安藍(lán)風(fēng)濕藥液急性毒性實驗和鎮(zhèn)痛作用的研究

1、安藍(lán)風(fēng)濕藥液急性毒性實驗和鎮(zhèn)痛作用的研究    作者：曾澤民,李雪艷,肖祥書； 潘善慶 , 陳子淵    【摘要】 目的 （1）觀察小鼠口服安藍(lán)風(fēng)濕藥液所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)及死亡情況，為臨床試驗安全性提供資料。（2）通過對小鼠鎮(zhèn)痛實驗觀察，對臨床用藥提供依據(jù)。方法 （1）經(jīng)10只小鼠預(yù)試，ig測不出LD50，故進行最大給藥量測定。（2）對醋酸致痛小鼠扭體次數(shù)的影響；對熱板法致痛小鼠痛閾的影響。結(jié)果 （1）小鼠ig安藍(lán)風(fēng)濕藥液每日最大給藥量為180g生藥/kg相當(dāng)于臨床60kg成人一日量的400倍；（2）安藍(lán)風(fēng)濕藥液

2、高、中、低三個劑量組和阿司匹林陽性對照組均明顯抑制醋酸致痛小鼠扭體次數(shù)的增加，均能明顯提高給藥后30、60、90、120min熱刺激小鼠的痛閾值，其中安藍(lán)風(fēng)濕藥液高、中劑量組和阿司匹林陽性組均能明顯提高醋酸致痛小鼠扭體的替伏期。結(jié)論 （1）安藍(lán)風(fēng)濕藥液毒性小，在臨床推薦的用藥劑量下使用是安全的；（2）安藍(lán)風(fēng)濕藥液具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。    【關(guān)鍵詞】 安藍(lán)風(fēng)濕藥液；急性毒性試驗；鎮(zhèn)痛實驗    Research on the acute toxic test and the analgesia effect of

3、the Anlar fengshi solution    【Abstract】 Objective （1）Observation mice with oral Anlan fengshi solution produces acute toxic response and death situation, provides the material for the clinical test security.（2） Through mice analgesia experiment observation, provides the basis wi

4、th the medicine. Method （1） After 10 mice preparations, ig cannot measure LD50,therefore carries on survey quota for most greatly gives the doses.（2） To acetic acid causes the ache mice sways from side to side the body number of times;Of Reban method causes the ache mouse ache scope influence. Resul

5、ts （1） Mice ig Anlan fengshi solution most greatly gives the dose every day is 180g drugs/kg,equal to clinical 60 kilograms grown-up person every day amount used 400 times;（2） Anlan fengshi solution high, middle,smaller three amount used with aspirin tablets positive comparison group all obvious sup

6、pression the acetic acid causes the ache of the mouse sways from side to side the bodily number of times the increase,all can obviously enhance for drugs after 30th, 60, 90, 120min.The heat stimulates mouses pain threshold value，among Anlan fengshi solution high, middle amount used with aspirin tabl

7、ets positive comparison group all can obviously enhance the acetic acid causes the ache mouse sways from side to side of the body for bends down the time. Conclusion （1） Anlan fengshi solution toxicity is small,uses under the medicine dosage in the clinical recommendation the use is safe; Anlan feng

8、shi solution possess obvious analgesia function.    【Key words】 Anlan fengshi solution; acute toxicity test; analgesia experiment    安藍(lán)風(fēng)濕藥液是邵陽市中醫(yī)醫(yī)院經(jīng)多年臨床觀察治療“風(fēng)寒濕痹”具有顯著療效的中藥方劑。“風(fēng)寒濕痹”1是采用病因分類的方法，是“五因痹”中風(fēng)痹、寒痹、濕痹的合稱，不包括熱痹、燥痹。其病因是正虛、邪侵、痰瘀三大主要因素，病機相當(dāng)復(fù)雜，常有“虛”、“邪”、“痰”相

9、互搏結(jié)，“不通”、“不榮”同時并見。方中以鬼毛針配螞蟻活血通絡(luò)止痛，絞股藍(lán)、螞蟻補肝腎，強筋骨，三藥合用祛邪扶正共為君藥；半夏、天南星祛痰，助鬼毛針、螞蟻使痰瘀不能互結(jié)，淫羊藿助君藥補肝腎、強筋骨、祛風(fēng)濕，增加主藥療效，故半夏、天南星、淫羊藿為臣藥；水蛭生用量微，意在破瘀通經(jīng)而不傷正氣，改變血流，使血液粘稠度下降為佐藥；甘草能減少螞蟻、水蛭等藥物的過敏反應(yīng)，兼益氣扶正，調(diào)和諸藥，為佐使藥。全方共奏活血通絡(luò)，益腎健骨，除濕止痛之功。這樣阻斷了“正虛”、“痰瘀”兩個關(guān)節(jié)的病理環(huán)節(jié)，全方以祛邪為第一要務(wù)，邪去則正安，兼顧扶正，組方主次分明有序，直達病所，創(chuàng)“活血通絡(luò)，益腎健骨，除濕止痛”之法治療風(fēng)寒

10、濕痹，意在治病求因。下面將安藍(lán)風(fēng)藥液急性毒性實驗和鎮(zhèn)痛作用的研究介紹如下。    1 安藍(lán)風(fēng)濕藥液的急性毒性實驗研究    1.1 實驗材料    1.1.1 藥物 安藍(lán)風(fēng)濕藥液，規(guī)格：500ml/瓶，每1ml含生藥0.225g，批號：20060816，由湖南省邵陽市中醫(yī)醫(yī)院提供。取安藍(lán)風(fēng)濕藥液2瓶，即1000ml，水浴濃縮至100ml，即每1ml含生藥2.25g，此濃度為最大濃度。    1.1.2 動物 清潔級昆明種小鼠，1822g

11、，50只，雌雄各半，由湖南長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務(wù)部提供；實驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK（湘）2006-0001號。湖南省藥品檢驗所動物房，實驗動物使用許可證：SYXK（湘）2003-0006號。實驗室溫度1828，自制標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料喂養(yǎng)，自由攝食、攝水。    1.2 實驗方法2，3    1.2.1 經(jīng)10只小鼠預(yù)試，ig測不出LD50，故進行最大給藥量測定。    1.2.2 取小鼠40只，2022g，雌雄各半，均分成兩組（n=20），給藥組和對照組。隔食不隔水12

12、h后，給藥組動物灌胃上述安藍(lán)風(fēng)濕藥液濃縮液0.8ml/20g，對照組動物灌胃等體積注射用水，每次間隔12h，共給藥2次，給藥后連續(xù)觀察7天動物的毒性反應(yīng)，包括行為活動、精神狀態(tài)、食欲、大小便，以及毛發(fā)、呼吸、口、鼻、眼、耳、肛門等有無異常分泌物，體重變化及死亡等情況。    2 安藍(lán)風(fēng)濕藥液的鎮(zhèn)痛作用的研究    2.1 實驗材料    2.1.1 藥物 安藍(lán)風(fēng)濕藥液，規(guī)格：500ml/瓶，每1ml含生藥0.225g，批號：20060816，由湖南省邵陽市中醫(yī)醫(yī)院提供；阿司匹

13、林片，批號：060807，舒泰神（北京）藥業(yè)有限公司。    2.1.2 動物及儀器 清潔級昆明種小鼠，由湖南長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務(wù)部提供；實驗動物生產(chǎn)許可證：SCXK（湘）2006-0001號。GJ-8402型熱板測痛儀。    2.2 實驗方法4    2.2.1 藥物配制方法和實驗動物分組 實驗動物分為5組，第一組為對照組，第二組為陽性藥物組，第三、四、五分別為安藍(lán)風(fēng)濕藥液高、中、低劑量組（16.4g生藥/kg、8.2g生藥/kg、4.1g生藥/kg），取安藍(lán)

14、風(fēng)濕藥液，在水浴上濃縮至0.655g生藥/ml和0.328g生藥/ml、或加蒸餾水稀釋成0.164g生藥/ml的濃度供動物用（按體表面積計，分別相當(dāng)于人用等效劑量的4倍、2倍和1倍）；陽性藥物用阿司匹林片，用蒸餾水分別配成0.91mg/ml的濃度供動物用（按體表面積計，相當(dāng)于人用等效劑量的2倍）；所有動物均灌胃給藥，動物給藥體積為25ml/kg體重。除另有規(guī)定外，一般每天給藥一次，實驗室溫度控制在1828，自制標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料喂養(yǎng)，自由攝食、攝水。    2.2.2 對醋酸致痛小鼠扭體次數(shù)的影響 清潔級昆明種小鼠50只，雌雄各半，體重1822g，隨機分為5組

15、（n10），按2.1方法給藥，每天1次，共給藥8天，在末次給藥后60min，各組分別腹腔注射0.7冰醋酸（0.15ml/10g），觀察每只小鼠15min內(nèi)扭體的潛伏期和因疼痛引起的扭體次數(shù)（腹部內(nèi)凹，伸展后肢，臀部抬高視為扭體反應(yīng)）。結(jié)果見表1。 表1 安藍(lán)風(fēng)濕藥液對醋酸致痛小鼠扭 體次數(shù)的影響注：與模型對照組比較，*P0.05， *P0.05， *P0.01    2.2.3 對熱板法致痛小鼠痛閾的影響 篩選合格小鼠：熱板溫度恒定在55±0.510min后，取體重1822g雌性清潔級昆明種小鼠若干。凡舔后足時間<5s或>30s或跳

16、躍者棄之不用。選合格小鼠50只，隨機分為5組（n10），測其正常痛閾值，作為該鼠給藥前痛閾值。按2.2.1方法給藥，每天1次，共給藥5天，在末次給藥后30、60、90、120min分別測小鼠痛閾值。結(jié)果見表2。表2 安藍(lán)風(fēng)濕藥液對熱刺激小鼠疼痛反應(yīng)的影響注：與正常對照組比較，*P0.05，*P0.05， *P0.01    3 實驗結(jié)果    3.1 安藍(lán)風(fēng)濕藥液急性毒性實驗結(jié)果 動物全部成活，對照組體重平均增加16.7，給藥組體重平均增加16.3。第8天處死小鼠解剖，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等主要臟器，均未見表

17、面與切面異常。結(jié)果小鼠ig安藍(lán)風(fēng)濕藥液每日最大給藥量為180g生藥/kg，相當(dāng)于臨床60kg成人一日用量（120ml/日，120×0.225/600.45g生藥/kg）的400倍。見表3。表3 安藍(lán)風(fēng)濕藥液小鼠急性毒性實驗結(jié)果    3.2 安藍(lán)風(fēng)濕藥液的鎮(zhèn)痛作用研究結(jié)果 結(jié)果表明，安藍(lán)風(fēng)濕藥液高、中、低三個劑量和阿司匹林片陽性組均明顯抑制醋酸致痛小鼠扭體次數(shù)的增加，其中安藍(lán)風(fēng)濕藥液高、中劑量組和阿司匹林片陽性組均能明顯提高醋酸致痛小鼠扭體的潛伏期；安藍(lán)風(fēng)濕藥液高、中、低三個劑量和阿司匹林片陽性組均能明顯提高給藥后30、60、90、120min熱刺激小鼠的痛閾值。    4 實驗結(jié)論    安藍(lán)風(fēng)濕藥液小鼠灌胃180g生藥/kg，相當(dāng)于臨床60kg成人一日用量400倍，提示本品毒性小，在臨床推薦的用藥劑量下使用是安全的。