KX-血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書

1、沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：1/9 SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書1. 檢驗?zāi)康腟YSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀是用于檢測血細(xì)胞(紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板)數(shù)量和白細(xì)胞分類的儀器。檢測血液中血細(xì)胞數(shù)量的變化對臨床有關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果具有重要參考價值。2. 檢測原理2.1 白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板采用電阻抗法進(jìn)行計數(shù)。即在細(xì)胞檢測器微孔的兩側(cè)各有一個電極，兩電極間通有恒定電流，經(jīng)過稀釋液電解質(zhì)溶液稀釋的血樣血細(xì)胞在通過檢測器微孔時，產(chǎn)生了一個電脈沖；脈沖的上下代表細(xì)胞體積

2、的大小，脈沖的個數(shù)代表細(xì)胞的數(shù)量。2.2 血紅蛋白濃度采用無氰HGB測量法氧合血紅蛋白法進(jìn)行測量。即在稀釋的血樣中參加溶血劑使紅細(xì)胞膜破裂釋放出血紅蛋白，后者在瞬時間被轉(zhuǎn)化生成氧合血紅蛋白，在555nm處其吸光度與只有稀釋液時的吸光度相比擬以求出HGB。3. 標(biāo)本3.1 臨床護(hù)士抽取病人靜脈血1-2ml置于含EDTA-3K的真空管內(nèi)抗凝；3.2 采血后立即送到檢驗科血細(xì)胞化驗室；3.3 血量不夠1ml或血液凝固、溶血或脂血標(biāo)本不能做檢測。4 設(shè)備和試劑4.1 SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀(主機(jī)號：A3878)；新儀器安裝后首先要鑒定，具體步驟見儀器手冊。4.2 試劑：包括稀釋液、溶血劑

3、和清潔液。4.3 購置的試劑應(yīng)放室溫保存，注意防塵、防潮。4.4 開封后的試劑應(yīng)盡快用完，超過有效期的試劑不能使用。5 校準(zhǔn)步驟5.1 SYSMEX KX-21 血細(xì)胞分析儀安裝或大修后需要進(jìn)行校準(zhǔn)；5.2 SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果中的全部或某一項不準(zhǔn)確，需要進(jìn)行校準(zhǔn)；5.3 儀器在進(jìn)行校準(zhǔn)前必須對檢測器、血紅蛋白測量池等管道液路系統(tǒng)進(jìn)行徹底清洗，操作過程詳見SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀使用手冊。5.4 SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn)包括末梢血和全血兩套系統(tǒng)，操作過程詳沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：

4、Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：2/9見該儀器使用手冊。 6 操作步驟6.1 試劑檢查：開機(jī)前檢查試劑是否夠量，有無混濁變質(zhì)，管道有無扭結(jié)，清空廢液桶。6.2 開機(jī)與本底檢測：翻開UPS電源開關(guān)，等待60秒鐘后，再翻開主機(jī)電源開關(guān)，儀器進(jìn)行系統(tǒng)檢查后進(jìn)行試劑本底測試，試劑本底必須滿足以下要求：WBC0.3×109/L、RBC 0.02×1012/L、HGB2×g/L、PLT10×109/L。6.3 末梢血測量：6.3.1用加液注射器吸取CELLPACK稀釋液500ul參加到試管中，將采集的20ul末梢血注入到稀釋液中,充分混勻制成稀釋血樣。6.3.2確認(rèn)

5、當(dāng)前LCD畫面為準(zhǔn)備測量狀態(tài)。按下< MODE > 鍵，將畫面變換至變換模式畫面，選擇 預(yù)先稀釋PD ，按< ENTER > 鍵后，進(jìn)行檢測模式的切換，回到主畫面。6.3.3將混勻的稀釋血樣，放在進(jìn)樣針下,按 <START> 鍵進(jìn)行計數(shù)，結(jié)果自動打印。6.4 全血測量：測量之前，確保確認(rèn)當(dāng)前LCD畫面處于全血模式WD下，將臨床送檢的合格抗凝靜脈血標(biāo)本編號后放入試管架中，測試前將血液顛倒混勻后,放在進(jìn)樣針下，按 <START> 鍵進(jìn)行計數(shù)，結(jié)果自動打印。6.5 標(biāo)本號碼的輸入：按下面板上SAMPLE No> 鍵，標(biāo)本號碼激活，這時輸

6、入需要的標(biāo)本號碼，如：24 按ENTER 鍵確認(rèn)，LCD畫面進(jìn)入準(zhǔn)備測量狀態(tài)。6.6清洗與關(guān)機(jī)：檢測完畢后，按下SHUTDOWN鍵，儀器進(jìn)入關(guān)機(jī)畫面，將清洗液放在吸樣針下，按 <START> 鍵，儀器自動吸引清潔液，對整個測量系統(tǒng)進(jìn)行清洗。約5分鐘清洗結(jié)束，即可關(guān)掉主機(jī)。7 質(zhì)量控制7.1 科內(nèi)自制質(zhì)控物7.2 質(zhì)控措施見科內(nèi)室內(nèi)質(zhì)控8 干擾因素8.1嚴(yán)重的黃疸或脂血使血紅蛋白結(jié)果假性增高；8.2紅細(xì)胞冷凝集可使紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性減低，MCV假性增高；8.3冷凝球蛋白增高使白細(xì)胞和血小板計數(shù)結(jié)果假性增高；8.4有血小板凝集使血小板計數(shù)結(jié)果假性減低。沭陽縣人民醫(yī)院檢驗

7、科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：3/99 計算 按儀器設(shè)計原理，只對紅細(xì)胞常數(shù)紅細(xì)胞平均體積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度進(jìn)行計算，可根據(jù)RBC、HGB及HCT結(jié)果求出。9.1 紅細(xì)胞平均體積MCV 根據(jù)RBC及HCT，由下式求出。9.2 紅細(xì)胞平均血紅蛋白量MCH根據(jù)RBC及HGB，由下式來求出。9.3 紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度MCHC根據(jù)HCT及HGB，由下式來求出。 9.4 RDW由血細(xì)胞分析儀測量獲得，是反映周圍血紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù)。當(dāng)紅細(xì)胞通過小孔的一瞬間，計數(shù)電路得到一個相應(yīng)大小的脈沖，不同大小的

8、脈沖信號分別貯存在儀器內(nèi)裝計算機(jī)的不同通道，計算出相應(yīng)當(dāng)體積及細(xì)胞數(shù)，統(tǒng)計處理而得RDW。10 生物參考值區(qū)間和極限值10.1 血細(xì)胞生物參考值區(qū)間10.1.1白細(xì)胞： 成年人靜脈血：3.510.0×109/L； 手指血：4.010.0×109/L； 新生兒 ：15.020.0×109/L； 6個月2歲 ：11.012.0×109/L； 10.1.2紅細(xì)胞 成年男性：4.35.86×1012/L； 成年女性：3.775.17×1012/L； 新生兒 ：6.07.0×1012/L； 10.1.3血紅蛋白沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床

9、檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：4/9成年男性：135180 g/L； 成年女性：115155 g/L； 新生兒 ：180190 g/L； 10.1.4紅細(xì)胞壓積 成年男性：0.4000.517； 成年女性：0.3670.467； 10.1.5血小板：100-300×109/L 10.1.6 MCV ：80100fL； 10.1.7 MCH ：27.234.3 pg； 10.1.8 MCHC：320360 g/L； 10.1.9 RDW ：< 0.145 10.1.10 PCT：男性 0.183±0.041

10、；女性 0.198±0.042； 10.1.11 MPV：男性 10.07±1.78fL；女性 10.24±1.58fL； 10.1.12 PDW：16.8%±0.63%； 10.2 血細(xì)胞極限值10.2.1 白細(xì)胞 < 0.5×109/L10.2.2 紅細(xì)胞 < 1.0×1012/L 10.2.3 血紅蛋白 < 30g/L 10.2.4 血小板 < 20×109/L 11 實驗室解釋11.1 白細(xì)胞計數(shù)結(jié)果異常11.1.1 白細(xì)胞生理變化：11.1.1.1 年齡：初生兒白細(xì)胞較高，一般在15

11、5;109/L左右，個別可高達(dá)30×109/L以上。通常在34天后降至10×109/L左右，約保持3個月，然后逐漸降低至成人水平。初生兒外周血白細(xì)胞主要為中性粒細(xì)胞，到第69天逐漸下降至與淋巴細(xì)胞大致相等。以后淋巴細(xì)胞逐漸增多，整個嬰兒期淋巴細(xì)胞數(shù)均較高，可達(dá)70%。到23歲后，淋巴細(xì)胞逐漸下降，中性粒細(xì)胞逐漸上升，到45歲二者又根本相等，形成中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞變化曲線的兩次交叉，至青春期時與成人根本相同。11.1.1.2日間變化：白細(xì)胞數(shù)在靜息狀態(tài)時較低，活動和進(jìn)食后較高；早晨較低，沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q

12、-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：5/9下午較高；一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。運動、疼痛和情緒變化、一般的體力勞動、冷熱水浴、日光或紫外線照射等，均可使白細(xì)胞輕度增多，而劇烈運動、劇痛和沖動可使白細(xì)胞顯著增多。如劇烈運動，可于短時間內(nèi)使白細(xì)胞高達(dá)35×109/L，以中性粒細(xì)胞為主；當(dāng)運動結(jié)束后迅即恢復(fù)原有水平 。這種短暫的變化，主要是由于循環(huán)池和邊緣池的粒細(xì)胞重新分配所致。11.1.1.3妊娠與分娩：妊娠期常見白細(xì)胞增多，特別是最后1個月，常波動于(1217)×109/L之間，分娩時可高達(dá)34×109/L。分娩后25日內(nèi)恢復(fù)正常。由于白細(xì)胞的生理波動很大，只

13、有通過定時和反 復(fù)觀察才有意義。11.1.2.白細(xì)胞病理變化：11.1.2.1增高11.1.2.1.1急性感染：急性化膿性感染時，白細(xì)胞增高程度取決于感染微生物的種類、感染灶的范圍、感染的嚴(yán)重程度、患者的反響能力。如感染很局限且輕微，白細(xì)胞總數(shù)仍可正常，但分類檢查時可見分葉核百分率有所增高；中度感染時，白細(xì)胞總數(shù)常增高大于10.0×109/L，并伴有輕度核象左移；嚴(yán)重感染時，白細(xì)胞總數(shù)常明顯增高，可達(dá)20.0×109/L以上，且伴有明顯的核象左移。11.1.2.1.2嚴(yán)重的組織損傷或大量血細(xì)胞破壞：在較大手術(shù)后1236小時，白細(xì)胞常達(dá)10.0×109/L以上，其增

14、多的細(xì)胞成分以中性分葉核粒細(xì)胞為主。急性心肌堵塞后12天內(nèi)，常見白細(xì)胞數(shù)明顯增高，借此可與心絞痛相區(qū)別。急性溶血反響時，也可見白細(xì)胞增多。11.1.2.1.3急性大出血：在脾破裂或?qū)m外孕輸卵管破裂后，白細(xì)胞迅速增高，常達(dá)(2030)×109/L。其增多的細(xì)胞也主要是中性分葉核粒細(xì)胞。11.1.2.1.4急性中毒：化學(xué)藥物如安眠藥、敵敵畏等中毒時，常見白細(xì)胞數(shù)增高，甚至可達(dá)20×109/L或更高，代謝性中毒如糖尿病酮癥酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時，也常見白細(xì)胞增多，均以中性分葉核粒細(xì)胞為主。11.1.2.1.5腫瘤性增多：白細(xì)胞呈長期持續(xù)增多，最常見于粒細(xì)胞性白血病，其次也可見于

15、各種惡性腫瘤的晚期。此時不但總數(shù)常達(dá)(1020)×109/L或更多，且可有較明顯的核左移現(xiàn)象，而呈所謂類白血病反響。11.1.2.2減低:11.1.2.1 某些感染：某些革蘭氏陰性桿菌如傷寒桿菌感染時，如無并發(fā)癥，白細(xì)胞數(shù)均減少甚至可低到2×109/L以下。一些病毒感染如流感時白細(xì)胞亦減少，可沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：6/9能是由于在細(xì)菌內(nèi)毒素及病毒作用下使貼壁的即邊緣池粒細(xì)胞增多而導(dǎo)致循環(huán)池中粒細(xì)胞減少所致，也可能與內(nèi)毒素抑制骨髓釋放粒細(xì)胞有關(guān)。11.1.3.2 某些血液?。喝绲湫?/p>

16、的再生障礙性貧血時，呈“三少表現(xiàn)。此時白細(xì)胞可少到1×109/L以下，分類時幾乎均為淋巴細(xì)胞，乃因中性粒細(xì)胞嚴(yán)重減少所致的淋巴細(xì)胞相對增多。小局部急性白血病其白細(xì)胞總數(shù)不高反而減低，稱非白血性白血病aleukemic leukemia，其白細(xì)胞可<1×109/L，分類時也呈淋巴細(xì)胞相對增多，此時只有骨髓檢查才能明確診斷。11.1.3.3 慢性理、化損傷：電離輻射如X線等、長期服用氯霉素后，可因抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂而致白細(xì)胞減少，故于接觸和應(yīng)用期間每周應(yīng)作一次白細(xì)胞計數(shù)。11.1.3.4 自身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡等，由于自身免疫性抗核抗體導(dǎo)致白細(xì)胞破壞而減少。

17、11.1.3.5 脾功能亢進(jìn)：各種原因所致的脾腫大，如門脈肝硬化、班替綜合征等均可見白細(xì)胞減少。其機(jī)制為腫大的脾中的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)破壞了過多的白細(xì)胞；腫大的脾分泌了過多的脾素，而此種體液因子能來活促進(jìn)粒細(xì)胞生在的某些因素。11.2 白細(xì)胞分類結(jié)果異常11.2.1中性粒細(xì)胞11.2.1.1 增加：急性感染性化膿性炎癥，中毒尿毒癥、糖尿病酸中毒急性出血、急性溶血及手術(shù)后等。11.2.1.2 減少：某些傳染病傷寒、瘧疾等化學(xué)藥物及放射損害，某些血液病、過敏性休克、惡病質(zhì)、脾功能亢進(jìn)及自身免疫性疾病等。11.2.2淋巴細(xì)胞11.2.2.1 增加：淋巴細(xì)胞性白血病，百日咳，傳染性單核細(xì)胞增多癥、水痘

18、、麻疹、結(jié)核病、狹窄排斥反響前期，傳染病恢復(fù)期等。11.2.2.2減少：免疫缺陷病，丙種球蛋白缺乏癥，淋巴細(xì)胞減少癥，應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后，放射病等。11.2.3單核細(xì)胞 增多：常見于亞急性細(xì)菌心內(nèi)膜炎、傷寒、瘧疾、黑熱病、活動性結(jié)核、沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：7/9單核細(xì)胞性白血病，急性感染 恢復(fù)期等。11.2.4 嗜酸性粒細(xì)胞11.2.4.1增多：見于過敏性疾病、皮膚病、寄生蟲、血液病、猩紅熱、潰瘍性結(jié)腸炎、X線照射后，脾切除、傳染病恢復(fù)期等。11.2.4.2減少：多見于傷寒、副傷寒，以及應(yīng)用腎上腺

19、皮質(zhì)素或促腎上腺皮質(zhì)素后。11.2.5 嗜堿性粒細(xì)胞 增多：見于慢性粒細(xì)胞白血病、淋巴網(wǎng)細(xì)胞瘤、脾切除后等，惡性腫瘤、嚴(yán)重傳染病、敗血病、中毒藥物或重金屬大面積燒傷等。嚴(yán)重感染中性粒可出現(xiàn)毒性顆粒、空泡、Dbhle氏體，核棘突，退行性變及細(xì)胞大小不均等變化。 11.3紅細(xì)胞結(jié)果異常：11.3.1 紅細(xì)胞增多11.3.1.1 相對性增多：常見于劇烈嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、大面積燒傷、大量出汗、多尿和水的攝入量顯著缺乏的患者。11.3.1.2 絕對性增高：與組織缺氧有關(guān)。可引起繼發(fā)性紅細(xì)胞增多，如慢性肺源性心臟病、發(fā)紺性先天性心臟病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。11.3.1.3 真性紅細(xì)胞增多癥，紅細(xì)胞可

20、達(dá)7-10×1012/L。11.3.2 紅細(xì)胞減少11.3.2.1 生理性貧血：妊娠期因血漿量相對增多，故紅細(xì)胞相對減少。3個月的嬰兒至15歲的兒童，因生長發(fā)育迅速而致造血原料相對缺乏，紅細(xì)胞和血紅蛋白可較正常人低10%-20%。老年人由于骨髓造血功能逐漸減低，均可導(dǎo)致紅細(xì)胞和血紅蛋白含量減少。11.3.2.2 病理性減少： 紅細(xì)胞減少所致的貧血：一是因骨髓造血功能衰竭，如再生障礙貧血、骨髓纖維化等伴發(fā)的貧血；二是因造血物質(zhì)缺乏或利用障礙引起的貧血，如缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血、葉酸及維生素B缺乏所致的巨幼細(xì)胞性貧血。 因紅細(xì)胞膜、酶遺傳性的缺陷或外來因素造成紅細(xì)胞破壞過多導(dǎo)致的貧

21、血，如遺傳性球型紅細(xì)胞增多癥、地中海性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、異常血紅蛋白病、免疫性溶血性貧血、心臟體外循環(huán)的大手術(shù)及一些化學(xué)、生物因素等引起的溶血性貧血。 失血：急性失血或消化到潰瘍、鉤蟲病等慢性沭陽縣人民醫(yī)院檢驗科臨床檢驗室SYSMEX KX-21血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書文件編號：Q-1版本：第一版頁號/總頁數(shù)：8/9失血所致貧血。11.4 血紅蛋白異常 血紅蛋白的增減臨床意義大致與紅細(xì)胞的增減意義相似，但血紅蛋白更準(zhǔn)確反映貧血的程度。血紅蛋白的減少與紅細(xì)胞的減少程度不一定呈正比例，一是在小紅細(xì)胞貧血時，由于單個紅細(xì)胞血紅蛋白的含量少于正常，所以血紅蛋白減少的程度較紅細(xì)胞減少的程度更為

22、明顯，如缺鐵性貧血、消化性潰瘍、腸息肉、痔瘡、月經(jīng)過多、鉤蟲病等慢性反復(fù)出血等；二是在大紅細(xì)胞性貧血減少的程度較血紅蛋白更為嚴(yán)重，如缺乏維生素B12或葉酸引起的營養(yǎng)不良性貧血及肝硬化性貧血等；三是在大出血時，血紅蛋白減少的程度根本上與紅細(xì)胞減少想一致，如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障礙性貧血、純紅細(xì)胞再生障礙性貧血。11.5 血小板結(jié)果異常11.5.1減少:血小板數(shù)100×109/L為減少。血小板產(chǎn)生減少，見于造血功能受到損害，如再生障礙性貧血、急性白血病、急性放射病；血小板破壞亢進(jìn)，見于原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)癥和進(jìn)行體外循環(huán)時；血小板消耗過多，如彌散性血管內(nèi)凝血、血栓性血小板減少性紫癜等。11.5.2增多:血小板數(shù)400×109/L為增多。一過性增多，見于急性大出血及溶血之后；持續(xù)性增多，見于真性紅細(xì)胞增多