TQD質(zhì)譜操作規(guī)程

1、國家城市供水水質(zhì)監(jiān)測網(wǎng)濱海監(jiān)測站儀器操作維護規(guī)程文件編號 BS/ZY 506第B版 第0次修訂標題：Waters TQD液質(zhì)聯(lián)儀 共5頁 第1頁頒布日期 2008年7月7日1 使用條件1.1 環(huán)境溫度：20-25恒溫。1.2 濕度：50-70%。1.3 電源電壓為：220V配置穩(wěn)壓電源防止意外停電。2 操作步驟2.1開機 確定MS及其它儀器電源電纜已連接.打開PC電源-打開2777控制電源-打開CM電源-打開BSM電源-打QSM電源-打開Detector電源-打開MS電源-等待5min-打開Masslynx, pumping,等1晚上，開氮氣、開高壓、準備液相色譜2.2 前期準備要求2.2.1

2、用0.22um的膜過濾緩沖液，所有的緩沖液和超純水都要新配制，2.2.2超純水和緩沖液使用不得超過二天。2.2.3緩沖鹽一定要是可揮發(fā)的，而且濃度不要大于10mM。2.2.4有機相要使用原裝進口的色譜純。2.2.5 測試樣品溶于水，并用0.22um的膜過濾。 2.2.6推薦溶劑：QSM online SPE用溶劑如下,體積為4LA: 2%NH4OH in WaterB: 2%Formic acid in WaterC: MeOHD: MeOH:acetone:hexane=1:1:1Seal wash: 10%MeOH in WaterBSM UPLC分析梯度用溶劑,體積為1LA1: 0.5%

3、formic acid in water B1: 0.5%formic acid in ACN/MeOH(9/1)A2: 0.5%NH4OH in waterB2: 0.5%NH4OH in ACN/MeOH(9/1)Seal wash: 10%MeOH in Water 2777自動進樣器洗針溶液 Wash1:10%MeOH in Water Wash2: MeOH 注 :以上溶劑可根據(jù)實際應(yīng)用進行更改.2.3 UPLC初始化2.3.1濕灌注BSM泵在質(zhì)譜控制臺上點擊左邊Binary Solvent Manager ,選擇CONTROL>Prime A/B solvent ，選擇A1/

4、B1或A2/B2 輸入時間3min,按start。 2.3.2濕灌注QSM泵 在質(zhì)譜控制臺上點擊左邊Quaternary Solvent Manager ,選擇CONTROL>Prime solvents， 選擇選擇A,B,C,D,時間為時間為3min，按，按start 。2.3.3濕灌注自動進樣器用2777操作小鍵盤執(zhí)行，選擇 F1 Menu （菜單）> F2 Clean Syr （清潔注射器）。選擇 Wash1 或 Wash2，然后按 Enter。選擇注射器的灌注輸送次數(shù)（建議5次以上）按Enter。2.4建立新的項目2.4.1從Masslynx主窗口選擇File>Pro

5、ject Wizard> yes >輸入ProjectName,以及項目所在的目錄(建議在C盤下) Next>選擇使用一個已經(jīng)存在的項目作為模板來創(chuàng)建新項目 ，點擊 “browse”，選擇Online SPE System Installation T>點擊 “Finish” 。2.5準備質(zhì)譜2.5.1點擊MS Tune，打開氮氣，待分析器儀表和碰撞器儀表顯示1.3e-5，打開高壓（紅色表示高壓已關(guān)，綠色表示高壓已開）。2.5.2點擊 ES+ Source. 輸入以下各參數(shù) : Capi ary (kV): 3 Cone (V): 30 Source Te

6、mp (°C): 140 Desolvation Temp (°C): 380 Desolvation (L/hr): 800 Cone (L/Hr): 50 以下參數(shù)最好直接使用以下參數(shù)最好直接使用inteinte istart istart 自動校正儀器質(zhì)量數(shù)時自動生的參數(shù)自動校正儀器質(zhì)量數(shù)時自動生的參數(shù) LM Resolution 1: 15 HM Resolution 1: 15 Ion Energy 1: 0.5 Entrance: 50 Co ision: 2 Exit: 50 LM Resolution 2: 15 HM Resolution 2: 15 Io

7、n Energy 2: 0.5點擊File>Save As,輸入文件名,把此調(diào)諧文件保存。2.6 ESI調(diào)諧2.6.1把調(diào)諧液放入B號位(注 :濃度在0.2-0.5ppm之間，根據(jù)實際的靈敏度調(diào)整樣品濃度)2.6.2點擊Tune界面下的Fluidics，選擇flowe State（直接進樣、混合進樣、液相進樣、廢液）。調(diào)諧ESI參數(shù)。2.6.3調(diào)出目標化合物的最佳調(diào)出目標化合物的最佳MRM質(zhì)譜參數(shù)點擊Mass Console質(zhì)譜控制臺>Intellstart>選擇選擇Sample Tune and Develop Method>點擊開始，輸入化合物的名稱、輸入化合物的分

8、子式或分子量、調(diào)用現(xiàn)有的調(diào)諧方法（選擇想調(diào)用的調(diào)諧方法）、選擇自動調(diào)諧MRM方法、每個化合物調(diào)諧幾個子離子（一般選2 ）、 選擇標樣所放的位置、選擇進樣方式（一般選combined ）>點擊,質(zhì)譜開始自動調(diào)諧，自動生成的儀器MRM的方法保存在當前project 內(nèi)。2.7建立質(zhì)譜的MRM方法點擊新建質(zhì)譜方法>點擊> 按調(diào)諧結(jié)果輸入下列參數(shù)：離子模式、化合物名稱化合物名稱 、子離子質(zhì)量數(shù)子離子質(zhì)量數(shù)、錐孔電壓錐孔電壓 、Auto Dwell、母離子質(zhì)量數(shù)母離子質(zhì)量數(shù) 、離子駐留時間、碰撞能、MRM的運行時間，通用性O(shè)A-SPE方法為11min>File>Save a

9、s保存質(zhì)譜方法。2.8建立液相方法點擊inlet method，編輯BSM梯度表，點擊Quaternary Solvent Manager，編輯on line SPE溶劑處理程序（如從右邊進樣口直接進樣做LC-MS分析，QSM梯度表只留第一行，流速設(shè)為0），點擊Autosampler出現(xiàn)2777自動進樣器方法編輯窗口(Injection=3代表，共取三次樣進樣分析。如進樣體積15m ，此處injection=3,同時進樣列表inject volume=5000mL)> File>Save as保存液相方法。2.9 建立樣品序列表,運行采集數(shù)據(jù)。File>點擊新建序列表>

10、 輸入文件名,注釋,質(zhì)譜方法,液相方法,瓶號（Bottle為1:1到1:18,標配VT18-20盤，可裝18個20m 進樣小瓶)，Inject volume不可大于5000,進樣體積 ，點擊運行>>保存樣品序列>OK。2.10 處理數(shù)據(jù)在masslynx主畫面上點擊short cut> Target Lynx2.10.1在樣品表中輸入樣品類型和濃度 Sample Type Concentration A (B, C, D.)2.10.2設(shè)正確的積分參數(shù)創(chuàng)建定量方法 首先點黑想看的數(shù)據(jù),再點擊Chromatogram打開譜圖>點擊調(diào)用離子通道>點擊> 選

11、取左邊的Target Lynx>選取Edit Method>點擊新建一個處理方法>添加添加化合物>輸入化合無名稱。所有的參數(shù)化合物參數(shù) (不需要填寫，打開色譜圖，右鍵拖拉被檢測化合物的色譜峰)校正曲線參數(shù)(line fitting)積分參數(shù) (e.g. smoothing, peak detect) 2.10.3 處理樣品方法建立好,就可以處理樣品>在樣品表中選取所要處理的樣品進行處理>點擊 TargetLynx 然后選擇 Process Samples>點擊OK后出現(xiàn)TargetLynx瀏覽器檢查結(jié)果。Slide Show按樣品查看按化合物查看2.1

12、1打印報告2.11.1編輯報告:File>Report Format報告模版>選擇需要的模版。2.11.2打印預(yù)覽:File>Print Preview。2.11.3保存報告:File>Save As。2.12 關(guān)機清洗色譜柱、儀器系統(tǒng)，停流速，關(guān)高壓，關(guān)氮氣，venting瀉真空, 退出軟件，關(guān)電腦，關(guān)儀器, MS斷開電源電纜. 3 注意事項3.1 氣體3.1.1液氮：使用液氮罐作為氣源，MS使用前打開增壓閥使用前打開增壓閥（綠色）和出口閥 ，減壓閥表壓力為0.7MPa。不使用MS時，關(guān)閉增壓閥，長期不用要關(guān)閉出氣閥，液位指示表讀數(shù)低時及時補充液氮。 3.1.2氬氣：

13、氬氣減壓閥壓力為0.05MPa。3.2 開高壓之前一定要先開氮氣，關(guān)氮氣之前一定要先關(guān)高壓。3.3定期清洗樣品錐孔定期清洗樣品錐孔：關(guān)閉隔斷閥，取下樣品錐孔，先用甲醇：水：甲酸 （45 ：45：10）的溶液超聲清洗20分鐘，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘，待晾干后再安裝到儀器上。當靈敏度下降時，需要清洗Ion Block、二級錐孔和RF lens 。3.4定期（每星期）檢查機械泵的油的狀態(tài)，如果發(fā)現(xiàn)渾濁、缺油等狀況，或者已經(jīng)累積運行超過3000小時，要及時更換機械泵油。 4 運行中的檢查4.1 在設(shè)備的兩次檢定之間，至少進行一次期間核查；當設(shè)備受到外力的沖擊（或震動）、移動或發(fā)生不正常操作時，應(yīng)及時進行期間核查，檢查結(jié)果在期間核查記錄中記錄。根據(jù)期間核查結(jié)果決定儀器是否繼續(xù)使用。4.2 儀器運行中適時監(jiān)測。在檢測試樣，每10個試樣帶1個標點，標點的相對誤差不超過±30%認為檢測數(shù)據(jù)有效，否則重新繪制標準曲線。標點的結(jié)果和試樣編號在大型儀器運行記錄中記錄。4.3 及時填寫齊全當日大型儀器運行記錄。5 維護與保養(yǎng)5.1 溶劑和流動相的要求溶劑和流動相的要求 所有的流動相都要使用0.22um的濾膜過濾，水相要用前新配，并不得超