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文檔簡介
1、 必修一、二生物實驗專題【基礎(chǔ)知識】光學顯微鏡的結(jié)構(gòu)、呈像原理、放大倍數(shù)計算方法結(jié)構(gòu):光學部分:目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器(有大小光圈)和反光鏡(有平面鏡和凹面鏡)機械部分:鏡座、傾斜關(guān)節(jié)、鏡臂、載物臺(上有通光孔、壓片夾)、鏡頭轉(zhuǎn)換器、粗、細準焦螺旋。注:目鏡無旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越??;物鏡有旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越大。呈像原理:映入眼球內(nèi)的是倒立放大的虛像。(物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度)放大倍數(shù):目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積注:顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù),即長度和寬度,而不是面積。二、顯微鏡的使用:置鏡(裝鏡頭)對光置片調(diào)焦觀察1安放。顯微鏡放置在桌前略偏左,距桌緣8
2、10cm處,裝好物鏡和目鏡(目鏡5× 物鏡10×)2對光。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡對準通光孔,選取較大光圈對準通光孔。左眼注視目鏡,同時把反光鏡轉(zhuǎn)向光源,直至視野光亮均勻適度。調(diào)節(jié)視野亮度只可用遮光器和反光鏡,光線過強,改用較小光圈或用平面反光鏡;光線過弱,改用較大光圈或用凹面反光鏡。選低倍鏡選較大的光圈選反光鏡(左眼觀察)3觀察。將切片或裝片放在載物臺上,標本正對通光孔中心。轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋(順時針),俯首側(cè)視鏡筒慢慢下降,直到物鏡接近切片(約0.5cm),左眼觀察目鏡,(反時針)旋轉(zhuǎn)粗準焦螺旋,使鏡筒慢慢上升,看到物像時輕微來回旋轉(zhuǎn)細準焦,直到物像清晰。(找不到物像時,可重復(fù)
3、一次或移動裝片使標本移至通光孔中心)。觀察時兩眼都要睜開,便于左眼觀察,右眼看著畫圖。側(cè)面觀察降鏡筒左眼觀察找物像細準焦螺旋調(diào)清晰4高倍鏡的轉(zhuǎn)換。找到物像后,把要觀察的物像移到視野中央,把低倍鏡移走,換上高倍鏡,只準用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,直到物像清楚為止。順序:移裝片轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器調(diào)反光鏡或光圈調(diào)細準焦螺旋注:換高倍物鏡時只能移動轉(zhuǎn)換器,換鏡后,只準調(diào)節(jié)細準焦和反光鏡(或光圈)。問1:低倍鏡換為高倍鏡后,若看不到或看不清原來的像,可能原因?(ABC) A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反,蓋玻片在下面 D、未換目鏡問2:放大倍數(shù)與視野的關(guān)系:放大倍數(shù)越小,視野
4、范圍越大,看到的細胞數(shù)目越多,視野越亮,工作距離越長;放大倍數(shù)越大,視野范圍越小,看到的細胞數(shù)目越少,視野越暗,工作距離越短。故裝片不能反放。5裝片的制作和移動:制作:滴清水放材料蓋片移動:物像在何方,就將載玻片向何處移。(原因:物像移動的方向和實際移動玻片的方向相反)6污點判斷:1)污點隨載玻片的移動而移動,則位于載玻片上;2)污點不隨載玻片移動,換目鏡后消失,則位于目鏡;換物鏡后消失,則位于物鏡;3)污點不隨載玻片移動,換鏡后也不消失,則位于反光鏡上。7完畢工作。使用完畢后,取下裝片,轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器,逆時針旋出物鏡,旋進鏡頭盒;取出目鏡,插進鏡頭盒,蓋上。把顯微鏡放正。 【實驗探
5、究】實驗一:觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一)一實驗?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細胞中分布的方法二實驗原理:1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。2鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,1.加速染色劑進入細胞,2.使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。三方法步驟:操作步驟注意問題解釋取口腔上皮細胞制片(洋蔥內(nèi)表皮)載玻片要潔凈,滴一滴質(zhì)量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液(清水)用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細胞將載玻片
6、在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果保持細胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗固定裝片水解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分數(shù)為8%的鹽酸溶液中,用300C水浴保溫5min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,促進染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min 觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳【討論】分布:真核生物DNA主要分布在細胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質(zhì)中。 實驗結(jié)果: 細胞核呈綠色
7、,細胞質(zhì)呈紅色. 實驗二 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一)一實驗?zāi)康模?嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)二實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的沉淀.2脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。3蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。三實驗材料1做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。2做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時
8、(也可用蓖麻種子)。3做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實驗試劑斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)、蘇丹或蘇丹染液、雙縮脲試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液和B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)、體積分數(shù)為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水。五、方法步驟:(一)可溶性糖的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋1. 制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2. 取1支試管
9、,向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。 3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑; 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無沉淀生成。4. 水浴加熱2min左右。觀察到溶液顏色:淺藍色 棕色 磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向?qū)嶒炚?。也可用酒精燈對試管直接加熱。防止試管?nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷; 縮短實驗時間。(二)脂肪的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋花生種子浸泡、去皮
10、、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。 用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上12滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。 滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。低倍鏡下找到花生子
11、葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中。 三、蛋白質(zhì)的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過濾。) 黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試管中,加入雙縮脲試劑A,搖勻;再加入雙縮脲試劑B液34滴,搖勻,溶液變紫色。A液和B液也要分開配制,儲存。鑒定時先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH )
12、 2沉淀,而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色。可用蛋清代替豆?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察用試管取2ml待測組織樣液,向試管內(nèi)滴加2滴碘液,觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察 實驗三 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一)一實驗?zāi)康模?使用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體的形態(tài)分布。二實驗原理:葉綠體的辨認依據(jù):葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。線粒體辨認依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是專一性染線粒體的活
13、細胞染料,可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色。三實驗材料: 觀察葉綠體時選用:蘚類的葉、黑藻的葉、洋蔥表皮細胞。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細胞不含葉綠體。四方法步驟:步 驟注 意 問 題分 析1制片。用鑷子取一片黑藻的小葉,放入載玻片的水滴中,蓋上蓋玻片。制片和鏡檢時,臨時裝片中的葉片不能放干了,要隨時保持有水狀態(tài)否則細胞或葉綠體失水收縮,將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察。2低倍鏡下找到葉片細胞 3高倍鏡下觀察葉綠體的
14、形態(tài)和分布 4制作人的口腔上皮細胞臨時裝片在潔凈載玻片中央滴一滴健那綠染液用牙簽取碎屑蓋蓋玻片 5觀察線粒體藍綠色的是線粒體,細胞質(zhì)接近無色。 【討論】(1)為什么可直接取用蘚類的小葉,而不能直接取用菠菜葉? 因為蘚類的小葉很薄,只有一層細胞組成,而菠菜葉由很多層細胞構(gòu)成。 (2)取用菠菜葉的下表皮時,為何要稍帶些葉肉? 表皮細胞除保衛(wèi)細胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細胞含較多的葉綠體。 (3)怎樣加快黑藻細胞質(zhì)的流動速度?最適溫度是多少?進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25左右。 (4)是否一般細胞的細胞質(zhì)不流動,只有黑藻等少數(shù)植物的細胞質(zhì)才流動?
15、否,活細胞的細胞質(zhì)都是流動的。 (5)若觀察植物根毛細胞細胞質(zhì)的流動,則對顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)? 視野應(yīng)適當調(diào)暗一些,可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。 (6)在強光照射下,葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。 實驗四 觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原(必修一)一、實驗?zāi)康模?學會觀察植物細胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的方法。2了解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。二實驗原理:1質(zhì)壁分離的原理:當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而失水,細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水
16、時,原生質(zhì)層就會與細胞壁分離。2質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。二、實驗材料:紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細胞無毒害作用。三、實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析1制作洋蔥表皮的臨時裝片。在載玻片上滴一滴水,撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平(也可挑取幾條水綿放入水滴中)。蓋上蓋玻片。 蓋蓋玻片應(yīng)讓蓋玻片的
17、一側(cè)先觸及載玻片,然后輕輕放平。 防止裝片產(chǎn)生氣泡。2觀察洋蔥(或水綿)細胞可看到:液泡大,呈紫色,原生質(zhì)層緊貼著細胞壁。(或水綿細胞中有帶狀葉綠體,原生質(zhì)層呈綠色,緊貼著細胞壁。 液泡含花青素,所以液泡呈紫色。 先觀察正常細胞與后面的“質(zhì)壁分離”起對照作用。3觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細胞壁分離。原生質(zhì)層與細胞壁之間充滿蔗糖溶液。 重復(fù)幾次糖液濃度不能過高蔗糖溶液濃度大于細胞液
18、濃度,細胞通過滲透作用失水,細胞壁伸縮性小原生質(zhì)層的伸縮性大,液泡和原生質(zhì)層不斷收縮,所以發(fā)生質(zhì)壁分離。為了使細胞完全浸入蔗糖溶液中。否則,細胞嚴重失水死亡,看不到質(zhì)壁分離的復(fù)原。4觀察細胞質(zhì)壁分離的復(fù)原現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入清水,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由小變大,顏色由深變淺,原生質(zhì)層恢復(fù)原狀。 發(fā)生質(zhì)壁分離的裝片,不能久置,要馬上滴加清水,使其復(fù)原。重復(fù)幾次。細胞液的濃度高于外界溶液,細胞通過滲透作用吸水,所以發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。因為細胞失水過久,也會死亡。 為了使細胞完全浸入清水中?!居懻摗?如果將上述表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖
19、溶液中,這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細胞維持原狀,因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2當紅細胞細胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?答:不會。因為紅細胞不具細胞壁。3.若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細胞,不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原,其原因是什么? 細胞已經(jīng)死亡(可能是外界溶液濃度過大,細胞失水過多或質(zhì)壁分離時間過長) 4.高倍鏡使用前,裝片如何移動? 若要把視野中上方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向左方移動,因為顯微鏡視野 中看到的是倒像。 5.換高倍物鏡后,怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調(diào)亮
20、?換高倍物鏡后,應(yīng)調(diào)節(jié)細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗,可調(diào)大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。 6.放大倍數(shù)與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系? 放大倍數(shù)越大,視野中細胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。 7.怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來測定植物細胞液的濃度? 配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液 分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片 用顯微鏡觀察某植物細胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。 實驗五 觀察細胞的有絲分裂(必修一)一實驗?zāi)康模?制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片2觀察植物細胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細
21、胞周期不同時期的時間長短。3繪制植物細胞有絲分裂簡圖。二實驗原理:1在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。2染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的完整過程。三實驗材料: 洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細胞分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細胞。四實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析一、根尖的培養(yǎng)實驗前34天,讓洋蔥放在廣口瓶上,底部接觸清水。根
22、長約5cm時可用。置于溫暖處,常換水。因為細胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離漂洗染色制片)1解離:上午10時至下午2時,剪取洋蔥根尖23mm,立即放入盛有質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室溫下解離35min。 解離時間要保證,細胞才能分散開來。 解離時間也不宜過長。 目的:溶解細胞間質(zhì),使組織中的細胞相互分離開來。此時,細胞已被鹽酸殺死。否則,根尖過于酥軟,無法取出。2漂洗:待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min。漂洗要充分,可換水12次。 目的:洗去
23、藥液,防止解離過度,并有利于染色. 3染色:把洋蔥根尖放進盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色4制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片, 目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標本被壓成云霧狀。三、觀察1低倍鏡觀察:把裝片放
24、在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。 2高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。 一定要找到分生區(qū)。 在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞。如果是這樣,可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。 分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期?!居懻摗?.培養(yǎng)根尖時,為何要經(jīng)常換水? 增加水中的氧氣,防止根進行無氧呼吸造成根的腐爛。 2.培養(yǎng)根尖時,應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么? 應(yīng)選用舊洋蔥,
25、因為新洋蔥尚在休眠,不易生根。 3.為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何? 因為根尖分生區(qū)的細胞能進行有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細胞分裂活躍。 4.解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片? 解離是為了使細胞相互分離開來,壓片是為了使細胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。 5.若所觀察的組織細胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?壓片時用力過大。 6.解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎? 分解和溶解細胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替。 7.為何要漂洗?洗去鹽酸便于染色;防止后面酸堿中和8.細胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么? 染色最
26、深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。9. 為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么? 因為在根尖只有分生區(qū)的細胞能夠進行細胞分裂;分生區(qū)的特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。 10.分生區(qū)細胞中,什么時期的細胞最多?為什么? 間期;因為在細胞周期中,間期時間最長。 11.*所觀察的細胞能從中期變化到后期嗎?為什么? 不能,因為所觀察的細胞都是停留在某一時期的死細胞。 12.觀察洋蔥表皮細胞能否看到染色體?為什么? 不能,因為洋蔥表皮細胞一般不分裂。 13.若觀察時不能看到染色體,其原因是什么
27、? 沒有找到分生區(qū)細胞;沒有找到處于分裂期的細胞;染液過稀;染色時間過短。 實驗六 探究影響酶活性的因素(必修一)一實驗?zāi)康模?探究不同溫度和PH對過氧化氫酶活性的影響。2培養(yǎng)實驗設(shè)計能力。二方法步驟:提出問題作出假設(shè)設(shè)計實驗(包括選擇實驗材料、選擇實驗器具、確定實驗步驟、設(shè)計實驗記錄表格)實施實驗分析與結(jié)論表達與交流。 實例1:比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率一)實驗原理:鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計算,質(zhì)量分數(shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分數(shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液
28、中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二)方法步驟:步驟注意問題解釋取4支潔凈試管,編號*,分別加入2mL H2O2溶液不讓H2O2接觸皮膚H2O2有一定的腐蝕性將2號試管放在900C左右的水浴中加熱,觀察氣泡冒出情況,與1號對照 向3號、4號試管內(nèi)分別滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝臟研磨液,觀察氣泡產(chǎn)生情況不可用同一支滴管 肝臟研磨液必須是新鮮的 肝臟在制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準確性 因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過久,可受細菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低 研磨可
29、破壞肝細胞結(jié)構(gòu),使細胞內(nèi)的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積2-3min后,將點燃的衛(wèi)生香分別放入3號和4號試管內(nèi)液面的上方,觀察復(fù)燃情況放衛(wèi)生香時,動作要快,不要插到氣泡中現(xiàn)象:3號試管產(chǎn)生氣泡多,冒泡時間短,衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃,4號試管產(chǎn)生氣泡少,冒泡時間長,衛(wèi)生香幾乎無變化避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅 實例2:溫度對酶活性的影響一)實驗?zāi)康模?初步學會探索溫度對酶活性的影響的方法。2探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。二)實驗原理:1淀粉遇碘后,形成紫藍色的復(fù)合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過程中,不同階段的中間產(chǎn)物遇碘后,會呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和
30、葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C三)方法步驟: 操作注意問題解釋取3支試管,編上號,然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支試管,編上號,然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液 將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(約600C)、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液防止混合時,由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應(yīng)溫度不是操作者所要控制的溫度,影響實驗結(jié)果。分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自的溫度5min保持各自溫度時間不能太短淀粉
31、酶催化淀粉水解需要一定時間在3支試管中各滴入1-2滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄碘液不能滴加太多防止影響實驗現(xiàn)象的觀察用表格的形式顯示實驗步驟序號加入試劑或處理方法試管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/新鮮淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保溫5min600C1000C00C600C1000C00C3將a液加入到A試管,b液加入到B試管,c液加入到C試管中,搖勻 4保溫5min600C1000C00C 5滴入碘液,搖勻2滴2滴2滴 6觀察現(xiàn)象并記錄 實例3:PH值對酶活性的影響
32、操作步驟:用表格開式顯示實驗步驟:(注意操作順序不能錯)序號加入試劑或處理方法試管1231注入新鮮的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸餾水1mL/3注入氫氧化鈉溶液/1mL/4注入鹽酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保溫5min 7加入斐林試劑,邊加邊振蕩2mL2mL2mL8水浴加熱煮沸1min 9觀察3支試管中溶液顏色變化變記錄 【討論】1.相同質(zhì)量的塊狀肝臟和肝臟研磨液,哪一個催化效果好?為什么?研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。 2.為何要選新鮮的肝臟?因為在不新鮮的肝臟
33、中,過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。 實驗七 葉綠體色素的提取和分離(必修一)一實驗?zāi)康模?嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。2分析實驗結(jié)果,探究葉綠體中有幾種色素,以及各自所呈現(xiàn)的顏色。二實驗原理:1葉綠體中的色素是有機物,不溶于水,易溶于丙酮等有機溶劑中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴散得慢。所以用層析法來分離四種色素。三、實驗材料:幼嫩、鮮綠的菠菜葉四、實驗步驟:步 驟注 意 問 題分 析1提取色素5克綠葉剪碎
34、,放入研缽,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL無水乙醇)迅速、充分研磨。(若沒有無水乙醇,也可用體積分數(shù)為95%的乙醇,但要加入適量的無水碳酸鈉,除去水分)加SiO2加CaCO3 迅速加丙酮加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。葉綠體色素易溶于丙酮等有機溶劑。減少研磨過程葉綠素的分解,減少有毒性的丙酮揮發(fā)。2收集濾液漏斗基部放一單層尼龍布,研磨倒入漏斗內(nèi)擠壓,將濾液收集到小試管中,用棉花塞塞住試管口。 尼龍布起過濾作用。 試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮揮發(fā)。3制備濾紙條將干燥的濾紙,順著紙紋剪成長1
35、0cm,寬1cm的紙條,一端剪去二個角,并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。 干燥順著紙紋剪成長條一端剪去二個角 可吸收更多的濾液。層析時,色素分離效果好??墒箤游鲆和瑫r到達濾液細線。4劃濾液細線用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線劃出細、齊、直的一條濾液細線,干后重復(fù)三次。 濾液細線越細、越齊越好。重復(fù)三次。 防止色素帶之間部分重疊。 增加色素在濾紙上的附著量,實驗結(jié)果更明顯。5紙層析法分離色素將3mL層析液倒入燒杯中,將濾紙條(劃線一端朝下)插入層析液中,用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。層析液不能沒及濾紙條。燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。防止色素溶解在層析液中,層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。6觀察實驗結(jié)果由上至下分別為:胡蘿卜素(橙黃色)葉黃素(黃色)葉綠素a(藍綠色)葉綠素b(黃綠色) 胡黃ab 擴散最快是胡蘿卜素,擴散最慢是葉綠素b,含量最多的是葉綠素a。四種色素之所以能被分離,是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同?!居懻摗?濾紙條上的濾液細線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。2提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分;濾液收集后,要及時用棉塞將
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