化學(xué)發(fā)光項(xiàng)目-SOP

1、一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/02三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/03四、雌二醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/04五、非結(jié)合雌三醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/05六、催乳素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/06七、孕酮測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/07八、睪酮測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/

2、08九、前列腺特異性抗原測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/09十、游離前列腺特異性抗原測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/10十一、癌胚抗原測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/11 十二、甲胎蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/12 十三、皮質(zhì)醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/13十四、總IgE測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/14十五、胰島素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/15十六、總甲狀腺素T4測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRC

3、YYLAB-MYSOP-02/16十七、游離甲狀腺素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/17十八、總?cè)饧谞钕侔彼釡y(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/18十九、游離三碘甲狀腺氨酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/19二十、促甲狀腺素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/20二十一、甲狀腺球蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/21二十二、鐵蛋白測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/22二十三、葉酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/23二十四

4、、維生素B12測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 SYXRCYYLAB-MYSOP-02/24沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 5 / 121生效日期： 2012-7-01一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 1頁(yè)共 5 頁(yè)1 檢驗(yàn)申請(qǐng) 單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定（縮寫hCG）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：腫瘤標(biāo)志物檢查組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2 標(biāo)本采集與處理2.1 標(biāo)本采集2.1.1 常規(guī)靜脈采血約2 ml，不抗凝，置普通試管中。或采用含分離膠的真空采血管。也可用肝素或EDTA作抗凝劑采集血

5、漿標(biāo)本。2.1.2 檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3 急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2 對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4 其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2 標(biāo)本保存2.2.1 接收標(biāo)本后在60min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清或血

6、漿, 避免溶血。離心必須達(dá)到4000rpm15min，離心后的血清中不能含有顆粒物或微量纖維蛋白。2.2.2 標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（1525）下可穩(wěn)定8h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定3d，在-20最多可保存4周。避免反復(fù)凍融。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對(duì)保存時(shí)間超過1d的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3 已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置48冰箱內(nèi)保存7d。2.3 標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)，早上或上午采血。3 方法原理雙位點(diǎn)免疫酶夾心法。標(biāo)本中HCG與試劑中兔抗hCG-ALP結(jié)合物和包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hCG復(fù)合物的磁性微粒子共同反應(yīng)，

7、血清hCG與固相化的抗hCG單克隆沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 6/ 121生效日期： 2012-7-01一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 2 頁(yè)共 5 頁(yè)抗體結(jié)合，而兔抗hCG-ALP結(jié)合物與血清hCG不同的抗原位點(diǎn)起反應(yīng)，最后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠McAb-hCG-兔抗體-ALP夾心型免疫復(fù)合物。經(jīng)磁性分離，洗滌洗去未結(jié)合的物質(zhì)，加入化學(xué)發(fā)光底物L(fēng)umi-Phos*530，測(cè)量反應(yīng)產(chǎn)生的光，光子的量與標(biāo)本中hCG的濃度成比例，由多點(diǎn)校準(zhǔn)曲線求得標(biāo)本中hCG的濃度。4 試劑及其他

8、用品4.1 試劑：Access-hCG測(cè)定試劑包，由美國(guó)BECKMAN COULTER公司出品，試劑盒產(chǎn)品號(hào)33500。未打開的試劑包保存于28在有效期內(nèi)穩(wěn)定，不可凍存。開啟的試劑包載入系統(tǒng)中可使用28d。4.2 試劑盒組分4.2.1 磁性微粒子：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hCG單克隆抗體復(fù)合物。4.2.2 液體試劑：堿性磷酸酶標(biāo)記的兔抗-HCG抗體。4.2.3 試劑包即開即用，無須特殊準(zhǔn)備。4.3 其他試劑與用品4.3.1 化學(xué)發(fā)光底物：ACCESS的通用發(fā)光劑底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗緩沖液、反應(yīng)杯等。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1 校準(zhǔn)品: 采用美國(guó)BECKMAN

9、COULTER公司Access專用配套hCG校準(zhǔn)液，5個(gè)濃度。有校準(zhǔn)卡片。5.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線卡片數(shù)據(jù)(6參數(shù)對(duì)數(shù)擬合曲線)自動(dòng)建立校準(zhǔn)曲線。5.3 校準(zhǔn)周期：在同一批號(hào)試劑使用期間校準(zhǔn)曲線有效，但在間隔28d后需要重新校準(zhǔn)。另在：更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4 校準(zhǔn)液重建方法：液態(tài)校準(zhǔn)液，即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1 質(zhì)控品采用hCG質(zhì)控品或采用自備混合血清。6.2 質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控液，即開即用，充分顛倒混勻，無需特殊準(zhǔn)備。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化

10、學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 7 / 121生效日期： 2012-7-01一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 3 頁(yè)共 5 頁(yè)6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定質(zhì)控血清一次。鼠IgG-鼠抗hCG復(fù)合物的磁性微粒子共同反應(yīng)，血清hCG與固相化的抗hCG單克隆鼠IgG-鼠抗hCG復(fù)合物的磁性微粒子共同反應(yīng)，血清hCG與固相化的抗hCG單克隆6.4 質(zhì)控規(guī)則：采用L-J質(zhì)控圖，以3s為失控限。標(biāo)準(zhǔn)差由本室實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得出。6.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本

11、檢測(cè)。7 適用儀器美國(guó)BECKMAN COULTER公司的DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀。8 標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入工作表 加載樣本 測(cè)定操作 結(jié)果復(fù)核 報(bào)告。 9 主要分析參數(shù)無須輸入操作參數(shù)，儀器根據(jù)預(yù)設(shè)的分析項(xiàng)目參數(shù)和試劑條碼的信息自動(dòng)進(jìn)行分析。標(biāo)本25l。10 結(jié)果計(jì)算儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果單位以mIU/mL或IU/L表示。11 檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1 結(jié)果的報(bào)告11.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2 報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息

12、。11.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2 報(bào)告范圍：0.5200000 mIU/mL。超過此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本重新稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12 操作性能12.1 精密度：批內(nèi)CV 3.5%4.4%；批間CV 1.34%2.15%。12.2 分析范圍：0.5200000mIU/mL沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 8 / 121生效日期： 2012-7-01一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 3 頁(yè)共 5

13、頁(yè)12.3 分析靈敏度：0.5mIU/mL。12.4 方法的有限性及干擾因素：TSH（250IU/mL）、LH（400 mIU/mL），F(xiàn)SH（400 mIU/mL）時(shí)無交叉反應(yīng)。甘油三脂（22.6mmol/L）、血紅蛋白（10g/L）或膽紅素（0.34mmol/L）時(shí)在檢測(cè)允許的精密度范圍內(nèi)對(duì)結(jié)果沒有影響。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：男性和未懷孕女性：100000 mIu/mL孕期（受孕后） HCG濃度0.21week 550 mIu/mL12week 50500 mIu/mL23week 1005000 mIu/mL34week 50010000 mIu/mL45week 100

14、050000 mIu/mL56week 10000100000 mIu/mL68weekmIu/mL23months 10000100000 mIu/mL14 臨床意義14.1 hCG最初是由滋養(yǎng)層分泌，后來由絨毛和胎盤分泌。在妊娠頭三個(gè)月，hCG的濃度增加并達(dá)到高峰；在妊娠中、后期hCG形成平臺(tái)。14.2 在末次月經(jīng)后的3到4周內(nèi)檢測(cè)尿液或血液中hCG的濃度是確定妊娠最可靠的指標(biāo)。測(cè)定hCG可應(yīng)用于對(duì)異位妊娠、先兆流產(chǎn)、多胎妊娠的診斷。hCG檢測(cè)濃度低并不能除外妊娠，如果懷疑妊娠，應(yīng)在48h以后再次采集標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。14.3 hCG濃度升高還可見于滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤和非

15、滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤，如：小腸癌、肺癌、睪丸癌、乳腺癌和前列腺癌、葡萄胎、絨毛膜癌及其腦轉(zhuǎn)移等；測(cè)定外周血循環(huán)中hCG的濃度對(duì)上述患者的療效監(jiān)測(cè)十分有意義。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2 審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 9 / 121生效日期： 2012-7-01一、人絨毛膜促性腺激素亞單位測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 5 頁(yè)共 5 頁(yè)審核者處簽名。15.3 相關(guān)項(xiàng)目：審核與其他腫瘤標(biāo)志物等

16、的關(guān)系，或參考受檢者臨床資料，若發(fā)現(xiàn)與臨床相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16 有關(guān)引用程序與文件16.1 DxI 800自動(dòng)發(fā)光分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。16.2免疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。16.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。16.4標(biāo)本送檢和接收程序。17 參考文獻(xiàn)17.1 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社, 2004.17.2 Access hCG測(cè)定試劑說明書。17.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 18 本SOP變動(dòng)程序任何一位使用本SOP的工作人員如提出對(duì)本SOP改動(dòng)意見，或本測(cè)定項(xiàng)目的方法、試

17、劑有變動(dòng)的情況，可以對(duì)本SOP作出改動(dòng)，但必須先報(bào)經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。19 本SOP涉及的記錄與表單19.1 劑裝載記錄表19.2 質(zhì)控記錄19.3 失控及失控處理記錄19.4 檢驗(yàn)結(jié)果審校核記錄沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 10 / 121生效日期： 2012-7-01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 1 頁(yè)共 5 頁(yè)1 檢驗(yàn)申請(qǐng) 單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：黃體生成素測(cè)定（縮寫LH）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：(女)性激素檢查組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2 標(biāo)本采集與處理2.1 標(biāo)本采集2.1.1 常規(guī)靜脈

18、采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。也可采集血漿標(biāo)本，用肝或EDTA抗凝。2.1.2 檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3 急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2 對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4 其他如標(biāo)識(shí)涂改

19、、標(biāo)本試管破裂等。2.2 標(biāo)本保存2.2.1 接收標(biāo)本后在60min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血漿, 避免溶血。離心必須達(dá)到4000rpm15min，離心后的血清中不能含有顆粒物或微量纖維蛋白。2.2.2 標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（1525）下可穩(wěn)定8h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定2d，在-20最多可保存4周。避免反復(fù)凍融。2.2.3 已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置48冰箱內(nèi)保存7d。2.3 標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)。3 方法原理采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫發(fā)光分析原理。標(biāo)本中LH與包被在磁性微粒子上的抗LH抗體結(jié)合，經(jīng)磁性分離，洗滌洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入AL

20、P標(biāo)記的羊抗hLH，反沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 11 / 121生效日期： 2012-7-01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 2 頁(yè)共 5 頁(yè)應(yīng)后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠抗hLH-hLH-羊抗體-ALP夾心型免疫復(fù)合物，再次離洗滌后，加入化學(xué)發(fā)光底物L(fēng)umi-Phos 530，經(jīng)堿性磷酸酶的作用產(chǎn)生光子，測(cè)量反應(yīng)產(chǎn)生的光，光子的量與標(biāo)本中hLH 的濃度成正比，由多點(diǎn)校準(zhǔn)曲線求得標(biāo)本中hLH 的濃度。4 試劑及其他用品4.1 試劑：Access LH測(cè)定試劑包，由美國(guó)BECKMAN COULT

21、ER公司出品，試劑盒產(chǎn)品號(hào)33510。未打開的試劑包保存于28在效期內(nèi)穩(wěn)定，不可凍存。開啟的試劑包載入系統(tǒng)中可使用28d。4.2 試劑盒組分4.2.1 磁性微粒子：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hLH單克隆抗體復(fù)合物的磁性微粒子。4.2.2 液體試劑：堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗人LH抗體。4.2.3 試劑包即開即用，無須特殊準(zhǔn)備。4.3 其他試劑與用品4.3.1 化學(xué)發(fā)光底物：ACCESS的通用發(fā)光劑底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗緩沖液、反應(yīng)杯等。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1 校準(zhǔn)品: 采用Access專用配套LH校準(zhǔn)液，Cat. No. 33515，5個(gè)濃度。有校準(zhǔn)卡片。5.2 校

22、準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線卡片數(shù)據(jù)(6參數(shù)對(duì)數(shù)擬合曲線)自動(dòng)建立校準(zhǔn)曲線。5.3 校準(zhǔn)周期：在同一批號(hào)試劑使用期間校準(zhǔn)曲線有效，但在間隔28d后需要重新校準(zhǔn)。每當(dāng)：更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4 校準(zhǔn)液重建方法：液態(tài)校準(zhǔn)液，即可使用。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1 質(zhì)控品采用LH質(zhì)控品或采用自備混合血清。6.2 質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控液，即開即用，充分顛倒混勻，無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定質(zhì)控血清一次。6.4 質(zhì)控規(guī)則：采用L-J質(zhì)控圖，以3s為失控限。標(biāo)準(zhǔn)差由本室實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得

23、出。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 9 / 121生效日期： 2012-7-01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 3 頁(yè)共 5 頁(yè)6.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測(cè)。7 適用儀器美國(guó)BECKMAN COULTER公司的DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀。8 標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入工作表 加載樣本 測(cè)定操作 結(jié)果復(fù)核 報(bào)告。9 主要分析參數(shù)無須輸入操作參數(shù)，儀器根據(jù)預(yù)設(shè)的分析項(xiàng)目參數(shù)和試劑條碼的信息自

24、動(dòng)進(jìn)行分析。標(biāo)本量50l。10 結(jié)果計(jì)算儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果單位以mIU/mL或IU/L表示。系統(tǒng)可以利用所得到的FSH和LH結(jié)果自動(dòng)進(jìn)行LH/FSH比值（L/F）的計(jì)算。11 檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1 結(jié)果的報(bào)告11.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2 報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2 報(bào)告范圍：0.2250IU/mL，超過此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根

25、據(jù)標(biāo)本重新稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12 操作性能12.1 精密度：批內(nèi)CV 3.6%5.4%；批間CV 4.3%6.4%。12.2 分析范圍：0.2250IU/mL。 12.3 分析靈敏度：0.2IU/ml。12.4 方法的有限性及干擾因素：FSH（400 mIU/mL）、TSH（200mIU/L）、hCG（1 IU/mL）；hCG（125 IU/mL）在檢測(cè)允許的精密度范圍內(nèi)對(duì)結(jié)果沒有影響。甘油三脂（33.9mmol/L）、血紅蛋白（5g/L）或膽紅素（0.684mmol/L）時(shí)對(duì)試驗(yàn)的干擾少于10%。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-

26、FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 13 / 121生效日期： 2012-7-01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 4 頁(yè)共 5 頁(yè)13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：男性：1.28.6 mIu/ ml女性: 卵泡期2.110.9mIu/ml排卵期19.2103.0mIu/mL黃體期1.212.8mIu/ml絕經(jīng)期10.958.6mIu/mL14 臨床意義14.1 黃體生成素（LH）是一種二聚體的糖蛋白，由腺垂體分泌，受下丘腦促性腺激素釋放激素的調(diào)節(jié)。其-亞單位與其它的糖蛋白類激素相同，-亞單位具有生物學(xué)活性并與人絨毛膜促性腺激素有部分的同源性。14.2 在女性月經(jīng)周期中，卵泡刺激素（FSH）刺

27、激卵泡的生長(zhǎng)；當(dāng)卵泡成熟時(shí)，LH分泌增強(qiáng)形成LH峰，F(xiàn)SH水平則有所下降，導(dǎo)致排卵。卵巢的類固醇激素是LH分泌的重要負(fù)反饋調(diào)節(jié)因素。當(dāng)女性絕經(jīng)后，卵巢的負(fù)反饋?zhàn)饔脺p退，從而導(dǎo)致LH濃度升高。14.3 LH濃度升高還可見于卵巢功能衰退的絕經(jīng)前女性或青春期卵巢發(fā)育不成熟的女性。14.4 hLHh/hFSH的比值常有助于對(duì)多囊子宮的診斷。14.5 低濃度hLH和hFSH可提示垂體功能不足，而高濃度hLH和hFSH若伴有性激素濃度降低，則提示性功能不足如Turners綜合征和絕經(jīng)期、子宮切除術(shù)后等。14.6 hLH測(cè)定還有助于分析下丘腦-垂體-性腺功能狀態(tài)，以便判斷卵巢和性腺發(fā)育不全或區(qū)別垂體性閉經(jīng)和

28、下丘腦閉經(jīng)。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2 審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。15.3 相關(guān)項(xiàng)目：審核與其他女性激素等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16 有關(guān)引用程序與文件16.1 DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 14 / 121生效日期： 2012-7-01二、黃體生成素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 5 頁(yè)共 5 頁(yè)16.2免

29、疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。16.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。16.4標(biāo)本送檢和接收程序。17 參考文獻(xiàn)17.1 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社, 2004.17.2 Access LH測(cè)定試劑說明書。17.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 18 本SOP變動(dòng)程序任何一位使用本SOP的工作人員如提出對(duì)本SOP改動(dòng)意見，或本測(cè)定項(xiàng)目的方法、試劑有變動(dòng)的情況，可以對(duì)本SOP作出改動(dòng)，但必須先報(bào)經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。19 本SOP涉及的記錄與表單19.1 劑裝載記錄表19.2 質(zhì)控記錄19.3 失控及失控

30、處理記錄19.4 檢驗(yàn)結(jié)果審校核記錄沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 15 / 121生效日期： 2012-7-01三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 1 頁(yè)共 5 頁(yè)1 檢驗(yàn)申請(qǐng) 單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：卵泡刺激素測(cè)定（縮寫FSH）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：女性激素檢查組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2 標(biāo)本采集與處理2.1 標(biāo)本采集2.1.1 常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。也可采集血漿標(biāo)本，用肝或EDTA抗凝。2.1.2 檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1

31、.3 急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2 對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4 其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2 標(biāo)本保存2.2.1 接收標(biāo)本后在60min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血漿, 避免溶血。離心必須達(dá)到4000rpm15min，離心后的血清中不能含有顆

32、粒物或微量纖維蛋白。2.2.2 標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（1525）下可穩(wěn)定8h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定2d，在-20最多可保存4周。避免反復(fù)凍融。2.2.3 已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置48冰箱內(nèi)保存7d。2.3 標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)。3 方法原理 采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫發(fā)光分析原理。標(biāo)本中FSH與包被在磁性微粒子上的鼠抗FSH單克隆抗體結(jié)合，再與液相試劑中堿性磷酸酶標(biāo)記的抗FSH抗體結(jié)合，經(jīng)磁性分沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼：16 / 121生效

33、日期： 2012-7-01三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 2 頁(yè)共 5 頁(yè)離，洗滌洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入ALP連結(jié)的羊抗hFSH，最后形成微粒子-羊抗鼠IgG-鼠抗hFSH-hFSH-羊抗體-ALP夾心型免疫復(fù)合物。再次分離洗滌后，加入化學(xué)發(fā)光底物L(fēng)umi-Phos 530，經(jīng)堿性磷酸酶的作用產(chǎn)生光子，測(cè)量反應(yīng)產(chǎn)生的光，光子的量與標(biāo)本中hFSH的濃度成正比，由多點(diǎn)校準(zhǔn)曲線求得標(biāo)本中hFSH的濃度。4 試劑及其他用品4.1 試劑：Access FSH測(cè)定試劑包，由美國(guó)BECKMAN COULTER公司出品，試劑盒產(chǎn)品號(hào)33520。未打開的試劑包保存于28在有效期內(nèi)穩(wěn)定，不可凍存。開啟的試

34、劑包載入系統(tǒng)中可使用28d。4.2 試劑盒組分4.2.1 磁性微粒子包被珠：包被了羊抗鼠IgG-鼠抗hFSH單克隆抗體復(fù)合物的磁性微粒子。4.2.2 液體試劑：堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗hFSH抗體。含蛋白的Tris緩沖液。4.2.3 試劑包即開即用，無須特殊準(zhǔn)備。4.3 其他試劑與用品4.3.1 化學(xué)發(fā)光底物：ACCESS的通用發(fā)光劑底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗緩沖液、反應(yīng)杯等。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1 校準(zhǔn)品: 采用Access專用配套FSH校準(zhǔn)液，5個(gè)濃度。Cat. No. 33525。有校準(zhǔn)卡片。5.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲

35、線卡片數(shù)據(jù)(6參數(shù)對(duì)數(shù)擬合曲線)自動(dòng)建立校準(zhǔn)曲線。5.3 校準(zhǔn)周期：在同一批號(hào)試劑使用期間校準(zhǔn)曲線有效，但在間隔28d后需要重新校準(zhǔn)。每當(dāng)：更換試劑批號(hào)或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時(shí)；儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4 校準(zhǔn)液重建方法：液態(tài)校準(zhǔn)液，即可使用。開封后于28保存最長(zhǎng)不超過13周，或-20保存13周。避免反復(fù)凍融。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1 質(zhì)控品可購(gòu)買FSH質(zhì)控品或采用自備混合血清。6.2 質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控液，即開即用，充分顛倒混勻，無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定質(zhì)控血清一次。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序

36、文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼：17/ 121生效日期： 2012-7-01三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 3 頁(yè)共 5 頁(yè)6.4 質(zhì)控規(guī)則：采用L-J質(zhì)控圖，以3s為失控限。標(biāo)準(zhǔn)差由本室實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得出。6.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測(cè)。7 適用儀器美國(guó)BECKMAN COULTER公司的DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀。8 標(biāo)本檢測(cè)步驟 裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測(cè)定 結(jié)果復(fù)核 報(bào)告。 9 主要分析參數(shù)無須輸入操作參數(shù)，儀器根據(jù)預(yù)設(shè)的分析項(xiàng)目

37、參數(shù)和試劑條碼的信息自動(dòng)進(jìn)行分析。標(biāo)本40l。10 結(jié)果計(jì)算儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果單位以mIU/mL或IU/L表示。系統(tǒng)可以利用所得到的FSH和LH結(jié)果自動(dòng)進(jìn)行LH/FSH比值（L/F）的計(jì)算。11 檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1 結(jié)果的報(bào)告11.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2 報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2 報(bào)告范圍：0.2200 mIU/mL，超過此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可

38、靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本重新稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12 操作性能12.1 精密度：批內(nèi)CV 1.9%2.4%；批間CV 5.0%7.3%。12.2 分析范圍：0.2200 mIU/mL。 12.3 分析靈敏度：0.2 IU/ml。12.4 準(zhǔn)確性：回收試驗(yàn)結(jié)果，回收率104.3。12.5 方法的有限性及干擾因素：LH（400 mIU/mL）、TSH（250IU/L）、hCG（125IU/mL）沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 18/ 121生效日期： 2012-7-01三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

39、第 4 頁(yè)共 5 頁(yè)在檢測(cè)允許的精密度范圍內(nèi)對(duì)結(jié)果沒有影響。甘油三脂（33.9mmol/L）、血紅蛋白（10g/L）或膽紅素（0.684mmol/L）時(shí)對(duì)試驗(yàn)的干擾少于10%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：男性：1.319.3 mIU/ml 女性：卵泡期 3.98.8 mIU/ml 排卵期 4.522.5 mIU/ml 黃體期 1.85.1 mIU/ml絕經(jīng)期 16.7113.6 mIU/ml14 臨床意義14.1 卵泡刺激素（FSH）是由腺垂體分泌，并受下丘腦促性腺激素釋放激素的調(diào)節(jié)。FSH在男性和女性體內(nèi)的功能主要是促進(jìn)性腺組織的發(fā)育并維持其功能，同時(shí)，性腺組織合成和分泌的類固醇激

40、素也可以負(fù)反饋調(diào)節(jié)FSH的分泌。14.2 FSH和黃體生成素（LH）共同控制性腺的生長(zhǎng)與生殖作用。育齡婦女的FSH刺激子宮濾泡的發(fā)育。血液FSH水平在月經(jīng)周期中波動(dòng)，受促性腺激素的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。在女性絕經(jīng)期，卵巢的功能和類固醇激素的分泌停止，負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用消失，從而導(dǎo)致FSH濃度的升高；此外，F(xiàn)SH濃度升高還可見于處于卵巢功能衰退的絕經(jīng)前期女性或青春期卵巢發(fā)育不成熟的女性。14.3 FSH與LH水平升高而性激素水平低下時(shí)反映性腺功能失調(diào)，如發(fā)生在男性，提示睪丸功能發(fā)育不成熟或無睪癥；在女性則可能于絕經(jīng)期、早熟性子宮功能失調(diào)或子宮切除術(shù)后等情況中出現(xiàn)。14.4 異常的FSH濃度還提示下丘腦-垂體軸

41、的功能失調(diào)。14.5 低濃度hLH和hFSH可提示垂體功能不足，而高濃度hLH和hFSH若伴有性激素濃度降低，則提示性功能不足如Turners綜合征和絕經(jīng)期、子宮切除術(shù)后等。服用口服避孕藥的婦女其促性腺激素水平常是低下的。15 結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1 由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2 審核者認(rèn)真審核每一個(gè)測(cè)定結(jié)果，對(duì)發(fā)出報(bào)告結(jié)果的可靠性負(fù)責(zé)，并在報(bào)告單的審核者處簽名。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 19 / 121生效日期： 2012-7-01三、卵泡刺激素測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第

42、 5 頁(yè)共 5 頁(yè)15.3 相關(guān)項(xiàng)目：審核與其他女性激素等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16 有關(guān)引用程序與文件16.1 DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。16.2免疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。16.3檢驗(yàn)結(jié)果審核程序。16.4標(biāo)本送檢和接收程序。17 參考文獻(xiàn)17.1 陸永綏，張偉民主編. 臨床檢驗(yàn)管理與技術(shù)規(guī)程. 杭州:浙江大學(xué)出版社, 2004.17.2 Access FSH測(cè)定試劑說明書。17.3 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 (第三版). 東南大學(xué)出版社，2006. 18 本SOP變動(dòng)程序任何一位使用本SOP的工作人員

43、如提出對(duì)本SOP改動(dòng)意見，或本測(cè)定項(xiàng)目的方法、試劑有變動(dòng)的情況，可以對(duì)本SOP作出改動(dòng)，但必須先報(bào)經(jīng)專業(yè)主管和科主任批準(zhǔn)。19 本SOP涉及的記錄與表單19.1 劑裝載記錄表19.2 質(zhì)控記錄19.3 失控及失控處理記錄19.4 檢驗(yàn)結(jié)果審校核記錄沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 20 / 121生效日期： 2012-7-01四、雌二醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 1 頁(yè)共 5 頁(yè)1 檢驗(yàn)申請(qǐng) 單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)：雌二醇測(cè)定（縮寫E2）；組合項(xiàng)目申請(qǐng)：女性激素檢查組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請(qǐng)。2 標(biāo)本采集與處理

44、2.1 標(biāo)本采集2.1.1 常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。也可采集血漿標(biāo)本，用肝或EDTA抗凝。2.1.2 檢驗(yàn)申請(qǐng)單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識(shí)符。2.1.3 急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上填寫標(biāo)本采集時(shí)間。2.1.4 標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請(qǐng)單一起及時(shí)運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對(duì)不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5 下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1 標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2 對(duì)反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3 無法確認(rèn)標(biāo)本與申請(qǐng)單對(duì)應(yīng)關(guān)

45、系的。2.1.5.4 其他如標(biāo)識(shí)涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2 標(biāo)本保存2.2.1 接收標(biāo)本后在60min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血漿, 避免溶血。離心必須達(dá)到4000rpm15min，離心后的血清中不能含有顆粒物或微量纖維蛋白。2.2.2 標(biāo)本保存時(shí)間：室溫（1525）下可穩(wěn)定8h，普通冰箱中（28）穩(wěn)定2d，在-20最多可保存4周。避免反復(fù)凍融。2.2.3 已完成測(cè)試的標(biāo)本保持完整的識(shí)別號(hào)，置48冰箱內(nèi)保存7d。2.3 標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1 采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動(dòng)，早上或上午采血。3 方法原理采用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫發(fā)光分析法。標(biāo)本與包被了羊抗兔IgG-兔抗雌二醇復(fù)合物的磁性

46、微粒子反應(yīng)，20分鐘后，加入雌二醇-ALP結(jié)合物，標(biāo)本中雌二醇與堿性磷酸酶標(biāo)記沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 21/ 121生效日期： 2012-7-01四、雌二醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 2 頁(yè)共 5 頁(yè)的雌二醇競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合磁性微粒子上抗雌二醇抗體有限的結(jié)合位點(diǎn)，最后抗原抗體復(fù)合物與固相化的捕獲抗體結(jié)合形成微粒子-羊抗兔IgG-兔抗體-（雌二醇或雌二醇-ALP）免疫復(fù)合物。經(jīng)磁性分離，洗滌洗去未結(jié)合的物質(zhì)，加入化學(xué)發(fā)光底物L(fēng)umi-Phos 530，經(jīng)堿性磷酸酶的作用產(chǎn)生光子，光子的量與標(biāo)本中雌二醇的量成反比，

47、由多點(diǎn)校準(zhǔn)曲線求得標(biāo)本中雌二醇的濃度。4 試劑及其他用品4.1 試劑：Access雌二醇測(cè)定試劑包，由美國(guó)BECKMAN COULTER公司出品，試劑盒產(chǎn)品號(hào)33540。未打開的試劑包保存于28可穩(wěn)定至有效期，不可凍存。開啟的試劑包載入系統(tǒng)中可使用14d。4.2 試劑盒組分4.2.1 微粒子包被珠：包被了羊抗兔IgG-兔抗雌二醇抗體復(fù)合物的磁性微粒子、含BSA的Tris緩沖液。4.2.2 液體試劑：堿性磷酸酶標(biāo)記的雌二醇抗體。4.2.4 試劑包即開即用，無須特殊準(zhǔn)備。4.3 其他試劑與用品4.3.1 化學(xué)發(fā)光底物：ACCESS的通用發(fā)光劑底物液，Cat. No. 81906。4.3.2 清洗緩

48、沖液、反應(yīng)杯等。5 校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1 校準(zhǔn)品：采用Access專用配套雌二醇校準(zhǔn)液，Cat. No. 33545，5個(gè)濃度。有校準(zhǔn)卡片。雌二醇校準(zhǔn)可溯源至同位素稀釋-氣相色譜分析/質(zhì)譜分析。5.2 校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：非線性模式，6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)。儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線卡片數(shù)據(jù)(6參數(shù)對(duì)數(shù)擬合曲線)自動(dòng)建立校準(zhǔn)曲線。5.3 校準(zhǔn)周期：在同一批號(hào)試劑使用期間校準(zhǔn)曲線有效，但在間隔28d后需要重新校準(zhǔn)。每次完成維修保養(yǎng)程序后或質(zhì)控失控時(shí)，也要重新校準(zhǔn)。5.4 校準(zhǔn)液重建方法：液態(tài)校準(zhǔn)液，即開即用。校準(zhǔn)液開啟后于28保存最長(zhǎng)不超過13周，或于-20保存13周。避免反復(fù)凍融。6 質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1

49、 質(zhì)控品采用E2質(zhì)控品或采用自備混合血清。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 22/ 121生效日期： 2012-7-01四、雌二醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 3 頁(yè)共 5 頁(yè)6.2 質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控液，即開即用，充分顛倒混勻，無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測(cè)定：在每一批標(biāo)本中測(cè)定質(zhì)控血清一次。6.4 質(zhì)控規(guī)則：采用L-J質(zhì)控圖，以3s為失控限。標(biāo)準(zhǔn)差由本室實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得出。6.5 如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時(shí)糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測(cè)。7 適用儀器：美國(guó)BE

50、CKMAN COULTER公司的DxI 800自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀。8 標(biāo)本檢測(cè)步驟裝載試劑 進(jìn)行校準(zhǔn) 進(jìn)行質(zhì)控 輸入標(biāo)本檢測(cè)項(xiàng)目 加載標(biāo)本 標(biāo)本測(cè)定 結(jié)果復(fù)核 報(bào)告。 9 主要分析參數(shù)無須輸入操作參數(shù)，儀器根據(jù)預(yù)設(shè)的分析項(xiàng)目參數(shù)和試劑條碼的信息自動(dòng)進(jìn)行分析。標(biāo)本25l。10 結(jié)果計(jì)算儀器根據(jù)校準(zhǔn)曲線自動(dòng)給出每個(gè)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果單位以pmol/L或pg/mL表示。換算公式：pg/mLpmol/L0.272411 檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告及范圍11.1 結(jié)果的報(bào)告11.1.1 結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報(bào)告。11.1.2 報(bào)告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報(bào)告日期、時(shí)間、操作者和審核者簽名，

51、并有與申請(qǐng)單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3 如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的也在報(bào)告單上指出。11.2 報(bào)告范圍：7313216 pmo/L，超過此范圍的結(jié)果報(bào)告時(shí)必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本重新稀釋后重復(fù)測(cè)定的結(jié)果。12 操作性能12.1 精密度：批內(nèi)CV 1.4%6.1%；批間CV 3.2%7.7%。12.2 分析范圍：7313216 pmo/L 。 12.3 分析靈敏度：73 pmo/L。沭陽(yáng)縣仁慈醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫實(shí)驗(yàn)室SOP化學(xué)發(fā)光測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號(hào)：SYXRCYYLAB-FGMY 版本：A/0頁(yè)碼： 23/ 121生效日期： 2012-7-01四、雌

52、二醇測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 第 4 頁(yè)共 5 頁(yè)12.4 方法的有限性及干擾因素：與雌三醇、雌激素酮、葡萄糖苷-雌二醇、5-二氫-睪酮和睪酮等無明顯交叉反應(yīng)性。甘油三脂（36.1mmol/L）、血紅蛋白（1.3g/L）或膽紅素（0.17mmol/L）時(shí)對(duì)試驗(yàn)的干擾少于5%。13 參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平參考范圍：男性：73275 pmo/L女性：卵泡期 88418 pmo/L 排卵期 2271959 pmo/L 黃體期 2931002 pmo/L 絕經(jīng)期 73322 pmo/L14 臨床意義14.1 雌二醇是卵巢分泌的重要雌性激素，也可由腎上腺、胎盤和睪丸產(chǎn)生。外周血循環(huán)中有超98%的雌二醇是與血清蛋白質(zhì)相結(jié)合，其中主要是與性激素結(jié)合球蛋白（SHBG）相