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1、模型的背景,心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血兩種,全心缺血主要靠注射藥物(如異丙腎上腺素等),左心室缺血主要靠手術(shù)對(duì)動(dòng)物的冠狀動(dòng)脈左降支進(jìn)行緊扎實(shí)現(xiàn)。由于左心室缺血對(duì)臨床的意義更大,所以研究心肌缺血藥物時(shí)這個(gè)模型是必須的。(1)術(shù)前12小時(shí)給動(dòng)物禁食(2)將動(dòng)物注射10%水合氯醛(0.4mL/100g)麻醉后固定在手術(shù)臺(tái)上(3)用筆型靜脈置留針進(jìn)行氣管插管,插好后可用手術(shù)刀柄靠近氣管,如果見(jiàn)氣霧,就證明成功,連接動(dòng)物呼吸機(jī),參數(shù)為:呼吸頻率85;呼吸比1:1;潮氣量為18ml(4)胸部被毛、酒精棉消毒,在胸部左側(cè)34肋間剪開(kāi)皮膚,如圖1(5)分離肌肉露出肋骨,切口位置有兩塊肌肉,胸淺肌和胸深
2、肌,注意按照肌肉的紋路分離可以避免將肌肉扯爛,如圖2(6)在第三根肋骨下用止血鉗將肌肉分離開(kāi),然后左手用止血鉗挑住肋骨,右手持剪刀剪開(kāi)第三根肋骨,如圖3 (7)用止血鉗將剪斷的肋骨夾住掰開(kāi),放入開(kāi)瞼器,用止血鉗剝離心包膜,如圖4(8)用止血鉗將胸腺(心臟上面白的像脂肪一樣的東西)夾住拉出,如圖5(9)在左心耳與肺動(dòng)脈圓錐間穿60號(hào)線,拉緊絲線,形成心肌缺血,觀察線扎緊的部位上下大約2mm范圍的心肌是發(fā)白色的,如圖6(10)閉合胸腔,注意將胸腔內(nèi)的空氣擠出(這點(diǎn)非常關(guān)鍵,這個(gè)模型最容易失敗導(dǎo)致大鼠死亡的就是這個(gè)地方),對(duì)肌肉和皮進(jìn)行縫合,擠空氣的手法如圖7(11)結(jié)扎術(shù)后6小時(shí)可進(jìn)行TTC染色:將大鼠脫頸處死,打開(kāi)胸腔,將心臟剪下,用生理鹽水將心臟清洗干凈并排出心臟內(nèi)的淤血,沿冠狀溝將心房切除留下心室,用刀片將心臟切成1mm厚的切片,放入0.1%的TTC磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)37水浴710分鐘,取出切片用生理鹽水沖洗數(shù)次,觀察結(jié)果。非梗死區(qū)因脫氫酶還原TTC而呈紅色,梗死區(qū)因脫氫酶流失而呈白色,將梗死區(qū)和非梗死區(qū)分離并分別稱重,梗死范圍以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。下圖是染色的結(jié)果,圖8結(jié)扎位置,梗死的地方其實(shí)肉眼大致能看出,和其他地方相比發(fā)白,圖9:下面再
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