纖維素的測定方法

1、實驗原理植物的主要化學(xué)成分是纖維素、半纖維素和木質(zhì)素這三部分。它們是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要組分。其中，纖維素組成微細(xì)纖維，構(gòu)成纖維細(xì)胞壁的網(wǎng)狀骨架，而半纖維素和木質(zhì)素是填充在纖維和微細(xì)纖維之間的粘合劑”和填充劑”。1. 纖維素生物制粉末在加熱的情況下用醋酸和硝酸的混合液處理，在這種情況下，細(xì)胞間的物質(zhì)被溶解，纖維素也分解成單個的纖維，木質(zhì)素、半纖維素和其它的物質(zhì)也被除去。淀粉、多縮戊糖和其它物質(zhì)受到了水解。用水洗滌除去雜質(zhì)以后，纖維素在硫酸存在下被重銘酸鉀氧化成二氧化碳和水。C6H10O5+4K2Cr2O7+16H2SO4=6CO2+4Cr2(SO4)3+4K2SO4+21H2O過剩的重銘酸鉀用

2、硫酸亞鐵錢溶液滴定，再用硫酸亞鐵俊滴定同量的但是未與纖維素反應(yīng)的重銘酸鉀，根據(jù)差值可以求得纖維素的含量。2. 半纖維素用沸騰的80%硝酸鈣溶液使淀粉溶解，同時將干擾測定半纖維素的溶于水的其它碳水化合物除掉。將沉淀用蒸儲水沖洗以后，用較高濃度的鹽酸，大大縮短半纖維素的水解時間，水解得到的糖溶液，稀釋到一定體積，用氫氧化鈉溶液中和，其中的總糖量用銅碘法測定。銅碘法原理：半纖維素水解后生成的糖在堿性環(huán)境和加熱的情況下將二價銅還原成一價銅，一價銅以CU2O的形式沉淀出來。用碘量法測定Cu2O的量，從而計算出半纖維素的含量。測定還原性糖的銅堿試劑中含有KIO3和KI,它們在酸性條件下會發(fā)生反應(yīng)，也不會干

3、擾糖和銅離子的反應(yīng)。加入酸以后，會發(fā)生反應(yīng)釋放出碘：KIO3+5KI+3H2SO4=3I2+3K2SO4+3H2O加入草酸以后，碘與氧化亞銅發(fā)生反應(yīng)：Cu2O+I2+H2C2O4=CUC2O4+CuI2+H2O過剩的碘用Na2s2O3溶液滴定：2Na2S2O3+I2=Na2s4。6+2NaI3. 木質(zhì)素用1%的醋酸處理以分離出糖、有機酸和其它可溶性化合物。然后用丙酮處理，分離出葉綠素、擬脂、脂肪和其它脂溶性化合物。將沉淀用蒸儲水洗滌以后，在硫酸存在下，用重需酸鉀氧化水解產(chǎn)物中的木質(zhì)素：C11H12O4+8K2Cr2O7+32H2SO4=11CO2+8K2SO4+8Cr2(SO4)3+32H2O

4、過量的重銘酸鉀用硫酸亞鐵錢溶液滴定。方法和測定纖維素相同。實驗所需試劑和儀器1 .實驗試劑硫酸亞鐵錢分析純，重銘酸鉀分析純，硫代硫酸鈉分析純,硝酸鈣分析純，硫酸銅分析純，可溶性淀粉分析純，碘酸鉀分析純，草酸分析純，酒后酸分析純，氯化銀分析純，鄰菲啰咻分析純，濃硫酸分析純，鹽酸分析純，冰醋酸分析純，硝酸分析純。2 .實驗儀器50mL酸式滴定管，50mL堿式滴定管，10mL離心試管若干，不同型號燒杯若干，真空塞，250mL錐形瓶若干，電爐，離心沉淀器。五實驗步驟(一)纖維素含量的測定1 .所需溶液硝酸和醋酸的混合液，0.5N重銘酸鉀溶液，試亞鐵靈指示劑(將鄰苯二胺與甘油、硝基苯及濃硫酸一起加熱，或

5、改用8-氨基唾咻為原料，都可制備該品。試亞鐵靈指示劑(1,10-菲繞咻)的配制方法：1.10-菲繞咻(1.10-phenanathrolinemonohydrate)指示劑溶溶解0.7g七水合硫酸亞鐵(FeSO4.7H2O)于50mL的水中，加入1.5g1.10-菲繞咻，攪動至溶解，加水稀釋至100mL。)0.1N硫酸亞鐵錢溶液，濃硫酸，0.1N重銘酸鉀溶液。2 .實驗步驟(1) 配制所需的各種溶液，硫酸亞鐵俊溶液在使用的一周內(nèi)準(zhǔn)備，并在使用當(dāng)天測定其滴定度Ko用該硫酸亞鐵錢溶液滴定25mL0.1N的重銘酸鉀溶液，用去mmL。K=25X0.1/m(2) 稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.05-0.0

6、6g,數(shù)值為n(3) 裝入離心管內(nèi)，加入硝酸和醋酸的混合液5mL(4) 塞住離心管，在沸水中煮沸25min,并定期攪拌(5) 離心，倒去清液，加入蒸儲水離心洗滌沉淀，共洗三次(6) 加入10mL0.5N的重銘酸鉀溶液和8mL濃硫酸，攪勻，放入開水中10min,并定期攪拌(7) 冷卻，倒入錐形瓶中，用少許蒸儲水沖洗沉淀，滴入3滴試亞鐵靈試劑，用0.1N的硫酸亞鐵錢溶液滴定，用去bmL,由黃色經(jīng)黃綠色至紅褐色為終點(8) 用0.1N的硫酸亞鐵錢溶液單獨滴定加入8mL濃硫酸和10mL0.5N重銘酸鉀溶液，用去amL(9) 生物質(zhì)中纖維素的含量計算公式x%=0.675XK(ab)/n0.05mol/L

7、硫代硫酸鈉溶液配制：用臺秤稱取Na2s2O3?5H2。12.5g和W2CO30.5g，溶于1000mL經(jīng)煮沸后冷卻了的蒸播水中，轉(zhuǎn)移到試劑瓶中，搖勻，靜置一周后，過濾備用。標(biāo)定：利用上述(2)中配制的K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液來進行標(biāo)定，用移液管移取25.00mL該K2Cr2O7標(biāo)液三份，分別置于250mL錐形瓶中，加入5mL3mol/LHCl,1gKI,搖勻，置于日f處5分鐘。待反應(yīng)完全后，用蒸儲水稀釋至50mL。用Na2s2O3溶液滴定至黃綠色，加入2mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定至溶液藍(lán)色消失呈現(xiàn)淺綠色即為終點，記下所消耗的Na2s2O3溶液體積，計算Na2s2O3溶液的濃度。(mol/L)0.29

8、42為K2Cr2O7的毫摩爾質(zhì)量(g/mmol)為準(zhǔn)確稱取K2Cr2O7的質(zhì)量(g)(二)半纖維素含量的測定1 .所需溶液80%硝酸鈣溶液，2N鹽酸，酚儆指示劑，2N氫氧化鈉溶液，堿性銅試劑草酸-硫酸混合液，0.5%淀粉，0.01N硫代硫酸鈉溶液。2 .實驗步驟(1) 稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.1-0.2g，數(shù)值為n(2) 裝入小燒杯中，加入15mL80%的硝酸鈣溶液，蓋好加熱至沸騰，在慢慢沸騰的情況下加熱5min(3) 分步離心，分別用10mL熱水洗滌沉淀三次(4) 在沉淀中加入10mL2N的鹽酸，攪勻，沸水浴中攪拌情況下微沸45min(5) 離心，殘渣分別用10mL蒸儲水沖洗三次，沖洗后

9、的水溶液合并在離心液中(6) 加入1滴酚Mt,用2N氫氧化鈉溶液中和到顯橙紅色(7) 轉(zhuǎn)入100mL的容量瓶，稀釋到刻度(8) 用干燥濾紙過濾到干燥燒杯中(9) 移液管吸取10mL濾液，加入10mL堿性銅試劑，蓋文?在沸水中煮15min(10) 冷卻，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色消失，用去bmL(11)取10mL堿性銅試劑，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL濾液，加入0.5mL0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色消失，用去amL(11) )生物質(zhì)中半纖維素的含量計算公式x%=0.9X100248(ab)(ab)/

10、10000X10Xn(三)木質(zhì)素含量的測定1 .所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化鋼溶液，0.5N重銘酸鉀溶液濃硫酸，0.1N硫酸亞鐵錢溶液，試亞鐵靈指示劑(稱取1.485g鄰菲羅咻(C12H8N2H2O)放人燒杯中，加水30ml,溫?zé)嶂镣耆芙猓Q取0.695g硫酸亞鐵(FeSO47H2O)放入燒杯中加水溶解，移入鄰菲羅咻溶液中混勻，用水稀釋至100ml。)。2 .實驗步驟(1) 標(biāo)定新配的0.1N硫酸亞鐵錢溶液,滴定度為K(2) 稱取自然風(fēng)干的生物質(zhì)粉末0.05-0.1g,數(shù)值為n(3) 裝入離心管，加入10mL1%醋酸，搖動5min混勻(4) 離心，用5mL1%醋酸洗沉淀(5) 加丙酮3-4mL,在搖蕩的情況下浸泡3min,洗三次(6) 用玻璃棒將沉淀沿管壁分散開，將離心管放熱水中使沉淀充分干燥(7) 在干燥沉淀中加入73%硫酸3mL,用玻璃棒攪勻，擠壓成均勻的漿液(8) 室溫下放置一夜(9) 加入10mL蒸儲水，攪勻，置沸水中5min(10) 冷卻，加入0.5mL10%氯化鋼溶液，攪勻，離心，倒出清液，分別用10mL蒸儲水沖洗沉淀兩次，每次要混勻(11) )沉淀中加入10mL0.5N的重銘酸鉀溶液和8mL濃硫酸，放入沸