核酸與蛋白質(zhì)的生物合成

1、（一）名詞解釋1半保留復(fù)制（semiconservative replication）2不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄（asymmetric trancription）3逆轉(zhuǎn)錄（reverse transcription）4岡崎片段（Okazaki fragment）5復(fù)制叉（replication fork）6領(lǐng)頭鏈（leading strand）7隨后鏈（lagging strand）8有意義鏈（sense strand）9光復(fù)活（photoreactivation）10重組修復(fù)（recombination repair）11內(nèi)含子（intron）12外顯子（exon）13基因載體（genonic vecto

2、r） 14質(zhì)粒（plasmid） （二）填空題1DNA復(fù)制是定點(diǎn)雙向進(jìn)行的， 股的合成是 ，并且合成方向和復(fù)制叉移動(dòng)方向相同； 股的合成是 的，合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反。每個(gè)岡崎片段是借助于連在它的 末端上的一小段 而合成的；所有岡崎片段鏈的增長(zhǎng)都是按 方向進(jìn)行。2DNA連接酶催化的連接反應(yīng)需要能量，大腸桿菌由 供能，動(dòng)物細(xì)胞由 供能。3大腸桿菌RNA聚合酶全酶由 組成；核心酶的組成是 。參與識(shí)別起始信號(hào)的是 因子。4基因有兩條鏈，作為模板指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄的那條鏈稱 鏈。5以RNA為模板合成DNA稱 ，由 酶催化。6DNA或UpGpCpA分別經(jīng)0.3NKOHR、NaseT1和牛胰RNa

3、seI處理所得結(jié)果：DNA: 0.3NKOH： ；RNaseT1： ；RNase I： ;UpGpCpA：0.3NKOH： ；RNaseT1： ；RNase I ： 。7基因突變形式分為： ， ， 和 四類。8亞硝酸是一個(gè)非常有效的誘變劑，因?yàn)樗芍苯幼饔糜贒NA，使堿基中 基氧化成 基，造成堿基對(duì)的 。9所有岡崎片段的延伸都是按 方向進(jìn)行的。10前導(dǎo)鏈的合成是 的，其合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向 ；隨后鏈的合成是 的，其合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向 。11引物酶與轉(zhuǎn)錄中的RNA聚合酶之間的差別在于它對(duì) 不敏感，并可以 作為底物。12DNA聚合酶I的催化功能有 、 、 、 和 。13DNA回旋酶又叫

4、，它的功能是 。14細(xì)菌的環(huán)狀DNA通常在一個(gè) 開(kāi)始復(fù)制，而真核生物染色體中的線形DNA可以在 起始復(fù)制。15大腸桿菌DNA聚合酶的 活性使之具有 功能，極大地提高了DNA復(fù)制的保真度。16大腸桿菌中已發(fā)現(xiàn) 種DNA聚合酶，其中 負(fù)責(zé)DNA復(fù)制， 負(fù)責(zé)DNA損傷修復(fù)。17DNA切除修復(fù)需要的酶有 、 、 和 。18在DNA復(fù)制中， 可防止單鏈模板重新締合和核酸酶的攻擊。19DNA合成時(shí)，先由引物酶合成 ，再由 在其3 端合成DNA鏈，然后由 切除引物并填補(bǔ)空隙，最后由 連接成完整的鏈。20原核細(xì)胞中各種RNA是 催化生成的，而真核細(xì)胞核基因的轉(zhuǎn)錄分別由 種RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由

5、轉(zhuǎn)錄，hnRNA基因由 轉(zhuǎn)錄，各類小分子量RAN則是 的產(chǎn)物。21一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位一般應(yīng)包括 序列、 序列和 順序。22真核細(xì)胞中編碼蛋白質(zhì)的基因多為 。編碼的序列還保留在成熟mRNA中的是 ，編碼的序列在前體分子轉(zhuǎn)錄后加工中被切除的是 。在基因中 被 分隔，而在成熟的mRNA序列被拼接起來(lái)。23染色質(zhì)中的 蛋白和 蛋白對(duì)轉(zhuǎn)錄均有調(diào)節(jié)作用，其中 的調(diào)節(jié)作用具有組織特異性。 （三）選擇題1DNA按半保留方式復(fù)制。如果一個(gè)完全放射標(biāo)記的雙鏈DNA分子，放在不含有放射標(biāo)記物的溶液中，進(jìn)行兩輪復(fù)制，所產(chǎn)生的四個(gè)DNA分子的放射活性將會(huì)怎樣：A半數(shù)分子沒(méi)有放射性 B所有分子均有放射性C半數(shù)分子的兩

6、條鏈均有放射性 D一個(gè)分子的兩條鏈均有放射性E四個(gè)分子均無(wú)放射性2參加DNA復(fù)制的酶類包括：（1）DNA聚合酶；（2）解鏈酶；（3）DNA聚合酶；（4）RNA聚合酶（引物酶）；（5）DNA連接酶。其作用順序是：A（4）、（3）、（1）、（2）、（5） B（2）、（3）、（4）、（1）、（5）C（4）、（2）、（1）、（5）、（3） D（4）、（2）、（1）、（3）、（5）E（2）、（4）、（1）、（3）、（5）3如果15N標(biāo)記的大腸桿菌轉(zhuǎn)入14N培養(yǎng)基中生長(zhǎng)了三代，其各種狀況的DNA分子比例應(yīng)是下列哪一項(xiàng)：純15N 15N14N 純14NDNA 雜種DNA DNAA 1/8 1/8 6/8B

7、1/8 0 7/8C 0 1/8 7/8D 0 2/8 6/8E 0 4/8 4/84下列關(guān)于DNA復(fù)制特點(diǎn)的敘述哪一項(xiàng)錯(cuò)誤的：ARNA與DNA鏈共價(jià)相連 B新生DNA鏈沿53方向合成CDNA鏈的合成是不連續(xù)的 D復(fù)制總是定點(diǎn)雙向進(jìn)行的EDNA在一條母鏈上沿53方向合成，而在另一條母鏈上則沿35方向合成 5DNA復(fù)制時(shí)， 5TpApGpAp3序列產(chǎn)生的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)是下列哪一種：A5TpCpTpAp3 B5ApTpCpTp3C5UpCpUpAp3 D5GpCpGpAp3 E3 TpCpTpAp56下列關(guān)于DNA聚合酶I的敘述哪一項(xiàng)是正確的：A它起DNA修復(fù)酶的作用但不參加DNA復(fù)制過(guò)程B它催化dNT

8、P聚合時(shí)需要模板和引物C在DNA復(fù)制時(shí)把岡崎片段連接成完整的隨從鏈D它催化產(chǎn)生的岡崎片段與RNA引物鏈相連E有些細(xì)菌突變體其正常生長(zhǎng)不需要它7下列關(guān)于真核細(xì)胞DNA聚合酶活性的敘述哪一項(xiàng)是正確的：A它僅有一種 B它不具有核酸酶活性C它的底物是二磷酸脫氧核苷 D它不需要引物E它按3-5方向合成新生鏈8從正在進(jìn)行DNA復(fù)制的細(xì)胞分離出的短鏈核酸岡崎片段，具有下列哪項(xiàng)特性：A它們是雙鏈的 B它們是一組短的單鏈DNA片段C它們是DNARNA雜化雙鏈 D它們被核酸酶活性切除E它們產(chǎn)生于親代DNA鏈的糖-磷酸骨架的缺口處9切除修復(fù)可以糾正下列哪一項(xiàng)引起的DNA損傷：A堿基缺失 B堿基插入 C堿基甲基化D胸

9、腺嘧啶二聚體形成 E堿基烷基化10大腸桿菌DNA連接酶需要下列哪一種輔助因子？AFAD作為電子受體 BNADP+作為磷酸供體CNAD+形成活性腺苷酰酶 DNAD+作為電子受體E以上都不是11下列關(guān)于RNA和DNA聚合酶的敘述哪一項(xiàng)是正確的：ARNA聚合酶用二磷酸核苷合成多核苷酸鏈BRNA聚合酶需要引物，并在延長(zhǎng)鏈的5端加接堿基CDNA聚合酶可在鏈的兩端加接核苷酸DDNA僅能以RNA為模板合成DNAE所有RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在生長(zhǎng)中的多核苷酸鏈的3端加接核苷酸12紫外線照射引起DNA最常見(jiàn)的損傷形式是生成胸腺嘧啶二聚體。在下列關(guān)于DNA分子結(jié)構(gòu)這種變化的敘述中，哪項(xiàng)是正確的：A不會(huì)終止

10、DNA復(fù)制B可由包括連接酶在內(nèi)的有關(guān)酶系統(tǒng)進(jìn)行修復(fù)C可看作是一種移碼突變D是由胸腺嘧啶二聚體酶催化生成的E引起相對(duì)的核苷酸鏈上胸腺嘧啶間的共價(jià)聯(lián)結(jié)13下列哪種突變最可能是致死的：A腺嘌呤取代胞嘧啶 B胞嘧啶取代鳥(niǎo)嘌呤C甲基胞嘧啶取代胞嘧啶 D缺失三個(gè)核苷酸E插入一個(gè)核苷酸14鐮刀形紅細(xì)胞貧血病是異常血紅蛋白純合子基因的臨床表現(xiàn)。-鏈變異是由下列哪種突變?cè)斐傻模篈交換 B插入 C缺失 D染色體不分離 E點(diǎn)突變15在培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，自發(fā)點(diǎn)突變的引起多半是由于：A氫原子的互變異構(gòu)移位 BDNA糖-磷酸骨架的斷裂C插入一個(gè)堿基對(duì) D鏈間交聯(lián) E脫氧核糖的變旋16插入或缺失堿基對(duì)會(huì)引起移碼突變，下列哪種

11、化合物最容易造成這種突變：A口丫啶衍生物 B5-溴尿嘧啶C氮雜絲氨酸 D乙基乙磺酸 E咪唑硫嘌呤17在對(duì)細(xì)菌DNA復(fù)制機(jī)制的研究中，常常用到胸腺嘧啶的類似物5-溴尿嘧啶，其目的在于：A引起特異性移碼突變以作為順序研究用B在胸腺嘧啶參入部位中止DNA合成C在DNA親和載體中提供一個(gè)反應(yīng)基D合成一種密度較高的DNA以便用離心分離法予以鑒別E在DNA中造成一個(gè)能被溫和化學(xué)方法裂解的特異部位18關(guān)于DNA指導(dǎo)的RNA合成，下列敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的：A只有在DNA存在時(shí)，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的生成B轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，RNA聚合酶需要引物CRNA鏈的合成是從53端D大多數(shù)情況下只有一股DNA鏈作為模板E

12、合成的RNA鏈從來(lái)沒(méi)有環(huán)狀的19下列關(guān)于因子的敘述哪一項(xiàng)是正確的：A是RNA聚合酶的亞基，起辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的作用B是DNA聚合酶的亞基，容許按53和35雙向合成C是50S核蛋白體亞基，催化肽鏈生成D是30S核蛋白體亞基，促進(jìn)mRNA與之結(jié)合E在30S亞基和50S亞基之間起搭橋作用，構(gòu)成70S核蛋白體20真核生物RNA聚合酶I催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是：AmRNA B45S-rRNAC5S-rRNA DtRNA ESnRNA21下列關(guān)于真核細(xì)胞DNA復(fù)制的敘述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的：A是半保留式復(fù)制 B有多個(gè)復(fù)制叉C有幾種不同的DNA聚合酶 D復(fù)制前組蛋白從雙鏈DNA脫出E真核DNA聚合酶不表現(xiàn)核酸酶活性22下列

13、關(guān)于原核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄終止的敘述哪一項(xiàng)是正確的：A是隨機(jī)進(jìn)行的 B需要全酶的亞基參加C如果基因的末端含GC豐富的回文結(jié)構(gòu)則不需要亞基參加D如果基因的末端含AT豐富的片段則對(duì)轉(zhuǎn)錄終止最為有效E需要因子以外的ATP酶23下列關(guān)于大腸桿菌DNA連接酶的敘述哪些是正確的：A催化DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)之?dāng)嚅_(kāi)的DNA鏈間形成磷酸二酯鍵B催化兩條游離的單鏈DNA分子間形成磷酸二酯鍵C產(chǎn)物中不含AMPD需要ATP作能源24下列關(guān)于真核細(xì)胞mRNA的敘述不正確的是：A它是從細(xì)胞核的RNA前體核不均RNA生成的B在其鏈的3端有7-甲基鳥(niǎo)苷，在其5端連有多聚腺苷酸的PolyA尾巴C它是從前RNA通過(guò)剪接酶切除內(nèi)含子連接外顯子而

14、形成的D是單順?lè)醋拥?#160;（四）是非判斷題（ ）1中心法則概括了DNA在信息代謝中的主導(dǎo)作用。（ ）2原核細(xì)胞DNA復(fù)制是在特定部位起始的，真核細(xì)胞則在多個(gè)位點(diǎn)同時(shí)起始進(jìn)行復(fù)制。（ ）3逆轉(zhuǎn)錄酶催化RNA指導(dǎo)的DNA合成不需要RNA引物。（ ）4原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中許多mRNA都是多順?lè)醋愚D(zhuǎn)錄產(chǎn)物。（ ）5因?yàn)镈NA兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，在雙向復(fù)制中一條鏈按53的方向合成，另一條鏈按35的方向合成。（ ）6限制性內(nèi)切酶切割的DNA片段都具有粘性末端。（ ）7已發(fā)現(xiàn)一些RNA前體分子具有催化活性，可以準(zhǔn)確地自我剪接，被稱為核糖酶（ribozyme），或稱核酶。（ ）8重組修復(fù)可把DNA損傷部

15、位徹底修復(fù)。（ ）9原核生物中mRNA一般不需要轉(zhuǎn)錄后加工。（ ）10RNA聚合酶對(duì)弱終止子的識(shí)別需要專一的終止因子(如蛋白)。（ ）11原核細(xì)胞啟動(dòng)子中RNA聚合酶牢固結(jié)合并打開(kāi)DNA雙鏈的部分稱為Pribnow box，真核細(xì)胞啟動(dòng)子中相應(yīng)的順序稱為Hogness box，因?yàn)楦缓珹-T，又稱TATA box。（ ）12增強(qiáng)子（endancer）是真核細(xì)胞DNA上一類重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)元件，它們自己并沒(méi)有啟動(dòng)子活性，卻具有增強(qiáng)啟動(dòng)子活性轉(zhuǎn)錄起始的效能。 （五）問(wèn)答題1. 簡(jiǎn)述中心法則。2. 2.       DNA復(fù)制的基本

16、規(guī)律？3. 3.       簡(jiǎn)述DNA復(fù)制的過(guò)程？4. 4.       簡(jiǎn)述DNA復(fù)制時(shí)酶系。5. 簡(jiǎn)述原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的RNA聚合酶有何不同？6. 簡(jiǎn)述RNA轉(zhuǎn)錄的過(guò)程？7. 簡(jiǎn)述基因工程過(guò)程。 三、參 考 答 案 （一）名詞解釋1半保留復(fù)制：雙鏈DNA的復(fù)制方式，其中親代鏈分離，每一子代DNA分子由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。2不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄：轉(zhuǎn)錄通常只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行，這稱為不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。3逆轉(zhuǎn)錄：Temin和Baltimore各自發(fā)現(xiàn)在

17、RNA腫瘤病毒中含有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶，才證明發(fā)生逆向轉(zhuǎn)錄，即以RNA為模板合成DNA。4岡崎片段：一組短的DNA片段，是在DNA復(fù)制的起始階段產(chǎn)生的，隨后又被連接酶連接形成較長(zhǎng)的片段。在大腸桿菌生長(zhǎng)期間，將細(xì)胞短時(shí)間地暴露在氚標(biāo)記的胸腺嘧啶中，就可證明岡崎片段的存在。岡崎片段的發(fā)現(xiàn)為DNA復(fù)制的科恩伯格機(jī)理提供了依據(jù)。5復(fù)制叉：復(fù)制 DNA分子的 Y形區(qū)域。在此區(qū)域發(fā)生鏈的分離及新鏈的合成。6領(lǐng)頭鏈：DNA的雙股鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，一條鏈?zhǔn)?/3/方向，另一條是3/5/方向，上述的起點(diǎn)處合成的領(lǐng)頭鏈，沿著親代DNA 單鏈的3/5/方向（亦即新合成的DNA沿5/3/方向）不斷延長(zhǎng)。所以領(lǐng)頭鏈

18、是連續(xù)的。7隨后鏈：已知的DNA聚合酶不能催化DNA鏈朝3/5/方向延長(zhǎng)，在兩條親代鏈起點(diǎn)的3/ 端一側(cè)的DNA鏈復(fù)制是不連續(xù)的，而分為多個(gè)片段，每段是朝5/3/方向進(jìn)行，所以隨后鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)的。8有意義鏈：即華森鏈，華森克里格型DNA中，在體內(nèi)被轉(zhuǎn)錄的那股DNA鏈。簡(jiǎn)寫為W strand。9光復(fù)活：將受紫外線照射而引起損傷的細(xì)菌用可見(jiàn)光照射，大部分損傷細(xì)胞可以恢復(fù)，這種可見(jiàn)光引起的修復(fù)過(guò)程就是光復(fù)活作用。10重組修復(fù)：這個(gè)過(guò)程是先進(jìn)行復(fù)制，再進(jìn)行修復(fù)，復(fù)制時(shí)，子代DNA鏈損傷的對(duì)應(yīng)部位出現(xiàn)缺口，這可通過(guò)分子重組從完整的母鏈上，將一段相應(yīng)的多核苷酸片段移至子鏈的缺口處，然后再合成一段多核昔酸鍵來(lái)

19、填補(bǔ)母鏈的缺口，這個(gè)過(guò)程稱為重組修復(fù)。11內(nèi)含子：真核生物的mRNA前體中，除了貯存遺傳序列外，還存在非編碼序列，稱為內(nèi)含子。12外顯子：真核生物的mRNA前體中，編碼序列稱為外顯子。13基因載體：外源DNA片段（目的基因）要進(jìn)入受體細(xì)胞，必須有一個(gè)適當(dāng)?shù)倪\(yùn)載工具將帶入細(xì)胞內(nèi)，并載著外源DNA一起進(jìn)行復(fù)制與表達(dá)，這種運(yùn)載工具稱為載體。14質(zhì)粒：是一種在細(xì)菌染色體以外的遺傳單元，一般由環(huán)形雙鏈DNA構(gòu)成，其大小從1200Kb。 （二）、填空題答案1領(lǐng)頭鏈；連續(xù)的；隨從鏈；不連續(xù)的；5；RNA；5 3。2NAD+；ATP。3；4有意義鏈。5反向轉(zhuǎn)錄；逆轉(zhuǎn)錄酶。6不作用；不作用；不作用；U

20、p+Gp+Cp+A；UpGp+CpA；GpCp+Up+A；7轉(zhuǎn)換；顛換；插入；缺失。8氨基；酮基；轉(zhuǎn)換。953 10連續(xù) 相同 不連續(xù) 相反11利福平 dNTP1253聚合 35外切 53外切 焦磷酸解作用，焦磷酸交換作用13拓樸異構(gòu)酶 使超螺旋DNA變?yōu)樗神Y狀14復(fù)制位點(diǎn) 多位點(diǎn) 1535核酸外切酶 校對(duì)163 DNA聚合酶 DNA聚合酶17專一的核酸內(nèi)切酶 解鏈酶 DNA聚合酶 DNA連接酶 18SSB（單鏈結(jié)合蛋白）19RNA引物 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA連接酶20同一RNA聚合酶 3 RNA聚合酶 RNA聚合酶 RNA聚合酶21啟動(dòng)子 編碼 終止子22隔裂基因 外顯子 內(nèi)含子

21、 外顯子 內(nèi)含子23組 非組 非組 （三）選擇題1（A）DNA半保留復(fù)制需要來(lái)自親代的每一條標(biāo)記鏈作模板合成互補(bǔ)鏈，以保持與親代相同的完整結(jié)構(gòu)。因此，在無(wú)記溶液中進(jìn)行第一輪復(fù)制將產(chǎn)生兩個(gè)半標(biāo)記分子。第二輪復(fù)制將產(chǎn)生兩個(gè)半標(biāo)記分子和兩個(gè)不帶標(biāo)記的雙鏈DNA分子。2（E）在DNA真正能夠開(kāi)始復(fù)制之前，必須由解鏈酶使DNA雙鏈結(jié)構(gòu)局部解鏈。在每股單鏈DNA模板上，由RNA聚合酶（引物酶）催化合成一小段（大約1050個(gè)核苷酸）互補(bǔ)RNA引物。然后由DNA聚合酶向引物3端加入脫氧核苷5三磷酸，從53方向合成DNA片段（岡崎片段），直至另一RNA引物的5末端。接著在DNA聚合酶的作用下將RNA引

22、物從5端逐步降解除去與之相鄰的DNA片段由3端延長(zhǎng)，以填補(bǔ)RNA除去后留下的空隙。最后由DNA連接酶將DNA片段連接成完整連續(xù)的DNA鏈。3（D）DNA復(fù)制三代后，每八個(gè)完整DNA雙鏈中將有兩個(gè)雙鏈分子含有一股親代鏈。4（E）DNA是由DNA聚合酶復(fù)合體復(fù)制的。該酶催化脫氧三磷酸核苷以核苷酸的形式加到RNA引物鏈上，選擇只能與親鏈DNA堿基互補(bǔ)配對(duì)的核苷酸參入。參入的第一個(gè)脫氧核苷酸以共價(jià)的磷酸二酯鍵與引物核苷酸相連。鏈的生長(zhǎng)總是從5向3延伸的。DNA復(fù)制開(kāi)始于特異起始點(diǎn)，定點(diǎn)雙向進(jìn)行。5（A）DNA復(fù)制必需胸腺嘧啶（T）與腺嘌呤（A）配對(duì)，鳥(niǎo)嘌呤（G）與胞嘧啶（C）配對(duì)，從而使雙螺旋兩鏈之間

23、部分地靠氨基與酮基間形成的氫鍵維系起來(lái)。鏈本身是反向平行方向合成的，即題中所述之磷酸二酯鍵的53順序決定其沿35方向互補(bǔ)。6（B）DNA聚合酶在起聚合酶作用時(shí)必需要有模板和引物。這個(gè)一條肽鏈的蛋白質(zhì)除聚合酶活性外還具有3和5外切核酸酶活性。在正常DNA復(fù)制時(shí)，它的作用是水解RNA引物鏈（53外切核酸酶活性）并用模板指導(dǎo)的脫氧核苷酸取代它們（聚合功能）。DNA聚合酶也參與DNA修復(fù)。例如在切除胸腺嘧啶二聚體中起53外切核酸酶的作用。在正常DNA復(fù)制時(shí)，DNA聚合酶表現(xiàn)3外切核酸酶活性，切除錯(cuò)誤參入的脫氧核苷酸殘基。岡崎片段是由DNA聚合酶復(fù)合體產(chǎn)生的，而不是DNA聚合酶。在除去RNA引物鏈后，D

24、NA片段通過(guò)DNA連接酶連接。DNA聚合酶，其功能目前還不清楚，一些細(xì)菌突變體，雖無(wú)DNA聚合酶，但卻能正常生長(zhǎng)。DNA聚合酶則是正常生長(zhǎng)所必需的。7（B）真核生物中有三種DNA聚合酶，及。DNApol在細(xì)胞核DNA復(fù)制中起作用；DNApol在細(xì)胞核DNA修復(fù)中起作用；而DNApol則在線粒體DNA復(fù)制中起作用。它們都需要引物，都用脫氧三磷酸核苷作底物，都按53方向合成新生DNA鏈。真核生物DNA聚合酶任何一種均不表現(xiàn)核酸酶活性。8（B）DNA復(fù)制時(shí)，如果兩股鏈按53方向先合成短的DNA片段，然后再連接成連續(xù)的鏈，這就能使DNA的兩條反向互補(bǔ)鏈能夠同時(shí)按53方向的聚合機(jī)制進(jìn)行復(fù)制。岡崎首先從大

25、腸桿菌中分離出正在復(fù)制的新生DNA，并發(fā)現(xiàn)這新生DNA是由一些不連續(xù)片段（岡崎片段）所組成。在大腸桿菌生長(zhǎng)期間，將細(xì)胞短時(shí)間地暴露在氚標(biāo)記的胸腺嘧啶中，在將細(xì)胞DNA變性處理（也就是解鏈）之后，岡崎分離得到了標(biāo)記的DNA片段。它們是單鏈的，并且由于DNA聚合酶復(fù)合體用RNA作引物，因此新生岡崎片段以共價(jià)鍵連著小段RNA鏈，但它們既不是堿基互補(bǔ)的RNADNA雙鏈雜合體，也不是來(lái)自親鏈的片段。新生岡崎片段決不會(huì)被核酸酶切除。9（D）DNA鏈內(nèi)胸腺嘧啶二聚體可因紫外線（UV）照射而形成。專一的修復(fù)系統(tǒng)依賴UV特異的內(nèi)切核酸酶，它能識(shí)別胸腺嘧啶二聚體，并且通常在二聚體5側(cè)切斷磷酸二酯鍵從而在DNA鏈內(nèi)

26、造成一個(gè)缺口。損傷序列的切除以及用完整的互補(bǔ)鏈作為模板重新合成切去的片段都是由DNA聚合酶來(lái)完成的。主鏈與新合成片段之間的裂口則由DNA連接酶接合。堿基缺失、插入、甲基化，或烷基化均不能作為切除修復(fù)體系靶子而為UV特異性內(nèi)切核酸酶所識(shí)別。10（C）DNA連接酶能夠連接留有缺口的DNA鏈或閉合單股DNA鏈以形成環(huán)狀 DNA分子。該酶需要一股鏈末端的游離3/-OH和另一股鏈末端的5/-磷酸，并且要求這兩股鏈?zhǔn)请p鏈DNA的一部分。反應(yīng)是吸能的，因此需要能源。在大腸桿菌和其它細(xì)菌中，能源是NAD+分子中的焦磷酸鍵。NAD+先與酶形成酶AMP復(fù)合物，同時(shí)釋放叮NAD的尼克酰胺單核苷酸；酶一AMP復(fù)合物上

27、的AMP再轉(zhuǎn)移到DNA鏈的5/-磷酸基上，使其活化，然后形成磷酸二酯鍵并釋放AMP。11（E）RNA聚合酶和DNA聚合酶都是以三磷酸核苷（NTP或dNTP）為其底物，這兩種聚合酶都是在生長(zhǎng)中的多核苷酸鏈的3端加接核苷酸單位。DNA聚合酶合成與DNA互補(bǔ)的DNA。合成與RNA互補(bǔ)的DNA的酶稱作逆轉(zhuǎn)錄酶。12（B）紫外線（260nm）照射可引起DNA分子中同一條鏈相鄰胸腺嘧啶之間形成二聚體，并從該點(diǎn)終止復(fù)制。該二聚體可由包括連接酶在內(nèi)的酶系切除和修復(fù)，或在光復(fù)合過(guò)程中，用較長(zhǎng)（330450nm）或較短（230nm）波長(zhǎng)的光照射將其分解。13（E）DNA鏈中插入一個(gè)額外核苷酸會(huì)引起移碼突變并使突變

28、點(diǎn)以后轉(zhuǎn)錄的全部mRNA發(fā)生翻譯錯(cuò)誤。題中列出的所有其它突變通常僅引起一個(gè)氨基酸的錯(cuò)誤（如題中的A或B），或從氨基酸序列中刪除一個(gè)氨基酸（D），或在氨基酸順序中完全沒(méi)有錯(cuò)誤。需要指出的是，如果A或B突變導(dǎo)致生成“無(wú)意義”或鏈終止密碼子，則這種突變所造成的后果也會(huì)象移碼突變那樣是致死的。14（E）在Hbs中，鏈上一個(gè)纈氨酸殘基替換了谷氨酸，這是由于一個(gè)核苷酸堿基的點(diǎn)突變所造成的后果。即位于三聯(lián)體第二位的胸腺嘧啶轉(zhuǎn)換為腺嘌呤。15（A）自發(fā)點(diǎn)突變多半是由于嘌呤或嘧啶堿中氫原子的互變異構(gòu)移位而引起的。在DNA復(fù)制中，這種移位會(huì)引起堿基配對(duì)的改變。某些誘變劑如5溴尿嘧啶和2氨基嘌呤可促進(jìn)DNA堿基的互

29、變異構(gòu)。16（A）吖啶衍生物可導(dǎo)致一個(gè)堿基對(duì)的插入或缺失，從而引起移碼突變。5溴尿嘧啶可引起轉(zhuǎn)換突變，因?yàn)殇迦〈诵叵汆奏さ募谆@樣則增加了烯醇式互變異構(gòu)物與鳥(niǎo)嘌呤而不是腺嘌呤進(jìn)行堿基配對(duì)的可能性。咪唑硫嘌呤可轉(zhuǎn)變?yōu)?巰基嘌呤，后者是嘌呤的類似物。乙基乙磺酸可通過(guò)使鳥(niǎo)嘌呤烷基化引起轉(zhuǎn)換突變。17（D）5溴尿嘧啶可代替胸腺嘧啶參入到DNA中，從而產(chǎn)生密度較高的DNA。然后可在氯化銫密度梯度中用離心法對(duì)新合成的DNA進(jìn)行定量分析。DNA中的5溴尿嘧啶較正常胸嘧啶既不更活潑又不更易被斷裂，也不能象吖啶染料那樣引起移碼突變。18（B）RNA聚合酶必須以DNA為模板催化合成RNA，通常只轉(zhuǎn)錄雙螺旋DN

30、A其中的一條鏈。RNA鏈的合成方向是從5到3端，產(chǎn)物從來(lái)沒(méi)有環(huán)狀分子。與DNA聚合酶不同，RNA聚合酶不需要引物。19（A）因子是RNA聚合酶的一個(gè)亞基，因子本身沒(méi)有催化功能，它的作用是與核心酶結(jié)合，對(duì)轉(zhuǎn)錄的起始特異性起決定性的作用。在有因子的情況下，RNA聚合酶將選擇DNA準(zhǔn)備轉(zhuǎn)錄的那條鏈，并在適當(dāng)?shù)膯?dòng)基因部位開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。20（B）真核生物有三種RNA聚合酶，它們分別催化45SrRNA（RAN聚合酶）mRNA和SnRNA（RNA聚合酶），以及tRNA和5SrRNA（RNA聚合酶）的合成。這三種酶可以根據(jù)它們對(duì)抗生素鵝膏蕈堿的敏感度不同加以區(qū)別：RNA聚合酶耐受；RNA聚合酶極敏感；RNA聚合

31、酶中等敏感。RNA聚合酶催化合成的45S原始轉(zhuǎn)錄本，經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工而成為成熟的18SrRNA，5.8SrRNA和28SrRNA。21（D）真核生物DNA在多個(gè)復(fù)制叉上按半保留方式復(fù)制。真核生物有三種DNA聚合酶：、及。分別參加細(xì)胞核DNA復(fù)制，細(xì)胞核DNA修復(fù)，以及線粒體DNA復(fù)制。真核生物DNA聚合酶一般都不具有核酸酶活性。真核DNA復(fù)制時(shí)，組蛋白不從DNA解離下來(lái)，而是留在含有領(lǐng)頭子鏈的雙鏈DNA上。新合成的組蛋白則與隨從子鏈結(jié)合。22（C）原核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄終止不是隨機(jī)進(jìn)行的，據(jù)目前所知有兩種轉(zhuǎn)錄終止方式即依賴Rho ()因子與不依賴Rho因子的方式。不依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止與轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成二級(jí)

32、結(jié)構(gòu)有關(guān)，即在基因的末端含GC豐富的回文結(jié)構(gòu)，當(dāng)RNA轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)至該部位時(shí)，按模板轉(zhuǎn)錄出的RNA堿基序列會(huì)立即形成發(fā)夾型的二級(jí)結(jié)構(gòu)，這種二級(jí)結(jié)構(gòu)是阻止轉(zhuǎn)錄繼續(xù)向下游推進(jìn)的關(guān)鍵。Rho因子是RNA聚合酶之外的一種蛋白質(zhì)，有控制轉(zhuǎn)錄終止的作用。Rho因子本身似乎就具有ATP酶的活性。23B：DNA連接酶催化DNA鏈兩段之間形成磷酸二酯鍵，但這兩段必須是在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)之中，它不能將兩條游離的單鏈DNA分子連接起來(lái)。在大腸桿菌中，成鍵所需能量來(lái)自NAD，產(chǎn)物是AMP和煙酰胺單核苷酸；而在某些動(dòng)物細(xì)胞以及噬菌體中，則以ATP作為能源。DNA連接酶在DNA合成、修復(fù)以及重組中都是十分重要的。24B：真核

33、mRNA是從2至20千堿基長(zhǎng)的細(xì)胞核RNA前體核不均RNA（hnRNA）形成的。所有真核mRNA5端均具有55焦磷酸連接的7-甲基鳥(niǎo)苷（帽結(jié)構(gòu)）。大多數(shù)真核mRNA的3端連有150至200個(gè)核苷酸長(zhǎng)度的聚腺苷酸尾鏈。從mRNA前體切除內(nèi)含子是由具有高度專一性的酶性催化完成的。內(nèi)含子是不被翻譯的。真核生物mRNA是單順?lè)醋拥摹?#160;（四）是非題1對(duì) 2對(duì) 3錯(cuò) 4錯(cuò) 5錯(cuò) 6錯(cuò)7對(duì) 8錯(cuò) 9對(duì) 10對(duì) 11對(duì) 12對(duì)（五）問(wèn)答題1答：在細(xì)胞分裂過(guò)程中通過(guò)DNA的復(fù)制把遺傳信息由親代傳遞給子代，在子代的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中遺傳信息由DNA傳遞到RNA，最后翻譯成特異的蛋白質(zhì)；在RNA病毒中RNA具

34、有自我復(fù)制的能力，并同時(shí)作為mRNA，指導(dǎo)病毒蛋白質(zhì)的生物合成；在致癌RNA病毒中，RNA還以逆轉(zhuǎn)錄的方式將遺傳信息傳遞給DNA分子。2.答：（1）復(fù)制過(guò)程是半保留的。（2）細(xì)菌或病毒DNA的復(fù)制通常是由特定的復(fù)制起始位點(diǎn)開(kāi)始，真核細(xì)胞染色體DNA復(fù)制則可以在多個(gè)不同部位起始。（3）復(fù)制可以是單向的或是雙向的，以雙向復(fù)制較為常見(jiàn)，兩個(gè)方向復(fù)制的速度不一定相同。（4）兩條DNA鏈合成的方向均是從5向3方向進(jìn)行的。（5）復(fù)制的大部分都是半不連續(xù)的，即其中一條領(lǐng)頭鏈?zhǔn)窍鄬?duì)連續(xù)的，其他隨后鏈則是不連續(xù)的。（6）各短片段在開(kāi)始復(fù)制時(shí)，先形成短片段RNA作為DNA合成的引物，這一RNA片段以后被切除，并用

35、DNA填補(bǔ)余下的空隙。3.答：DNA復(fù)制從特定位點(diǎn)開(kāi)始，可以單向或雙向進(jìn)行，但是以雙向復(fù)制為主。由于 DNA雙鏈的合成延伸均為53的方向，因此復(fù)制是以半不連續(xù)的方式進(jìn)行，可以概括為：雙鏈的解開(kāi)；RNA引物的合成；DNA鏈的延長(zhǎng)；切除RNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的DNA片段。（1）雙鏈的解開(kāi) 在DNA的復(fù)制原點(diǎn)，雙股螺旋解開(kāi)，成單鏈狀態(tài)，形成復(fù)制叉，分別作為模板，各自合成其互補(bǔ)鏈。在復(fù)制叉上結(jié)合著各種各樣與復(fù)制有關(guān)的酶和輔助因子。（2）RNA引物的合成 引發(fā)體在復(fù)制叉上移動(dòng)，識(shí)別合成的起始點(diǎn)，引發(fā)RNA引物的合成。移動(dòng)和引發(fā)均需要由ATP提供能量。以DNA為模板按53的方向，合成一段引物RNA

36、鏈。引物長(zhǎng)度約為幾個(gè)至10個(gè)核苷酸。在引物的5端含3個(gè)磷酸殘基，3端為游離的羥基。（3）DNA鏈的延長(zhǎng) 當(dāng)RNA引物合成之后，在DNA聚合酶的催化下，以四種脫氧核糖核苷5-三磷酸為底物，在RNA引物的3端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出PPi。DNA鏈的合成是以兩條親代DNA鏈為模板，按堿基配對(duì)原則進(jìn)行復(fù)制的。親代DNA的雙股鏈呈反向平行，一條鏈?zhǔn)?3方向，另一條鏈?zhǔn)?5方向。在一個(gè)復(fù)制叉內(nèi)兩條鏈的復(fù)制方向不同，所以新合成的二條子鏈極性也正好相反。由于迄今為止還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)一種DNA聚合酶能按35方向延伸，因此子鏈中有一條鏈沿著親代DNA單鏈的35方向（亦即新合成的DNA沿53方向）不斷延

37、長(zhǎng)。（4）切除引物，填補(bǔ)缺口，連接修復(fù) 當(dāng)新形成的岡崎片段延長(zhǎng)至一定長(zhǎng)度，其3-OH端與前面一條老片斷的5斷接近時(shí)，在DNA聚合酶的作用下，在引物RNA與DNA片段的連接處切去RNA引物后留下的空隙，由DNA聚合酶催化合成一段DNA填補(bǔ)上；在DNA連接酶的作用下，連接相鄰的DNA鏈；修復(fù)摻入DNA鏈的錯(cuò)配堿基。這樣以兩條親代DNA鏈為模板，就形成了兩個(gè)DNA雙股螺旋分子。每個(gè)分子中一條鏈來(lái)自親代DNA，另一條鏈則是新合成的。4.答：（1）原核細(xì)胞大腸桿菌的RNA聚合酶研究的較深入。這個(gè)酶的全酶由5種亞基（2）組成，還含有2個(gè)Zn原子。在RNA合成起始之后，因子便與全酶分離。不含因子的酶仍有催化

38、活性，稱為核心酶。亞基具有與啟動(dòng)子結(jié)合的功能，亞基催化效率很低，而且可以利用別的DNA的任何部位作模板合成RNA。加入因子后，則具有了選擇起始部位的作用，因子可能與核心酶結(jié)合，改變其構(gòu)象，從而使它能特異地識(shí)別DNA模板鏈上的起始信號(hào)。（2）真核細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)有RNA聚合酶I、II和III，通常由46種亞基組成，并含有Zn2+。RNA聚合酶I存在于核仁中，主要催化rRNA前體的轉(zhuǎn)錄。RNA聚合酶和存在于核質(zhì)中，分別催化mRNA前體和小分子量RNA的轉(zhuǎn)錄。此外線粒體和葉綠體也含有RNA聚合酶，其特性類似原核細(xì)胞的RNA聚合酶。5.答：RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程為起始位點(diǎn)的識(shí)別、起始、延伸、終止。（1）起始位點(diǎn)

39、的識(shí)別 RNA聚合酶先與DNA模板上的特殊啟動(dòng)子部位結(jié)合，因子起著識(shí)別DNA分子上的起始信號(hào)的作用。在亞基作用下幫助全酶迅速找到啟動(dòng)子，并與之結(jié)合生成較松弛的封閉型啟動(dòng)子復(fù)合物。這時(shí)酶與DNA外部結(jié)合，識(shí)別部位大約在啟動(dòng)子的-35位點(diǎn)處。接著是DNA構(gòu)象改變活化，得到開(kāi)放型的啟動(dòng)子復(fù)合物，此時(shí)酶與啟動(dòng)子緊密結(jié)合，在-10位點(diǎn)處解開(kāi)DNA雙鏈，識(shí)別其中的模板鏈。由于該部位富含A-T堿基對(duì)，故有利于DNA解鏈。開(kāi)放型復(fù)合物一旦形成，DNA就繼續(xù)解鏈，酶移動(dòng)到起始位點(diǎn)。（2）起始留在起始位點(diǎn)的全酶結(jié)合第一個(gè)核苷三磷酸。第一個(gè)核苷三磷酸常是GTP或ATP。形成的啟動(dòng)子、全酶和核苷三磷酸復(fù)合物稱為三元起始復(fù)合物，第一個(gè)核苷酸摻入的位置稱為轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。這時(shí)亞