實驗維生素C的定量測定

1、實驗實驗8 維生素維生素C的定量測定的定量測定一、實驗目的n1、學習維生素C定量測定法的原理和方法。n2、進一步熟悉、掌握微量商定法的基本操作技術。二、2,6-二氯酚靛酚滴定法定量二氯酚靛酚滴定法定量測定維生素測定維生素C的原理的原理n維生素C具有很強的還原性。它可分為還原性和脫氫型，還原型抗壞血酸能還原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈紅色，還原后變?yōu)闊o色 。一旦溶液中的維生素C已全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以，當溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的維生素C剛剛全部被氧化，此時即為滴定終點。 CCCCCCHOHH

2、OHOOH OHO2NOHClClO+CCCCCCOHOHOOH OHO2NOHClClO+OH(藍色)還原型抗壞血酸還原型抗壞血酸氧化型脫氫抗壞血酸氧化型脫氫抗壞血酸2，6二氯酚靛酚二氯酚靛酚還原型還原型2，6二氯酚靛酚二氯酚靛酚(紅紅 色色)HOH+ (無色）NClClO 三、試劑三、試劑n2%草酸溶液草酸溶液: 草酸草酸2g溶于溶于100ml蒸餾水中。蒸餾水中。n1%草酸溶液草酸溶液: 草酸草酸1g溶于溶于100ml蒸餾水中。蒸餾水中。n 標準抗壞血酸溶液（標準抗壞血酸溶液（1mg/ml）: 準確稱取準確稱取100mg純純 抗壞血酸（應為潔白色，如變?yōu)辄S抗壞血酸（應為潔白色，如變?yōu)辄S色則

3、不能用）溶于色則不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀釋至草酸溶液中，并稀釋至100ml，貯于棕色瓶中，冷藏。最好臨用前配，貯于棕色瓶中，冷藏。最好臨用前配制。制。 三、試劑三、試劑n0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于二氯酚靛酚溶于150ml含有含有52mg NaHCO3的熱水中，冷卻后加水稀釋至的熱水中，冷卻后加水稀釋至250ml，貯于棕色瓶中冷藏（，貯于棕色瓶中冷藏（4）約）約可保存一周。每次臨用時，以標準抗壞可保存一周。每次臨用時，以標準抗壞血酸溶液標定。血酸溶液標定。 四、材料四、材料 蘋果、辣椒等。蘋果、辣椒等。 五、器材五、器材 錐形瓶（

4、錐形瓶（100ml），組織搗碎器，吸量管（），組織搗碎器，吸量管（10ml），）， 漏斗，濾紙，微量滴定管（漏斗，濾紙，微量滴定管（5ml），容量瓶（），容量瓶（100ml，250ml）。）。 六、提取六、提取 水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果，水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果，用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取20g，加入，加入20ml 2%草酸，用研缽研磨，草酸，用研缽研磨，四層紗布過濾，濾液備用。紗布可用少量四層紗布過濾，濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次，合并濾液，濾液總體積草酸洗幾次，合并濾液，濾液總體積定容至定容至50ml。 七、標準液滴

5、定七、標準液滴定 準確吸取標準抗壞血酸溶液準確吸取標準抗壞血酸溶液1ml置置100ml錐形錐形瓶中，加瓶中，加9ml 1%草酸，用微量滴定管以草酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色，并保持二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色，并保持15s不褪色，即達終點。由所用染料的體積計算出不褪色，即達終點。由所用染料的體積計算出1ml染料相當于多少毫克抗壞血酸（取染料相當于多少毫克抗壞血酸（取10ml 1%草酸作空白對照，按以上方法滴定）。草酸作空白對照，按以上方法滴定）。 八、樣品滴定八、樣品滴定n準確吸取濾液兩份，每份準確吸取濾液兩份，每份10ml, 分別放入分別放入2個錐形瓶個錐形瓶內，滴定方法同前。另取內，滴定方法同前。另取10ml 1%草酸作空白對照草酸作空白對照滴定。滴定。 九、計算九、計算n式中：式中：VA為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù)；為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù)； VB為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù)；為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù)； C為樣品提取液的總毫升數(shù)；為樣品提取液的總毫升數(shù)； D為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù)；為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù)；