練案36微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用

1、.練案36選修一生物技術(shù)理論第二講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用一、選擇題12019·海淀質(zhì)檢通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中別離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中參加青霉素可以抑制細菌和放線菌的生長；在培養(yǎng)基中參加10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別別離出 A大腸桿菌霉菌放線菌固氮細菌A BC D只有解析缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，而固氮細菌能生長；在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細菌和放線菌等原核生物細胞壁的合成，而霉菌屬于真核生物，故能生長；在培養(yǎng)基中參加10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長，對放線菌的生長無

2、影響。22019·廣州質(zhì)檢利用農(nóng)作物秸稈為原料可消費乙醇，消費過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，基主要技術(shù)流程如以下圖所示，以下相關(guān)說法錯誤的選項是B秸稈碎屑反響罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵真空分餾A可用剛果紅染色法挑選過程所需的纖維素分解菌B過程參加的是葡萄糖苷酶C酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵D酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進展高壓蒸汽滅菌解析挑選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法；纖維素酶為復(fù)合酶，至少包含三種組分，C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶；酒精發(fā)酵需在無氧條件下進展；酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進展高壓蒸汽滅菌。3以下有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法，正確的選項是CA天然培養(yǎng)基是指直接取自自然

3、界不需加工的培養(yǎng)基B接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進展嚴格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段D別離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源解析天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，但也需要加工；實驗操作者的雙手應(yīng)消毒，不能滅菌；別離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，不是碳源，需參加不含氮元素的有機物如葡萄糖作為碳源。4平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，以下描繪正確的選項是DA都要將菌液進展一系列的梯度稀釋B平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基外表C稀釋涂布平板法是將不同稀釋度

4、的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進展培養(yǎng)D都會在培養(yǎng)基外表形成單個的菌落解析平板劃線法不需要進展梯度稀釋；稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的外表；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基外表形成單個的菌落。5做“微生物的別離與培養(yǎng)實驗時，以下表達正確的選項是DA高壓滅菌加熱完畢時，立即開啟鍋蓋，拿出培養(yǎng)基和工具待用B倒平板時，應(yīng)將翻開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標記在皿底上解析高壓滅菌加熱完畢，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能翻開放氣閥使壓力表指針回到零，A錯誤；倒平板過程中不能翻開培

5、養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯誤；用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標記在皿底上，D正確。6消毒和滅菌是兩個不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生物使其永遠喪失生長繁殖的才能。消毒僅指殺死一部分對人體有害的病原菌而對被消毒的物體根本無害。以下哪些事物適用于消毒處理A皮膚 飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀ABCD以上全部解析消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營養(yǎng)細胞，適用于那些不耐高溫的液體，如牛奶、果汁、醬油，這樣可以使其中的營養(yǎng)成分不被破壞。 另外對要求不是很嚴格的皮膚、飲用水也用消毒的方法處理；而對于嚴格要求的注射器、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、

6、手術(shù)刀等必須進展滅菌處理。 所以，立該用消毒的方法處理。7以下是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)實驗操作的表達，其中錯誤的選項是DA用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上C將實驗組和對照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進展計數(shù)解析首先要進展培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；然后將土壤稀釋液涂布于各組平板上，B正確；將實驗組和對照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時，C正確；確定對照組無菌后，選擇菌落

7、數(shù)在30300的進展記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)，D錯誤。8微生物培養(yǎng)過程中，要非常重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進展無菌操作，防止雜菌污染，請分析以下操作，錯誤的選項是D煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢接種操作要在酒精燈火焰附近進展無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進展消毒家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進展滅菌培養(yǎng)基要進展高壓蒸汽滅菌參加培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌ABCD解析100煮沸56 min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢，正確；酒精燈火焰附近存在一個無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰附近進展，正確；無菌繁殖脫毒苗，植物的外植體要進

8、展消毒，正確；葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮外表的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時葡萄不進展滅菌，以免殺死酵母菌，錯誤；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，正確；指示劑和染料混有微生物，故參加培養(yǎng)基前需滅菌，錯誤。所以，錯誤。二、填空題92019·河南鄭州二模某同學(xué)要別離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g1根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同

9、學(xué)能否別離出土壤中分解尿素的細菌？_不能_填“能或“不能，原因是_培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素_。2培養(yǎng)基用_高壓蒸汽滅菌_方法滅菌，培養(yǎng)皿用_干熱滅菌_方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到_50_填“20、“30、“40或“50左右時，在_酒精燈火焰_附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止_培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基_，以免造成污染。3要統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用_稀釋涂布平板_法接種，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的_菌落數(shù)目_就能大約推測出樣品中活菌數(shù)。4培養(yǎng)分解尿素的細菌時，在接

10、種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生_。5某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL_2.34×109_。解析1據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能別離尿素分解菌，挑選尿素分解菌，應(yīng)以尿素為唯一氮源。2微生物培養(yǎng)中的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，玻璃器皿可以使用干熱滅菌。倒平板時需要培養(yǎng)基冷卻至50 左右時在酒精燈火焰旁進展，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上

11、的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。3固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法適用于微生物的統(tǒng)計計數(shù)，根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目或平均菌落數(shù)可以推測樣品中的活菌數(shù)。4檢測培養(yǎng)基是否被污染，需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，假如有菌落說明被污染，否那么沒有被污染。5根據(jù)公式得每克樣品中菌落數(shù)×M×1062.34×109。10如下圖為別離分解纖維素的微生物的實驗流程。答復(fù)以下相關(guān)問題：梯度稀釋 1圖中采集土樣時，一般選擇_纖維素_豐富的環(huán)境。圖中過程所用的培養(yǎng)基以纖維素為唯一

12、_碳源_，選擇培養(yǎng)的目的是_使纖維素分解菌得到增殖_。2圖中過程采用的接種方法為_稀釋涂布平板法_填“平板劃線法或“稀釋涂布平板法，所用的培養(yǎng)基中的染料是_剛果紅_，該染料能與纖維素形成_紅色_復(fù)合物。圖中過程挑選菌落的標準是_菌落周圍有透明圈_。3常采用_高壓蒸汽滅菌_法對實驗中所用的培養(yǎng)基進展滅菌。解析1纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中，選擇培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源。選擇培養(yǎng)的目的是使那些可以適應(yīng)選擇培養(yǎng)基中的營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖。2將樣品用稀釋涂布平板法接種到鑒別培養(yǎng)基上。剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，挑選菌落時應(yīng)選那些周圍有透明圈的菌落。3對培養(yǎng)基常

13、采用的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。112019·山東濟寧檢測高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)消費中有很大的實用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中挑選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其挑選過程如以下圖所示：1進展過程的目的是_稀釋_，過程所使用的接種方法是_稀釋涂布平板_法。2從用處上來說，號培養(yǎng)基屬于_選擇_培養(yǎng)基，配制時僅以_淀粉_作為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)參加_瓊脂_作為凝固劑。3、號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_先調(diào)節(jié)pH，后滅菌_。一般對配制的培養(yǎng)基采用_高壓蒸汽滅菌_法滅菌。4培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)從號培養(yǎng)基上挑出_透明圈大_的菌落，接種到號

14、培養(yǎng)基上。解析1分析題圖可知，過程是梯度稀釋，目的是對樣品進展稀釋；過程是用稀釋涂布平板法進展接種。2此題實驗的目的是挑選高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，從用處上來說，號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源；從物理狀態(tài)上來說，號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時應(yīng)參加瓊脂作為凝固劑。3培養(yǎng)基配制和滅菌時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，然后再進展滅菌，假如先滅菌再凋節(jié)pH，在調(diào)節(jié)pH時會污染培養(yǎng)基；一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。4能分解淀粉的嗜熱菌在號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，透明圈越大淀粉酶的活性越強，所以要從號培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落，接種到號培養(yǎng)基

15、上。12牛奶是微生物培養(yǎng)的良好培養(yǎng)基，牛奶在飲前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物，為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如下圖操作。用無菌吸管從錐形瓶中汲取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次。請答復(fù)以下有關(guān)問題：1巴氏消毒的方法是_7075_煮30分鐘80_煮15分鐘_，使用這種方法對生鮮牛奶進展消毒的好處是_牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞_。2取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進展涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的_B_。3圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基外表形成菌落。假設(shè)用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個、33個