細胞生物學實驗

1、細胞生物學實驗是高等教育出版社于 2011 年出版的一本書。作者是王崇英和高慶祥。該教科書首先介紹了對常見實驗動物的理解，解剖儀器的使用，細胞生物學實驗的繪制方法和要求以及特殊顯微鏡的原理和應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上，學生將學習動物細胞的基本形態(tài)學觀察和顯微測量，細胞顯微攝影以及細胞核和線粒體的分類和分離。然后開始研究細胞化學：核酸細胞化學，酶細胞化學，a 啶橙熒光染色，免疫細胞化學；重新研究細胞的生理活性：細胞生理活性的實驗觀察和細胞分裂的形態(tài)學觀察；最后是綜合能力和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)：細胞的原代培養(yǎng)，細胞的亞培養(yǎng)，培養(yǎng)細胞的生長特性和形態(tài)分類，培養(yǎng)細胞的形態(tài)觀察和計數(shù)，細胞生長曲線的測定，細胞分裂指數(shù)，

2、細胞融合，早熟染色體凝集（PCC）的誘導，觀察和分析，正常細胞和腫瘤細胞的常規(guī)核型的檢測和分析。1.什么是細胞培養(yǎng)？它是指從活體動物中取出組織，將它們分散到單個細胞中（機械或酶消化），在體外模擬生理環(huán)境，并使其在人工培養(yǎng)條件下生長，分裂和繁殖，抑制細胞接觸并老化。 。通常有兩種細胞，一種是原代細胞，另一種是繼代培養(yǎng)細胞。原代細胞是指這樣的過程，其中動物組織被諸如胰酶或膠原酶的酶消化并分散以獲得單個細胞，然后這些單個細胞在培養(yǎng)容器中生長。大多數(shù)組織可以制備原代細胞，但制備方法略有不同，制備細胞的生長速度和難度也不同。不同的原代細胞具有不同的形態(tài)。通常，十代之內(nèi)的細胞稱為原代細胞。傳代細胞通常指無

3、限期繁殖的細胞系。從理論上講，這些細胞可以無限期傳代。實驗中經(jīng)常使用這種細胞，例如 Hela，293，Vero 等。2.細胞生長周期空閑期：從細胞接種到新培養(yǎng)容器中到附著之前的時間。此時間的長短取決于細胞類型，范圍從幾分鐘到幾小時不等。粘附期：細胞從自由狀態(tài)變化到粘附在培養(yǎng)皿表面并顯示出一定細胞形態(tài)的時期。潛伏期：細胞附著在壁上后，不會立即增殖，但會儲存必要的物質(zhì)和能量進行增殖。這個時間稱為等待時間。對數(shù)生長期：完成材料和能量存儲后，細胞開始大量增殖的時期。在此期間，細胞充滿活力且穩(wěn)定，我們的大部分實驗都在此期間進行。停藥期：隨著細胞的生長，細胞密度在增加。由于營養(yǎng)的消耗和細胞間接觸的抑制，細

4、胞的生長緩慢甚至停止。這時，我們將使細胞通過，以便細胞可以繼續(xù)增殖并保持旺盛的生命力。3.細胞生長的營養(yǎng)條件細胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)通常來自基本培養(yǎng)基（例如 DMEM 培養(yǎng)基）和血清?；九囵B(yǎng)基：主要提供氨基酸（蛋白質(zhì)的基本單位），維生素（細胞代謝中的輔酶成分），無機離子（K +，N a +等），碳水化合物（碳源和能源）等營養(yǎng)物質(zhì)激素。血清：主要提供基本培養(yǎng)基無法提供的某些生長因子和低分子營養(yǎng)素，此外還可以促進細胞黏附并中和有害的重金屬離子。如果僅提供不含血清的基本培養(yǎng)基，則大多數(shù)細胞將無法生長。血清對我們實驗的重要性是不言而喻的，那么合格的血清是哪種血清？合格的血清需要通過各種測試，包括無細菌，無真菌，無支原體和無病毒污染。血清通常為淡黃色透明液體，由于含有大量蛋白質(zhì)和其他成分，因此略帶粘性。以全金公司的 Tra