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文檔簡介
1、宋體,五號注:1、論文的中文摘要、正文、參考文獻、附錄、致謝等均采用宋體;英文摘要和英文關鍵詞采用“Times New Roman”字體;2、除表格內容、表注、圖注外,均采用小四號字;3、中英文摘要、正文和附錄的行距:1.5倍;4、圖、表:居中,并且前后均要空一行;圖注和表頭居中;表內文字用5號字(特殊情況用更小號字)。5、物種要全稱并加學名。如中華蜜蜂(Apis cerana cerana)6、當外文插在中文中間時外文的前和后都要空1格,如本文中“現(xiàn)的Ascosphaera 屬孢囊真菌” ;7、文中段落除本模版規(guī)定的了“空一行”外均不另設置間隔。(空一行)加粗中文摘要和關鍵詞的內容:小四號,
2、宋體摘要:Ascosphaera 屬真菌是影響蜂類幼蟲成活率的主要疾病白堊病的病原物。本研究根據(jù) GenBank 收錄的 Ascosphaera 屬中20個種的核糖體DNA(rDNA)的內部轉錄間隔區(qū)ITS1和ITS2及5.8S(ITS1-5.8S-ITS2)區(qū)段序列資料,分別設計 Ascosphaera 屬的和種的高特異性引物,構建一套以PCR為基礎的 Ascosphaera 屬和種的快速、可靠的鑒定方法,并對本實驗室保存的9個不同來源的菌株進行鑒定。結果表明,Ascosphaera 屬和A. apis 種特異引物可以擴增出穩(wěn)定特異條帶,A. aggragata 種特異引物還需要進一步優(yōu)化。
3、(空一行)加粗關鍵詞之間空2格(半角)關鍵詞:白堊病 球囊菌 特異性引物 PCR鑒定(空二行)英文摘要和關鍵詞的內容:小四號,“Times New Roman”字體“Times New Roman”字體, 小四號,加粗Abstract: Fungi in the genus Ascosphaera are the causative agents of chalkbrood, a major disease affecting bee larval viability. The genus-specific primers for Ascosphaera, and species-specif
4、ic primers for species were designed from the sequences of the internal transcribed spacers, ITS1 and ITS2, and 5.8S region (ITS1-5.8S-ITS2) of ribosomal DNA (rDNA) in GenBank from 20 species of Ascosphaera. We developed a rapid and reliable PCR method for identifying species of Ascosphaera. The res
5、ults showed that Ascosphaera genus-specific primers and A. apis species-specific primers successfully amplified a specific product, A. aggragata species-specific primers need to be optimized.Key words: chalk-brood disease; Ascosphaera; specific primers; PCR identification“Times New Roman”字體, 小四號,加粗關
6、鍵詞之間分號間隔(半角)并加 1個空格各級標題字左起頂格、加粗1 引言 1.1 蜜蜂白堊病的發(fā)生現(xiàn)狀.格式各級標題左起頂格書寫;標題序號后空2格。 白堊?。–halkbrood)又名“石灰子病”、“石灰質病”等,是當前養(yǎng)蜂生產上危害嚴重的一種頑固性真菌傳染病1。蜜蜂白堊病是蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)引起的,該病最早是1913年由Massen在德國發(fā)現(xiàn)的2,其后該病很快蔓延至許多國家1, 3-5。1968年以前主要發(fā)現(xiàn)在歐洲各國,但到1970年以后迅速傳播至美國、加拿大、日本等地4, 6。標注編碼:12用1,2格式3、4、5用3-5格式。1.2 蜜蜂白堊病發(fā)生癥狀蜜蜂白堊拖出
7、巢地面可看見石灰塊狀尸體3。1.5 蜜蜂白堊病的防治蜜蜂白堊病的防治各學者提出不同方法,1.5.1 預防措施從大量觀察的情況表明,凡是巢內飼料不足的蜂群、弱群以及交尾群等,在白堊病發(fā)生流行季節(jié)都容易發(fā)生此病。1.6 球囊菌屬中種的鑒定研究進展標題2、3、4、5、參考文獻前空一行目前自然界中所發(fā)現(xiàn)的Ascosphaera 屬孢囊真菌有22種14-15,都與 Apoidea 總科的社的腐生物16。(空一行)2 材料與方法 2.1 材料2.1.1 菌株(空一行)3 結果與分析3.1 菌絲體基因組DNA的提取對9個采自不同地區(qū)的菌要求。3.2 高特異性引物的設計參照文獻23所列的 Ascosphaer
8、a 屬中20個種的 ITS1-5.8S-ITS2 rDNA 區(qū)段序列,通過比特異性引物,1a-F2/AscoA112、3-F1/AscoA112和1b-F1/AscoA112分別為 A. aggregata、A. apis 和 A. proliperda 的高特異性引物。圖前空一行(空一行)圖后空一行圖大小適中;居中圖注:宋體,5號;居中居中圖2 切葉蜂采集空2格(空一行)表頭:宋體、小四號、加粗,居中表前空一行參照文獻23所列的Ascosphaera屬中20個種的 ITS1-5.8S-ITS2 rDNA 區(qū)段序列,通過比較分析各序列的保守區(qū)和變異區(qū),分別設計Ascosphaera 屬的高特異
9、性引物和部分種的高特異性引物(圖2),共計6條引物序列(表2)。(空一行)表2 Ascosphaera屬及其各種的鑒定標記所用引物引物正向/反向引物序列(5-3)標題居中(單元格),宋體,5號,粗體TW811)F線粗:1.5磅GTT TCC GTA GGT GAA CCT GCAB282)表中標注:用“1)”“2)”格式RATA TGC TTA AGTTCA GCG GGTAscoA111FGCACTCCCACCCTTGTCTA1a-F2F線粗:0.5磅GGA AAA GAC CCT CGA CGA G5-R1RTTT TCA GGT GCG TCC TTC CA注:1) 來自Curran e
10、t al.;2) 來自Curran et al.。表居中;表大小適中;列內容居中對齊宋體,小五號;與表左側邊線起縮進2字(空一行)表后空一行 參照文獻23所列的 Ascosphaera 屬中20個種的ITS1-5.8S-ITS2 rDNA區(qū)段序列,通過比較分析各序列的保守區(qū)和變異區(qū),分別設計 Ascosphaera 屬的高特異性引物和部分種的高特異性引物(圖2),共計6條引物序列(表2)。(注意:遇到位置不夠時通過調整文字或下移數(shù)行,避免一個表格分散在2格頁面上)空一行。當圖、表在頂端時也要空一行(空一行)表3 不同工蜂密度蜂群6:008:00時對蜂巢中心溫度影響的研究蜂 群工蜂密度0.75工
11、蜂密度 1.0工蜂密度 1.535.2972235.1009434.8文、表中與統(tǒng)計相關的字母一律斜體A B a1)C b 注: 1) 小寫字母表示差異達顯著水平;大寫字母表示差異達極顯著水平正文統(tǒng)計表格式(空一行)3.3 PCR擴增對高特異性引物的檢測3.3.1 Ascosphaera 屬高特異性引物的檢測用所設計的 Ascosphaera 屬高特異性引物 AscoA111/AscoA112 對9個菌株DNA樣品進行 PCR 擴增檢測,PCR 產物經(jīng)15(W/V)的瓊脂糖凝膠電泳(圖4)。文字大小適中,頭向左;文字上端與Y軸上端對齊(空一行)圖不帶外框圖4 13 mm 脾間蜂路箱內空間和外界
12、氣溫變化折線圖文字與X軸右端對齊3.3.2 種特異性引物的檢測3.3.2.1 A. apis 種特異性引物的檢測(空一行)4 討論(1)根據(jù) Ascosphaera 屬的 ITS1-5.8S-ITS2 rDNA 序列資料設計的屬高特異性引物,在 Ascosphaera 屬中獲得了理想的結果,說明該標記Anderson et al. 的研究發(fā)現(xiàn),A. apis 與 Eremascus albus Eidam 有著較近的親緣關系23。由于實驗材料所限,在本研究中我們沒能做這方面的對照研究。標題:加粗,小四號,字左頂格(2)本實驗的結果中看出,雜志文獻年份后用“,”(4)本實驗1、 標點符號用“半角
13、”形式;2、 標點符號后空1格。(空一行)參考文獻 1 趙磊, 楊永紅, 馮源. 白堊病研究進展J. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2006, (2): 62-64. 書籍文獻年份后用“.”宋體,五號,首行頂格;序號后空1格;次行縮進。8 邵瑞宜, 王麗華, 趙安法, 等. 蜜蜂白堊病病原觀察及其綜合防治措施J. 福建農業(yè)大學學報, 1997, 26(3): 345-348.9 周順伍. 動物生物化學M. 北京: 中國農業(yè)出版社, 1999. 178-253.30 Reynaldi F J., Lopez A C., Albo G N., Alippi A M. Differentiation of As
14、cosphaera apis isolates by Rep-PCR fingerprinting and determination of chalkbrood incidence in Argentinean honey samples J. J Apicul Res, 2003, 42: 68-76.文獻題目第一個單詞的第一個字母大寫,其他實詞第一個字母均小寫。但注意專用名詞和學名除外。其他特殊參考文獻格式:(學校格式)1、網(wǎng)絡文獻樣式序號責任者.文章標題文獻類型標識.(發(fā)布時間)下載時間文獻網(wǎng)址.(時間格式如:2007-02-08) (網(wǎng)絡文獻是期刊的形式,按期刊文獻格式方法書寫)2、
15、論文集文獻樣式:序號作者.文題.論文集名C.出版地:出版社,出版年.起止頁碼.3、學位論文文獻樣式:序號作者.文題D.授予單位所在地:授予單位,答辯年份:起止頁碼.附錄A (單獨頁,加粗、字左起頂格)A1 (加粗、字左頂格)(首行縮進2字)A1.1 (加粗、字左頂格)(圖A1)(空一行)圖、圖注同正文格式要求圖A1 中華蜜蜂蜂王A2 (加粗、字左頂格)附錄B (單獨頁,加粗、字左起頂格)B1 (加粗、字左頂格)(首行縮進2字)B1.1 (加粗、字左頂格)(表B1)表B1.1 引物正向/反向引物序列(5-3)TW81*FGTT TCC GTA GGT GAA CCT GCAB28*RATA TGC TTA AGTTCA GCG GGTAscoA111FGCACTCCCACCCTTGTCTAAscoA112RGAWCACGACGCCGTCACT1a-F2FGGA AAA GAC CCT CGA CGA G5-R1RTTT TCA GGT GCG TCC TTC CA表、表頭、表注和表線等與正文格式要求同表B1.2 引物正向/反向引物序列(5-3)TW81*FGTT TCC GTA GGT GAA CCT GCAB28*
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