動物生物化學蛋白質(zhì)習題

1、第一章 蛋白質(zhì)（一）名詞解釋1 兩性離子（dipolarion）   2 必需氨基酸（essential amino acid）3 等電點(isoelectric point,pI)       4 稀有氨基酸(rare amino acid)5 非蛋白質(zhì)氨基酸(nonprotein amino acid)   6 構型(configuration)7 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(protein primary structure)   8 構象(conformation)9 蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(protein secondary structu

2、re) 10結(jié)構域(domain)11蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(protein tertiary structure)   12氫鍵(hydrogen bond) 13蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(protein quaternary structure) 14離子鍵(ionic bond)15超二級結(jié)構(super-secondary structure)     16疏水鍵(hydrophobic bond)   17范德華力( van der Waals force)       18鹽析(salting out)19鹽溶(salting

3、 in)           20蛋白質(zhì)的變性(denaturation)21蛋白質(zhì)的復性(renaturation)       22蛋白質(zhì)的沉淀作用(precipitation)23凝膠電泳（gel electrophoresis）     24層析（chromatography）(二) 填空題1蛋白質(zhì)多肽鏈中的肽鍵是通過一個氨基酸的_基和另一氨基酸的_基連接而形成的。2大多數(shù)蛋白質(zhì)中氮的含量較恒定，平均為_%，如測得1克樣品含氮量為10mg,則蛋白質(zhì)含量為_%。3在20種氨基酸中，酸性氨基

4、酸有_和_2種，具有羥基的氨基酸是_和_，能形成二硫鍵的氨基酸是_.4蛋白質(zhì)中的_、_和_3種氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白質(zhì)在280nm處有最大吸收值。5精氨酸的pI值為10.76,將其溶于pH7的緩沖液中，并置于電場中，則精氨酸應向電場的_方向移動。6組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸中，含有咪唑環(huán)的氨基酸是_，含硫的氨基酸有_和_。7蛋白質(zhì)的二級結(jié)構最基本的有兩種類型，它們是_和_。8-螺旋結(jié)構是由同一肽鏈的_和 _間的_鍵維持的，螺距為_,每圈螺旋含_個氨基酸殘基，每個氨基酸殘基沿軸上升高度為_。天然蛋白質(zhì)分子中的-螺旋大都屬于_手螺旋。9在蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構中，在環(huán)狀氨基酸_存在處局部螺旋

5、結(jié)構中斷。10球狀蛋白質(zhì)中有_側(cè)鏈的氨基酸殘基常位于分子表面而與水結(jié)合，而有_側(cè)鏈的氨基酸位于分子的內(nèi)部。11氨基酸與茚三酮發(fā)生氧化脫羧脫氨反應生成_色化合物，而_與茚三酮反應生成黃色化合物。12維持蛋白質(zhì)的一級結(jié)構的化學鍵有_和_；維持二級結(jié)構靠_鍵；維持三級結(jié)構和四級結(jié)構靠_鍵，其中包括_、_、_和_.13穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體的因素是_和_。14GSH的中文名稱是_，它的活性基團是_，它的生化功能是_。15加入低濃度的中性鹽可使蛋白質(zhì)溶解度_，這種現(xiàn)象稱為_，而加入高濃度的中性鹽，當達到一定的鹽飽和度時，可使蛋白質(zhì)的溶解度_并_,這種現(xiàn)象稱為_,蛋白質(zhì)的這種性質(zhì)常用于_。16用電泳方法分離蛋白質(zhì)

6、的原理，是在一定的pH條件下，不同蛋白質(zhì)的_、_和_不同，因而在電場中移動的_和_不同，從而使蛋白質(zhì)得到分離。17氨基酸處于等電狀態(tài)時，主要是以_形式存在，此時它的溶解度最小。18鑒定蛋白質(zhì)多肽鏈氨基末端常用的方法有_和_。19測定蛋白質(zhì)分子量的方法有_、_和_。20今有甲、乙、丙三種蛋白質(zhì)，它們的等電點分別為8.0、4.5和10.0,當在pH8.0緩沖液中，它們在電場中電泳的情況為：甲_，乙_，丙_。21當氨基酸溶液的pH=pI時，氨基酸以_離子形式存在，當pH>pI時，氨基酸以_離子形式存在。22谷氨酸的pK1(-COOH)2.19, pK2 (-NH+3 ) = 9.67, pKR

7、(R基)= 4.25,谷氨酸的等電點為_。23天然蛋白質(zhì)中的螺旋結(jié)構，其主鏈上所有的羰基氧與亞氨基氫都參與了鏈內(nèi)_鍵的形成，因此構象相當穩(wěn)定。24將分子量分別為a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三種蛋白質(zhì)混合溶液進行凝膠過濾層析，它們被洗脫下來的先后順序是_。25肌紅蛋白的含鐵量為0.34%，其最小分子量是_.血紅蛋白的含鐵量也是0.34%，但每分子含有4個鐵原子，血紅蛋白的分子量是_.26一個-螺旋片段含有180個氨基酸殘基，該片段中有_圈螺旋？該-螺旋片段的軸長為_.(三) 選擇題1在生理pH條件下，下列哪種氨基酸帶正電荷？A丙氨酸    

8、B酪氨酸     C賴氨酸D蛋氨酸     E異亮氨酸2下列氨基酸中哪一種是非必需氨基酸？A亮氨酸     B酪氨酸     C賴氨酸D蛋氨酸     E蘇氨酸3蛋白質(zhì)的組成成分中，在280nm處有最大吸收值的最主要成分是：A酪氨酸的酚環(huán)       B半胱氨酸的硫原子C肽鍵           D苯丙氨酸4下列4種氨基酸中哪個有堿性側(cè)鏈？A脯氨酸   B苯丙氨酸   C異亮氨酸   D

9、賴氨酸5下列哪種氨基酸屬于亞氨基酸？A絲氨酸   B脯氨酸   C亮氨酸   D組氨酸6下列哪一項不是蛋白質(zhì)-螺旋結(jié)構的特點？A天然蛋白質(zhì)多為右手螺旋B肽鏈平面充分伸展C每隔3.6個氨基酸螺旋上升一圈。D每個氨基酸殘基上升高度為0.15nm.7下列哪一項不是蛋白質(zhì)的性質(zhì)之一？A處于等電狀態(tài)時溶解度最小   B加入少量中性鹽溶解度增加C變性蛋白質(zhì)的溶解度增加   D有紫外吸收特性8下列氨基酸中哪一種不具有旋光性？ALeu   BAla   CGly   DSer   EVal9在下列檢測蛋白質(zhì)的方法中，哪一

10、種取決于完整的肽鏈？A凱氏定氮法   B雙縮尿反應   C紫外吸收法   D茚三酮法10下列哪種酶作用于由堿性氨基酸的羧基形成的肽鍵？A糜蛋白酶   B羧肽酶   C氨肽酶   D胰蛋白酶11下列有關蛋白質(zhì)的敘述哪項是正確的？A蛋白質(zhì)分子的凈電荷為零時的pH值是它的等電點B大多數(shù)蛋白質(zhì)在含有中性鹽的溶液中會沉淀析出C由于蛋白質(zhì)在等電點時溶解度最大，所以沉淀蛋白質(zhì)時應遠離等電點D以上各項均不正確12下列關于蛋白質(zhì)結(jié)構的敘述，哪一項是錯誤的？A氨基酸的疏水側(cè)鏈很少埋在分子的中心部位B電荷的氨基酸側(cè)鏈常在分子的外側(cè)，面向水相C白質(zhì)的一級結(jié)構

11、在決定高級結(jié)構方面是重要因素之一D白質(zhì)的空間結(jié)構主要靠次級鍵維持13列哪些因素妨礙蛋白質(zhì)形成-螺旋結(jié)構？A脯氨酸的存在       B氨基酸殘基的大的支鏈C性氨基酸的相鄰存在     D性氨基酸的相鄰存在E以上各項都是14于-折疊片的敘述，下列哪項是錯誤的？A-折疊片的肽鏈處于曲折的伸展狀態(tài)B的結(jié)構是借助于鏈內(nèi)氫鍵穩(wěn)定的C有的-折疊片結(jié)構都是通過幾段肽鏈平行排列而形成的D基酸之間的軸距為0.35nm15持蛋白質(zhì)二級結(jié)構穩(wěn)定的主要作用力是：A鹽鍵   B疏水鍵   C氫鍵   D二硫鍵16維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構穩(wěn)定的因素

12、是：A肽鍵   B二硫鍵   C離子鍵   D氫鍵   E次級鍵17凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)時，從層析柱上先被洗脫下來的是：A分子量大的       B分子量小的C電荷多的       D帶電荷少的18. 下列哪項與蛋白質(zhì)的變性無關？A. 肽鍵斷裂       B氫鍵被破壞C離子鍵被破壞     D疏水鍵被破壞19蛋白質(zhì)空間構象的特征主要取決于下列哪一項？A多肽鏈中氨基酸的排列順序   B次級鍵C鏈內(nèi)及鏈間的二硫鍵    

13、;   D溫度及pH20下列哪個性質(zhì)是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的？A膠體性質(zhì)       B兩性性質(zhì)C沉淀反應       D變性性質(zhì)E雙縮脲反應21氨基酸在等電點時具有的特點是：A不帶正電荷       B不帶負電荷CA和B       D溶解度最大E在電場中不泳動22蛋白質(zhì)的一級結(jié)構是指：A蛋白質(zhì)氨基酸的種類和數(shù)目   B蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序C蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤繞 D包括A,B和C(四) 是非判斷題( ) 1氨基酸與茚三酮反應都產(chǎn)生藍紫色化合

14、物。( ) 2因為羧基碳和亞氨基氮之間的部分雙鍵性質(zhì)，所以肽鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。( ) 3所有的蛋白質(zhì)都有酶活性。( ) 4-碳和羧基碳之間的鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。( ) 5多數(shù)氨基酸有D-和L-兩種不同構型，而構型的改變涉及共價鍵的破裂。( ) 6所有氨基酸都具有旋光性。( ) 7構成蛋白質(zhì)的20種氨基酸都是必需氨基酸。( ) 8蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序在很大程度上決定了它的構象。( ) 9一氨基一羧基氨基酸的pI為中性，因為-COOH和-NH2 的解離度相同。( ) 10蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)立體結(jié)構的破壞，因此涉及肽鍵的斷裂。( ) 11蛋白質(zhì)是生物大分子，但并不都具有四級結(jié)構。( ) 12血

15、紅蛋白和肌紅蛋白都是氧的載體，前者是一個典型的變構蛋白，在與氧結(jié)合過程中呈現(xiàn)變構效應，而后者卻不是。( ) 13.用FDNB法和Edman降解法測定蛋白質(zhì)多肽鏈N-端氨基酸的原理是相同的。( ) 14并非所有構成蛋白質(zhì)的20種氨基酸的-碳原子上都有一個自由羧基和一個自由氨基。( ) 15蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，它的酸堿性質(zhì)主要取決于肽鏈上可解離的R基團。( ) 16在具有四級結(jié)構的蛋白質(zhì)分子中，每個具有三級結(jié)構的多肽鏈是一個亞基。( ) 17所有的肽和蛋白質(zhì)都能和硫酸銅的堿性溶液發(fā)生雙縮尿反應。( ) 18一個蛋白質(zhì)分子中有兩個半胱氨酸存在時，它們之間可以形成兩個二硫鍵。( ) 19鹽析法可使蛋白

16、質(zhì)沉淀，但不引起變性，所以鹽析法常用于蛋白質(zhì)的分離制備。( ) 20蛋白質(zhì)的空間結(jié)構就是它的三級結(jié)構。( ) 21維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構最重要的作用力是氫鍵。( )22具有四級結(jié)構的蛋白質(zhì)，它的每個亞基單獨存在時仍能保存蛋白質(zhì)原有的生物活性。( )23變性蛋白質(zhì)的溶解度降低，是由于中和了蛋白質(zhì)分子表面的電荷及破 壞了外層的水膜所引起的。( )24蛋白質(zhì)二級結(jié)構的穩(wěn)定性是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的，肽鏈上每個肽鍵都參與氫鍵的形成。（五）問答題1什么是蛋白質(zhì)的一級結(jié)構？為什么說蛋白質(zhì)的一級結(jié)構決定其空間結(jié)構？2什么是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構？蛋白質(zhì)的空間結(jié)構與其生物功能有何關系？3蛋白質(zhì)的螺旋結(jié)構有何特點？4蛋白質(zhì)的折

17、疊結(jié)構有何特點？5舉例說明蛋白質(zhì)的結(jié)構與其功能之間的關系。6什么是蛋白質(zhì)的變性作用和復性作用？蛋白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會發(fā)生改變？7簡述蛋白質(zhì)變性作用的機制。8蛋白質(zhì)有哪些重要功能9下列試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學的研究中：CNBr、異硫氰酸苯酯、丹黃酰氯、脲、6mol/L HCl、-巰基乙醇、水合茚三酮、過甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一個最適合完成以下各項任務？（1）測定小肽的氨基酸序列。（2）鑒定肽的氨基末端殘基。（3）不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性；如有二硫鍵存在時還需加什么試劑？（4）在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（4）在蛋氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（5）在賴氨酸和精氨酸殘基羧基側(cè)水解

18、肽鍵。10根據(jù)蛋白質(zhì)一級氨基酸序列可以預測蛋白質(zhì)的空間結(jié)構。假設有下列氨基酸序列（如圖）：1       5       10       15 Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-  20       25   27Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg（1）預測在該序列的哪一部位可能會出彎或-轉(zhuǎn)角。（2）何處可能形

19、成鏈內(nèi)二硫鍵？（3）假設該序列只是大的球蛋白的一部分，下面氨基酸殘基中哪些可能分布在蛋白的外表面，哪些分布在內(nèi)部？天冬氨酸；異亮氨酸；蘇氨酸；纈氨酸；谷氨酰胺；賴氨酸三、 習題解答（一）名詞解釋1兩性離子：指在同一氨基酸分子上含有等量的正負兩種電荷，又稱兼性離子或偶極離子。2必需氨基酸：指人體（和其它哺乳動物）自身不能合成，機體又必需，需要從飲食中獲得的氨基酸。3. 氨基酸的等電點：指氨基酸的正離子濃度和負離子濃度相等時的pH值，用符號pI表示。4稀有氨基酸：指存在于蛋白質(zhì)中的20種常見氨基酸以外的其它罕見氨基酸，它們是正常氨基酸的衍生物。5非蛋白質(zhì)氨基酸：指不存在于蛋白質(zhì)分子中而以游離狀態(tài)和

20、結(jié)合狀態(tài)存在于生物體的各種組織和細胞的氨基酸。6構型：指在立體異構體中不對稱碳原子上相連的各原子或取代基團的空間排布。構型的轉(zhuǎn)變伴隨著共價鍵的斷裂和重新形成。7蛋白質(zhì)的一級結(jié)構：指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，以及二硫鍵的位置。8構象：指有機分子中，不改變共價鍵結(jié)構，僅單鍵周圍的原子旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的原子的空間排布。一種構象改變?yōu)榱硪环N構象時，不涉及共價鍵的斷裂和重新形成。構象改變不會改變分子的光學活性。 9蛋白質(zhì)的二級結(jié)構：指在蛋白質(zhì)分子中的局部區(qū)域內(nèi)，多肽鏈沿一定方向盤繞和折疊的方式。10結(jié)構域：指蛋白質(zhì)多肽鏈在二級結(jié)構的基礎上進一步卷曲折疊成幾個相對獨立的近似球形的組裝體。11蛋白質(zhì)的三級結(jié)

21、構：指蛋白質(zhì)在二級結(jié)構的基礎上借助各種次級鍵卷曲折疊成特定的球狀分子結(jié)構的構象。12氫鍵：指負電性很強的氧原子或氮原子與N-H或O-H的氫原子間的相互吸引力。13蛋白質(zhì)的四級結(jié)構：指多亞基蛋白質(zhì)分子中各個具有三級結(jié)構的多肽鏈以適當方式聚合所呈現(xiàn)的三維結(jié)構。14離子鍵：帶相反電荷的基團之間的靜電引力，也稱為靜電鍵或鹽鍵。15超二級結(jié)構：指蛋白質(zhì)分子中相鄰的二級結(jié)構單位組合在一起所形成的有規(guī)則的、在空間上能辨認的二級結(jié)構組合體。16疏水鍵：非極性分子之間的一種弱的、非共價的相互作用。如蛋白質(zhì)分子中的疏水側(cè)鏈避開水相而相互聚集而形成的作用力。17范德華力：中性原子之間通過瞬間靜電相互作用產(chǎn)生的一種弱

22、的分子間的力。當兩個原子之間的距離為它們的范德華半徑之和時，范德華力最強。18鹽析：在蛋白質(zhì)溶液中加入一定量的高濃度中性鹽（如硫酸氨），使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀析出的現(xiàn)象稱為鹽析。19鹽溶：在蛋白質(zhì)溶液中加入少量中性鹽使蛋白質(zhì)溶解度增加的現(xiàn)象。20蛋白質(zhì)的變性作用：蛋白質(zhì)分子的天然構象遭到破壞導致其生物活性喪失的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)在受到光照、熱、有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵遭到破壞導致天然構象的破壞，但其一級結(jié)構不發(fā)生改變。21蛋白質(zhì)的復性：指在一定條件下，變性的蛋白質(zhì)分子恢復其原有的天然構象并恢復生物活性的現(xiàn)象。22蛋白質(zhì)的沉淀作用：在外界因素影響下，蛋白質(zhì)分子失去水化膜或被中和其所帶電

23、荷，導致溶解度降低從而使蛋白質(zhì)變得不穩(wěn)定而沉淀的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的沉淀作用。23凝膠電泳：以凝膠為介質(zhì)，在電場作用下分離蛋白質(zhì)或核酸等分子的分離純化技術。24層析：按照在移動相（可以是氣體或液體）和固定相（可以是液體或固體）之間的分配比例將混合成分分開的技術。（二）填空題1   氨；羧基； 2   16 ；6.25   3   谷氨酸；天冬氨酸；絲氨酸；蘇氨酸4   苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；紫外吸收   5   負極 6   組氨酸；半胱氨酸；蛋氨酸   7   -螺旋結(jié)構；-折疊結(jié)構8 C=O

24、；N=H；氫；0.54nm； 3.6；0.15nm；右9 脯氨酸；羥脯氨酸   10極性；疏水性   11藍紫色；脯氨酸12肽鍵；二硫鍵；氫鍵；次級鍵；氫鍵；離子鍵；疏水鍵；范德華力13表面的水化膜；同性電荷   14谷胱甘肽；巰基15增加；鹽溶；減??；沉淀析出；鹽析；蛋白質(zhì)分離16帶電荷量；分子大小；分子形狀；方向；速率 17兩性離子；最小 18FDNB法（2,4-二硝基氟苯法）；Edman降解法（苯異硫氫酸酯法）19沉降法；凝膠過濾法；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE法）20不動；向正極移動；向負極移動；   21兩性離子；負；223.

25、2223氫鍵；24C；a；b   2516 672； 66 687；   2650圈；27nm（三） 選擇題1D：5種氨基酸中只有賴氨酸為堿性氨基酸，其等電點為9.74,大于生理pH值，所以帶正電荷。2B：人（或哺乳動物）的必需氨基酸包括賴氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸8種，酪氨酸不是必需氨基酸。3A：酪氨酸和苯丙氨酸在280nm處的克分子消光系數(shù)分別為540何120,所以酪氨酸比苯丙氨酸有較大吸收，而且大多數(shù)蛋白質(zhì)中都含有酪氨酸。肽鍵的最大吸收在215nm,半胱氨酸的硫原子在280nm和215nm均無明顯吸收。4D：在此4種氨基酸中，只

26、有賴氨酸的R基團可接受氫質(zhì)子，作為堿，而其它3種氨基酸均無可解離的R側(cè)鏈。5B：氨基酸的-碳上連接的是亞氨基而不是氨基，所以實際上屬于一種亞氨基酸，而其它氨基酸的-碳上都連接有氨基，是氨基酸。6B：天然蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構的特點是，肽鏈圍繞中心軸旋轉(zhuǎn)形成螺旋結(jié)構，而不是充分伸展的結(jié)構。另外在每個螺旋中含有3.6個氨基酸殘基，螺距為0.54nm,每個氨基酸殘基上升高度為0.15nm,所以B不是-螺旋結(jié)構的特點。7C：蛋白質(zhì)處于等電點時，凈電荷為零，失去蛋白質(zhì)分子表面的同性電荷互相排斥的穩(wěn)定因素，此時溶解度最?。患尤肷倭恐行喳}可增加蛋白質(zhì)的溶解度，即鹽溶現(xiàn)象；因為蛋白質(zhì)中含有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸

27、，所以具有紫外吸收特性；變性蛋白質(zhì)的溶解度減小而不是增加，因為蛋白質(zhì)變性后，近似于球狀的空間構象被破壞，變成松散的結(jié)構，原來處于分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈暴露于分子表面，減小了與水分子的作用，從而使蛋白質(zhì)溶解度減小并沉淀。8C：甘氨酸的-碳原子連接的4個原子和基團中有2個是氫原子，所以不是不對稱碳原子，沒有立體異構體，所以不具有旋光性。9B：雙縮脲反應是指含有兩個或兩個以上肽鍵的化合物（肽及蛋白質(zhì)）與稀硫酸銅的堿性溶液反應生成紫色（或青紫色）化合物的反應，產(chǎn)生顏色的深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比，所以可用于蛋白質(zhì)的定量測定。茚三酮反應是氨基酸的游離的-NH與茚三酮之間的反應；凱氏定氮法是測定蛋白質(zhì)消

28、化后產(chǎn)生的氨；紫外吸收法是通過測定蛋白質(zhì)的紫外消光值定量測定蛋白質(zhì)的方法，因為大多數(shù)蛋白質(zhì)都含有酪氨酸，有些還含有色氨酸或苯丙氨酸，這三種氨基酸具有紫外吸收特性，所以紫外吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比。10D：靡蛋白酶即胰凝乳蛋白酶作用于酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的羧基參與形成的肽鍵；羧肽酶是從肽鏈的羧基端開始水解肽鍵的外肽酶；氨肽酶是從肽鏈的氨基端開始水解肽鍵的外肽酶；胰蛋白酶可以專一地水解堿性氨基酸的羧基參與形成的肽鍵。11A：蛋白質(zhì)的等電點是指蛋白質(zhì)分子內(nèi)的正電荷桌能總數(shù)與負電荷總數(shù)相等時的pH值。蛋白質(zhì)鹽析的條件是加入足量的中性鹽，如果加入少量中性鹽不但不會使蛋白質(zhì)沉淀析出反而會增加其溶解度，

29、即鹽溶。在等電點時，蛋白質(zhì)的凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小，在溶液中易于沉淀，所以通常沉淀蛋白質(zhì)應調(diào)pH至等電點。12A：在蛋白質(zhì)的空間結(jié)構中，通常是疏水性氨基酸的側(cè)鏈存在于分子的內(nèi)部，因為疏水性基團避開水相而聚集在一起，而親水側(cè)鏈分布在分子的表面以充分地與水作用；蛋白質(zhì)的一級結(jié)構是多肽鏈中氨基酸的排列順序，此順序即決定了肽鏈形成二級結(jié)構的類型以及更高層次的結(jié)構；維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構的作用力主要是次級鍵。13E：脯氨酸是亞氨基酸,參與形成肽鍵后不能再與C=O 氧形成氫鍵，因此不能形成-螺旋結(jié)構;氨基酸殘基的支鏈大時，空間位阻大，妨礙螺旋結(jié)構的形成；連續(xù)出現(xiàn)多個酸性氨基酸或堿性氨

30、基酸時，同性電荷會互相排斥，所以不能形成穩(wěn)定的螺旋結(jié)構。14C：-折疊結(jié)構是一種常見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構的類型，分為平行和反平行兩種排列方式，所以題中C項的說法是錯誤的。在-折疊結(jié)構中肽鏈處于曲折的伸展狀態(tài)，氨基酸殘基之間的軸心距離為0.35nm, 相鄰肽鏈（或同一肽鏈中的幾個肽段）之間形成氫鍵而使結(jié)構穩(wěn)定。15C：蛋白質(zhì)二級結(jié)構的兩種主要類型是-螺旋結(jié)構和-折疊結(jié)構。在-螺旋結(jié)構中肽鏈上的所有氨基酸殘基均參與氫鍵的形成以維持螺旋結(jié)構的穩(wěn)定。在-折疊結(jié)構中，相鄰肽鏈或肽段之間形成氫鍵以維持結(jié)構的穩(wěn)定，所以氫鍵是維持蛋白質(zhì)二級結(jié)構穩(wěn)定的主要作用力。離子鍵、疏水鍵和范德華力在維持蛋白質(zhì)的三級結(jié)構和四級

31、結(jié)構中起重要作用，而二硫鍵在穩(wěn)定蛋白質(zhì)的三級結(jié)構中起一定作用。16E：肽鍵是連接氨基酸的共價鍵，它是維持蛋白質(zhì)一級結(jié)構的作用力；而硫鍵是2分子半胱氨酸的巰基脫氫氧化形成的共價鍵，它可以存在于2條肽鏈之間也可以由存在于同一條肽鏈的2個不相鄰的半胱氨酸之間，它在維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構中起一定作用，但不是最主要的。離子鍵和氫鍵都是維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構穩(wěn)定的因素之一，但此項選擇不全面，也不確切。次級鍵包括氫鍵、離子鍵、疏水鍵和范德華力，所以次項選擇最全面、確切。17A：用凝膠過濾柱層析分離蛋白質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同進行分離的方法，與蛋白質(zhì)分子的帶電狀況無關。在進行凝膠過濾柱層析過程中，比凝膠網(wǎng)眼大的分子

32、不能進入網(wǎng)眼內(nèi)，被排阻在凝膠顆粒之外。比凝膠網(wǎng)眼小的顆?？梢赃M入網(wǎng)眼內(nèi)，分子越小進入網(wǎng)眼的機會越多，因此不同大小的分子通過凝膠層析柱時所經(jīng)的路程距離不同，大分子物質(zhì)經(jīng)過的距離短而先被洗出，小分子物質(zhì)經(jīng)過的距離長，后被洗脫，從而使蛋白質(zhì)得到分離。18A：蛋白質(zhì)的變性是其空間結(jié)構被破壞，從而引起理化性質(zhì)的改變以及生物活性的喪失，但其一級結(jié)構不發(fā)生改變，所以肽鍵沒有斷裂。蛋白質(zhì)變性的機理是維持其空間結(jié)構穩(wěn)定的作用力被破壞，氫鍵、離子鍵和疏水鍵都是維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構的作用力，當這些作用力被破壞時空間結(jié)構就被破壞并引起變性，所以與變性有關。   19A：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構即蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的

33、排列順序決定蛋白質(zhì)的空間構象，因為一級結(jié)構中包含著形成空間結(jié)構所需要的所有信息，氨基酸殘基的結(jié)構和化學性質(zhì)決定了所組成的蛋白質(zhì)的二級結(jié)構的類型以及三級、四級結(jié)構的構象；二硫鍵和次級鍵都是維持蛋白質(zhì)空間構象穩(wěn)定的作用力，但不決定蛋白質(zhì)的構象；溫度及pH影響蛋白質(zhì)的溶解度、解離狀態(tài)、生物活性等性質(zhì)，但不決定蛋白質(zhì)的構象。20B：氨基酸即有羧基又有氨基，可以提供氫質(zhì)子也可以接受氫質(zhì)子，所以即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。由氨基酸組成的蛋白質(zhì)分子上也有可解離基團，如谷氨酸和天冬氨酸側(cè)鏈基團的羧基以及賴氨酸的側(cè)鏈氨基，所以也是兩性電解質(zhì)，這是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的性質(zhì)；膠體性質(zhì)是蛋白質(zhì)所具有的性質(zhì)，沉淀反應

34、是蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)被破壞產(chǎn)生的現(xiàn)象；變性是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構被破壞后性質(zhì)發(fā)生改變并喪失生物活性的現(xiàn)象，這三種現(xiàn)象均與氨基酸無關。21E： 氨基酸分子上的正電荷數(shù)和負電荷數(shù)相等時的pH值是其等電點，即凈電荷為零，此時在電場中不泳動。由于凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小。22B：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，蛋白質(zhì)中所含氨基酸的種類和數(shù)目相同但排列順序不同時，其一級結(jié)構以及在此基礎上形成的空間結(jié)構均有很大不同。蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤繞是蛋白質(zhì)二級結(jié)構的內(nèi)容，所以B項是正確的。（四）是非判斷題1錯：脯氨酸與茚三酮反應產(chǎn)生黃色化合物，其它氨基酸與茚三酮反應產(chǎn)生

35、藍色化合物。2對：在肽平面中，羧基碳和亞氨基氮之間的鍵長為0.132nm，介于CN 單鍵和CN 雙鍵之間，具有部分雙鍵的性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。3錯：蛋白質(zhì)具有重要的生物功能，有些蛋白質(zhì)是酶，可催化特定的生化反應，有些蛋白質(zhì)則具有其它的生物功能而不具有催化活性，所以不是所有的蛋白質(zhì)都具有酶的活性。4錯：-碳和羧基碳之間的鍵是CC單鍵，可以自由旋轉(zhuǎn)。5對：在20種氨基酸中，除甘氨酸外都具有不對稱碳原子，所以具有L-型和D-型2種不同構型，這兩種不同構型的轉(zhuǎn)變涉及到共價鍵的斷裂和從新形成。6錯：由于甘氨酸的-碳上連接有2個氫原子，所以不是不對稱碳原子，沒有2種不同的立體異構體，所以不具有旋光性。其它常

36、見的氨基酸都具有不對稱碳原子，因此具有旋光性。7錯：必需氨基酸是指人（或哺乳動物）自身不能合成機體又必需的氨基酸，包括8種氨基酸。其它氨基酸人體自身可以合成，稱為非必需氨基酸。8對：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構是蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，不同氨基酸的結(jié)構和化學性質(zhì)不同，因而決定了多肽鏈形成二級結(jié)構的類型以及不同類型之間的比例以及在此基礎上形成的更高層次的空間結(jié)構。如在脯氨酸存在的地方-螺旋中斷，R側(cè)鏈具有大的支鏈的氨基酸聚集的地方妨礙螺旋結(jié)構的形成，所以一級結(jié)構在很大程度上決定了蛋白質(zhì)的空間構象。9錯：一氨基一羧基氨基酸為中性氨基酸，其等電點為中性或接近中性，但氨基和羧基的解離度，即pK值不同。10

37、錯：蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)空間結(jié)構的破壞，這是由于維持蛋白質(zhì)構象穩(wěn)定的作用力次級鍵被破壞所造成的，但變性不引起多肽鏈的降解，即肽鏈不斷裂。11對：有些蛋白質(zhì)是由一條多肽鏈構成的，只具有三級結(jié)構，不具有四級結(jié)構，如肌紅蛋白。12對：血紅蛋白是由4個亞基組成的具有4級結(jié)構的蛋白質(zhì)，當血紅蛋白的一個亞基與氧結(jié)合后可加速其它亞基與氧的結(jié)合，所以具有變構效應。肌紅蛋白是僅有一條多肽鏈的蛋白質(zhì)，具有三級結(jié)構，不具有四級結(jié)構，所以在與氧的結(jié)合過程中不表現(xiàn)出變構效應。13錯：Edman降解法是多肽鏈N端氨基酸殘基被苯異硫氫酸酯修飾，然后從多肽鏈上切下修飾的殘基，經(jīng)層析鑒定可知N端氨基酸的種類，而余下的多肽鏈仍為

38、一條完整的多肽鏈，被回收后可繼續(xù)進行下一輪Edman反應，測定N末端第二個氨基酸。反應重復多次就可連續(xù)測出多肽鏈的氨基酸順序。FDNB法（Sanger反應）是多肽鏈N末端氨基酸與FDNB（2,4-二硝基氟苯）反應生成二硝基苯衍生物（DNP-蛋白），然后將其進行酸水解，打斷所有肽鍵，N末端氨基酸與二硝基苯基結(jié)合牢固，不易被酸水解。水解產(chǎn)物為黃色的N端DNP-氨基酸和各種游離氨基酸。將DNP-氨基酸抽提出來并進行鑒定可知N端氨基酸的種類，但不能測出其后氨基酸的序列。14對：大多數(shù)氨基酸的-碳原子上都有一個自由氨基和一個自由羧基，但脯氨酸和羥脯氨酸的-碳原子上連接的氨基氮與側(cè)鏈的末端碳共價結(jié)合形成環(huán)

39、式結(jié)構，所以不是自由氨基。15對：蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的大分子，有些氨基酸的R側(cè)鏈具有可解離基團，如羧基、氨基、咪唑基等等。這些基團有的可釋放H+ ,有的可接受H+ ,所以使得蛋白質(zhì)分子即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。蛋白質(zhì)分子中可解離R基團的種類和數(shù)量決定了蛋白質(zhì)提供和接受H+ 的能力，即決定了它的酸堿性質(zhì)。16對：在具有四級結(jié)構的蛋白質(zhì)分子中，每個具有三級結(jié)構的多肽鏈是一個亞基。17錯：具有兩個或兩個以上肽鍵的物質(zhì)才具有類似于雙縮脲的結(jié)構，具有雙縮脲反應，而二肽只具有一個肽鍵，所以不具有雙縮脲反應。18錯：二硫鍵是由兩個半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以兩個半胱氨酸只能形成一個二硫鍵。19對

40、：鹽析引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素（蛋白質(zhì)分子表面的水化膜及所帶同性電荷互相排斥），從而使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀，但并未破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構，所以不引起變性。根據(jù)不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度分段鹽析可將蛋白質(zhì)進行分離和純化。20錯：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構包括二級結(jié)構、三級結(jié)構和四級結(jié)構三個層次，三級結(jié)構只是其中一個層次。21錯：維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構的作用力有氫鍵、離子鍵、疏水鍵、范德華力以及二硫鍵，其中最重要的是疏水鍵。22錯：具有四級結(jié)構的蛋白質(zhì)，只有所有的亞基以特定的適當方式組裝在一起時才具有生物活性，缺少一個亞基或單獨一個亞基存在時都不具有生物活性。23錯：蛋白質(zhì)

41、變性是由于維持蛋白質(zhì)構象穩(wěn)定的作用力（次級鍵和而硫鍵）被破壞從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構被破壞并山個喪失生物活性的現(xiàn)象。次級鍵被破壞以后，蛋白質(zhì)結(jié)構松散，原來聚集在分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈伸向外部，減弱了蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用，因而使溶解度將低。24錯：蛋白質(zhì)二級結(jié)構的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如-螺旋結(jié)構和-折疊結(jié)構中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構的作用。但并非肽鏈中所有的肽鍵都參與氫鍵的形成，如脯氨酸與相鄰氨基酸形成的肽鍵，以及自由回轉(zhuǎn)中的有些肽鍵不能形成鏈內(nèi)氫鍵。（五） 問答題（解題要點）1答：蛋白質(zhì)一級結(jié)構指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸殘基的排列順序。因為蛋白質(zhì)分子肽鏈的排列順序包含了自動形成復雜的三維結(jié)構（即正確的空間構象）所需要的全部信息，所以一級結(jié)構決定其高級結(jié)構。2答：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構是指蛋白質(zhì)分子中原子和基團在三維空間上的排列、分布及肽鏈走向。蛋白質(zhì)的空間結(jié)構決定蛋白質(zhì)的功能