顯微鏡的結(jié)構(gòu)及使用

1、實驗一實驗一 顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用(穩(wěn)定鏡身穩(wěn)定鏡身)(支持鏡柱以支持鏡柱以上的部件上的部件)(握鏡的部位握鏡的部位)(使物像清晰使物像清晰)(使物像更清晰使物像更清晰)( (用眼觀察的鏡頭用眼觀察的鏡頭) )( (接近物體的鏡頭接近物體的鏡頭) )(調(diào)節(jié)光線強弱調(diào)節(jié)光線強弱)(放置玻片標本放置玻片標本)( (使光線經(jīng)過通使光線經(jīng)過通光孔反射上來光孔反射上來) )(安裝物鏡安裝物鏡)(連接目鏡和物鏡連接目鏡和物鏡)(固定標本固定標本)電子顯微鏡與光學顯微鏡的基本區(qū)別電子顯微鏡與光學顯微鏡的基本區(qū)別 電子電子顯微鏡顯微鏡 光學光學顯微鏡顯微鏡分辨本領分辨本領200nm 接近接近0

2、.1nm可見光可見光透透 鏡鏡電子束電子束光光 源源玻璃透鏡玻璃透鏡電磁透鏡電磁透鏡細胞結(jié)構(gòu)細胞結(jié)構(gòu)顯微顯微結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)亞顯微亞顯微 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)顯微鏡的使用 1、步驟：取鏡、安放、對光、放置裝片、使鏡筒下降、低倍鏡觀察、將要觀察的物像移至視野中央、高倍鏡觀察。 2 2、高倍鏡使用要領、高倍鏡使用要領觀察時應先使用低倍鏡，然后換用高倍鏡。觀察時應先使用低倍鏡，然后換用高倍鏡。換用高倍鏡前，應先把要觀察的目標移至視換用高倍鏡前，應先把要觀察的目標移至視野中央。野中央。換用高倍鏡時，可直接轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍換用高倍鏡時，可直接轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使高倍物鏡對準通光孔即可。物鏡對準通光孔即可。換用高倍鏡后，只可調(diào)節(jié)

3、細準焦螺旋對焦。換用高倍鏡后，只可調(diào)節(jié)細準焦螺旋對焦。換用高倍鏡后，若視野較暗，可調(diào)節(jié)光圈和換用高倍鏡后，若視野較暗，可調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，使用大光圈或凹面反光鏡以調(diào)亮視野。反光鏡，使用大光圈或凹面反光鏡以調(diào)亮視野。3.3.物鏡和目鏡的特征比較物鏡和目鏡的特征比較鏡頭鏡頭種類種類有無有無螺紋螺紋長度長度放大放大倍數(shù)倍數(shù)視野大小、視野大小、明暗明暗物鏡物鏡有有長長大大小而暗小而暗短短小小大而亮大而亮目鏡目鏡無無長長小小大而亮大而亮短短大大小而暗小而暗4.4.顯微鏡的放大倍數(shù)與成像規(guī)律顯微鏡的放大倍數(shù)與成像規(guī)律（1 1）放大倍數(shù)）放大倍數(shù)= =目鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍物鏡放大倍數(shù)。這里的放

4、大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾?，而?shù)。這里的放大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾?，而不是面積或體積。不是面積或體積。（2 2）成像規(guī)律：顯微鏡下所成的像是倒立的）成像規(guī)律：顯微鏡下所成的像是倒立的虛像，上下左右均是顛倒的。例如若觀察的虛像，上下左右均是顛倒的。例如若觀察的實物為實物為“b b”，則顯微鏡視野中看到的物象是，則顯微鏡視野中看到的物象是“q q”；若物象偏向視野的右下方，則向右下；若物象偏向視野的右下方，則向右下方移動裝片才能將其移至視野中央。方移動裝片才能將其移至視野中央。5 5、污點位置判斷、污點位置判斷: : 分別轉(zhuǎn)動鏡頭、移動裝片分別轉(zhuǎn)動鏡頭、移動裝片, ,看污點是否隨之而動看污點是否隨之而動

5、6 6、臨時裝片的制作、臨時裝片的制作: : （3）放置玻片標本）放置玻片標本 （4）調(diào)節(jié)焦距）調(diào)節(jié)焦距 （2） 對光對光使用低倍顯微鏡的步驟：使用低倍顯微鏡的步驟： （1）取鏡和放置）取鏡和放置一）取一）取鏡安放：鏡安放：二）對光二）對光三）放置標本：三）放置標本：五）善后整理五）善后整理1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座；、右手握住鏡臂，左手托住鏡座；2、輕拿輕放，并略偏左；、輕拿輕放，并略偏左；3、裝好目鏡和物鏡。、裝好目鏡和物鏡。1、扭動轉(zhuǎn)換器，使鏡頭（低倍鏡）、鏡筒和通、扭動轉(zhuǎn)換器，使鏡頭（低倍鏡）、鏡筒和通光孔成一直線；光孔成一直線；2、根據(jù)光線強弱，調(diào)節(jié)反光鏡和遮光器（光圈）、根據(jù)光

6、線強弱，調(diào)節(jié)反光鏡和遮光器（光圈）四）調(diào)焦觀察四）調(diào)焦觀察玻片標本放置要正對通光孔的中央，用玻片標本放置要正對通光孔的中央，用押片夾固定押片夾固定1、將顯微鏡外表擦拭干凈、將顯微鏡外表擦拭干凈2、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，把兩物鏡偏到旁邊，并、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，把兩物鏡偏到旁邊，并下調(diào)鏡筒至最低，送回鏡箱。下調(diào)鏡筒至最低，送回鏡箱。調(diào)焦、調(diào)整玻片（重點注意事項）調(diào)焦、調(diào)整玻片（重點注意事項） （1）取鏡和放置：顯微鏡平時存放在柜或箱 中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，鏡座后端距桌邊12寸為宜，便于坐著操作。 （2）對光：用拇指和中指移動旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動)

7、，使低倍鏡對準鏡臺的通光孔(當轉(zhuǎn)動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心)。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。 （3）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。 （4）調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時針方向轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處，應注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順

8、時針方向緩慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。 高倍鏡的使用方法 （1）選好目標：一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調(diào)到中心，同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進行高倍鏡的觀察。 （2）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢，并從側(cè)面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好，應重新操作。 （3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時一般能見到一個不太清楚的物象，可將細調(diào)節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.51圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!) 。 如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要

9、更換玻片標本時，必須順時針(切勿轉(zhuǎn)錯方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降，方可取下玻片標本。 顯微鏡使用的注意事項（1） 1持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。 2輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣，以免碰翻落地。 3保持顯微鏡的清潔，光學和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機械部分用布擦拭。 4水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺，如果沾污應立即擦凈。 5放置玻片標本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。 6要養(yǎng)成兩眼同時睜開的習慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。 7不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要

10、任意拆卸各種零件，以防損壞。 8使用完畢后，必須復原才能放回鏡箱內(nèi)，其步驟是：取下標本片，轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔，下降鏡臺，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實驗臺柜內(nèi)。 最后填寫使用登記表。(注：反光鏡通常應垂直放，但有時因集光器沒提至應有高度，鏡臺下降時會碰壞光圈，所以這里改為平放)顯微鏡使用的注意事項（2） 先低后高（換高后只能用細準焦螺旋?。┫确畔鹊秃蟾撸〒Q高后只能用細準焦螺旋?。┫确诺顽R筒，再向上調(diào)節(jié)低鏡筒，再向上調(diào)節(jié)成像規(guī)律成像規(guī)律：上下、左右顛倒（如何移動玻片）：上下、左右顛倒（如何移動玻片）變化規(guī)律變化規(guī)律：圖像變大、數(shù)量

11、減少、視野變暗：圖像變大、數(shù)量減少、視野變暗 放大倍數(shù)放大倍數(shù)：物：物x x目目 指的是長度上的放大倍數(shù)指的是長度上的放大倍數(shù)鞏固練習 1、2、3、4、5是使用顯微鏡的幾個步驟。右圖為顯微鏡觀察中的兩個視野，其中細胞甲為主要觀察對象，由視野到視野時，操作過程的正確順序是（ ）1轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋 2轉(zhuǎn)動細準焦螺旋 3調(diào)節(jié)光圈 4轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器 5移動玻片A、1234 B、312 C、5432 D、34121目鏡的長度與其擴大的倍數(shù)有關系嗎，有何關系？ 2物鏡的長度與其擴大的倍數(shù)有關系嗎，有何關系？ 3請大家將鏡臂向鏡座方向移動，觀察物鏡的鏡片， 問題：根據(jù)鏡片的大小，是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明

12、亮？目鏡的長度越長，擴大的倍數(shù)越小目鏡的長度越長，擴大的倍數(shù)越小物鏡的長度越長，擴大的倍數(shù)越大物鏡的長度越長，擴大的倍數(shù)越大高倍鏡的視野小，視野暗高倍鏡的視野小，視野暗1 為什么要先用低倍鏡觀察清楚后把要放大觀察的物象移至視野中央，再換高倍鏡觀察？2 用轉(zhuǎn)化器轉(zhuǎn)過高倍鏡后，為何只能使用細準焦螺旋，而不能使用粗準焦螺旋呢？高倍鏡視野小，而且轉(zhuǎn)換高倍鏡后，物像被放大，沒有在低倍鏡下移到中央，就會跑出視野外。 這是因為高倍鏡的倍數(shù)越高，長度越長，離玻片的距離就越近，這是因為高倍鏡的倍數(shù)越高，長度越長，離玻片的距離就越近，如果后粗準焦旋很容易將高倍鏡的鏡片和玻片壓壞。如果后粗準焦旋很容易將高倍鏡的鏡片

13、和玻片壓壞。首先，在載玻片上滴加一滴清水；首先，在載玻片上滴加一滴清水；第二，用鑷子夾取一塊單層細胞的材料或者撕取一層薄薄的材料第二，用鑷子夾取一塊單層細胞的材料或者撕取一層薄薄的材料放在載玻片上的清水中均勻展開。放在載玻片上的清水中均勻展開。最后是蓋上蓋玻片。最后是蓋上蓋玻片。實驗材料： （1酵母菌溶液（2小白菜的葉表皮（3魚的紅細胞制備液一二實驗記錄細胞種類細胞種類 細胞壁細胞壁細胞膜細胞膜細胞器細胞器細胞核細胞核通過該表，大家歸納一下這些細胞在形態(tài)和結(jié)構(gòu)上的共同點，通過該表，大家歸納一下這些細胞在形態(tài)和結(jié)構(gòu)上的共同點，并描述它們的差異。并描述它們的差異。不同的細胞，其形態(tài)，大小千差萬別。

14、不同的細不同的細胞，其形態(tài)，大小千差萬別。不同的細胞有共同的結(jié)構(gòu)：細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核。胞有共同的結(jié)構(gòu)：細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核。這些細胞與大腸桿菌細胞結(jié)構(gòu)的最主要的差別是大腸桿菌沒這些細胞與大腸桿菌細胞結(jié)構(gòu)的最主要的差別是大腸桿菌沒有明顯的細胞核，但有鞭毛。有明顯的細胞核，但有鞭毛。 這些細胞與大腸桿菌在結(jié)構(gòu)上有什么主要區(qū)別呢？這些細胞與大腸桿菌在結(jié)構(gòu)上有什么主要區(qū)別呢？電鏡下的大腸桿菌電鏡下的大腸桿菌不同細胞之間存在差異性，分析產(chǎn)生差異的可能原因不同細胞之間存在差異性，分析產(chǎn)生差異的可能原因？不同的細胞在形態(tài)和結(jié)構(gòu)千差萬別，造成其差異性是因為這些細胞的位置和功能不同位置和功能不同，結(jié)構(gòu)與功

15、能相適應，這是個體發(fā)育過程中細胞分化的結(jié)果細胞分化的結(jié)果。檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)試劑試劑成分成分實驗現(xiàn)象實驗現(xiàn)象常用材料常用材料蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)雙縮脲雙縮脲A: 0.1g/mL NaOHA: 0.1g/mL NaOH紫色紫色大豆大豆雞蛋雞蛋B: 0.01g/mL CuSOB: 0.01g/mL CuSO4 4脂肪脂肪蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色花生花生蘇丹蘇丹紅色紅色還原糖還原糖斐林（班斐林（班氏氏) )0.1g/mL NaOH0.1g/mL NaOH淺藍色淺藍色棕色棕色磚磚紅色沉淀紅色沉淀蘋果、梨、蘋果、梨、白蘿卜白蘿卜0.05g/mL CuSO0.05g/mL CuSO4 4淀粉淀粉碘液碘

16、液I I2 2藍色藍色馬鈴薯馬鈴薯可溶性還原糖的鑒定：制備組織樣液（提取或分離出含還原可溶性還原糖的鑒定：制備組織樣液（提取或分離出含還原性糖的過程）性糖的過程） 鑒定樣液鑒定樣液 （取樣液（取樣液2mL于試管中于試管中加剛配的斐林（班氏）試加剛配的斐林（班氏）試劑劑2mL水浴水浴2min左右左右觀察顏色變化）觀察顏色變化）蛋白質(zhì)的鑒定：制備樣液蛋白質(zhì)的鑒定：制備樣液(制備豆?jié){或稀釋蛋清制備豆?jié){或稀釋蛋清) 鑒定鑒定(試管中加樣液試管中加樣液2mL加加2mL雙縮脲試劑雙縮脲試劑A搖均搖均雙縮脲雙縮脲試劑試劑B試劑試劑34滴搖均滴搖均觀察顏色變化觀察顏色變化)脂肪的鑒定：制作切片（含脂肪量越高的組織越好，切片越脂肪的鑒定：制作切片（含脂肪量越高的組織越好，切片越薄越好）薄越好） 染色（滴蘇丹染色（滴蘇丹染液染液23滴切片上滴切片上23min后吸去染液后吸去染液滴體積分數(shù)滴體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色的酒精洗去浮色吸去多余的酒精）吸去多余的酒精） 制作裝片（滴制作裝片（滴12水于材料切片上水于材料切片上蓋上蓋玻片）蓋上蓋玻片） 鏡檢鑒定（顯微鏡對光鏡檢鑒定（顯微鏡對光低倍鏡觀察低倍鏡觀察高倍鏡觀察）高倍鏡觀察）總結(jié)：三大類物質(zhì)的鑒定步驟都是：取樣總