11細(xì)胞及其介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答1

1、1B細(xì)胞及其介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答（細(xì)胞及其介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答（1）張 偉 娟Department of ImmunologyShanghai Medical College, Fudan UniversityTel： 2一、B細(xì)胞的分化發(fā)育二、B細(xì)胞活化的調(diào)控機制B 細(xì)胞的抗原識別系統(tǒng)BCR 復(fù)合物B 細(xì)胞活化共受體復(fù)合物（coreceptor complex）其他輔助分子2. B 細(xì)胞抗原識別后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)3. B 細(xì)胞激活后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控機制4. B細(xì)胞亞群及功能 掌握5. B 細(xì)胞活化異常與免疫疾病主要內(nèi)容主要內(nèi)容掌握掌握3 掌握掌握BCR特點、細(xì)胞表面主要膜分子及其作用特點、細(xì)胞表面主

2、要膜分子及其作用 掌握掌握B細(xì)胞亞群及其生物學(xué)功能細(xì)胞亞群及其生物學(xué)功能 掌握初次體液免疫應(yīng)答和再次體液免疫應(yīng)答的規(guī)律掌握初次體液免疫應(yīng)答和再次體液免疫應(yīng)答的規(guī)律 熟悉熟悉B細(xì)胞分化發(fā)育過程細(xì)胞分化發(fā)育過程要求要求4B LymphocyteF得名于鳥類法氏囊（得名于鳥類法氏囊（Bursa of Fabricius）和哺乳）和哺乳動物骨髓（動物骨髓（Bone Marrow）。）。F人的人的B祖細(xì)胞最早出現(xiàn)在妊娠第祖細(xì)胞最早出現(xiàn)在妊娠第8周的胚肝中。周的胚肝中。F妊娠中期以后，妊娠中期以后，B祖細(xì)胞在骨髓中完成其發(fā)育。祖細(xì)胞在骨髓中完成其發(fā)育。6Martin Raff and Cooper col

3、laborated to identify precursor (pre)-B cells in murine fetal liver and marrow.Early production of intracellular IgM by B-lymphocyte precursors in mouse. Nature. 1976;259:224-226.Immunofluorescent studies of the development of pre-B cells, B lymphocytes and immunoglobulin isotype diversity in humans

4、. Eur J Immunol. 1977;7:804-810.Martin RaffMax Cooper7B-cell development in mice and humans has been extensively studied, and the functional rearrangement of the Ig loci is a sine qua non.This occurs via an error-prone process involving the combinatorial rearrangement of the V, D, and J gene segment

5、s in the H chain locus and the V and J gene segments in the L chain loci.Susumu Tonegawa was awarded the Nobel Prize in Physiology or Medicine in 1987 for this discovery.Susumu Tonegawa（利根川進）Nobel Prize winner in 1987Cell. 1978;15:1-14.組合多樣性鏈接多樣性受體編輯體細(xì)胞高頻突變89The discovery of the recombination activa

6、ting genes 1/2 (RAG-1/2) in the late 1980s by David Baltimore and colleagues provided the mechanistic explanation for the initial steps of DNA strand breakage in both Ig and T-cell receptor rearrangement.Cell. 1989;59:1035-1048.Science. 1990;248:1517-1523.David Baltimore1975 Recipient of Nobel Prize

7、 in Physiology or Medicine for their discoveries concerning the interaction between tumour viruses and the genetic material of the cell BCR and TCRHeavy Chain Gene FamilyGerm line gene organizationIntrons separate exons coding for H chain domainsHeavy chain genes， on chromosome 14; Vn=65, Dn=27PL V1

8、PLVnPL V2D2 D3D1DnCCC3C 2 C C 1C 1C 4 CJ2J3J5J1J4ECH1 CH2 CH3CH4，C 23J6V65-D30-J6-C9Light Chain Gene FamiliesGerm line gene organizationJ 1C 1EJ 2C 2EJ 3C 3EJ 4C 4EPLV1PLV nPLV 2Lambda light chain genes, on chromosome 22; n=30V70100-(J-C)4PLV1PLV nPLV 2J 2 J 3J 5C EJ 1J 4Kappa light chain genes, on

9、chromosome 2; n=40V85-J5-C2、免疫球蛋白基因重排（gene rearrangement）可變區(qū)基因重組的機制重組信號序列重組信號序列(recombination signal sequence, RSS)在在VH和和VL基因基因3端、端、J基因基因5端和端和D基因兩端有高度?；騼啥擞懈叨缺Ｊ氐暮塑账嵝蛄?，包括一個守的核苷酸序列，包括一個7核苷酸組成的七聚體核苷酸組成的七聚體(heptamer)和一個和一個9核苷酸組成的九聚體核苷酸組成的九聚體(nonamer)，兩者間，兩者間隔隔121或或231個核苷酸，稱為個核苷酸，稱為RSS只有間隔只有間隔12個堿基對和間隔個堿

10、基對和間隔23個堿基對的個堿基對的RSS之間發(fā)生重之間發(fā)生重組，而間隔長度相等的組，而間隔長度相等的RSS之間不發(fā)生重組，這就是之間不發(fā)生重組，這就是12/23堿基對規(guī)律堿基對規(guī)律(12/23 base pair rule)，也叫做，也叫做1+2圈規(guī)律圈規(guī)律(1+2 turn rule)u 等位排斥（等位排斥（allelic exclusion）：）：u 是指是指B細(xì)胞中位于一對染色體上的輕鏈或重鏈基細(xì)胞中位于一對染色體上的輕鏈或重鏈基因，其中只有一條染色體上的基因得到表達(dá)，先重排成功因，其中只有一條染色體上的基因得到表達(dá)，先重排成功的重鏈抑制另一條染色體上重鏈基因的重排。的重鏈抑制另一條染色

11、體上重鏈基因的重排。u 這樣對遺傳上是雜合子的個體來說，也同樣保證了這樣對遺傳上是雜合子的個體來說，也同樣保證了一個一個B細(xì)胞只表達(dá)一種輕鏈和一種重鏈，也即只表達(dá)一種特細(xì)胞只表達(dá)一種輕鏈和一種重鏈，也即只表達(dá)一種特異抗原受體。異抗原受體。u 同種型排斥（同種型排斥（isotype exclusion）：）：u 是指兩種輕鏈?zhǔn)侵竷煞N輕鏈(和和鏈鏈)之間的排斥，之間的排斥， 鏈基因表鏈基因表達(dá)成功即抑制達(dá)成功即抑制鏈基因的表達(dá)。鏈基因的表達(dá)。等位排斥和同種異型排斥等位排斥和同種異型排斥組合多樣性（combinatorial diversity）連接多樣性（junctional diversity）

12、受體編輯 （receptor editing）體細(xì)胞高頻突變（somatic hypermutation） 抗體多樣性產(chǎn)生機制（1）胚系細(xì)胞所攜帶的遺傳信息）胚系細(xì)胞所攜帶的遺傳信息包括多副本的包括多副本的V基因、基因、D基因、基因、J基因及輕鏈重鏈基因及輕鏈重鏈等隨機配對所形成的多樣性等隨機配對所形成的多樣性以以IgH為例，按為例，按50個個VH基因、基因、30個個D基因、基因、6個個JH基因、基因、40個個V基因、基因、5個個J基因計算，固基因計算，固有多樣性可達(dá)：有多樣性可達(dá)：503064051.8106（2）接頭處的變化所產(chǎn)生的多樣性）接頭處的變化所產(chǎn)生的多樣性（junctional

13、diversity）這種變化不依賴于抗原，發(fā)生在這種變化不依賴于抗原，發(fā)生在CDR3，包括重組時編，包括重組時編碼端核苷酸的刪除、添加、碼端核苷酸的刪除、添加、P核苷酸和核苷酸和N區(qū)的形成等區(qū)的形成等有些是在原有遺傳信息基礎(chǔ)上的變化，如接頭處不準(zhǔn)有些是在原有遺傳信息基礎(chǔ)上的變化，如接頭處不準(zhǔn)確連接所造成的編碼框架的變化、確連接所造成的編碼框架的變化、D段閱讀框架的變化、段閱讀框架的變化、P核苷酸的形成等核苷酸的形成等有些與基因有些與基因DNA中攜帶的信息無關(guān)，如中攜帶的信息無關(guān)，如N區(qū)的形成區(qū)的形成估計估計CDR3的多樣性可達(dá)的多樣性可達(dá)1014（3）受體編輯 （receptor editin

14、g） 一些完成基因重排并成功表達(dá)BCR（mIgM）的B細(xì)胞識別自身抗原后未被克隆清除，而是發(fā)生RAG基因重新活化，導(dǎo)致輕鏈VJ再次重排，合成新的輕鏈，替代自身反應(yīng)性輕鏈，從而使BCR獲得新的特異性。 若受體編輯不成功，則該細(xì)胞凋亡。（4）體細(xì)胞高頻突變）體細(xì)胞高頻突變（somatic hypermutation）親和力成熟過程中的體細(xì)胞突變僅發(fā)生于重組后的親和力成熟過程中的體細(xì)胞突變僅發(fā)生于重組后的可變區(qū)基因及其可變區(qū)基因及其3端和端和5端端300個左右堿基以內(nèi)，個左右堿基以內(nèi)，而不見于恒定區(qū)，主要是點突變，也可能有插入和而不見于恒定區(qū)，主要是點突變，也可能有插入和缺失，相當(dāng)于缺失，相當(dāng)于“微

15、調(diào)微調(diào)”突變率比細(xì)胞中正?；蚋咄蛔兟时燃?xì)胞中正?；蚋?05倍倍發(fā)生在生發(fā)中心（發(fā)生在生發(fā)中心（germinal center）HV(D)J基因片段的組合VDJ組合多樣性652761100040052003004120重鏈/輕鏈11000(200+120)3.5106不準(zhǔn)確連接多樣性增加100倍核苷酸插入多樣性增加300倍多樣性預(yù)期10101011IGH基因超突變突變頻率是其它基因的百萬倍以上抗體分子的多樣性一、一、B細(xì)胞的分化發(fā)育細(xì)胞的分化發(fā)育23B細(xì)胞在中樞免疫器官中的分化發(fā)育過程中發(fā)生的主要事件：細(xì)胞在中樞免疫器官中的分化發(fā)育過程中發(fā)生的主要事件：1、功能性、功能性B細(xì)胞（抗原）受體（

16、細(xì)胞（抗原）受體（B cell receptor，BCR）的表達(dá)；的表達(dá)；2、自身免疫耐受的形成。、自身免疫耐受的形成。24B細(xì)胞中樞免疫耐受的形成：在骨髓中發(fā)育的未成熟的B細(xì)胞通過克隆清除、受體編輯和失能等機制形成了對自身抗原的中樞免疫耐受。骨髓造血微環(huán)境骨髓造血微環(huán)境骨髓基質(zhì)中的細(xì)胞因子骨髓基質(zhì)中的細(xì)胞因子骨髓基質(zhì)中的粘附分子骨髓基質(zhì)中的粘附分子是是B細(xì)胞發(fā)育的必要條件細(xì)胞發(fā)育的必要條件26B淋巴細(xì)胞的發(fā)育淋巴細(xì)胞的發(fā)育表達(dá)CD79a/CD79b27記憶細(xì)胞記憶細(xì)胞(Ig基因成熟基因成熟)漿細(xì)胞漿細(xì)胞造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞 祖祖/前前B細(xì)胞細(xì)胞 成熟成熟B細(xì)胞細(xì)胞 B母細(xì)胞母細(xì)胞Ig基因處于

17、基因處于種系狀態(tài)種系狀態(tài)Ig重重/輕鏈輕鏈基因重組基因重組膜表面膜表面Ig陽性陽性Ig基因趨基因趨于成熟于成熟分泌分泌Ig骨髓骨髓骨髓骨髓骨髓、粘膜骨髓、粘膜外周淋外周淋巴細(xì)胞巴細(xì)胞生發(fā)中心生發(fā)中心抗原非依賴期 抗原依賴期28B-cell developmentCLP:common lymphoid progenitorSurrogate L chains (SLCs) is a heterodimer consisting of 5 and VpreB.SLCs with the H chain to form the so-called pre-BCR in murine and huma

18、n pre-B cells.體細(xì)胞高頻突變抗體類別轉(zhuǎn)換29一、B細(xì)胞的分化發(fā)育二、B細(xì)胞活化的調(diào)控機制B 細(xì)胞的抗原識別系統(tǒng)BCR 復(fù)合物B 細(xì)胞活化共受體復(fù)合物（coreceptor complex）其他輔助分子2. B 細(xì)胞抗原識別后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)3. B 細(xì)胞激活后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控機制4. B細(xì)胞亞群及功能 掌握5. B 細(xì)胞活化異常與免疫疾病主要內(nèi)容主要內(nèi)容掌握掌握30二、二、B 細(xì)胞的抗原識別系統(tǒng)細(xì)胞的抗原識別系統(tǒng)（B細(xì)胞表面分子）細(xì)胞表面分子）1.BCR2.Ig(CD79a)/Ig(CD79b)3.B細(xì)胞共受體4.協(xié)同刺激受體5.其他表面分子31 CR1ICAM-1LFA-1FcRB

19、 B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞CD45BCRFcRCRMHC-IICD40有絲分裂原受體有絲分裂原受體32Thomas F. TedderTuckerW. LeBienA graduate student (T.F.T.) with Max CooperA postdoctoral fellow (T.W.L.) with John Kersey.Charting the B-cell surface33Blood, 2008, 112:1570-158034Importantly, ritixumab is a chimeric CD20 mAb, which was the first mAb ap

20、proved by the Food and Drug Administration (FDA) for clinical use in cancer therapy (eg, follicular lymphoma).利妥昔單抗利妥昔單抗(Rituximab) 35B細(xì)胞抗原受體（BCR）是嵌入細(xì)胞膜類脂分子中的膜表面免疫球蛋白(mIg)，乃B細(xì)胞的特征性表面標(biāo)志，也是B細(xì)胞特異性識別不同抗原表位的分子基礎(chǔ)。B細(xì)胞抗原受體（BCR）復(fù)合物是由識別和結(jié)合抗原的膜表面免疫球蛋白(mIg)和傳遞抗原刺激信號的Ig(CD79a)/Ig(CD79b)異二聚體非共價結(jié)合組成。通常包括1個mIg分子與 2

21、個Ig/Ig異二聚體。B B細(xì)胞抗原受體復(fù)合物細(xì)胞抗原受體復(fù)合物3637能結(jié)合特異性能結(jié)合特異性Ag，結(jié)合位點是，結(jié)合位點是VH和和VL的高變區(qū)。的高變區(qū)。mIg的胞內(nèi)段短僅的胞內(nèi)段短僅3個氨基酸（個氨基酸（KVK/賴?yán)i賴），不能轉(zhuǎn)導(dǎo)賴?yán)i賴），不能轉(zhuǎn)導(dǎo)抗原刺激信號?？乖碳ば盘枴?其其IgH鏈分為親水或疏水性鏈分為親水或疏水性COOH-末端，有分泌型和膜末端，有分泌型和膜結(jié)合型；成熟結(jié)合型；成熟B細(xì)胞的細(xì)胞的BCR主要是主要是mIgM和和mIgD。mIg特點特點3839Ig(CD79a)/Ig(CD79b)結(jié)構(gòu)特點：結(jié)構(gòu)特點： I型跨膜蛋白型跨膜蛋白兩者以二硫鍵連接為異源二聚體兩者以二硫鍵連接

22、為異源二聚體胞內(nèi)均有胞內(nèi)均有ITAM若表達(dá)缺陷，也不能誘導(dǎo)若表達(dá)缺陷，也不能誘導(dǎo)mIg的表達(dá)的表達(dá)功能：功能：1.轉(zhuǎn)導(dǎo)抗原與轉(zhuǎn)導(dǎo)抗原與BCR結(jié)合所產(chǎn)生的信號結(jié)合所產(chǎn)生的信號; 2.參與參與Ig從胞內(nèi)向胞膜的轉(zhuǎn)運。從胞內(nèi)向胞膜的轉(zhuǎn)運。BCR介導(dǎo)的介導(dǎo)的抗原內(nèi)吞抗原內(nèi)吞抗原加工和抗原加工和提呈（提呈（MHC II類分子提類分子提呈途徑）呈途徑）T細(xì)胞識細(xì)胞識別抗原別抗原TD-AgT細(xì)胞表位細(xì)胞表位B細(xì)胞表位細(xì)胞表位BCR識別抗原識別抗原41B細(xì)胞共受體復(fù)合物由B細(xì)胞表面CD19/CD21/CD81非共價相聯(lián)形成。主要作用是增強BCR與抗原結(jié)合的穩(wěn)定性并與CD79a/CD79b共同傳遞B細(xì)胞活化的第

23、一信號。CD19表達(dá)于除漿細(xì)胞之外B細(xì)胞譜系發(fā)育各個階段和FDC，參與啟動信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、生發(fā)中心生成和抗體親和力成熟等。 CD21主要表達(dá)于成熟B 細(xì)胞和FDC，為C3d受體；也是B細(xì)胞上的EB病毒受體。作用：結(jié)合補體裂解片段、促進B細(xì)胞增殖（可溶性CD23分子作為配體）、FDC通過CD21固定和濃縮抗原、EB病毒通過CD21感染B細(xì)胞CD81和B淋巴細(xì)胞的增殖相關(guān)。B細(xì)胞共受體細(xì)胞共受體4243CD19作為作為B細(xì)胞的標(biāo)志進行分析和細(xì)胞的標(biāo)志進行分析和B細(xì)胞分選細(xì)胞分選通過結(jié)合抗原補體復(fù)合結(jié)構(gòu)中的C3裂解片段C3d、C3dg，共受體復(fù)合物與BCR交聯(lián)成簇，CD19胞質(zhì)區(qū)酪氨酸磷酸化，進一步招募和

24、結(jié)合Src家族如Lyn，以及PI3K等多種激酶，放大抗原刺激BCR信號,增強B細(xì)胞對抗原刺激的敏感性451.CD40：表達(dá)于成熟B細(xì)胞,配體為CD40L表達(dá)于活化的T細(xì)胞， CD40-CD40L相互作用給予B細(xì)胞活化第二信號，對B細(xì)胞分化和抗體產(chǎn)生以及類別轉(zhuǎn)換有重要作用。2. CD80和CD86：靜息B細(xì)胞不表達(dá)或低表達(dá),活化B細(xì)胞表達(dá)增強。相應(yīng)受體是T細(xì)胞表面的CD28分子,二者結(jié)合相互作用可產(chǎn)生協(xié)同剌激信號(T細(xì)胞活化第二信號),使T細(xì)胞激活 。3.其他黏附分子：ICAM-1（CD54）、LFA-1(CD11/CD18)，與相應(yīng)配體結(jié)合后參與細(xì)胞間的接觸，具有協(xié)調(diào)刺激作用。其他輔助分子其他

25、輔助分子其他輔助分子其他輔助分子4. CD45：又名白細(xì)胞共同抗原。CD45磷酸酶通過作用于Src PTK C端調(diào)節(jié)區(qū)505位磷酸化的酪氨酸殘基脫磷酸化，解除Src PTK的抑制狀態(tài)，調(diào)控Src PTK 活性5. 絲裂原的膜結(jié)合分子：美洲商陸(PWM)對T細(xì)胞和B細(xì)胞均有致有絲分裂作用；脂多糖(LPS)可與B細(xì)胞上的LPS受體結(jié)合，刺激B細(xì)胞的活化、增殖和分化，是常用的小鼠B細(xì)胞絲裂原。6. CD20：在B細(xì)胞的增殖分化中起調(diào)節(jié)作用。是B細(xì)胞特異性標(biāo)志，是治療性單抗識別的靶分子。477.CD22：特異性表達(dá)于B細(xì)胞，其胞內(nèi)段含有ITIM模體，是B細(xì)胞的抑制性受體，能負(fù)調(diào)節(jié)CD19/CD21/C

26、D81共受體。8.CD32(FcR) ：FcRB亞型能負(fù)反饋調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化和抗體分泌。其他表面分子其他表面分子489.補體受體（CR）：多數(shù)B細(xì)胞表面表達(dá)CR1和CR2(即CD35和CD21)。10.細(xì)胞因子受體：B細(xì)胞表面表達(dá)IL-1R、IL-2R、IL-4R、IL-5R、IL-6R、IL-7R及IFN-R等多種細(xì)胞因子受體。細(xì)胞因子通過與B細(xì)胞表面相應(yīng)受體結(jié)合而參與或調(diào)節(jié)B細(xì)胞活化、增殖和分化。11. MHC：B細(xì)胞可表達(dá)MHC-類和MHC-類分子。MHC-類分子可與Th細(xì)胞表面CD4結(jié)合，增強B細(xì)胞與Th細(xì)胞間的黏附作用，并參與抗原遞呈和淋巴細(xì)胞激活。50B B細(xì)胞活化的雙信號細(xì)胞活化的

27、雙信號IFN-g , IL-4, IL-5第第2 2信號信號ThCD40 CD40LMHC-II/抗原肽抗原肽 / TCRCD4B第第1 1信號信號活性封閉活性封閉沒有沒有Th細(xì)胞的幫助細(xì)胞的幫助第第1 1信號信號BCD40 CD40LCD40 CD40L51ICAM-1LFA-1B7CD28MHCI類分子TCRCD40gp39ICAM-1LFA-1CD4CD3SlgIgIg細(xì)胞因子活化信號活化信號B細(xì)胞活化抗原加工、提呈(CD40L)B細(xì)胞T細(xì)胞活化信號活化信號Th活化IgaIgbB細(xì)胞通過表面分子與細(xì)胞通過表面分子與Th細(xì)胞的相互作用細(xì)胞的相互作用MHCII類分子B細(xì)胞和T細(xì)胞抗原識別結(jié)構(gòu)

28、的主要成分的比較53一、B細(xì)胞的分化發(fā)育二、B細(xì)胞活化的調(diào)控機制B 細(xì)胞的抗原識別系統(tǒng)BCR 復(fù)合物B 細(xì)胞活化共受體復(fù)合物（coreceptor complex）其他輔助分子2. B 細(xì)胞抗原識別后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)3. B 細(xì)胞激活后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控機制4. B細(xì)胞亞群及功能 掌握5. B 細(xì)胞活化異常與免疫疾病主要內(nèi)容主要內(nèi)容掌握掌握三、三、B 細(xì)胞抗原識別后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞抗原識別后的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)l 抗原結(jié)合導(dǎo)致受體交聯(lián)成簇，啟動抗原結(jié)合導(dǎo)致受體交聯(lián)成簇，啟動B細(xì)胞的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)l 參與參與B細(xì)胞激活后跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞激活后跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的Src PTK家族成員家族成員LYN、FYN、B

29、LK、LCKl B 細(xì)胞激活后的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑細(xì)胞激活后的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 磷脂酰肌醇途徑、磷脂酰肌醇途徑、PI3K 激活激活PKC 途徑以及途徑以及Ras- MAPK 途徑途徑Trends in Immunology 31 (2010) 205211200 to 500 AngstromsTD-AgTI-Ag蛋白質(zhì)抗原蛋白質(zhì)抗原多糖、糖脂、核酸抗原多糖、糖脂、核酸抗原B 細(xì)胞激活后的胞內(nèi)信細(xì)胞激活后的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)號轉(zhuǎn)導(dǎo): 磷脂酰肌醇途磷脂酰肌醇途徑、徑、PI3K 激活激活PKC 途途徑以及徑以及Ras- MAPK 途途徑徑參與參與B細(xì)胞激活后跨膜細(xì)胞激活后跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的Src P

30、TK家家族成員主要包括族成員主要包括LYN、FYN、BLK、LCKl CD22 分子介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控分子介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控l FcRIIb 受體介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控受體介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控l B 10 B 細(xì)胞介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控細(xì)胞介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控四、四、B B 細(xì)胞激活后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控機制細(xì)胞激活后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控機制CD22胞質(zhì)區(qū)ITIM，可結(jié)合帶有SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1；SHP-1能夠作用于鄰近的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物上的pY脫磷酸化，是B細(xì)胞活化中的抑制性受體 BCR BCR FcRII-B FcRII-B ITIM ITIM 阻斷 B 細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 阻斷 B 細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 抗鏈抗體和

31、抗原抗體復(fù)合物通過交聯(lián)BCR和FcRII-B抑制B細(xì)胞增殖抗 BCR (mIgM) 的IgG 抗體 抗原抗體復(fù)合物抗抗BCR獨特型抗體（抗抗體，獨特型抗體（抗抗體，IgG）或抗原抗體復(fù)合物通過交聯(lián)）或抗原抗體復(fù)合物通過交聯(lián)BCR和和FcRII-B分子抑制分子抑制B細(xì)胞增殖；細(xì)胞增殖；產(chǎn)生抗抗體的前提必須是產(chǎn)生抗抗體的前提必須是BCR或相應(yīng)抗體分子大量出現(xiàn)（超過免疫或相應(yīng)抗體分子大量出現(xiàn)（超過免疫系統(tǒng)感知閾值、以特定獨特型為表位的自身抗原，產(chǎn)生相應(yīng)的抗系統(tǒng)感知閾值、以特定獨特型為表位的自身抗原，產(chǎn)生相應(yīng)的抗BCR抗體），這只能是抗體），這只能是B細(xì)胞充分激活的結(jié)果細(xì)胞充分激活的結(jié)果B細(xì)胞表面的細(xì)

32、胞表面的FcgRII-B60調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（regulatory B cell，Breg） 近年來在人和小鼠體內(nèi)均確定存在一群具有免疫抑制功能的Breg，其表面表達(dá)CD19、IgM、CD5，高表達(dá)CD24和CD1d且分泌IL-10。Breg表達(dá)BCR和B細(xì)胞激活因子（BAFF）受體，可通過產(chǎn)生IL-10、IL-35和TGF-，抑制病理性Th細(xì)胞亞群、其他炎性淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等的激活，并可誘導(dǎo)CD4+CD25-T細(xì)胞分化為Foxp3+Treg和Tr1調(diào)節(jié)細(xì)胞。B 10 B 細(xì)胞介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控細(xì)胞介導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控61五、五、B細(xì)胞亞群及功能細(xì)胞亞群及功能1.B-1細(xì)胞2.B-2細(xì)胞3.B-1細(xì)胞與B

33、-2細(xì)胞的異同4.其它B細(xì)胞亞群（自學(xué)）62B細(xì)胞亞群63 根據(jù)B細(xì)胞是否表達(dá)CD5分子，可分為CD5+B1細(xì)胞和CD5-B2細(xì)胞兩個亞群。 大部分B細(xì)胞自胎肝干細(xì)胞發(fā)育分化為表達(dá)CD5的B1細(xì)胞。 B細(xì)胞從骨髓前體細(xì)胞發(fā)育分化為不表達(dá)CD5的B2細(xì)胞。有兩個主要的B細(xì)胞亞群是從B2細(xì)胞前體分化而來，即濾泡B細(xì)胞（Fo-B）和邊緣區(qū) B細(xì)胞（Mz-B），其中Fo-B細(xì)胞是循環(huán)淋巴細(xì)胞，Mz-B細(xì)胞則主要定居于脾臟的邊緣區(qū)，在人的淋巴結(jié)中也能發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞。64分布分布: 分布于胸腔、腹腔和腸壁固有層中分布于胸腔、腹腔和腸壁固有層中表面標(biāo)志表面標(biāo)志: CD5+、mIgM+、抗原識別譜：針對抗原識別譜

34、：針對TI抗原抗原應(yīng)答特點應(yīng)答特點: 不需要不需要Th細(xì)胞輔助，產(chǎn)生細(xì)胞輔助，產(chǎn)生IgM類低親和力類低親和力抗體、不發(fā)生抗體類別轉(zhuǎn)換、無免疫記憶抗體、不發(fā)生抗體類別轉(zhuǎn)換、無免疫記憶B-1細(xì)胞亞群細(xì)胞亞群根據(jù)是否表達(dá)CD5把B細(xì)胞分為B-1和B-2兩群細(xì)胞65 分布分布: : 體內(nèi)出現(xiàn)較晚，定位于淋巴器官體內(nèi)出現(xiàn)較晚，定位于淋巴器官 表面標(biāo)志表面標(biāo)志: CD5-: CD5-、mIgM+mIgM+、 mIgD+ mIgD+ 抗原識別譜：廣，主要識別抗原識別譜：廣，主要識別TDTD抗原抗原 應(yīng)答特點應(yīng)答特點: : 1) 1)直接識別抗原決定基，需要直接識別抗原決定基，需要ThTh的輔助。的輔助。 2

35、) 2)可產(chǎn)生高親和力抗體（可產(chǎn)生高親和力抗體（IgGIgG、IgAIgA、IgE)IgE) 3) 3)有抗體類型轉(zhuǎn)換、免疫記憶和再次應(yīng)答有抗體類型轉(zhuǎn)換、免疫記憶和再次應(yīng)答B(yǎng)-2細(xì)胞亞群細(xì)胞亞群66TI與與TD抗原抗原6768性質(zhì)性質(zhì)B-1細(xì)胞細(xì)胞B-2細(xì)胞細(xì)胞CD5CD23 產(chǎn)生時間產(chǎn)生時間胎兒期胎兒期出生后出生后更新方式更新方式自我更新自我更新骨髓產(chǎn)生骨髓產(chǎn)生自發(fā)性自發(fā)性Ig產(chǎn)生產(chǎn)生高高低低分泌的分泌的Ig類型類型IgM為主為主IgG為主為主體細(xì)胞突變頻率體細(xì)胞突變頻率低低/無無高高T細(xì)胞依賴細(xì)胞依賴親和力成熟親和力成熟免疫記憶免疫記憶 少少/無無 有有B-1細(xì)胞與細(xì)胞與B-2細(xì)胞的異同細(xì)

36、胞的異同69B淋巴細(xì)胞的功能淋巴細(xì)胞的功能 產(chǎn)生抗體產(chǎn)生抗體 提呈抗原提呈抗原 免疫調(diào)節(jié)免疫調(diào)節(jié)70Multifunctional attributes of B cellsBlood, 2008, 112:1570-1580.711. 產(chǎn)生抗體介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答 介導(dǎo)特異性體液免疫應(yīng)答, 中和、調(diào)理、ADCC、參與補體的溶細(xì)胞或溶菌作用、參與I型超敏反應(yīng)。2. 提呈可溶性抗原 B細(xì)胞通過BCR結(jié)合可溶性抗原，經(jīng)加工后以抗原肽-MHC分子復(fù)合物形式提呈給T細(xì)胞。3. 免疫調(diào)節(jié) B細(xì)胞通過與其他細(xì)胞接觸及產(chǎn)生細(xì)胞因子參與免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)及造血過程。B細(xì)胞的主要生物學(xué)功能細(xì)胞的主要生物學(xué)功能（一）

37、中和作用（一）中和作用中和毒素（細(xì)菌外毒素、昆蟲和蛇毒素）中和毒素（細(xì)菌外毒素、昆蟲和蛇毒素） 中和抗體中和抗體中和病原體中和病原體 高親和力高親和力IgG IgG 與病毒、細(xì)菌表面蛋白結(jié)合，阻止入侵細(xì)胞。與病毒、細(xì)菌表面蛋白結(jié)合，阻止入侵細(xì)胞。（二）免疫調(diào)理作用（二）免疫調(diào)理作用IgGIgG、IgA IgA 的的 Fab Fab 段與病原體結(jié)合，其段與病原體結(jié)合，其FcFc段與吞噬細(xì)段與吞噬細(xì) 胞表面胞表面FcR FcR 結(jié)合，從而促進吞噬細(xì)胞吞噬病原體。結(jié)合，從而促進吞噬細(xì)胞吞噬病原體。 抗體的調(diào)理作用抗體的調(diào)理作用 （三）激活補體（三）激活補體IgG 的Fab 段與抗原結(jié)合，F(xiàn)c 段與N

38、K 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的 FcRIII 結(jié)合，介導(dǎo)效應(yīng)細(xì)胞殺傷攜帶特異性抗原的靶細(xì)胞，此為ADCC作用。（四）抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（四）抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCCADCC） IgG 和IgM 與抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，通過經(jīng)典途徑，激活補體系統(tǒng)，發(fā)揮殺菌、溶菌作用。 C3b結(jié)合病原體，與吞噬細(xì)胞表面C3bR結(jié)合，促進吞噬?？贵w依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCCADCC） （五）分泌型（五）分泌型IgAIgA的局部抗感染作用的局部抗感染作用 型超敏反應(yīng)由IgE介導(dǎo)，、型超敏反應(yīng)由IgG、IgM介導(dǎo)。某些自身免疫病損傷與、型超敏反應(yīng)

39、有關(guān)。 （六）抗體的病理損傷（六）抗體的病理損傷抗黏附素的分泌型IgA抗體，位于呼吸道、消化道和生殖道黏膜表面，可阻止細(xì)菌、病毒和其他病原體入侵。l 免疫缺陷免疫缺陷l 超敏反應(yīng)超敏反應(yīng)l 自身免疫性疾病自身免疫性疾病l 促腫瘤生長促腫瘤生長六、六、B B 細(xì)胞活化異常與免疫疾病細(xì)胞活化異常與免疫疾病Abnormalities in B-cell development: immunodeficienciesB-cell abnormalities: leukemia and lymphomasAbnormalities in B-cell regulation: autoimmunity（一

40、）（一） Abnormalities in B-cell developmentThe importance of genes encoding the pre-BCR and downstream signaling molecules has been demonstrated in gene-targeted mice and patients with primary immunodeficiencies.Perhaps the best studied is the Bruton tyrosine kinase (BTK) gene mutated in X-linked agamm

41、aglobulinemia (XLA).Btk plays a central role in signaling downstream of pre-BCR and BCR activation, primarily by promoting calcium flux.All XLApatients have a block at the pro-B to large pre-B-cell transition in marrow, and a substantial reduction in the percentage of normal peripheral blood B cells

42、.Abnormalities in B-cell development and XLAHuman B-cell malignancies（二）（二） B-cell abnormalitiesMolecular crosstalk between malignant B cells, exemplified for CLL B cells, and the microenvironment.A series of checkpoints normally controls B-cell selection, both centrally in the marrow and in the per

43、ipheral lymphoid tissues; in the latter a second screening process for reactivity with peripheral self-antigens results in apoptosis, receptor editing, or anergy.However, disruption of the delicate balance between activating and inhibitory signals that regulate normal B-cell activation and longevity

44、 can predispose to pathogenic autoantibody production and autoimmunity.（三）（三）Abnormalities in B-cell regulation1. B cells in HIV infection and diseaseAlthough a close correlation between autoantibody production and systemic autoimmune disease is universally acknowledged, the precise contributions of

45、 autoantibodies and their autoantigen targets to disease pathogenesis remain to be elucidated in many human syndromes.B cells may contribute to autoimmune pathogenesis by presentation of autoantigen to T cells, or through production of proinflammatory cytokines2. Role of B cells in autoimmune diseas

46、esB cells regulate immune responses and immune system developmentB cells, autoantibodies, and T cells interact to drive many autoimmune diseasesAutoantibodies contribute to SLE pathogenesisThe relative contributions of B cells to autoimmunity vary depending on the disease (A) and the stage of disease progression (B).一、初次應(yīng)答（一、初次應(yīng)答（primary immune responseprimary immune response）：病原體初次侵）：病原體初次侵入機體所引發(fā)的應(yīng)答。入機體所引發(fā)的應(yīng)答。二、二次應(yīng)答（回憶應(yīng)答）二、二次應(yīng)答（回憶應(yīng)答） （secondary immune responsesecondary immune response）：）：初次應(yīng)答的晚期，再次遭遇相同抗原刺激，記憶性淋巴細(xì)胞可初次應(yīng)答的晚期，再次遭遇相同抗原