海蛇發(fā)酵去腥后與其生藥材的對(duì)比研究

1、    海蛇發(fā)酵去腥后與其生藥材的對(duì)比研究作者：雒換鋒1,胡昌江1,雷羽2,王霞2 作者單位：(1.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川成都 611173;2.海南椰島(集團(tuán))股份有限公司,海南海口 570102)【摘要】 目的 探討海蛇經(jīng)發(fā)酵去除腥味后,與其生品在生藥學(xué)方面的差異,確定發(fā)酵對(duì)海蛇各方面的影響。方法 利用性狀、顯微、薄層及紅外掃描四個(gè)方面對(duì)海蛇生品與發(fā)酵品進(jìn)行研究。結(jié)果 海蛇生品與發(fā)酵品的生藥學(xué)特征,發(fā)酵前后有一定的差別。發(fā)酵品與生品含有同樣的氨基酸成分,海蛇在發(fā)酵去腥后,仍保持良好的功效。結(jié)論 發(fā)酵對(duì)海蛇的生藥學(xué)特征影響不大,采用發(fā)酵去除海蛇腥味具有一

2、定的可行性。【關(guān)鍵詞】 海蛇;去腥;發(fā)酵;生藥學(xué)Comparative study of sea snakes and its deodorized product after fermentationLUO Huanfeng1,HU Changjiang1,LEI Yu2,WANG Xia2(1.Chengdu University of TCM,Chengdu 611173,China;2.Hainan Coconut Island(Group)Co.,Ltd,Haikou 570102,China)【Abstract】 Objective To study pharmacognostic

3、al difference between sea snakes and its deodorized products after fermentation and ensure how fermentation affects sea snakes.Methods Sea snakes and its deodorized products after fermentation were comparatively studied in four aspects including characteristics,microscopy,TLC and IR.Results Pharmaco

4、gnostical characteristics between sea snakes and its deodorized products after fermentation showed a certain difference.The fermented and nonfermented products contained similar amino acid,which proved out that deodorized sea snakes after fermentation had the same functions as before.Conclusion Ferm

5、entation can slightly affect sea snakes.It is feasible to deodorize sea snake by fermentation.【Key words】 sea snakes;deodorization;fermentation;pharmacognosy中華本草1中有關(guān)平頦海蛇論述:為海蛇科動(dòng)物平頦海蛇Lapemis hardwichii(Gray)的干燥全體。藥性:味咸,性平。功能與主治:祛風(fēng)濕,通絡(luò)止痛,解毒。主治風(fēng)濕痹痛,肌膚麻木,疥癬,皮膚濕癢,瘡癤。可見海蛇有著廣闊的市場(chǎng)潛力,但其本身含有腥味,影響進(jìn)一步的開發(fā)利用。通過研究

6、,確定了發(fā)酵去除其腥味27的工藝。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,發(fā)酵去腥應(yīng)用很少,且其機(jī)理不清楚,故筆者分別從性狀、顯微、薄層及紅外掃描對(duì)其進(jìn)行研究,比較海蛇發(fā)酵前后的差異,確定發(fā)酵對(duì)海蛇的影響。1 材料1.1 材料本品購于海南省?？谑袞|門市場(chǎng),經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)盧先明教授鑒定為海蛇科平頦海蛇Lapemis hardwickii(Gray)的干燥全體。其多于夏、秋季捕捉,捕得后用沸水燙死,除去內(nèi)臟,烘干或鮮用。1.2 海蛇發(fā)酵品用凈海蛇段,依照如下操作,制得海蛇發(fā)酵品。取5g酵母菌,加2蔗糖液50 ml敞開活化30 min.取海蛇段1 kg,將的處理液轉(zhuǎn)移至海蛇藥材中,并加入3 000 ml 2蔗糖液和pH=5緩

7、沖液2 000 ml.充分?jǐn)嚢?使液體均勻分布于海蛇體。敞開放置在3540 培養(yǎng)箱內(nèi),發(fā)酵100 min,每20 min攪拌1次。取出海蛇,盡量除去其攜帶的水,即得。1.3 化學(xué)試劑纈氨酸(批號(hào):24200104)、丙氨酸(批號(hào):624200104),均購自中國(guó)藥品生物制品檢定所,其余均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 海蛇炮制前后的性狀鑒定海蛇生品全體長(zhǎng)69.291.5 cm.頭較長(zhǎng),鼻孔向上,鼻鱗彼此相接。體側(cè)扁,全體帶有深欖色寬橫斑,橫斑間距12鱗寬,在體側(cè)下方尖出呈三角形,有的形成完整環(huán)紋。體背鱗片菱形,呈鑲嵌狀排列,除去內(nèi)臟的腹面,肌肉土黃色,可見排列均勻而微隆起的肋骨。質(zhì)堅(jiān)韌,不易折

8、斷。氣腥,味咸。海蛇發(fā)酵品:海蛇干體長(zhǎng)約0.6 cm橫切小段。表面橄欖黃,較生藥材顏色淺,發(fā)白,無腥味,有酵母粉的淡淡清香味,味咸。2.2 海蛇炮制前后的顯微鑒定89本品粉末黃色或淡黃色,氣腥,味淡。角質(zhì)鱗片淡灰色或近無色或淡黃色或紅棕色,側(cè)面觀具半圓形或乳頭狀突起;表面觀呈類圓形,分布有淡灰色或淡棕色細(xì)顆粒狀物。皮膚碎片淡黃色或近無色或近紅棕色,表面密布棕色或黑色色素顆粒,常聚集成網(wǎng)狀或分枝狀,細(xì)胞界限較清楚。橫紋肌纖維較多,淡黃色或近無色,呈條狀或方狀,直徑415 m,具極細(xì)的橫紋,明暗相間,橫紋平直或稍彎,有的邊緣不平整,斷面觀少見。骨碎片近無色或淡灰色,呈不規(guī)則的碎塊。骨陷窩長(zhǎng)梭形,大

9、多同方向排列,骨小管稀而稍粗,于橫、縱斷面均明顯可見。二者均具有基本的角質(zhì)鱗片,皮膚碎片,橫紋肌纖維,骨陷窩與骨小管,只是在結(jié)構(gòu)上有微小差別。發(fā)酵品角質(zhì)鱗片較生品少,且其淡灰色居多,無紅棕色;側(cè)面觀乳頭狀突起不明顯,表面觀類圓形突起很大,未看到有棕色顆粒密布。發(fā)酵品皮膚碎片和骨碎片較多,其骨陷窩與骨小管常一起,而生品只能看到外露的骨陷窩,長(zhǎng)梭形,大多同方向排列?？梢姲l(fā)酵會(huì)使得海蛇結(jié)構(gòu)上產(chǎn)生一定變化。結(jié)果見圖1.2.3 海蛇炮制前后的薄層鑒定1012海蛇(海蛇發(fā)酵品)粉末(過藥典三號(hào)篩)1 g,加甲醇10 ml,超聲處理30 min,濾過,濾液水浴蒸干,加1 ml甲醇溶解,作為供試品溶液。取0.

10、001 g纈氨酸,0.001 g丙氨酸,分別加1 ml甲醇溶解,制成1 mg/ml對(duì)照品液。照薄層色譜法實(shí)驗(yàn),吸取上述溶液各1 l,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇冰醋酸水(411)與顯色劑(0.5%茚三酮醇液)以101的混合液及正丁醇冰醋酸乙醇水(5112)與顯色劑同樣的混合液為展開劑,展開,取出,晾干,105 烘箱內(nèi)烘至顯清晰的斑點(diǎn)。2種展開系統(tǒng)供試品色譜中,生品、發(fā)酵品與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上均顯紫紅色的斑點(diǎn),說明二者含有同樣的化學(xué)成分,只是發(fā)酵品的含量很明顯低于生品。其原因可能是在發(fā)酵處理過程中,有些成分溶于水,而損失部分含量。可見發(fā)酵未影響海蛇的氨基酸成分結(jié)構(gòu),只是含量有一定減少

11、。結(jié)果見圖2.2.4 海蛇炮制前后紅外圖譜的對(duì)比研究132.4.1 儀器與試藥 儀器:Prestige21型紅外光譜儀(島津國(guó)際貿(mào)易上海有限公司),FW4壓片機(jī)(天津天光光學(xué)儀器有限公司),遠(yuǎn)紅外燈,瑪瑙研缽。試藥:溴化鉀分析純。三批(090101、090102、090103)放大試驗(yàn)海蛇生品與發(fā)酵品粉末,過六號(hào)篩。2.4.2 樣品的制備 取KBr粉末與藥材粉末以1200混勻,置烘箱烘干。測(cè)定時(shí),取適量粉末置瑪瑙研缽中研細(xì),即得(操作在紅外燈下進(jìn)行)。2.4.3 KBr的紅外光譜圖 取分析純KBr約100 mg,研細(xì),裝入壓片模具,用壓片機(jī)加壓至30 MPa,維持壓力2 min后卸掉壓力,得厚

12、約1 mm的透明KBr片進(jìn)行紅外光譜測(cè)定,作為空白對(duì)照。2.4.4 海蛇樣品的紅外光譜圖 取各批次海蛇生品與發(fā)酵品樣品適量.按2.4.3項(xiàng)下操作,進(jìn)行樣品紅外光譜測(cè)定。絕大多數(shù)有機(jī)化合物的基頻振動(dòng)出現(xiàn)在4 000400 cm1 區(qū)域。6種樣品均有明顯的兩種吸收峰:2 9003 400 cm 1,1 5401 660 cm 1.推測(cè)090101生品與發(fā)酵品,090102生品與發(fā)酵品含有酰胺鍵,而090103生品與發(fā)酵品含有CH3及C=O.090101生品與發(fā)酵品在3 000 cm 1以上的吸收峰有差別,前者為3 279.44 cm 1,后者為3 422.36 cm 1.在2 350 cm 1處,

13、二者亦有一定差別,前者為波峰,后者為波谷。090102生品與發(fā)酵品對(duì)比情況同090101.090103生品與發(fā)酵品圖譜基本相同?？梢姲l(fā)酵對(duì)海蛇化學(xué)成分的官能團(tuán)有一定影響,結(jié)果見圖3.3 結(jié)論通過對(duì)海蛇生品與發(fā)酵品的性狀、顯微、薄層及紅外掃描的對(duì)比研究,說明發(fā)酵對(duì)海蛇的結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分產(chǎn)生了一定影響,但二者含有同樣的氨基酸成分,可認(rèn)為海蛇在發(fā)酵去腥后,仍保持海蛇的生藥學(xué)特征,應(yīng)該不會(huì)影響其功效,進(jìn)一步說明采用發(fā)酵去除海蛇腥味具有較好的可行性。另外,此次研究也為海蛇的基礎(chǔ)研究提供了一定依據(jù)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 宋立人.中華本草第九冊(cè)M.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1999:428430.2 龔千鋒,中藥炮

14、制學(xué)M.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2003:134.3 王雅立,張甫生,費(fèi)帆.魚腥草涼茶飲料的研制J.四川食品與發(fā)酵,2007,43(138):4446.4 吳光缸,洪玉菁,張金亮.水產(chǎn)食品學(xué)M.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1992:118124.5 裘迪紅,周濤,戴志遠(yuǎn),等.鮐魚蛋白質(zhì)水解液脫苦脫腥的研究J.食品科學(xué),2001,22(5):3739.6 毋瑾超,朱碧英,胡錫鋼,等.魚肉液體制曲的工藝條件J.湛江海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2002,22(3):3337.7 鄧尚貴,章超樺.雙酶法在水產(chǎn)品水解蛋白制作工藝中的應(yīng)用J.水產(chǎn)學(xué)報(bào),1998,22(4):354356.8 張貴君.常用中藥顯微鑒定M.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2000:348350.9 胡淑琴.中國(guó)動(dòng)物圖