試卷B現(xiàn)代生物分析儀器原理與實(shí)驗(yàn)試卷與答案

1、姓名 學(xué)號(hào) 學(xué)院 專業(yè) 座位號(hào) ( 密 封 線 內(nèi) 不 答 題 )密封線線_ _ 誠(chéng)信應(yīng)考,考試作弊將帶來(lái)嚴(yán)重后果！ 華南理工大學(xué)期末考試 現(xiàn)代生物分析儀器原理與實(shí)驗(yàn) 試卷B注意事項(xiàng)：1. 考前請(qǐng)將密封線內(nèi)各項(xiàng)信息填寫(xiě)清楚； 2. 所有答案請(qǐng)直接答在試卷上(或答題紙上)； 3考試形式：閉卷； 4. 本試卷共 四 大題，滿分100分，考試時(shí)間120分鐘。題 號(hào)一二三四五總分得 分評(píng)卷人一、單項(xiàng)選擇題（每小題2分，共30分。請(qǐng)?zhí)钤谙旅姹砀裰?，否則不計(jì)分）12345678910DAABC A CCDB1112131415CBBBB1、某帶一個(gè)電荷的化合物經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)出分子離子峰的 m/z 為 67。從

2、分子離子峰的質(zhì)荷比可以判斷分子式可能為 A. C4H3O B. C5H8 C. C4H7N D. C3H3N22、電磁輻射的微粒性表現(xiàn)在下述哪種性質(zhì)上 A. 能量 B. 頻率 C. 波長(zhǎng) D. 波數(shù)3、在使用熱導(dǎo)檢測(cè)器時(shí)，為了提高檢測(cè)器的靈敏度，常使用的載氣為 A. 氮?dú)?B. 氫氣 C. 氧氣 D. 氦氣4、俄國(guó)植物學(xué)家茨維特用石油醚為沖洗劑，分離植物葉子的色素時(shí)是采用 A. 液液色譜法 B. 液固色譜法 C. 凝膠色譜法D. 離子交換色譜法5、在紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)中，用于紫外波段的光源是 A. 鎢燈 B. 鹵鎢燈 C. 氘燈 D. 能斯特光源6、在氣相色譜法中,用于定性的參數(shù)是 A. 保

3、留時(shí)間 B. 分配比 C. 半峰寬 D. 峰面積7、下列氣體中, 不能用做氣相色譜法載氣的是 A. 氮?dú)?B. 氫氣 C. 氧氣 D. 氦氣 8、對(duì)聚苯乙烯相對(duì)分子質(zhì)量進(jìn)行分級(jí)分析，應(yīng)采用下述哪一種色譜方法? A. 離子交換色譜法 B. 液-固色譜法 C. 空間排阻色譜法 D. 液-液色譜法 9、在液相色譜中,梯度洗脫適用于分離的是 A. 異構(gòu)體 B. 沸點(diǎn)相近，官能團(tuán)相同的化合物 C. 沸點(diǎn)相差大的試樣 D. 極性變化范圍寬的試樣10、紫外-可見(jiàn)吸收光譜主要決定于 A. 分子的振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷 B. 分子的電子結(jié)構(gòu) C. 原子的電子結(jié)構(gòu) D. 原子的外層電子能級(jí)間躍遷11、如果試樣比較復(fù)

4、雜，相鄰兩峰間距離太近或操作條件不易控制穩(wěn)定，要準(zhǔn)確測(cè)量保留值有一定困難時(shí)，宜采用的定性方法為 A. 利用相對(duì)保留值定性 B. 利用文獻(xiàn)保留值數(shù)據(jù)定性 C. 加入已知物增加峰高的辦法定性 D. 與化學(xué)方法配合進(jìn)行定性12、用氣相色譜測(cè)定農(nóng)作物中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量，應(yīng)選用哪種檢測(cè)器 A. 熱導(dǎo) B. 電子捕獲 C. 火焰光度 D. 氫火焰離子化13、在氣相色譜法中，調(diào)整保留值實(shí)際上反映了哪些部分分子間的相互作用? A. 組分與載氣 B. 組分與固定相C. 組分與組分 D. 載氣與固定14、在氣相色譜中，可以利用文獻(xiàn)記錄的保留數(shù)據(jù)定性，目前最有參考價(jià)值的是 A. 調(diào)整保留體積 B. 相對(duì)保留值 C.

5、 保留體積 D. 調(diào)整保留時(shí)間15、CO2應(yīng)有四種基本振動(dòng)形式它的紅外光譜圖應(yīng)有幾個(gè)峰 A、1個(gè) 、2個(gè) 、3個(gè) 、4個(gè)二、填空題（每空1分，共20分）1、生物分析技術(shù)是對(duì)天然和合成生物產(chǎn)物中有效成分進(jìn)行分離（英文：Separation）、辨別（英文：Identification）和定量（英文：Quantification）的一門技術(shù)學(xué)科。2、氣相色譜儀的檢測(cè)器包括：熱導(dǎo)檢測(cè)器、火焰離子化檢測(cè)器、火焰光度檢測(cè)器和電子捕獲檢測(cè)器。 3、依據(jù)固定相和流動(dòng)相的相對(duì)極性強(qiáng)弱，把固定相極性大于流動(dòng)相的極性的色譜法稱為正相分配色譜法。4、根據(jù)液相色譜的用途不同，液相色譜可分為：制備型液相色譜和分析型液相色

6、譜。5、質(zhì)譜分析技術(shù)中，常見(jiàn)的質(zhì)量分析器為： 四級(jí)桿 、離子阱 和飛行時(shí)間 。6、多原子分子振動(dòng)的基本模式是：對(duì)稱伸縮振動(dòng)、不對(duì)稱伸縮振動(dòng)、剪式振動(dòng)、平面搖擺振動(dòng)、非平面搖擺振動(dòng)和扭動(dòng)振動(dòng)。7、根據(jù)熒光物質(zhì)的激發(fā)能量形式或發(fā)射熒光光譜的差異，分子熒光可分為：光致熒光、化學(xué)熒光和生物熒光。三、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）1、什么是離心機(jī)？其測(cè)量單位RCF和rpm各代表什么物理意義？ 離心技術(shù)是利用強(qiáng)大的離心力將物理性質(zhì)（如質(zhì)量、浮力、沉降系數(shù)等）不同的懸浮液內(nèi)微粒進(jìn)行分離、濃縮的技術(shù)。離心技術(shù)特別適用于溶液量較小或沉淀黏稠的生物樣品的分離。能產(chǎn)生強(qiáng)大離心力的機(jī)械裝置就是離心機(jī)。RCF: 相對(duì)離心

7、力rpm：角速度也常用轉(zhuǎn)速n(r/min)來(lái)表達(dá)2、在生物樣品制備中，經(jīng)常用到的真空濃縮儀和凍干機(jī)，它們的用途是什么？在原理上有什么不同？ 真空濃縮儀和凍干機(jī)都是用來(lái)將樣品中的溶劑去除，可以有效地保存樣品的儀器。 真空離心濃縮儀應(yīng)用于DNA/RNA、核苷、蛋白、藥物、代謝物、酶或類似樣品的濃縮合成物的溶劑去除，具有濃縮效率高，樣品活性留存高的特點(diǎn)。 冷凍干燥機(jī)（簡(jiǎn)稱凍干機(jī)）就是將含水物質(zhì)，先凍結(jié)成固態(tài)，而后使其中的水分從固態(tài)升華成氣態(tài)，以除去水分而保存物質(zhì)的方法。在壓縮空氣干燥過(guò)程中，其冷凍干燥是通過(guò)降低壓縮空氣溫度，使壓縮空氣中的水份析出。 3、什么是吸收光譜？電子躍遷所需吸收的能量是量子化

8、的。當(dāng)物質(zhì)的分子在兩個(gè)能級(jí)間躍遷所需的能量滿足下面的關(guān)系式時(shí)，電子的躍遷將會(huì)產(chǎn)生吸收光譜。4、在質(zhì)譜的分析過(guò)程中，譜圖是如何產(chǎn)生的？ 將帶電原子、分子或分子碎片按其質(zhì)量或質(zhì)荷比（mass-to-charge ration, m/z）的大小依次排列形成的圖譜5、在質(zhì)譜分析過(guò)程中，樣品的離子化非常重要，決定了測(cè)試是否能順利進(jìn)行。請(qǐng)舉出現(xiàn)在最常用于兩種生物樣品離子化的方法。如果你要得到某種蛋白抗體的質(zhì)譜圖，需要使用什么離子源？ 最常用于生物樣品離子化的方法是：電噴霧電離（Electrospray Ionization-ESI）和基質(zhì)輔助激光解吸電離(Matrix Assisted Laser Des

9、orption Ionization, MALDI) 由于蛋白抗體是一種帶多個(gè)電荷的大分子，因此要有效電離這一類的離子，通常采用電噴霧電離。四、問(wèn)答題（每題10分，共20分） 1、請(qǐng)將下段英文翻譯成中文，并根據(jù)你所到知識(shí)，說(shuō)明這種生物分析儀器的基本組成部分。簡(jiǎn)單地舉例說(shuō)明它在現(xiàn)代醫(yī)藥研發(fā)領(lǐng)域的重要作用。A spectrometer (spectrophotometer, spectrograph or spectroscope) is an instrument used to measure properties of light over a specific portion of the

10、 electromagnetic spectrum, typically used in spectroscopic analysis to identify materials. Electromagnetic radiation (EMR) is a form of energy emitted and absorbed by charged particles which exhibits wave-like behavior as it travels through space. The nature of EMR presents waveparticle duality，whic

11、h postulates that all particles exhibit both wave and particle properties. 光譜儀是一種用于測(cè)定某些電磁光譜中光波性質(zhì)的儀器，特別是用于光譜分析來(lái)鑒定物質(zhì)。電磁輻射是一種由帶電粒子發(fā)射或吸收的能量形式，在穿過(guò)空間的運(yùn)動(dòng)中可呈現(xiàn)出類似波的特征。電磁輻射的本質(zhì)為波粒二象性，其特征為所有粒子都既有波的物理性質(zhì)又有粒子的物理性質(zhì)。以紫外可見(jiàn)光譜儀為例：它的儀器組成為：光源、色散系統(tǒng)、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)顯示系統(tǒng)注：這部分，學(xué)生可以結(jié)合課堂中講述的光譜儀在現(xiàn)在醫(yī)藥研發(fā)的各個(gè)階段的使用，來(lái)闡述其重要性。例如，在藥物研發(fā)過(guò)程中，臨床前

12、和臨床試驗(yàn)階段，藥物在合成和后期的檢測(cè)中，會(huì)大量用到高效液相色譜和光譜聯(lián)用，來(lái)檢測(cè)藥物的含量及純度等。2、請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，使用你所學(xué)過(guò)的生物分析儀器來(lái)測(cè)定所收集的1x106 HeLa細(xì)胞中蛋白含量。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要包括從細(xì)胞破碎到儀器測(cè)定的基本步驟，可能用到的實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)儀器等（提示：使用BCA蛋白定量測(cè)定法）實(shí)驗(yàn)材料：含0.05%胰酶的PBS緩沖液，BCA試劑盒，96孔板實(shí)驗(yàn)儀器：細(xì)胞超聲破碎儀，高速離心機(jī)（帶溫控），渦旋儀，酶標(biāo)儀實(shí)驗(yàn)過(guò)程：1. 細(xì)胞收集：1）棄去細(xì)胞培養(yǎng)液。用PBS緩沖液清洗貼壁的細(xì)胞若干次。2）加入適量含有0.05%胰蛋白酶的PBS緩沖液，使細(xì)胞脫壁懸浮。3）用離心管收集細(xì)胞懸液。2. 細(xì)胞破碎：1）4低速離心，棄去上清液，沉淀為細(xì)胞。2）根據(jù)后續(xù)分析加入適量緩沖液。3）使用渦旋儀使細(xì)胞懸浮于緩沖液中。4）使用超聲波細(xì)胞破碎儀破碎：選擇合適的破碎能量、破碎時(shí)間和破碎次數(shù)。（選擇的破碎條件要使細(xì)