誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗的研究進(jìn)展.docx

1、【綜述】中國(guó)圖書分類號(hào)R512.91文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1004.5503(2008)09082003誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗的研究進(jìn)展李進(jìn)郭軍【摘要】隨著HIV特異性T淋巴細(xì)胞在控制體內(nèi)HIV復(fù)制方面的作用被認(rèn)可,HIV疫苗研究的重點(diǎn)越來(lái)越多地集中在誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HW疫苗上，這類疫苗可能通過(guò)誘導(dǎo)或增強(qiáng)體內(nèi)針對(duì)H1V的特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)，有效控制HIV在體內(nèi)的復(fù)制。本文對(duì)近年來(lái)誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗在健康和感染機(jī)體中應(yīng)用的研究進(jìn)展作一綜述。【關(guān)鍵詞】艾滋病;人類免疫缺陷病毒;特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng);HIV疫苗艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征(Aquiredim

2、munodeficiencysyndrom,AIDS)對(duì)人類的生命健康構(gòu)成了極大威脅，據(jù)權(quán)威機(jī)構(gòu)的最新估計(jì)，目前全球約有3320萬(wàn)人感染艾滋病毒，每天新增感染者約6800人,死亡約5700A，1o自20世紀(jì)80年代初發(fā)現(xiàn)AIDS并確定其病原為人類免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiencyvirus,HIV)以來(lái)，人們研制H1V疫苗的努力就從未停止過(guò),但由于HIV基因的高度變異性及病毒結(jié)構(gòu)上的特殊性，常規(guī)的以誘導(dǎo)中和抗體為機(jī)理的預(yù)防性疫苗在研制中受阻2】。2003年，重組gP120預(yù)防性HIV疫苗在經(jīng)歷了數(shù)年數(shù)千人參與的DI期臨床觀察后宣告失敗口方,更使人們將目光轉(zhuǎn)向了誘導(dǎo)特異性T

3、細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗的研制。HIV感染初期，感染者體內(nèi)病毒載量的下降總伴隨著特異性CD8細(xì)胞數(shù)量高峰的出現(xiàn)，用抗CD8+細(xì)胞的單克隆抗體清除CD驢細(xì)胞，導(dǎo)致猴體內(nèi)猴免疫缺陷病毒(Simianimmunodeficiencyvirus,SIV)復(fù)制失控，以及SIVgag基因的T細(xì)胞優(yōu)勢(shì)表位上單-氨基酸突變,使感染猴體內(nèi)本來(lái)已經(jīng)得到控制的病毒載量再度升高這些現(xiàn)象從不同側(cè)面證實(shí)了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)是體內(nèi)控制HIV復(fù)制的關(guān)鍵。利用疫苗誘導(dǎo)或增強(qiáng)體內(nèi)針對(duì)HIV的特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)，以此控制體內(nèi)HIV的復(fù)制，具有重大研究?jī)r(jià)值。隨著體內(nèi)誘導(dǎo)HIV特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的技術(shù)手段日趨成熟及猴SIV感染模

4、型的建立，以誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)為機(jī)理的HIV疫苗的研究近幾年進(jìn)入了非?；钴S的階段，迄今已有30多個(gè)誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗進(jìn)入臨床觀察,包括多肽疫苗、滅活病毒疫苗、DNA疫苗、活病毒載體疫苗及其聯(lián)合應(yīng)用等。本文就該類疫苗在健康和感染機(jī)體中的應(yīng)用作一綜述。作者單位:深圳市源興生物醫(yī)藥科技有限公司(深圳518057).通訊作者:李進(jìn),E-mail：lijin1.誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗在健康機(jī)體中的應(yīng)用誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗用于健康個(gè)體,在其體內(nèi)誘導(dǎo)出針對(duì)病毒的特異性T細(xì)胞,雖然不能完全阻止感染的發(fā)生，但有可能增加感染建立的難度,降低感染的發(fā)生率;另外，

5、一旦感染發(fā)生，疫苗誘導(dǎo)的特異性CD8,細(xì)胞能在感染的初始階段將體內(nèi)的HIV載量控制在一個(gè)較低水平，使CD4+記憶細(xì)胞免受大量破壞,從而延緩病情進(jìn)展;再者,感染初期對(duì)病毒進(jìn)行控制,可能使感染者體內(nèi)慢性感染期的病毒載量保持在較低水平，這意味著較低的傳染性。Ellenberger等10報(bào)道，通過(guò)直腸內(nèi)多次少量的方式,使經(jīng)過(guò)HIV-1DNA疫苗初免、MVA疫苗加強(qiáng)免疫的試驗(yàn)猴及空白對(duì)照組猴暴露于SHIV,結(jié)果14只對(duì)照猴分別在114次暴露后被感染,建立感染需要的平均暴露次數(shù)為4.6次；16只免疫組猴中的9只在不超過(guò)6次暴露后被感染，1只在經(jīng)過(guò)10次暴露后被感染，另外6只(37.5%)經(jīng)過(guò)17次暴露仍不

6、能被感染，其中1只經(jīng)過(guò)26次暴露后還保持健康。經(jīng)計(jì)算，免疫組猴每次暴露后，被感染的可能性較對(duì)照組降低了64%OLetvin等n:用含SIV的gag、pol、nef基因和HIV的env基因的復(fù)制缺陷型腺病毒載體疫苗免疫猴體，再用SHIV攻擊，雖然免疫組與對(duì)照組均被感染，但免疫組猴體內(nèi)的病毒載量在高峰期和平臺(tái)期均明顯低于對(duì)照組，差別可達(dá)100倍;對(duì)照組猴體內(nèi)的CD4細(xì)胞數(shù)量急劇下降，而免疫組猴體內(nèi)的CD4細(xì)胞數(shù)量仍保持在較高水平。他們同時(shí)發(fā)現(xiàn),env誘導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)在控制病毒載量和穩(wěn)定CD4細(xì)胞數(shù)量方面發(fā)揮了很大的作用。SHIV是實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建出的一種嵌合病毒，含有HIV的包膜基因,SIV的骨

7、架基因，感染猴體后通常很快起發(fā)病，這些特征與HIV感染不符I，使其作為攻擊病毒的價(jià)值受到質(zhì)疑。有研究者用與H1V相似性更好的SIV作為攻擊病毒，疫苗的保護(hù)效果大都不如在SHIV模型上觀察到的顯著，雖然疫苗仍能誘導(dǎo)出針對(duì)SIV的特異性CD8和CD4緬胞,但對(duì)免疫猴體內(nèi)的SIV載量只在早期有短暫控制或控制不明顯，也未見有明顯的穩(wěn)定免疫猴體內(nèi)CD4,細(xì)胞數(shù)量的效果（,3J4o但是，另有試驗(yàn)顯示,疫苗在病毒感染早期對(duì)感染者體內(nèi)病毒即便只有短暫控制，也會(huì)對(duì)疾病進(jìn)程產(chǎn)生良性影響。Letvin等報(bào)道，在用表達(dá)SIV基因的DNA疫苗初免，腺病毒載體疫苗加強(qiáng)免疫撈猴后，用SIV攻擊，結(jié)果在攻擊后的112d內(nèi)，免

8、疫組猴體內(nèi)病毒載量低于空白對(duì)照組，112d后，免疫組與對(duì)照組猴體內(nèi)的病毒載量差異無(wú)顯著意義,但這種感染早期對(duì)病毒的短期抑制，明顯影響到了試驗(yàn)猴的存活率。當(dāng)觀察時(shí)間延長(zhǎng)到攻擊后的850d時(shí),發(fā)現(xiàn)免疫組猴的存活率顯著高于對(duì)照組。Mattapallil等頃用同樣的疫苗免疫，并用同樣的病毒進(jìn)行攻擊，發(fā)現(xiàn)免疫組猴體內(nèi)高峰期SIV載量較空白對(duì)照組降低10倍,結(jié)果導(dǎo)致空白對(duì)照組猴體內(nèi)50%80%的CD4記憶細(xì)胞被破壞，而免疫組猴體內(nèi)的CD4記憶細(xì)胞只喪失了5%20%o由于H1V、SIV感染初期對(duì)CD”記憶細(xì)胞，尤其對(duì)黏膜組織中的CD4記憶細(xì)胞的破壞非常顯著,7J8,此階段對(duì)病毒載量進(jìn)行控制有著重要的臨床意義

9、。2004年底，美國(guó)國(guó)家過(guò)敏和感染疾病研究所、美國(guó)Merck公司及AIDS疫苗試驗(yàn)網(wǎng)絡(luò)三方聯(lián)合，將Merck公司的表達(dá)HIVgag、pol和nef基因的人5型復(fù)制缺陷型載體疫苗推進(jìn)到了人體觀察尻。這個(gè)被命名為STEP的人體觀察計(jì)劃募集了3000名HIV陰性的高危人群，在幾個(gè)不同的地區(qū)進(jìn)行。2007年9月，通過(guò)對(duì)1503名男性同性戀觀察對(duì)象數(shù)據(jù)的階段性分析發(fā)現(xiàn),741名接種疫苗者中,24名感染了HIV,762名未接種疫苗的對(duì)照者中,21名被HIV感染，感染的發(fā)生率差異無(wú)顯著意義，同時(shí)，被感染者體內(nèi)HIV載量差異也無(wú)顯著意義.STEP因此而終止。目前,該項(xiàng)觀察的數(shù)據(jù)還在繼續(xù)分析中。2.誘導(dǎo)特異性T

10、細(xì)胞免疫反應(yīng)的HIV疫苗在感染機(jī)體中的應(yīng)用高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物（Highlyactiveanti-retroviraltherapy,HAART）的應(yīng)用，使HIV感染從不治之癥轉(zhuǎn)變成為可以控制的慢性疾病。但HAART也存在許多不足,由于不能清除病毒，HAART必須長(zhǎng)期服用，導(dǎo)致了諸如耐藥毒株產(chǎn)生以及毒副作用和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)加重等一系列問(wèn)題，這種狀況要求人們尋求新的解決方案。由于體內(nèi)細(xì)胞免疫反應(yīng)在抑制HIV復(fù)制中起著關(guān)鍵作用,利用誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞反應(yīng)的疫苗來(lái)加強(qiáng)體內(nèi)針對(duì)HIV的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng),使體內(nèi)HIV的復(fù)制得到更有效控制，或許可以使患者階段性停用HAART,或延遲對(duì)HAART的需要】。因此，以

11、誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)為機(jī)理的治療性HIV疫苗成為眾多研究人員的優(yōu)先選擇。目前，有關(guān)治療性HIV疫苗的應(yīng)用研究主要在經(jīng)過(guò)HAART治療、體內(nèi)HIV病毒載量已得到完全控制的感染者中進(jìn)行，通常是在HAART治療的同時(shí)加用疫苗免疫,再分析性停藥,通過(guò)評(píng)價(jià)疫苗對(duì)病毒反跳的頻率、強(qiáng)度和病毒載量回歸到平臺(tái)期時(shí)的高度等因素的影響，以及疫苗免疫后體內(nèi)各種免疫學(xué)指標(biāo)與病毒控制的相關(guān)性來(lái)判定疫苗的效果21o通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已觀察到治療性疫苗對(duì)病毒載量的控制效果，如Fuller等22】用SIV感染猴體,2周后開始用抗病毒藥物PMPA治療直到第30周,此期間用含SIVgag.nef基因及多個(gè)CTL細(xì)胞表位的DNA疫苗連

12、續(xù)6次免疫猴體,觀察對(duì)PMPA有反應(yīng)的猴停藥后的情況，結(jié)果停用抗病毒藥物1年后,加用疫苗組的猴多數(shù)體內(nèi)病毒載量仍能被控制在104以下,CD47細(xì)胞數(shù)保持穩(wěn)定,而單用PMPA的對(duì)照組猴體內(nèi)病毒載量仍明顯高于疫苗免疫組,CD4細(xì)胞數(shù)下降非常顯著。人體觀察中,不同的研究者所得到的結(jié)果不同，如Jacobson等方用ALVACvCP1452（表達(dá)HIVgpl20、gp41和pol基因片段的金絲雀痘病毒載體疫苗）對(duì)接受HAART穩(wěn)定治療的慢性HIV感染者進(jìn)行3輪免疫，再間歇性停用HAART,結(jié)果未發(fā)現(xiàn)ALVACvCP1452對(duì)體內(nèi)的病毒有任何控制作用。但Levy等羽用HIV疫苗ALVAC-HIVvCP14

13、33（表達(dá)HIVgpl20.gp41.p55和來(lái)自nef、pol的CTL表位的金絲雀痘病毒載體疫苗）和Lipo-6T（含來(lái)自HIVgag.nef和pol的5個(gè)T細(xì)胞表位的脂多肽疫苗）聯(lián)合免疫正在接受HAART治療且病毒載量已得到控制的HIV慢性感染者，同時(shí)加用IL-2,結(jié)果免疫組患者體內(nèi)的HIV特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)（包括CD4,和CD8細(xì)胞免疫反應(yīng)）呈陽(yáng)性的人數(shù)明顯高于對(duì)照組。停用HAART3個(gè)月后，免疫組有RNA水平來(lái)看，免疫組也低于對(duì)照組。最近報(bào)道的RNA水平來(lái)看，免疫組也低于對(duì)照組。最近報(bào)道的isi約24%（8/33）的患者無(wú)需恢復(fù)HAART治療,對(duì)照組無(wú)需恢復(fù)治療的患者約占5%（2/37

14、）,兩組間差異有顯著意義。延長(zhǎng)觀察時(shí)間到100周【方,免疫組患者脫離HAART治療的累計(jì)天數(shù)的中間值（177（1）大于對(duì)照組（89d）;免疫組患者脫離HAART治療的時(shí)間比例為42.8%,而對(duì)照組為26.5%;從各患者第2次、第3次中斷HAART治療后4周時(shí)的HIV其他治療性疫苗,人體觀察的結(jié)果也提示，疫苗可以提升HIV感染者體內(nèi)特異性CD4LCD8+細(xì)胞的強(qiáng)度和廣度，但對(duì)病毒的控制效果尚需進(jìn)一步證實(shí)5”現(xiàn)有的研究結(jié)果提示，治療性疫苗可在一定程度上控制感染者體內(nèi)的HIV復(fù)制，但離人們期待的治療效果尚有差距。目前，許多不同的治療性疫苗的臨床研究仍在進(jìn)行中。3.結(jié)語(yǔ)誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的疫苗在

15、健康人體的應(yīng)用價(jià)值因STEP的失敗而受到質(zhì)疑，但對(duì)于一個(gè)不誘導(dǎo)中和抗體的疫苗，未能降低HIV感染的發(fā)生率應(yīng)在意料之中，至于對(duì)被感染的個(gè)體體內(nèi)病毒載量的影響如何，有待更詳細(xì)的分析結(jié)果公布后才能判定。這類疫苗用于人群，理想的效果應(yīng)該是延緩HIV感染者的病情進(jìn)展及降低被感染者的傳染性,這些都需要足夠長(zhǎng)時(shí)間的動(dòng)態(tài)觀察才能做出判斷，現(xiàn)在完全否定誘導(dǎo)特異性細(xì)胞免疫的疫苗在健康人體的應(yīng)用價(jià)值還為時(shí)過(guò)早。誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的疫苗用于HIV感染者的治療，目前雖然還沒(méi)有明確的臨床效果，但已經(jīng)積累了一些有利的數(shù)據(jù)，值得人們?nèi)ミM(jìn)一步探索。與現(xiàn)有HAART以病毒復(fù)制的各個(gè)環(huán)節(jié)為靶點(diǎn)、直接抑制病毒復(fù)制的作用機(jī)理不同

16、，誘導(dǎo)特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)的疫苗通過(guò)調(diào)動(dòng)感染者體內(nèi)的免疫力來(lái)抑制病毒，其作為治療性疫苗的成功使用,有望彌補(bǔ)HAART的不足或加強(qiáng)HAART的治療效果。參考文獻(xiàn)1JointUnitedNationsProgrammeonHIV/AIDS(UNAIDS)andWorldHealthOrganization.AIDSepidemicupdate,December200712LetvinNL.ProgresstowardanHIVvaccine.AnnuRevMed,2005,56：213-23.3 FlynnNM,ForthalDN,HarroCD,elal.Placebo-controlledph

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