EP9中文版用患者樣本進(jìn)行方法比較和偏差估計(jì)

1、用患者樣本進(jìn)行方法比較和偏差估計(jì)1序言1.1目的本文件給臨床實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的用戶(hù)和制造商提供了在測(cè)試同一分析物時(shí), 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)價(jià)兩種方法間的偏差的指導(dǎo)原則。理想情況下，測(cè)試（或候選）方法應(yīng)當(dāng)與參考方法比較。但是對(duì)用戶(hù)來(lái)說(shuō)，比較方法通常是目前的日常方法，并且評(píng)價(jià)的目的是確定這兩種方法在實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的功效內(nèi)是否產(chǎn)生相等的結(jié)果。在這種情況下，主要關(guān)注的是確定測(cè)試方法是否是當(dāng)前方法合適的替代品。本指導(dǎo)原則允許兩種方法間的偏差評(píng)估（期望差異）在不同的濃度進(jìn)行評(píng)價(jià)。如果比較方法與制造商在聲明陳述中所用的相同，可以將統(tǒng)計(jì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與制造商的聲明比較來(lái)確認(rèn)可接受性能。1.2一般比較實(shí)驗(yàn)的概述評(píng)價(jià)一種分析方法需要下面

2、的內(nèi)容：l 操作者有足夠的時(shí)間熟悉設(shè)備操作和維護(hù)步驟。l 操作者有足夠的時(shí)間熟悉評(píng)價(jià)方案。l 確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期內(nèi)測(cè)試和比較方法在合適的質(zhì)量控制中。l 有足夠的數(shù)據(jù)來(lái)確保測(cè)試和比較方法有代表性的數(shù)據(jù)。（多少數(shù)據(jù)構(gòu)成足夠的數(shù)據(jù)取決于兩種方法的精密度和干擾影響，和兩種方法間偏差的量，和可用的樣本分析物值的范圍，以及測(cè)試的醫(yī)學(xué)要求。）。在設(shè)備熟悉期，測(cè)試和比較方法的操作者必須全面的熟悉兩種方法的設(shè)定，操作，維護(hù)，故障排除和質(zhì)量控制。本期可以先于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的其他部分或與制造商的培訓(xùn)期一致。對(duì)兩種方法運(yùn)行日常實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制程序。在熟悉期之后，可以開(kāi)始方法比較實(shí)驗(yàn)。工作組推薦至少40個(gè)患者樣本在至少5個(gè)工作日

3、進(jìn)行分析。在更長(zhǎng)時(shí)間分析更多的樣本，同時(shí)按照制造商的建議進(jìn)行定標(biāo)，可增加實(shí)驗(yàn)的可靠性和有效性。對(duì)每一個(gè)患者樣本用測(cè)試和對(duì)比方法進(jìn)行雙份測(cè)試。對(duì)每種方法的雙份測(cè)定，在相應(yīng)方法的同一批內(nèi)分析。只要可能，至少50的測(cè)試樣本應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間之外。1.3本文所用的符號(hào)（略）1.4定義（略）2設(shè)備熟悉期測(cè)試和比較方法的操作者必須熟悉下面的內(nèi)容：l 操作l 維護(hù)步驟l 樣本準(zhǔn)備方法l 定標(biāo)和監(jiān)控功能。如果制造商提供培訓(xùn)，可作為熟悉期的一部分。在實(shí)驗(yàn)室建立和運(yùn)行設(shè)備足夠長(zhǎng)的時(shí)間，以確保操作者理解所有的步驟，并能恰當(dāng)?shù)牟僮髟O(shè)備。工作組推薦5天作為設(shè)備熟悉期。對(duì)于極其簡(jiǎn)單的設(shè)備，稍短的時(shí)間就夠了；對(duì)復(fù)雜的，多

4、通道的設(shè)備，需要更長(zhǎng)的時(shí)間。操作者應(yīng)當(dāng)實(shí)踐分析實(shí)際的樣本材料，使他們注意到其他設(shè)備在日常操作中可能發(fā)生的意外（例如錯(cuò)誤標(biāo)志，錯(cuò)誤修正，定標(biāo)等）。在本期不應(yīng)收集數(shù)據(jù)。直到操作者可以自信的操作設(shè)備，設(shè)備熟悉期才能結(jié)束。（這一步驟可能對(duì)所有的用戶(hù)不是必須的。）在開(kāi)始方法比較評(píng)估前，確保日常質(zhì)量控制程序和適當(dāng)?shù)目刂葡拊谑褂弥小?方法比較實(shí)驗(yàn)3.1測(cè)試樣本按照公認(rèn)的實(shí)驗(yàn)室慣例和制造商的建議收集和處理患者樣本 。3.1.1儲(chǔ)存儲(chǔ)存的條件和持續(xù)時(shí)間取決于被分析成分的穩(wěn)定性。如果可能，避免儲(chǔ)存樣本。3.1.2被排斥的樣本如果一個(gè)樣本被排斥，記錄排斥的原因。3.2對(duì)比方法對(duì)于比較方法，用實(shí)驗(yàn)室目前的方法，制造商

5、標(biāo)注聲明所用的方法，或公認(rèn)的參考方法。這個(gè)實(shí)驗(yàn)給出了在任意特定濃度兩種方法間的偏差和偏差的可能區(qū)間的評(píng)估。因此兩種方法間的差異可歸因于測(cè)試方法的誤差。比較方法應(yīng)滿(mǎn)足下列條件：l 具有優(yōu)于測(cè)試方法的精密度，如果需要，可通過(guò)重復(fù)獲得。l 如果可能，不受已知的干擾的影響。l 用與測(cè)試方法相同的單位。l 如果可能，具有相對(duì)于（可追蹤的）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差。本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有分離來(lái)自被比較的每種方法的偏差的不同來(lái)源。（關(guān)于基質(zhì)效應(yīng)覺(jué)察的信息，見(jiàn)最新版的NCCLS文件EP14基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)。）干擾影響可能對(duì)方法間差異有盡可能多的不精密度影響。（干擾對(duì)每一種方法影響的合適的定性，可通過(guò)一個(gè)單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)確定；見(jiàn)最新

6、版的NCCLS文件EP7臨床化學(xué)的干擾測(cè)試。）3.3測(cè)試范圍評(píng)價(jià)測(cè)試方法應(yīng)越過(guò)臨床上有意義的范圍，如醫(yī)學(xué)決定水平。通常，范圍擴(kuò)展到從低于到充分高于期望的參考范圍。分析物濃度應(yīng)當(dāng)分布在超越可報(bào)告范圍到盡可能擴(kuò)展的范圍?？蓤?bào)告范圍是制造商聲明的可以提供可接受性能的分析物濃度區(qū)間。表1a和1b給出了推薦的分布，它考慮了一組分析物異常的可用性。3.3.1可報(bào)告范圍研究的范圍受兩種方法可報(bào)告范圍的限制。對(duì)比方法的范圍應(yīng)當(dāng)至少與測(cè)試方法的范圍一樣寬，以便比較在可報(bào)告范圍限的偏差。3.4樣本數(shù)最少分析40個(gè)符合上述標(biāo)準(zhǔn)的樣本。更多的樣本將提高統(tǒng)計(jì)評(píng)價(jià)的可信度和增加合并未預(yù)期的干擾物質(zhì)的影響的機(jī)會(huì)（個(gè)體特異性

7、偏差）。數(shù)據(jù)記錄表的例子見(jiàn)圖A1和A2。3.4.1重復(fù)測(cè)定為下列原因，每個(gè)樣本應(yīng)獲得足夠的量：1）可用測(cè)試方法進(jìn)行雙份測(cè)定；2）可用比較方法進(jìn)行雙份測(cè)定；3）如果需要，可進(jìn)行后續(xù)研究。3.4.2混合的樣本如果一個(gè)樣本需要的體積無(wú)法從一個(gè)單獨(dú)的樣本獲得，混合來(lái)自?xún)蓚€(gè)（但不要更多）具有相似病史和大約相同成份水平的患者樣本以獲得少量的混合液。用這些少量的混合液進(jìn)行兩組重復(fù)性分析。如果樣本為全血，混合需要血清學(xué)的兼容性。注意：合并的作用可通過(guò)平均單獨(dú)或特定的樣本偏差而被掩蓋，這樣可以導(dǎo)致兩種方法可比性的樂(lè)觀的圖形。3.5樣本次序 分配選擇的樣本的第一部分在批內(nèi)有序排列。以相反的順序進(jìn)行第二部分（平行雙

8、份）。顛倒第二部分的順序可最小化批內(nèi)雙份測(cè)定的均值受攜帶和漂移的影響。盡可能隨機(jī)排列序列中的樣本。例如，樣本可按下列順序進(jìn)行測(cè)試：1，2，3，4，5，6，7，8和8，7，6，5，4，3，2，1。比較和測(cè)試方法都遵照顛倒的步驟，但每種方法最初的序列可以不同。3.6持續(xù)時(shí)間對(duì)于一個(gè)給定的樣本，不管這個(gè)樣本是新鮮的還是儲(chǔ)存的，應(yīng)在2個(gè)小時(shí)內(nèi)用對(duì)比和測(cè)試方法進(jìn)行分析。如果使用儲(chǔ)存的樣本，應(yīng)確保它們均儲(chǔ)存在保證它們穩(wěn)定性的情況下，并符合測(cè)試和對(duì)比方法的要求。對(duì)兩種程序在相同的情形下保存樣本，可避免引入儲(chǔ)存條件的差異。如果方法對(duì)比實(shí)驗(yàn)在精密度實(shí)驗(yàn)（EP5）之后進(jìn)行，每天可以選擇并分析8個(gè)以上的樣本。如果方

9、法對(duì)比實(shí)驗(yàn)和精密度實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，在草案熟悉期后10到15天每天僅能分析4個(gè)樣本。將患者樣本分散在很多天和很多批會(huì)更好。3.7在收集中對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行檢查3.7.1分析系統(tǒng)誤差當(dāng)設(shè)備提示有錯(cuò)誤情況發(fā)生時(shí)，記錄在這段時(shí)間內(nèi)收集的數(shù)據(jù)，但在最后的數(shù)據(jù)分析時(shí)不要包括這些數(shù)據(jù)。3.7.2人為誤差記錄操作者可證明的出錯(cuò)的任何數(shù)據(jù)，但在最后分析時(shí)不要包括這些數(shù)據(jù)。3.7.3其他有差異數(shù)據(jù)的評(píng)價(jià)記錄沒(méi)有發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤沒(méi)有經(jīng)過(guò)編輯的成對(duì)的雙份數(shù)據(jù)點(diǎn)。如果找不到差異的原因，保留原始數(shù)據(jù)在數(shù)據(jù)組中，進(jìn)行4.1和4.4節(jié)的離群點(diǎn)檢查。3.8質(zhì)量控制在實(shí)驗(yàn)中遵照實(shí)驗(yàn)室日常質(zhì)量控制程序。保留控制圖表，重復(fù)兩種方法中任意一種顯示失控的

10、任意批，直到獲得需要的樣本數(shù)目。3.9被拒數(shù)據(jù)的證實(shí)認(rèn)真證實(shí)和保留任何需要拒絕數(shù)據(jù)的情況，同時(shí)記錄任何發(fā)現(xiàn)的可接受的原因和問(wèn)題。4初步數(shù)據(jù)檢查圖1給出了本節(jié)所述檢查步驟的概述。圖2 給出了過(guò)程中單獨(dú)步驟的邏輯流程圖。在閱讀以下章節(jié)時(shí)參考這些圖表。4.1方法內(nèi)重復(fù)測(cè)試的離群點(diǎn)的檢查應(yīng)當(dāng)對(duì)所有的點(diǎn)和已經(jīng)移走的離群點(diǎn)進(jìn)行分析。對(duì)測(cè)試方法（Y）和比較方法（X）的雙份測(cè)定提供下面的步驟。分析應(yīng)當(dāng)按兩種方式進(jìn)行：1）對(duì)所有的點(diǎn)2）對(duì)所有已經(jīng)被移走的離群點(diǎn)。按如下計(jì)算每個(gè)樣本雙份測(cè)定間差值的絕對(duì)值。這里i=樣本數(shù)（從1到N，N為總的樣本數(shù)）。計(jì)算每種方法雙份測(cè)試間差值的絕對(duì)值的平均值：計(jì)算每種方法絕對(duì)差均值

11、的4倍為可接受限（對(duì)可報(bào)告值進(jìn)行舍入操作）。如果某個(gè)絕對(duì)差超出了合適的（X或Y）限制值，用標(biāo)準(zhǔn)化（相對(duì)的）絕對(duì)差對(duì)每種方法進(jìn)行附加計(jì)算；這樣：相對(duì)差值的均值的4倍的限制，為標(biāo)準(zhǔn)化值提供了測(cè)試限。如果一個(gè)單獨(dú)的數(shù)據(jù)點(diǎn)落在范圍和相對(duì)范圍程序之外，研究為什么會(huì)這樣，并將該樣本從數(shù)據(jù)組中刪除。刪除來(lái)自該樣本的所有數(shù)據(jù)（X和Y），繼續(xù)分析數(shù)據(jù)。如果一個(gè)以上的樣本被刪除，對(duì)差異產(chǎn)生的原因進(jìn)行詳細(xì)的調(diào)查。如果問(wèn)題的來(lái)源被確定，單獨(dú)追溯到這些樣本，取代數(shù)據(jù)組中的那些樣本。問(wèn)題的原因必須被證實(shí)。如果問(wèn)題可被更正但不能追溯到特定的樣本，必須重新收集全部的數(shù)據(jù)。如果問(wèn)題既沒(méi)有發(fā)現(xiàn)也無(wú)法被更正，評(píng)價(jià)重復(fù)性測(cè)定間最大差

12、異相對(duì)于方法精密度允許的醫(yī)學(xué)決定限的大小。如果沒(méi)有超出此限，按隨后的步驟重測(cè)這些數(shù)據(jù)。如果超出此限，停止實(shí)驗(yàn)并通知制造商。（被據(jù)數(shù)據(jù)的證明見(jiàn)3.9節(jié)。）4.2將數(shù)據(jù)作圖用這些數(shù)據(jù)做4個(gè)圖。第一個(gè)是（雙份測(cè)定的均值）對(duì)（雙份測(cè)定的均值）的散點(diǎn)圖，將測(cè)試方法作為Y變量，比較方法作為X變量（見(jiàn)圖B1）。畫(huà)出兩個(gè)軸的原點(diǎn)和刻度，并畫(huà)一條通過(guò)原點(diǎn)的斜率為1.0的直線(xiàn)。第二個(gè)是用相同的方法畫(huà)出每個(gè)對(duì)的散點(diǎn)圖（見(jiàn)圖B2）。第三個(gè)是偏差圖，X變量取決于比較方法是否為參考方法。如果是，則第三個(gè)圖是Y均值與X均值差（）或每個(gè)化驗(yàn)對(duì)值的偏差圖（見(jiàn)圖B3）。這個(gè)圖的水平中心線(xiàn)為0值。同前，第四個(gè)圖是每個(gè)單獨(dú)的Y與均值

13、的差對(duì)相同的值作圖（見(jiàn)圖B4）。如果比較方法不是參考方法，或不能確定，則第三個(gè)圖是Y均值與X均值差（）或每個(gè)化驗(yàn)對(duì)（）/2值的偏差圖（見(jiàn)圖B3）。這個(gè)圖的水平中心線(xiàn)為0值。同前，第四個(gè)圖是每個(gè)單獨(dú)的Y與均值的差對(duì)相同的（）/2值作圖（見(jiàn)圖B4）。這4個(gè)圖都很有用，因?yàn)樗鼈冮g刻度的差異可用于平衡對(duì)測(cè)試和對(duì)比方法比較的關(guān)于非線(xiàn)性關(guān)系，離群點(diǎn)和非恒定變量影響的決定。4.3線(xiàn)性關(guān)系的目視檢查檢查這些圖在整個(gè)測(cè)試范圍內(nèi)X（對(duì)比方法）和Y（測(cè)試方法）的線(xiàn)性關(guān)系。通常非線(xiàn)性出現(xiàn)在濃度值的端點(diǎn)。如果是這樣的話(huà)，在開(kāi)始變成非線(xiàn)性時(shí)截?cái)鄶?shù)據(jù)點(diǎn)。檢查剩余的線(xiàn)性部分，確定是否足夠?qū)?，以覆蓋醫(yī)學(xué)有用的范圍。如果是這樣，

14、分析在該范圍的附加樣本，取代這些超出的樣本。然后按第4節(jié)開(kāi)始再次檢查新的數(shù)據(jù)。如果非線(xiàn)性部分明顯，或如果線(xiàn)性部分太小，停止實(shí)驗(yàn)并通知制造商。如果非線(xiàn)性的原因可以確定并更正，重新開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。4.4方法間離群點(diǎn)的目視檢查檢查數(shù)據(jù)圖A和數(shù)據(jù)圖C有無(wú)可察覺(jué)的明顯的離群點(diǎn)。如果沒(méi)有這樣的點(diǎn)，前進(jìn)到4.5節(jié)。如果離群點(diǎn)存在，進(jìn)行下面的與4.1節(jié)中雙份測(cè)定相似的計(jì)算。計(jì)算方法間差的絕對(duì)值及它們的平均值；這里i樣本數(shù)1到40，j雙份測(cè)定數(shù)1或2。計(jì)算測(cè)試限（TLE）為4*，對(duì)可報(bào)告值進(jìn)行舍入操作。比較每個(gè)與測(cè)試限，并標(biāo)記超出該限的任意點(diǎn)。計(jì)算方法間相對(duì)差值的絕對(duì)值和它們的平均值；計(jì)算相對(duì)測(cè)試限為4*，并比較每一

15、個(gè)與此限（不對(duì)此限舍入）。標(biāo)記任何超出此限的點(diǎn)。沒(méi)有通過(guò)兩個(gè)檢測(cè)的任意點(diǎn)都為離群點(diǎn)。最多可有2.5的數(shù)據(jù)可從數(shù)據(jù)組中去除。如果超過(guò)2.5的數(shù)據(jù)在檢查中被確定為離群點(diǎn)，調(diào)查可能的干擾，人為錯(cuò)誤和設(shè)備故障。如果幾種分析物在同一設(shè)備上同時(shí)進(jìn)行評(píng)價(jià)，檢查異常樣本其他分析物的結(jié)果。同時(shí)回顧該批的質(zhì)量控制結(jié)果。如果無(wú)法找到明顯的原因，或差異超出了醫(yī)學(xué)重要性的邊界，停止實(shí)驗(yàn)或另加40個(gè)樣本。如果發(fā)現(xiàn)一個(gè)以上的離群點(diǎn)，但離群點(diǎn)沒(méi)有超出醫(yī)學(xué)重要差異，保留并使用這些數(shù)據(jù)。如果詳細(xì)的調(diào)查給出了離群點(diǎn)的原因，分析附加的樣本，并用這些數(shù)據(jù)增加數(shù)據(jù)組。4.5X足夠范圍的檢查回歸分析的結(jié)果僅在數(shù)據(jù)的某一假設(shè)為真時(shí)才有效。其

16、中一個(gè)假設(shè)是，X變量已知且沒(méi)有誤差。在臨床實(shí)驗(yàn)室，這并不是真實(shí)的，因?yàn)槊總€(gè)測(cè)試都有固有誤差。但是，如果數(shù)據(jù)范圍足夠?qū)?，這個(gè)誤差對(duì)回歸評(píng)價(jià)的影響很小，可認(rèn)為被忽略。為了克服這個(gè)問(wèn)題，修正系數(shù)r可被用于評(píng)價(jià)X范圍足夠的粗略指導(dǎo)。r的公式如下：這里，作為一般的指導(dǎo)，如果r0.975（或等價(jià)的r20.95），X的范圍可被認(rèn)為足夠了。如果數(shù)據(jù)產(chǎn)生的r滿(mǎn)足這個(gè)需要，X的誤差足以被數(shù)據(jù)范圍補(bǔ)償，可用簡(jiǎn)單的線(xiàn)性回歸評(píng)價(jià)斜率和截距。如果r297.5）大于可接受偏差，因此候選方法的性能和目前的方法不相等，并且不能被定義的應(yīng)用接受。l 如果可接受偏差大于預(yù)期偏差可信區(qū)間的上限，可得出下面的結(jié)論：預(yù)期偏差很可能（97

17、.5）小于可接受偏差，因此候選方法的性能等同于目前的方法，并可被定義的應(yīng)用接受。如果沒(méi)有觀察到等價(jià)，仍然相信候選方法更特效，而不是拒絕這種方法，在使其進(jìn)行日常使用前，對(duì)其獲得新的臨床數(shù)據(jù)（如新的參考范圍）。記住為實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)定義兩種方法間允許的差異。在比較兩種方法的允許誤差時(shí)，醫(yī)學(xué)上精密度允許誤差的標(biāo)準(zhǔn)可能沒(méi)有單獨(dú)給出。誤差限的指導(dǎo)原則可以在被研究的測(cè)試的個(gè)體內(nèi)生物差異的文獻(xiàn)中找到。如果制造商提供了測(cè)試方法的方法比較數(shù)據(jù)，可以進(jìn)行性能的附加評(píng)估。但是，為了與制造商的數(shù)據(jù)進(jìn)行有效的比較，對(duì)比方法和操作步驟必須與制造商的一樣。如果制造商對(duì)平均偏差的聲明被包含在95的可信區(qū)間，可以得到結(jié)論，

18、候選方法可以提供相等的結(jié)果。8制造商修正8.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)制造商應(yīng)當(dāng)獲得最少100個(gè)患者樣本，分散在方法或設(shè)備聲稱(chēng)的整個(gè)可報(bào)告范圍內(nèi)。特別的，如果在多個(gè)地點(diǎn)收集樣本或需要研究其他因素，制造商可選擇使用超過(guò)100個(gè)患者樣本?；颊邩颖究捎糜诙喾N分析物評(píng)估。8.2數(shù)據(jù)分析按本文件所述的基本步驟進(jìn)行收集的數(shù)據(jù)的初步檢查。制造商可以選擇用任意有效的統(tǒng)計(jì)程序分析數(shù)據(jù)，但是，終點(diǎn)必須是測(cè)試和對(duì)比方法在相關(guān)醫(yī)學(xué)決定點(diǎn)的偏差估計(jì)。為了評(píng)估參量的誤差，制造商應(yīng)當(dāng)計(jì)算回歸斜率和區(qū)間的標(biāo)準(zhǔn)差及用于聲明偏差的點(diǎn)的預(yù)期值的標(biāo)準(zhǔn)差。如果標(biāo)準(zhǔn)差太大而不能接受，需要附加數(shù)據(jù)。避免無(wú)用的步驟，例如測(cè)定在垂直方向上評(píng)估的標(biāo)準(zhǔn)差。8.3偏差性能聲明的陳述下面的項(xiàng)目應(yīng)當(dāng)包含在制造商對(duì)方法比較偏差的聲明中。除非比較方法是建立的參考方法，不應(yīng)使用術(shù)語(yǔ)“精密度”。列出的項(xiàng)目可被有選擇的包含在制造商的判斷中。l 與線(xiàn)性回歸線(xiàn)吻合的斜率和截距（通過(guò)任意方法）。l 回歸中所用的總點(diǎn)數(shù)。l 在規(guī)定的醫(yī)學(xué)決定點(diǎn)（在通常公認(rèn)的決定點(diǎn)或參考區(qū)間的終點(diǎn)）從回歸線(xiàn)計(jì)算的偏差。l 數(shù)據(jù)的范圍（包含在回歸中的X的最大和最小值）。l 在回歸中用的對(duì)比方法。l 回歸中用的是單個(gè)