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文檔簡介
1、免疫球蛋白 IgM 測定1 檢驗目的指導本室工作人員規(guī)范操作本檢測項目,確保檢測結(jié)果的準確。2 原理免疫透射比濁法抗免疫球蛋白 M 抗體和樣本中的抗原形成抗原抗體復合物,出現(xiàn)凝集,進行透射比濁檢測。通過加入PEG可促使反應迅速達到終點,可增加靈敏度,降低樣本中抗原過剩導致 假陰性的風險。3 標本要求3.1 使用新鮮血清 , 不使用血漿 .3.2 在采集血液后 2h 分離血清 .3.3 8h內(nèi)不能及時測定血清可存放于2-8 °C冰箱保存,3天后測定的血清置一15°C 200C冰凍保存,但冰凍血清只能復 融一次 .3.4 嚴重溶血或脂血的標本不能作測定4試劑4.1試劑:上海羅氏
2、診斷產(chǎn)品有限公司IgM試劑盒,國械注進 20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 試劑組成R1:TRIS 緩沖液:20 mmol/l ,pH 8.0 ;氯化鈉:200 mmol/L ;PEG 3.6%;防腐劑和穩(wěn)定劑。R2:抗人免疫球蛋白 M抗體(羊):取決于滴度;TRIS緩沖液:20 mmol/l ;氯化鈉:150 mmol/L ;防腐劑試劑準備:試劑為即用式。4.1.3 試劑穩(wěn)定性與貯存:2-8 C下保存期限:見試劑標簽 上的有效期。機上穩(wěn)定期:90天。變質(zhì)指示:當試劑有濁度時,表明有細菌污染則試劑 不能使用。4.2校準品:使用羅氏多項生化校準品提供的IgM校準
3、品對自動分析儀進行校準4.3質(zhì)控品:使用正常值、病理值復合控制品5 儀器AU2700 生化分析儀,羅氏 P800 生化分析儀 , 西門子ADVIA-2400 生化分析儀,東芝 TBA-120 生化分析儀6 操作步驟6.1 樣品的準備: 將標好號的樣品離心后放到儀器規(guī)定的位 置。6.2 試劑的檢測: 儀器開機后,檢查各種試劑的位置,體積 等確認無誤后方可進行測定。6.3 項目基本參數(shù): 參見生化檢驗 AU2700 生化分析儀,羅 氏 P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分析儀,東芝 TBA-120 生化分析儀項目測定參數(shù)。6.4儀器操作步驟:參見生化檢驗 AU2700生化
4、分析儀,羅氏P800 生化分析儀 , 西門子 ADVIA-2400 生化分析儀,東芝 TBA-120 生化分析儀操作規(guī)程。7 質(zhì)量控制未知標本進行分析,以 2S為質(zhì)控警告限,3S為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控。8計算方法以IgM復合校準品校準儀器后,在病人結(jié)果可報告范圍 內(nèi),儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果,以g/l報告。9參考值成人0.4-2.3 g/L(40-230 mg/dL;0.4-2.4 umol/L)兒童及青少年0-1歲0.0 0-1.45g/L(0-145 mg/dL; 0.00-1.49 umol/L)1-3歲umol/L)g/L(19-146mg/dL ;4-6歲umol/L)
5、g/L(24-210mg/dL ;7-9歲0.31 -2.08umol/L)g/L(31 -208mg/dL ;10-11 歲0.31 -1.79g/L(31 -179mg/dL;0.32-1.84umol/L)12-13 歲umol/L)g/L(35-239mg/dL ;14-15 歲umol/L)g/L(15-188mg/dL ;16-19 歲umol/L)g/L(23-259mg/dL ;我室的參考范圍 035-2.6 g/l10臨床意義:正常的IgM由10個重卩鏈和10個k或入輕鏈組成,IgM 分子中的K或入輕鏈總是相等的。還有1個J鏈將所有的卩鏈連接在一起,簡言之,IgM與IgG相比
6、,是五聚體的結(jié)構(gòu)。 IgM的相對分子量為900000,在免疫球蛋白中最大,但其只 占血漿免疫球蛋白的 6%。在感染后,IgM是最早出現(xiàn)的特異性抗體,能激活補體系 統(tǒng)協(xié)助殺滅細菌。但是和IgG相比,在感染控制后IgM水平就會較快地下降。臨床上比較 IgG 及 IgM 的滴度來鑒別急性 與慢性感染。如以 IgM 為主,感染是急性的;以 IgG 為主, 感染為慢性的(如:風疹、病毒性肝炎) 。多克隆 IgM 水平升高見于病毒、細菌、和寄生蟲感染, 肝病,類風濕性關(guān)節(jié)炎,硬皮病,膽囊纖維化,和海洛因吸 毒等。單克隆 IgM 水平升高見于 Waldenstrom 巨球蛋白血癥。 IgM 流失增加見于腸道病和燒傷的蛋白流失。 IgM 的合成減 低見于獲得性及先天性免疫缺陷綜合征。11 操作性能11
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