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1、實(shí)驗(yàn)七尿液干化學(xué)分析儀Urinary Chemical An alyzer實(shí)驗(yàn)原理1 儀器工作原理多聯(lián)試帶模塊與尿樣中相應(yīng)成分發(fā)生特異性呈色反響, 顏色深淺與相應(yīng)物質(zhì)濃度成正比。 光源掃描各模塊產(chǎn)生的反射光,經(jīng)球面積分儀 的濾光片得到單色光,照射光電二極管轉(zhuǎn)化為電信號(hào)。微處理系統(tǒng)結(jié)合參考系統(tǒng) 將電信號(hào)校正為測(cè)定值,以定性或半定量方式打印出結(jié)果。2. 試帶根本結(jié)構(gòu) 如圖5-3,碘酸鹽層可破壞尿中維生素 C等復(fù)原性物質(zhì), 消除干擾;無(wú)此層的試帶含一個(gè)檢測(cè)維生素 C的模塊,以便進(jìn)行有關(guān)工程的 校正。圖5-3尿液干化學(xué)分析儀試劑塊組成示意圖3. 試帶模塊反響原理各模塊反響的原理、參考范圍、常見(jiàn)干擾工程
2、等見(jiàn)表 5-10。表5-10 尿液干化學(xué)分析儀檢查工程、原理、參考范圍及主要干擾因素檢測(cè)工程反響原理靈敏度參考范圍干擾因素假陽(yáng)性假陰性酸堿度酸堿指示劑法4.59.057標(biāo)本久置后,細(xì)菌繁試帶浸尿時(shí)間過(guò)(pH)殖或CO2喪失,pH個(gè)長(zhǎng),pH J蛋白pH指示劑蛋白對(duì)白蛋白敏感陰性pH > 8,奎寧、磺胺pH V 3,高濃度青(PRO)質(zhì)誤差法(70100mg/L),對(duì)嘧啶、聚乙烯吡咯酮霉素,高鹽,球蛋球蛋白、粘蛋白、等藥物,季銨類(lèi)消毒白、本周蛋白等非本周蛋白敏感性劑電解質(zhì)蛋白差葡萄糖葡萄糖氧化酶250mg/L陰性過(guò)氧化物、強(qiáng)氧化劑高VitC、乙酰乙(GLU)法污染酸,L-多巴代謝物,高比密低
3、pH尿酮體亞硝基鐵氰化乙酰乙酸:50陰性苯丙酮、L-多巴代謝酮體以性羥丁酸(KET)鈉法100mg/L ;丙酮:物、為主,陳舊尿400700mg/L ;與&羥丁酸不反響隱血過(guò)氧化物酶法Hb0.30.5mg/L ;陰性肌紅蛋白、易熱性VitC、蛋白尿、糖(BLD)RBC V 10/訕觸酶、氧化劑和菌尿尿膽紅素偶氮法5mg/L陰性吩噻嗪類(lèi)藥物VitC、亞硝酸鹽、(BIL)光照尿膽原偶氮法或Ehrich10mg/L陰性或弱吩噻嗪類(lèi)藥物、膽色亞硝酸鹽、光照、(UBG)反響陽(yáng)性素原、膽紅素、吲哚重氮藥物亞硝酸鹽偶氮法0.50.6mg/L陰性陳舊尿、亞硝酸鹽或pH V 5、尿量過(guò)(NIT)偶氮試劑
4、污染、食物多、食物硝酸鹽含硝酸鹽含量豐富量過(guò)低、尿在膀胱內(nèi)停留V 4h、非含硝酸鹽復(fù)原酶細(xì)菌感染、VitC、亞硝酸鹽白細(xì)胞中性粒細(xì)胞酯25/ 4陰性甲醛、氧化劑、膽紅以淋巴或單核細(xì)(LEU/酶法素、呋喃類(lèi)藥胞為主、蛋白、慶WBC)大霉素比密多聚電解質(zhì)中1.0101.0301.0151.02電解質(zhì)性尿蛋白致堿性尿致SGJ(SG)H+解離量與離5SGf子濃度相關(guān)維生素C酸性環(huán)境中還50 mg/L陰性巰基化合物、胱氨堿性尿(VitC)原染料酸、內(nèi)源性酚儀器組成1 機(jī)械系統(tǒng) 將試帶傳送至預(yù)定檢測(cè)區(qū),檢測(cè)完成后送到廢物盒。2 光學(xué)系統(tǒng) 光線照射到試帶外表產(chǎn)生反射光,反射光強(qiáng)度與反響顏色成正比。不同強(qiáng)度的
5、反射光經(jīng)光電轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行處理。(1) 光源:提供特定波長(zhǎng)的光源如發(fā)光二極管 (light emitting diode,LED)。(2) 單色裝置:球面積分儀使模塊外表的反射光轉(zhuǎn)變成單色光。(3) 光電檢測(cè)器:將反射光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),如電荷耦合器件( charge coupled device, CCD)。3 電路系統(tǒng) 將電信號(hào)放大,經(jīng)模/數(shù)轉(zhuǎn)換后送微處理器(computer unit, CPU)處理,計(jì)算最終檢測(cè)結(jié)果。然后將結(jié)果輸出到屏幕顯示并打印。4 微處理器 除了與參照系統(tǒng)比擬,處理和校正檢測(cè)信號(hào)外,還控制整個(gè) 儀器運(yùn)作。尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖5-4。圖5-4尿干化學(xué)分析儀結(jié)構(gòu)示意
6、圖試劑器材1 試劑人工尿質(zhì)控液低濃度和高濃度各I份2 器材 尿液干化學(xué)分析儀、尿干化學(xué)試帶。操作步驟1 開(kāi)機(jī) 翻開(kāi)電源開(kāi)關(guān),等待儀器自檢完成后,進(jìn)入主菜單。2. 檢測(cè)質(zhì)控試帶 將質(zhì)控試帶置于檢測(cè)槽內(nèi),啟動(dòng)儀器運(yùn)行鍵,自動(dòng)檢測(cè)。 待儀器打印出質(zhì)控結(jié)果,顯示“正常后,取回質(zhì)控帶保存。3. 浸漬試帶 將試帶完全浸入尿樣中12s,取出,吸干試帶多余的尿樣。4. 標(biāo)本檢測(cè)同步驟2,直到儀器自行打印報(bào)告或?qū)?shù)據(jù)輸出。性能評(píng)價(jià)目前各醫(yī)院使用的尿液分析儀的廠家、種類(lèi)不一,型號(hào)各異,但其 性能評(píng)價(jià)及儀器的校正均應(yīng)包括以下5個(gè)方面。1校正儀器1按儀器制造商規(guī)定的要求,調(diào)正儀器使其處于最正確工作狀態(tài),包括 儀器安裝
7、的位置、工作室溫度和濕度、檢測(cè)速度、打印顯示功能是否在規(guī)定范 圍之內(nèi)。防止陽(yáng)光等其他光源的直接照射、外源性振動(dòng)、外源性電源干擾等。2檢查儀器檢測(cè)系統(tǒng):用標(biāo)準(zhǔn)試帶校正條對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè),觀察其是 否在規(guī)定的范圍內(nèi)。2. 檢查儀器和多聯(lián)試帶的準(zhǔn)確性按儀器規(guī)定的測(cè)定范圍配制一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)物,在嚴(yán)格操作的前提下,每份標(biāo)準(zhǔn)物重復(fù)檢測(cè) 3次,觀察其符合程度。3檢查儀器和多聯(lián)試帶的精確性取人工尿質(zhì)控液低濃度和高濃度各1份和自然尿標(biāo)本正常尿和異常尿各1份,連續(xù)檢測(cè) 20次,觀察每份標(biāo)本每次檢測(cè)是否在靶值允許的范圍內(nèi)一般每次檢測(cè)最多相差一個(gè)定性 等級(jí)。4評(píng)價(jià)敏感性S和特異性Sp將尿液干化學(xué)分析儀和傳統(tǒng)顯微鏡及尿液
8、理化檢查結(jié)果進(jìn)行比照,以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn),計(jì)算儀器檢測(cè)的S和Sp。真陽(yáng)性數(shù)S二- 真陽(yáng)性數(shù)假陽(yáng)性數(shù)S真陰性數(shù)p=真陰性數(shù)+假陰性數(shù)5建立儀器檢測(cè)參數(shù)的參考范圍以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn),結(jié)合多聯(lián)試帶檢測(cè)范圍,建立符合本實(shí)驗(yàn)室尿分析儀的參考范圍。質(zhì)量控制尿液干化學(xué)分析存在的局限性和影響因素較多,容易產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰 性。因此,必須十分重視尿干化學(xué)分析儀和多聯(lián)試帶質(zhì)量控制。使用尿干 化學(xué)分析儀應(yīng)以傳統(tǒng)法為基準(zhǔn),結(jié)合多聯(lián)試帶檢測(cè)范圍,建立符合本實(shí) 驗(yàn)室尿液分析儀的參考范圍。其質(zhì)量控制的主要環(huán)節(jié)如下:1 分析前的質(zhì)量控制1尿樣收集:告知病人正確留取尿樣的方法。根據(jù)檢測(cè)內(nèi)容留取適當(dāng)?shù)臉?biāo)本,防止非尿液成分如陰道分泌物等混
9、入。要使用1次性尿杯,有明顯的標(biāo)簽,含患者姓名、病歷號(hào)、收集時(shí)間和檢驗(yàn)工程等。2了解患者可能影響尿化學(xué)檢測(cè)的進(jìn)食及使用藥物的情況。3 尿樣保存:尿樣收集后應(yīng)在2h之內(nèi)完成檢測(cè),否那么選用適當(dāng)?shù)姆?腐劑并冷藏保存。注意準(zhǔn)確有效地標(biāo)記尿標(biāo)本。2分析中的質(zhì)量控制 包括儀器和試帶的準(zhǔn)確性、試帶的有效期、儀器操 作正確程度和儀器的校正等方面。1嚴(yán)格按操作步驟進(jìn)行檢測(cè)。2使用質(zhì)控尿液,根據(jù)尿化學(xué)質(zhì)控液的期望值判斷尿液分析儀的工作 狀態(tài)是否正常。 自制人工尿質(zhì)控液對(duì)尿葡萄糖、 蛋白質(zhì)、 血紅蛋白根本能滿足要 求,但尿膽紅素、尿膽原結(jié)果不能令人滿意,尿酮體也有問(wèn)題。國(guó)外公司的商品 質(zhì)控液效果較好,如 Bio-
10、Rad 公司的 Routine Urine Chemistry Control。3質(zhì)控步驟:在對(duì)分析儀全面鑒定和定期校正的根底上,每日對(duì)儀 器和試帶按圖5-3程序進(jìn)行檢查。每次使用“正常和“異常兩種濃度的 質(zhì)控物進(jìn)行檢查:同1天內(nèi)最好使用同I份質(zhì)控物標(biāo)本;質(zhì)控物任一膜塊的測(cè)定 結(jié)果與“靶值允許有1個(gè)定性等級(jí)的差異靶值的土+ ,超過(guò)此范圍或結(jié) 果由“正常變成 “異?;蛴伞爱惓W兂伞罢>鶓?yīng)視為失控。尿液分 析中質(zhì)量控制程序見(jiàn)圖 5-5。質(zhì)控允許范圍內(nèi)r標(biāo)本測(cè)那么定檢查質(zhì)控物是否失效用質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)控超出質(zhì)控允許范圍質(zhì)控允許范圍內(nèi)質(zhì)控允許范圍外重新試驗(yàn)重復(fù)試驗(yàn)使用新質(zhì)控物繼續(xù)標(biāo)本測(cè)定配制新質(zhì)控物質(zhì)控
11、允許范圍外使用新質(zhì)控物啟用同一批號(hào)試帶繼續(xù)標(biāo)本測(cè)定質(zhì)控允許范圍外另一批號(hào)新試帶重新試驗(yàn)質(zhì)控允許范圍內(nèi) 新試帶 妙 廢棄失效試帶標(biāo)本測(cè)定質(zhì)控允許范圍外檢修或校正儀器質(zhì)控允許范圍內(nèi)新批號(hào)試帶xL廢棄全部失效試帶j標(biāo)本測(cè)定圖5-5尿液分析中質(zhì)量控制程序3. 分析后的質(zhì)量控制包括試驗(yàn)結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果的相關(guān)性、是否受藥 物或病理物質(zhì)的干擾、參考范圍的認(rèn)可、報(bào)告單書(shū)寫(xiě)是否標(biāo)準(zhǔn)和報(bào)告單回報(bào)時(shí)間 是否及時(shí)等方面。1化學(xué)分析結(jié)果與顯微鏡檢結(jié)果之間的關(guān)聯(lián)性:如出現(xiàn)表5-11情況表示尿化學(xué)檢測(cè)結(jié)果可疑,應(yīng)進(jìn)一步查明原因。表5-11尿干化學(xué)結(jié)果可疑情況化學(xué)分析顯微鏡檢查隱血一大量紅細(xì)胞亞硝酸鹽 +白細(xì)胞一蛋白質(zhì)一紅
12、細(xì)胞、白細(xì)胞和管型增多2 綜合考慮患者的病史:特別是腎臟疾病患者,尿蛋白定性應(yīng)當(dāng)用磺 基水楊酸法。如尿化學(xué)分析結(jié)果與鏡檢不一致,應(yīng)進(jìn)一步查明原因。3參考范圍的認(rèn)可:尿干化學(xué)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞、紅細(xì)胞出現(xiàn)“假 陰性時(shí),應(yīng)以鏡檢為準(zhǔn);但當(dāng)“假陽(yáng)性時(shí),儀器的結(jié)果可能正確。這種 情況見(jiàn)于白細(xì)胞:當(dāng)尿在膀胱貯存時(shí)間長(zhǎng),白細(xì)胞破壞,中性粒細(xì)胞酯酶 釋放到尿中,導(dǎo)致儀器分析 + ,鏡檢反而-;紅細(xì)胞:腎病患者尿中紅細(xì)胞常破壞而釋出血紅蛋白或某些病人尿中有高 活性不耐 熱的觸酶時(shí)均可導(dǎo)致儀器分析 + ,鏡檢卻為-。尿液煮沸冷卻后再測(cè)試可排除不耐熱的觸酶造成的假陽(yáng)性。其他情況要結(jié)合臨床實(shí)踐,不能一概 否認(rèn)或肯定儀器檢測(cè)結(jié)果,更不能隨意調(diào)節(jié)改變儀器的靈
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