第四章 生物制品生產(chǎn)的基本技術(shù)生物制品學(xué) 教學(xué)課件

1、主講教師：趙凱主講教師：趙凱 博士博士E-mailE-mail： 電電 話：話：第一節(jié)第一節(jié) 菌菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的選育培養(yǎng)與保藏種的選育培養(yǎng)與保藏 一、生物制品菌一、生物制品菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的分類種的分類生物制品中使用的菌生物制品中使用的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的范圍很種的范圍很廣泛，廣泛，包括生產(chǎn)和檢定疫苗、毒素、類毒素、包括生產(chǎn)和檢定疫苗、毒素、類毒素、抗血清以及診斷用品等的菌抗血清以及診斷用品等的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種種，并，并隨著生物制品種類的增多和生物制品技術(shù)的隨著生物制品種類的增多和生物制品技術(shù)的發(fā)展，菌發(fā)展，菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的內(nèi)容也會(huì)

2、不斷增加。種的內(nèi)容也會(huì)不斷增加。（一）、按菌（一）、按菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的毒力分類種的毒力分類1 1、強(qiáng)毒菌、強(qiáng)毒菌( (毒、蟲毒、蟲) )種種 n是指具有強(qiáng)大致病力的菌是指具有強(qiáng)大致病力的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種，種，一般免疫原性也良好，常用于制造某些滅一般免疫原性也良好，常用于制造某些滅活疫苗，抗血清以及疫苗效力檢驗(yàn)?；钜呙纾寡逡约耙呙缧Яz驗(yàn)。2 2、弱毒菌、弱毒菌( (毒、蟲毒、蟲) )種種 n是指對(duì)動(dòng)物無致病力而具有一定免疫原是指對(duì)動(dòng)物無致病力而具有一定免疫原性的菌性的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種，主要用于制造弱毒活種，主要用于制造弱毒活苗。苗。（二）、按菌（二）、

3、按菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的用途分類種的用途分類1 1、生產(chǎn)用菌、生產(chǎn)用菌( (毒、蟲毒、蟲) )種種 n是指用于生產(chǎn)生物制品的菌是指用于生產(chǎn)生物制品的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種，即指種，即指生產(chǎn)疫苗、抗毒素、類毒素、抗血清及診斷用品生產(chǎn)疫苗、抗毒素、類毒素、抗血清及診斷用品的菌、毒種。的菌、毒種。如生產(chǎn)豬瘟兔化弱毒疫苗用的豬瘟種毒，生產(chǎn)如生產(chǎn)豬瘟兔化弱毒疫苗用的豬瘟種毒，生產(chǎn)破傷風(fēng)類毒素的破傷風(fēng)菌種，生產(chǎn)炭疽抗血清的破傷風(fēng)類毒素的破傷風(fēng)菌種，生產(chǎn)炭疽抗血清的號(hào)炭疽桿菌號(hào)炭疽桿菌C40C402222菌種，制造牛型結(jié)核菌素的菌種，制造牛型結(jié)核菌素的牛型結(jié)核桿菌菌種等牛型結(jié)核桿菌菌種等（二）

4、、按菌（二）、按菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的用途分類種的用途分類2 2、檢定用菌、檢定用菌( (毒、蟲）種毒、蟲）種 n是指用于檢定生物制品效力等菌是指用于檢定生物制品效力等菌( (毒、蟲毒、蟲) )種。種。如效力如效力檢驗(yàn)中攻毒用的新城疫強(qiáng)毒，豬丹毒強(qiáng)毒菌種等。另檢驗(yàn)中攻毒用的新城疫強(qiáng)毒，豬丹毒強(qiáng)毒菌種等。另外，還包括外，還包括用于檢定診斷血清交叉反應(yīng)的菌（毒、蟲）用于檢定診斷血清交叉反應(yīng)的菌（毒、蟲）種。種。3 3、工具用菌（毒、蟲）種、工具用菌（毒、蟲）種n是指在生物制品生產(chǎn)中作為工具使用的菌（毒、蟲）是指在生物制品生產(chǎn)中作為工具使用的菌（毒、蟲）種。種。如基因工程中表達(dá)某些異種抗原用

5、的宿主大腸桿如基因工程中表達(dá)某些異種抗原用的宿主大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌等。菌、枯草桿菌、酵母菌等。二、生物制品中菌二、生物制品中菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的條件種的條件菌（毒、蟲）種是決定生物制品質(zhì)菌（毒、蟲）種是決定生物制品質(zhì)量的重要因素，懸于培養(yǎng)好的菌（毒、量的重要因素，懸于培養(yǎng)好的菌（毒、蟲）種也是生物制品工作中最重要的蟲）種也是生物制品工作中最重要的一環(huán)。好的菌（毒、蟲）種應(yīng)具備如一環(huán)。好的菌（毒、蟲）種應(yīng)具備如下條件。下條件。（一）、具有良好的免疫原性（一）、具有良好的免疫原性由于生物制品主要是免疫制劑，故由于生物制品主要是免疫制劑，故耍求菌耍求菌( (毒、蟲毒、蟲) )種應(yīng)具

6、種應(yīng)具有良好的免疫原性，使用后能產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免有良好的免疫原性，使用后能產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫，并持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間，同時(shí)對(duì)某些菌疫，并持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間，同時(shí)對(duì)某些菌( (毒，蟲毒，蟲) )種而言還應(yīng)是種而言還應(yīng)是抗原譜廣?？乖V廣。一般來說，一般來說，動(dòng)物接種后產(chǎn)生動(dòng)物接種后產(chǎn)生8080以上的保護(hù)即為有良好的以上的保護(hù)即為有良好的免疫原性。免疫原性。因?yàn)闄C(jī)體的免疫反應(yīng)是一個(gè)生物學(xué)過程，受到遺因?yàn)闄C(jī)體的免疫反應(yīng)是一個(gè)生物學(xué)過程，受到遺傳、環(huán)境等許多因素的影響，不論使用菌傳、環(huán)境等許多因素的影響，不論使用菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的免疫種的免疫原性多么好，都不可能一次使免疫動(dòng)物獲得原性

7、多么好，都不可能一次使免疫動(dòng)物獲得100100的保護(hù)。的保護(hù)。生物診斷用品的菌生物診斷用品的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種應(yīng)以少量注入動(dòng)物體內(nèi)就能種應(yīng)以少量注入動(dòng)物體內(nèi)就能產(chǎn)生強(qiáng)烈免疫反應(yīng)，這樣才能生產(chǎn)出既特異又靈敏的診斷用產(chǎn)生強(qiáng)烈免疫反應(yīng)，這樣才能生產(chǎn)出既特異又靈敏的診斷用品。品。 （二）、具有可靠的安全性（二）、具有可靠的安全性生物制品使用的菌生物制品使用的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種除具有良好的種除具有良好的免疫原性外還應(yīng)安全。免疫原性外還應(yīng)安全。菌菌( (毒、蟲）種的安全毒、蟲）種的安全性主要與兩方面的因素有關(guān)，一方面是菌性主要與兩方面的因素有關(guān)，一方面是菌( (毒、毒、蟲蟲) )種本身

8、的殘余毒力；另一方面是混有強(qiáng)毒種本身的殘余毒力；另一方面是混有強(qiáng)毒或其他病原體。或其他病原體。 殘余毒力是指減毒后的弱毒菌殘余毒力是指減毒后的弱毒菌( (毒、蟲毒、蟲) )種仍種仍殘存一定的毒力或致病力。殘存一定的毒力或致病力。如雞新城疫如雞新城疫系弱系弱毒疫苗種毒就保持較強(qiáng)的毒力，對(duì)雛雞接種后毒疫苗種毒就保持較強(qiáng)的毒力，對(duì)雛雞接種后有致病性，而有致病性，而2 2個(gè)月齡以上的雞接種才安全。個(gè)月齡以上的雞接種才安全。（二）、具有可靠的安全性（二）、具有可靠的安全性在菌在菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的選育培養(yǎng)時(shí)，盡量降低毒力，種的選育培養(yǎng)時(shí)，盡量降低毒力，保持良好的抗原性，使動(dòng)物接種后既能產(chǎn)生良好

9、的保持良好的抗原性，使動(dòng)物接種后既能產(chǎn)生良好的免疫，又不致于引起發(fā)病或損傷。免疫，又不致于引起發(fā)病或損傷。而在實(shí)踐中，一般而在實(shí)踐中，一般免疫原性與毒力呈正相關(guān)免疫原性與毒力呈正相關(guān)，免，免疫原性強(qiáng)毒力也強(qiáng)。如果采用某種方法使毒力降低，疫原性強(qiáng)毒力也強(qiáng)。如果采用某種方法使毒力降低，免疫原性也隨之降低。用于生產(chǎn)滅活疫苗的強(qiáng)毒都免疫原性也隨之降低。用于生產(chǎn)滅活疫苗的強(qiáng)毒都有很好免疫原性，而用于生產(chǎn)活疫苗的弱毒，免疫有很好免疫原性，而用于生產(chǎn)活疫苗的弱毒，免疫原性都有一定程度下降。這是選育培養(yǎng)菌原性都有一定程度下降。這是選育培養(yǎng)菌( (毒、蟲毒、蟲) )種時(shí)需要注意和解決的一個(gè)矛盾，從某種意義上講種

10、時(shí)需要注意和解決的一個(gè)矛盾，從某種意義上講安全更為重要。安全更為重要。（二）、具有可靠的安全性（二）、具有可靠的安全性在菌在菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的選育培養(yǎng)過程中還要避免種的選育培養(yǎng)過程中還要避免污染強(qiáng)毒和其他病原體，尤其是用于活疫苗生污染強(qiáng)毒和其他病原體，尤其是用于活疫苗生產(chǎn)的菌產(chǎn)的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種。種。因?yàn)樵谏a(chǎn)活疫苗時(shí)，不加任何滅活劑，使因?yàn)樵谏a(chǎn)活疫苗時(shí)，不加任何滅活劑，使污染的強(qiáng)毒和病原體得不到應(yīng)有的處理。污染的強(qiáng)毒和病原體得不到應(yīng)有的處理。對(duì)于毒種來說，控制污染外源病原體是較難對(duì)于毒種來說，控制污染外源病原體是較難的。因?yàn)橛糜诓《九囵B(yǎng)的細(xì)胞、雞胚及動(dòng)物不的。因?yàn)橛?/p>

11、于病毒培養(yǎng)的細(xì)胞、雞胚及動(dòng)物不易做到完全無污染。易做到完全無污染。（三）、具有典型的生物學(xué)性狀（三）、具有典型的生物學(xué)性狀p選育培養(yǎng)的菌選育培養(yǎng)的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種要有典型的生物學(xué)性狀，如形種要有典型的生物學(xué)性狀，如形態(tài)、染色、培養(yǎng)特性、生化特性、抗原結(jié)構(gòu)、致病性、宿態(tài)、染色、培養(yǎng)特性、生化特性、抗原結(jié)構(gòu)、致病性、宿主適應(yīng)范圍、代謝產(chǎn)物、色素產(chǎn)生以及抵抗力等。主適應(yīng)范圍、代謝產(chǎn)物、色素產(chǎn)生以及抵抗力等。p這些生物學(xué)性狀是鑒別菌這些生物學(xué)性狀是鑒別菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的重要標(biāo)志，可用種的重要標(biāo)志，可用以區(qū)分其他微生物，進(jìn)而在生產(chǎn)和檢定生物制品時(shí)依據(jù)這以區(qū)分其他微生物，進(jìn)而在生產(chǎn)

12、和檢定生物制品時(shí)依據(jù)這些性狀來控制質(zhì)量些性狀來控制質(zhì)量。p如果發(fā)現(xiàn)某些性狀改變就標(biāo)志著菌如果發(fā)現(xiàn)某些性狀改變就標(biāo)志著菌( (毒、蟲毒、蟲) )種發(fā)生了變種發(fā)生了變異或發(fā)生外源污染，應(yīng)及時(shí)廢棄或更換，如果是用弱毒或異或發(fā)生外源污染，應(yīng)及時(shí)廢棄或更換，如果是用弱毒或無毒菌無毒菌( (毒、蟲毒、蟲) )種生產(chǎn)生物制品，這些性狀也是區(qū)別強(qiáng)毒種生產(chǎn)生物制品，這些性狀也是區(qū)別強(qiáng)毒株的標(biāo)志，從而保證制品的安全性和免疫原性。株的標(biāo)志，從而保證制品的安全性和免疫原性。（四）、具有遺傳穩(wěn)定性和一致性（四）、具有遺傳穩(wěn)定性和一致性p微生物在傳代和生產(chǎn)過程中，由于大量增殖時(shí)基因突微生物在傳代和生產(chǎn)過程中，由于大量增殖

13、時(shí)基因突變而表現(xiàn)出某些特性變異。變而表現(xiàn)出某些特性變異。如形態(tài)、生化特性、毒力、如形態(tài)、生化特性、毒力、抗原性及藥物敏感性的變異。抗原性及藥物敏感性的變異。p人工選育培養(yǎng)弱毒菌（毒、蟲人工選育培養(yǎng)弱毒菌（毒、蟲) )株就是利用毒力變異的株就是利用毒力變異的特性在一定條件下經(jīng)多次傳代而使毒力減弱的。特性在一定條件下經(jīng)多次傳代而使毒力減弱的。p然而，然而，選育出的菌選育出的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種在用于生產(chǎn)時(shí)要注意具種在用于生產(chǎn)時(shí)要注意具有穩(wěn)定的遺傳特性和保持微生物群體的一致性，尤其是有穩(wěn)定的遺傳特性和保持微生物群體的一致性，尤其是毒力和免疫原性的遺傳穩(wěn)定性毒力和免疫原性的遺傳穩(wěn)定性，以避免毒

14、力返祖和免疫，以避免毒力返祖和免疫原性下降，從而確保生物制品的質(zhì)量。原性下降，從而確保生物制品的質(zhì)量。（四）、具有遺傳穩(wěn)定性和一致性（四）、具有遺傳穩(wěn)定性和一致性p一般采用限制菌一般采用限制菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的傳代次數(shù)和培養(yǎng)種的傳代次數(shù)和培養(yǎng)條件來控制變異幅度，并定期進(jìn)行檢定。條件來控制變異幅度，并定期進(jìn)行檢定。發(fā)現(xiàn)有發(fā)現(xiàn)有性狀變化時(shí)可通過育種、傳代、蝕斑純化等方法性狀變化時(shí)可通過育種、傳代、蝕斑純化等方法來恢復(fù)性狀；如果在微生物群體中發(fā)現(xiàn)性狀不一來恢復(fù)性狀；如果在微生物群體中發(fā)現(xiàn)性狀不一致，可采用傳代和篩選等方法進(jìn)行純化，例如，致，可采用傳代和篩選等方法進(jìn)行純化，例如，細(xì)菌可挑選典

15、型的單個(gè)菌落，病毒可挑選蝕斑進(jìn)細(xì)菌可挑選典型的單個(gè)菌落，病毒可挑選蝕斑進(jìn)行純化。行純化。p菌菌( (毒、蟲毒、蟲) )種在遺傳上的穩(wěn)定性和一致性對(duì)生種在遺傳上的穩(wěn)定性和一致性對(duì)生產(chǎn)至關(guān)重要。產(chǎn)至關(guān)重要。（五）、歷史及有關(guān)資料清楚完整（五）、歷史及有關(guān)資料清楚完整對(duì)于菌對(duì)于菌( (毒、蟲毒、蟲) )種要有明確的來源，種要有明確的來源，分離時(shí)動(dòng)物病情及流行情況，傳代及生分離時(shí)動(dòng)物病情及流行情況，傳代及生物學(xué)和免疫學(xué)特性，生產(chǎn)工藝質(zhì)量檢定，物學(xué)和免疫學(xué)特性，生產(chǎn)工藝質(zhì)量檢定，動(dòng)物試驗(yàn)等各方面的研究資料和數(shù)據(jù)都動(dòng)物試驗(yàn)等各方面的研究資料和數(shù)據(jù)都應(yīng)完整。這樣的菌應(yīng)完整。這樣的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種

16、方可用于種方可用于生物制品。生物制品。第一節(jié) 細(xì)胞生物學(xué)研究的內(nèi)容與現(xiàn)狀生物制品用的菌生物制品用的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種還應(yīng)該易于培種還應(yīng)該易于培養(yǎng)和大量繁殖，并能穩(wěn)定地達(dá)到和保持較高養(yǎng)和大量繁殖，并能穩(wěn)定地達(dá)到和保持較高的滴度。的滴度。用于生產(chǎn)類毒素和抗毒素的菌種，應(yīng)該能用于生產(chǎn)類毒素和抗毒素的菌種，應(yīng)該能夠大量產(chǎn)生外毒素。對(duì)于某些生物制品還應(yīng)夠大量產(chǎn)生外毒素。對(duì)于某些生物制品還應(yīng)考慮提取、純化手段等。考慮提取、純化手段等。（六）、其他條件（六）、其他條件三、菌三、菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的選育培養(yǎng)方法種的選育培養(yǎng)方法按著菌按著菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的標(biāo)準(zhǔn)選育培養(yǎng)種的標(biāo)準(zhǔn)選育

17、培養(yǎng)優(yōu)良的菌優(yōu)良的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種是生物制品研究種是生物制品研究和生產(chǎn)的關(guān)鍵。和生產(chǎn)的關(guān)鍵。選育培養(yǎng)方法一般有選育培養(yǎng)方法一般有如下幾種。如下幾種。（一）、自然選育培養(yǎng)法（一）、自然選育培養(yǎng)法人們對(duì)生物制品菌人們對(duì)生物制品菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的選育培養(yǎng)最先采用的方法種的選育培養(yǎng)最先采用的方法就屬于自然選育培養(yǎng)法。就屬于自然選育培養(yǎng)法。遠(yuǎn)在遠(yuǎn)在1515世紀(jì)，我國(guó)民間就用良好的天花患者的干燥痂皮研世紀(jì)，我國(guó)民間就用良好的天花患者的干燥痂皮研成粉末吹鼻免疫。成粉末吹鼻免疫。100100多年前，巴斯德就選用雞霍亂巴氏桿多年前，巴斯德就選用雞霍亂巴氏桿菌陳舊培養(yǎng)物制備疫苗，并獲得免疫

18、成功。此后又有學(xué)者采菌陳舊培養(yǎng)物制備疫苗，并獲得免疫成功。此后又有學(xué)者采用加熱殺死雞霍亂巴氏桿菌首次制成了死菌疫苗。用加熱殺死雞霍亂巴氏桿菌首次制成了死菌疫苗。自然選育培養(yǎng)法是對(duì)自然界中已存在的菌自然選育培養(yǎng)法是對(duì)自然界中已存在的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株進(jìn)行株進(jìn)行分離，從中選擇適于種用的菌分離，從中選擇適于種用的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株。株。一般常以感染的一般常以感染的動(dòng)物，媒介昆蟲以及污染物等獲得分離。動(dòng)物，媒介昆蟲以及污染物等獲得分離。（一）、自然選育培養(yǎng)法（一）、自然選育培養(yǎng)法分離到菌分離到菌 ( (毒、蟲毒、蟲) )株的毒力，抗原性往往都不同株的毒力，抗原性往往都不同。l某些自

19、然分離的菌某些自然分離的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株毒力很強(qiáng)株毒力很強(qiáng)，如自然分離的多，如自然分離的多殺性巴氏桿菌等。這些強(qiáng)毒株適于制造滅活菌、診斷抗原和殺性巴氏桿菌等。這些強(qiáng)毒株適于制造滅活菌、診斷抗原和檢定用。檢定用。l有些自然分離菌有些自然分離菌( (毒、蟲毒、蟲) )株毒力很弱，抗原性也較好株毒力很弱，抗原性也較好，如，如雞新城疫雞新城疫BlBl株弱疫苗，株弱疫苗，L L系弱毒、馬立克氏病系弱毒、馬立克氏病SB-lSB-l弱毒株等，弱毒株等，這些弱毒株適于制造弱疫苗。這些弱毒株適于制造弱疫苗。在自然弱毒中還包括由異種動(dòng)物引用過來的菌在自然弱毒中還包括由異種動(dòng)物引用過來的菌( (毒、蟲毒

20、、蟲) )株，株，如用火雞皰疹病毒預(yù)防雞馬立克氏病、鴿痘病毒預(yù)防雞痘，如用火雞皰疹病毒預(yù)防雞馬立克氏病、鴿痘病毒預(yù)防雞痘，也有用牛病毒性腹瀉也有用牛病毒性腹瀉- -粘膜病弱毒株預(yù)防豬瘟等。這些菌粘膜病弱毒株預(yù)防豬瘟等。這些菌( (毒、毒、蟲蟲) )株是由于在自然條件下流行或傳代過程中適應(yīng)存在和變株是由于在自然條件下流行或傳代過程中適應(yīng)存在和變異的結(jié)果。異的結(jié)果。（一）、自然選育培養(yǎng)法（一）、自然選育培養(yǎng)法F自然選育培養(yǎng)菌自然選育培養(yǎng)菌( (毒、蟲毒、蟲) )種時(shí)，首先從分離的菌種時(shí)，首先從分離的菌( (毒、毒、蟲蟲) )株中選擇形態(tài)特征、培養(yǎng)特性、理化特性典型的，株中選擇形態(tài)特征、培養(yǎng)特性、理

21、化特性典型的，并與相應(yīng)診斷血清出現(xiàn)明顯血清學(xué)反應(yīng)的菌并與相應(yīng)診斷血清出現(xiàn)明顯血清學(xué)反應(yīng)的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株，株，然后再測(cè)定其毒力和免疫原性。然后再測(cè)定其毒力和免疫原性。F測(cè)定時(shí)首先用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行初選，然后再用原宿主動(dòng)測(cè)定時(shí)首先用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行初選，然后再用原宿主動(dòng)物測(cè)定。物測(cè)定。F毒力測(cè)定毒力測(cè)定一般是先選用敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雞胚或細(xì)胞一般是先選用敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)物等，測(cè)定菌培養(yǎng)物等，測(cè)定菌( (毒、蟲毒、蟲) )株的半數(shù)致死量（株的半數(shù)致死量（LDLD5050），），最小致死量（最小致死量（MLDMLD），半數(shù)感染量（），半數(shù)感染量（IDID5050）或者是半數(shù)雞）或者是

22、半數(shù)雞胚致死量（胚致死量（ CELDCELD5050 ），半數(shù)雞胚感染量（），半數(shù)雞胚感染量（CEIDCEID5050 ）、）、半數(shù)細(xì)胞感染量（半數(shù)細(xì)胞感染量（TCIDTCID5050 ）等。）等。（一）、自然選育培養(yǎng)法（一）、自然選育培養(yǎng)法n在測(cè)定時(shí)，還應(yīng)設(shè)生理鹽水或培養(yǎng)液陰性對(duì)照和同種在測(cè)定時(shí)，還應(yīng)設(shè)生理鹽水或培養(yǎng)液陰性對(duì)照和同種菌菌( (毒、蟲毒、蟲) )種的陰性對(duì)照，以免得出錯(cuò)誤結(jié)論。種的陰性對(duì)照，以免得出錯(cuò)誤結(jié)論。n如果陰性對(duì)照動(dòng)物發(fā)病，則實(shí)驗(yàn)不能成立；如果陰性對(duì)照動(dòng)物發(fā)病，則實(shí)驗(yàn)不能成立；n如果陰性對(duì)照不發(fā)病，則對(duì)結(jié)論應(yīng)慎重。如果陰性對(duì)照不發(fā)病，則對(duì)結(jié)論應(yīng)慎重。F免疫原性測(cè)定免疫原

23、性測(cè)定是使對(duì)菌是使對(duì)菌( (毒、蟲毒、蟲) )種免疫敏感的動(dòng)物產(chǎn)種免疫敏感的動(dòng)物產(chǎn)生免疫力，然后再用強(qiáng)毒攻擊，如果動(dòng)物不發(fā)病死亡則生免疫力，然后再用強(qiáng)毒攻擊，如果動(dòng)物不發(fā)病死亡則表明有一定的免疫原性。如果分離的菌表明有一定的免疫原性。如果分離的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株有數(shù)株有數(shù)種，可分別免疫，然后交叉攻擊感染以確定抗原譜。種，可分別免疫，然后交叉攻擊感染以確定抗原譜。F作為菌作為菌( (毒、蟲毒、蟲) )種應(yīng)選用的免疫原性好，且抗原譜廣，種應(yīng)選用的免疫原性好，且抗原譜廣，能提供交叉保護(hù)的菌能提供交叉保護(hù)的菌( (毒，蟲毒，蟲) )株。株。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法由于死疫

24、苗免疫效果不理想，而且反應(yīng)重，由于死疫苗免疫效果不理想，而且反應(yīng)重，這便促使人們研究和使用弱毒活疫苗免疫。這便促使人們研究和使用弱毒活疫苗免疫。生產(chǎn)弱毒活疫苗所用的菌生產(chǎn)弱毒活疫苗所用的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種只靠自種只靠自然選育培養(yǎng)是遠(yuǎn)不能滿足要求的，因而開始了然選育培養(yǎng)是遠(yuǎn)不能滿足要求的，因而開始了人工選育培養(yǎng)菌人工選育培養(yǎng)菌( (毒、蟲毒、蟲) )種。種。目前，在生產(chǎn)中目前，在生產(chǎn)中用于制造疫苗菌用于制造疫苗菌( (毒、蟲毒、蟲) )種多為人工選育培養(yǎng)種多為人工選育培養(yǎng)獲得。獲得。本法是生物制品菌本法是生物制品菌( (毒、蟲毒、蟲) )種選育培養(yǎng)的最種選育培養(yǎng)的最重要、最常用的方法。

25、重要、最常用的方法。 （二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法人工選育培養(yǎng)法就是分離的菌人工選育培養(yǎng)法就是分離的菌( (毒、蟲毒、蟲) )株在培養(yǎng)和傳株在培養(yǎng)和傳代過程中采用某些理化和生物學(xué)方法誘發(fā)其發(fā)生變異，代過程中采用某些理化和生物學(xué)方法誘發(fā)其發(fā)生變異，使毒力減弱或消失而仍保持一定的免疫原性。使毒力減弱或消失而仍保持一定的免疫原性。有的毒力致弱后毒力穩(wěn)定，用于制苗的代數(shù)不受限制；有的毒力致弱后毒力穩(wěn)定，用于制苗的代數(shù)不受限制；也有的在繼代時(shí)免疫性亦隨之喪失，制苗使用代數(shù)較窄。也有的在繼代時(shí)免疫性亦隨之喪失，制苗使用代數(shù)較窄。入選的微生物要經(jīng)過毒力和免疫原性穩(wěn)定性測(cè)定，在入選的微生物要經(jīng)

26、過毒力和免疫原性穩(wěn)定性測(cè)定，在培養(yǎng)基中連續(xù)傳代后不改變的，說明穩(wěn)定性良好且有使培養(yǎng)基中連續(xù)傳代后不改變的，說明穩(wěn)定性良好且有使用價(jià)值。用價(jià)值。人工選育培養(yǎng)菌人工選育培養(yǎng)菌( (毒、蟲毒、蟲) )種可具體分以下幾種方法。種可具體分以下幾種方法。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法1 1、物理學(xué)方法、物理學(xué)方法 主要包括以下幾個(gè)方面。主要包括以下幾個(gè)方面。（1 1）溫）溫 度度各種微生物都有其最適宜的生長(zhǎng)繁殖溫度，各種微生物都有其最適宜的生長(zhǎng)繁殖溫度，如果如果改變溫度可引起發(fā)生變異，以適應(yīng)環(huán)境。改變溫度可引起發(fā)生變異，以適應(yīng)環(huán)境。再通過選擇生產(chǎn)性能比較穩(wěn)定的變異株再通過選擇生產(chǎn)性能比較穩(wěn)定

27、的變異株，如巴，如巴斯德將炭疽桿菌培養(yǎng)于斯德將炭疽桿菌培養(yǎng)于4242育成減毒株，用于育成減毒株，用于預(yù)防注射；豬肺疫內(nèi)蒙古系弱毒株也是經(jīng)高溫預(yù)防注射；豬肺疫內(nèi)蒙古系弱毒株也是經(jīng)高溫培養(yǎng)選育的。培養(yǎng)選育的。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法（2 2）射）射 線線將微生物暴露于紫外線或?qū)⑽⑸锉┞队谧贤饩€或射線、射線、射線下，射線下，大大增強(qiáng)了微生物的突變頻率，可從中選出變大大增強(qiáng)了微生物的突變頻率，可從中選出變異株。異株。如制造乙型腦炎疫苗的如制造乙型腦炎疫苗的2-82-8弱毒株就是弱毒株就是采用紫外線處理和小鼠皮下傳代選育的。仔豬采用紫外線處理和小鼠皮下傳代選育的。仔豬副寒副寒C50

28、0C500號(hào)菌株選育過程中就使用了鈷號(hào)菌株選育過程中就使用了鈷 射射線處理。線處理。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法2 2、化學(xué)方法、化學(xué)方法 主要包括以下幾個(gè)方面。主要包括以下幾個(gè)方面。（1 1）改變培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境）改變培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境需氧菌培養(yǎng)在厭氧環(huán)境中，或厭氧菌培養(yǎng)在需氧菌培養(yǎng)在厭氧環(huán)境中，或厭氧菌培養(yǎng)在有氧環(huán)境中，也能夠逐漸適應(yīng)，產(chǎn)生變異株。有氧環(huán)境中，也能夠逐漸適應(yīng)，產(chǎn)生變異株。如如SternStern在二氧化碳環(huán)境中選育出了無莢膜的在二氧化碳環(huán)境中選育出了無莢膜的炭疽桿菌變異株，炭疽桿菌變異株， （二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法（2 2）改變培養(yǎng)基的組成

29、）改變培養(yǎng)基的組成在細(xì)菌培養(yǎng)基中加入或去掉其中物質(zhì)可以引起變異，在細(xì)菌培養(yǎng)基中加入或去掉其中物質(zhì)可以引起變異，并使毒力下降，成為弱毒株。并使毒力下降，成為弱毒株。p如馬流產(chǎn)如馬流產(chǎn)C355C355弱毒株是在培養(yǎng)基中加入了醋酸鉈育成弱毒株是在培養(yǎng)基中加入了醋酸鉈育成的；豬肺疫的；豬肺疫630630弱毒株是在含海歐牌洗滌劑培養(yǎng)基中連弱毒株是在含海歐牌洗滌劑培養(yǎng)基中連續(xù)傳代育成的；豬丹毒續(xù)傳代育成的；豬丹毒G4T10G4T10弱毒株是在含維黃素的血弱毒株是在含維黃素的血瓊脂上培養(yǎng)選育的；瓊脂上培養(yǎng)選育的；WilliamsWilliams應(yīng)用亞硝酸和羥胺誘變選應(yīng)用亞硝酸和羥胺誘變選育了腺病毒株。育了腺

30、病毒株。能夠引起變異的化學(xué)物質(zhì)種類很多，除上述外還包括能夠引起變異的化學(xué)物質(zhì)種類很多，除上述外還包括許多許多堿基化合物、烷基化合物以及吖啶類堿基化合物、烷基化合物以及吖啶類。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法3 3、生物學(xué)方法、生物學(xué)方法 主要包括以下幾個(gè)方面。主要包括以下幾個(gè)方面。（1 1）通過動(dòng)物機(jī)體）通過動(dòng)物機(jī)體將強(qiáng)毒菌將強(qiáng)毒菌( (毒、蟲毒、蟲) )株通過非易感的動(dòng)物機(jī)體，可以改株通過非易感的動(dòng)物機(jī)體，可以改變強(qiáng)毒株的毒力，使其成為弱毒株。變強(qiáng)毒株的毒力，使其成為弱毒株。p如將豬瘟強(qiáng)毒通過兔體傳代使其成為豬瘟兔化弱毒用如將豬瘟強(qiáng)毒通過兔體傳代使其成為豬瘟兔化弱毒用于疫苗生產(chǎn)，

31、已在世界享有盛譽(yù)；通過鵪鶉成功地培育于疫苗生產(chǎn)，已在世界享有盛譽(yù)；通過鵪鶉成功地培育了雞痘鵪鶉化弱毒；通過豚鼠成功地培育了布氏桿菌羊了雞痘鵪鶉化弱毒；通過豚鼠成功地培育了布氏桿菌羊五號(hào)弱毒株；通過乳兔成功地培養(yǎng)了豬地方性肺炎乳兔五號(hào)弱毒株；通過乳兔成功地培養(yǎng)了豬地方性肺炎乳兔化弱毒株等。也可以通過雞胚培育弱毒株，如雞胚致弱化弱毒株等。也可以通過雞胚培育弱毒株，如雞胚致弱的羊痘雞胚化弱毒。的羊痘雞胚化弱毒。（二）、人工選育培養(yǎng)法（二）、人工選育培養(yǎng)法（2 2）通過細(xì)胞培養(yǎng)物）通過細(xì)胞培養(yǎng)物將強(qiáng)毒力菌將強(qiáng)毒力菌( (毒、蟲毒、蟲) )株通過細(xì)胞培養(yǎng)物反復(fù)傳代也株通過細(xì)胞培養(yǎng)物反復(fù)傳代也可以使其毒力

32、減弱或消失。可以使其毒力減弱或消失。p如馬傳染性貧血驢白細(xì)胞弱毒株，山羊痘細(xì)胞弱毒如馬傳染性貧血驢白細(xì)胞弱毒株，山羊痘細(xì)胞弱毒株，通過豬腎細(xì)胞繼代的偽狂犬病弱毒株等。株，通過豬腎細(xì)胞繼代的偽狂犬病弱毒株等。 通過上述方法人工選育培養(yǎng)的菌通過上述方法人工選育培養(yǎng)的菌( (毒、蟲毒、蟲) )種，其形種，其形態(tài)、生理生化特性可能也會(huì)隨之改變，但最重要的是態(tài)、生理生化特性可能也會(huì)隨之改變，但最重要的是要保證遺傳上穩(wěn)定的弱的毒力和有良好的免疫原性。要保證遺傳上穩(wěn)定的弱的毒力和有良好的免疫原性。（三）、基因重組選育培養(yǎng)法（三）、基因重組選育培養(yǎng)法p基因重組技術(shù)基因重組技術(shù)選育培養(yǎng)菌選育培養(yǎng)菌( (毒、蟲毒

33、、蟲) )種是上世紀(jì)種是上世紀(jì)8080年代發(fā)年代發(fā)展起來的一項(xiàng)新技術(shù)，展起來的一項(xiàng)新技術(shù)，是將編碼保護(hù)性抗原的目的基因?qū)菍⒕幋a保護(hù)性抗原的目的基因?qū)胼d體中，使之得到表達(dá)，產(chǎn)生大量保護(hù)性抗原蛋白，并入載體中，使之得到表達(dá)，產(chǎn)生大量保護(hù)性抗原蛋白，并可用作疫苗?？捎米饕呙纭Ｓ眠@種方法生產(chǎn)的疫苗稱為基因工程疫苗。用這種方法生產(chǎn)的疫苗稱為基因工程疫苗。p目前用這種方法選育和研制成功的有大腸桿菌目前用這種方法選育和研制成功的有大腸桿菌K K8888、K K9999重重組菌株，用大腸桿菌表達(dá)口蹄疫抗原，在牛痘病中表達(dá)狂組菌株，用大腸桿菌表達(dá)口蹄疫抗原，在牛痘病中表達(dá)狂犬病病毒的表面糖蛋白等。犬病病毒的

34、表面糖蛋白等。p這一技術(shù)的建立和發(fā)展，不僅能夠把各種微生物的基因這一技術(shù)的建立和發(fā)展，不僅能夠把各種微生物的基因進(jìn)行如愿重組，使沒有可用疫苗或雖有疫苗而在生產(chǎn)上存進(jìn)行如愿重組，使沒有可用疫苗或雖有疫苗而在生產(chǎn)上存在很大困難的疾病的免疫預(yù)防得到可能的解決，而且將有在很大困難的疾病的免疫預(yù)防得到可能的解決，而且將有許多更安全有效的重組基因工程疫苗代替常規(guī)疫苗制品。許多更安全有效的重組基因工程疫苗代替常規(guī)疫苗制品。這一技術(shù)將為疫苗研制開辟廣闊的前景。這一技術(shù)將為疫苗研制開辟廣闊的前景。（四）、菌（毒、蟲）種的保藏（四）、菌（毒、蟲）種的保藏p微生物一旦被入選為種子，微生物一旦被入選為種子，應(yīng)立即凍干

35、并保存應(yīng)立即凍干并保存。p凍凍干后的細(xì)菌于干后的細(xì)菌于44的條件下保存；凍干后的病毒在的條件下保存；凍干后的病毒在低于低于-20 -20 的條件下保存。這樣可以保存多年而形狀的條件下保存。這樣可以保存多年而形狀不改變。不改變。p為避免污染動(dòng)物內(nèi)源性細(xì)菌和病毒，為避免污染動(dòng)物內(nèi)源性細(xì)菌和病毒，入選的菌（毒、入選的菌（毒、蟲）種不應(yīng)再通過動(dòng)物體傳代。蟲）種不應(yīng)再通過動(dòng)物體傳代。如果通過動(dòng)物體傳代，如果通過動(dòng)物體傳代，分離物必須按照新的菌（毒、蟲）種對(duì)待進(jìn)行全部測(cè)分離物必須按照新的菌（毒、蟲）種對(duì)待進(jìn)行全部測(cè)定，證明可以使用后，保存?zhèn)溆?。定，證明可以使用后，保存?zhèn)溆谩保存的菌（毒、蟲）種使用時(shí)，傳

36、代后應(yīng)測(cè)定其理保存的菌（毒、蟲）種使用時(shí)，傳代后應(yīng)測(cè)定其理化性狀、毒力和免疫原性，符合標(biāo)準(zhǔn)者方可使用。化性狀、毒力和免疫原性，符合標(biāo)準(zhǔn)者方可使用。第二節(jié)、生物制品的滅活劑與保護(hù)劑第二節(jié)、生物制品的滅活劑與保護(hù)劑 一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑Inactivation and Inactivator凡破壞微生物的生物學(xué)活性及血清中補(bǔ)體活性，凡破壞微生物的生物學(xué)活性及血清中補(bǔ)體活性，或破壞病原微生物的繁殖能力和致病作用，均稱或破壞病原微生物的繁殖能力和致病作用，均稱之為之為“滅活滅活”。適當(dāng)?shù)臏缁顒┖蜏缁罘椒?，?duì)微生物抗原性及適當(dāng)?shù)臏缁顒┖蜏缁罘椒ǎ瑢?duì)微生物抗原性及免疫原性沒有影響。免疫原性沒有

37、影響。研究滅活生物制品，重要條件是選擇適當(dāng)?shù)臏缪芯繙缁钌镏破?，重要條件是選擇適當(dāng)?shù)臏缁顒┖蜏缁罘椒ā；顒┖蜏缁罘椒ā?一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑（一）、物理學(xué)方法滅活（一）、物理學(xué)方法滅活一般常用一般常用加熱殺菌、超聲波裂解細(xì)胞、射線加熱殺菌、超聲波裂解細(xì)胞、射線照射照射殺死微生物體或消除其毒性。殺死微生物體或消除其毒性。采用此類滅活方法應(yīng)注意，加熱處理以放水采用此類滅活方法應(yīng)注意，加熱處理以放水浴間接升溫為好；超聲波裂解應(yīng)放冰浴中間斷浴間接升溫為好；超聲波裂解應(yīng)放冰浴中間斷進(jìn)行；進(jìn)行；6060CoCo照射處理，應(yīng)根據(jù)被照射物的容量照射處理，應(yīng)根據(jù)被照射物的容量大小選擇照射物與鈷源的距

38、離和劑量。大小選擇照射物與鈷源的距離和劑量。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑n據(jù)試驗(yàn)用據(jù)試驗(yàn)用l0000mLl0000mL大玻瓶裝大玻瓶裝6000mL6000mL的血清或血液，當(dāng)吸的血清或血液，當(dāng)吸收收6060CoCo量達(dá)量達(dá)200200萬萬rad/rad/時(shí)能完全殺死芽孢桿菌，時(shí)能完全殺死芽孢桿菌，150150萬萬rad/rad/時(shí)可使非芽孢菌完全滅活。照射后的血清或裂解紅時(shí)可使非芽孢菌完全滅活。照射后的血清或裂解紅細(xì)胞全血的質(zhì)量不受影響，經(jīng)測(cè)定細(xì)胞全血的質(zhì)量不受影響，經(jīng)測(cè)定1717種氨基酸含量與非種氨基酸含量與非照射的血清無差異。照射的血清無差異。n對(duì)病毒的滅活試驗(yàn)結(jié)果為：含雞新城疫病毒的

39、雞胚尿?qū)Σ《镜臏缁钤囼?yàn)結(jié)果為：含雞新城疫病毒的雞胚尿囊液，吸收囊液，吸收6060CoCo劑量達(dá)劑量達(dá)5050萬萬rad/rad/時(shí)完全滅活，豬瘟病毒強(qiáng)時(shí)完全滅活，豬瘟病毒強(qiáng)毒吸收量達(dá)到毒吸收量達(dá)到300300萬萬rad/rad/時(shí)完全失去致病力。被時(shí)完全失去致病力。被6060CoCo照射照射處理的血清，用于細(xì)胞培養(yǎng)與未照射的血清均產(chǎn)毒效果處理的血清，用于細(xì)胞培養(yǎng)與未照射的血清均產(chǎn)毒效果良好；被照射處理的裂解全血，不影響牛出敗菌及禽霍良好；被照射處理的裂解全血，不影響牛出敗菌及禽霍亂菌的生長(zhǎng)，制出的菌苗效力良好。亂菌的生長(zhǎng)，制出的菌苗效力良好。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑（二）、化學(xué)藥劑滅活

40、（二）、化學(xué)藥劑滅活 制備生物制品，在制備生物制品，在2020世紀(jì)初世紀(jì)初Lowenstein和和Eisler（1911）就開始用就開始用甲醛減毒制備破傷風(fēng)類毒素甲醛減毒制備破傷風(fēng)類毒素；19241924年年P(guān)untoni以以甲醛或苯酚制成犬瘟熱疫苗甲醛或苯酚制成犬瘟熱疫苗；19251925年年CastaBoyer和和Plaudi等用等用甲醛滅活制備豬丹甲醛滅活制備豬丹毒菌苗毒菌苗等。等。隨后許多學(xué)者還試用隨后許多學(xué)者還試用氯仿、甲苯、胺葉油氯仿、甲苯、胺葉油等滅活等滅活劑制牛瘟臟器苗。到了劑制牛瘟臟器苗。到了2020世紀(jì)的世紀(jì)的3030年代，年代，Dorset等等用結(jié)晶紫制豬瘟疫苗成功。用結(jié)

41、晶紫制豬瘟疫苗成功。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑數(shù)十年來，除主要用甲醛滅活劑外，在生產(chǎn)口蹄疫滅數(shù)十年來，除主要用甲醛滅活劑外，在生產(chǎn)口蹄疫滅活苗過程中，不斷選出了新的滅活劑，如活苗過程中，不斷選出了新的滅活劑，如19571957年年Ubetini等報(bào)道用等報(bào)道用-丙酰內(nèi)脂；丙酰內(nèi)脂；19591959年年Franklin和和Welkei等試用等試用羥胺；羥胺；19641964年年Martinsen用縮水甘油醛等。用縮水甘油醛等。但是，但是，無論選用何種滅活劑，都應(yīng)注意以較低溫度和無論選用何種滅活劑，都應(yīng)注意以較低溫度和最低劑量為原則，同時(shí)應(yīng)注意溶液的最低劑量為原則，同時(shí)應(yīng)注意溶液的pHpH值

42、，以近于中性值，以近于中性為宜。為宜。此外此外被滅液的濃度如含菌或含蛋白量高，應(yīng)適當(dāng)增加被滅液的濃度如含菌或含蛋白量高，應(yīng)適當(dāng)增加滅活劑劑量或適當(dāng)稀釋滅活劑，否則易造成滅活不完全。滅活劑劑量或適當(dāng)稀釋滅活劑，否則易造成滅活不完全。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑有些滅活劑還需在滅活一定時(shí)間后，加滅活有些滅活劑還需在滅活一定時(shí)間后，加滅活作用阻斷劑，以免繼續(xù)滅活而損害抗原性。作用阻斷劑，以免繼續(xù)滅活而損害抗原性?？傊傊?，化學(xué)滅活劑的滅活作用，一般是隨劑化學(xué)滅活劑的滅活作用，一般是隨劑量增大，溫度升高，滅活效率遞增。滅活劑量量增大，溫度升高，滅活效率遞增。滅活劑量大小與滅活時(shí)間成反比。并且在選

43、用滅活劑時(shí)，大小與滅活時(shí)間成反比。并且在選用滅活劑時(shí)，應(yīng)以能保證疫苗安全與效力，以低劑量和較低應(yīng)以能保證疫苗安全與效力，以低劑量和較低溫度短時(shí)間處理為好。溫度短時(shí)間處理為好。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑（三）、影響滅活劑滅活的因素（三）、影響滅活劑滅活的因素1 1、被滅活物質(zhì)的種類和特性、被滅活物質(zhì)的種類和特性不同種類的被滅活物質(zhì)對(duì)各種滅活劑的敏感性不同種類的被滅活物質(zhì)對(duì)各種滅活劑的敏感性是不完全一樣的。是不完全一樣的。被滅液的濃度如含菌或含蛋白量高，應(yīng)適當(dāng)增被滅液的濃度如含菌或含蛋白量高，應(yīng)適當(dāng)增加滅活劑劑量或適當(dāng)稀釋滅活劑，否則易造成滅加滅活劑劑量或適當(dāng)稀釋滅活劑，否則易造成滅活不完全

44、。活不完全。如多數(shù)病毒對(duì)甲醛滅活敏感，使用時(shí)濃度較低，如多數(shù)病毒對(duì)甲醛滅活敏感，使用時(shí)濃度較低，滅火時(shí)間也較短，一般只需加滅火時(shí)間也較短，一般只需加0.1%0.1%滅活不超過滅活不超過2 2天。天。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑2 2、滅活劑的種類和特性、滅活劑的種類和特性不同種類的滅活劑適用的滅活范圍不同不同種類的滅活劑適用的滅活范圍不同，如甲醛適用于多種細(xì)菌、病毒和毒素的如甲醛適用于多種細(xì)菌、病毒和毒素的滅活，但對(duì)口蹄疫病毒的滅活效果不理滅活，但對(duì)口蹄疫病毒的滅活效果不理想；而乙烯亞胺對(duì)口蹄疫病毒的滅活效想；而乙烯亞胺對(duì)口蹄疫病毒的滅活效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于甲醛。果遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于甲醛。一、滅活與滅活劑一

45、、滅活與滅活劑3 3、滅活劑的濃度和劑量、滅活劑的濃度和劑量滅活的速度和效果在一定范圍內(nèi)與滅活劑滅活的速度和效果在一定范圍內(nèi)與滅活劑的濃度和劑量成正比，濃度和劑量越大，滅的濃度和劑量成正比，濃度和劑量越大，滅活效果越確實(shí)，所以滅活時(shí)間也越短。活效果越確實(shí)，所以滅活時(shí)間也越短。但許多滅活劑都有一定的毒害作用，濃度但許多滅活劑都有一定的毒害作用，濃度高，劑量大，反而會(huì)破壞抗原性，而且易引高，劑量大，反而會(huì)破壞抗原性，而且易引起疫苗接種部位的組織損傷，甚至壞死，甲起疫苗接種部位的組織損傷，甚至壞死，甲醛即是如此。醛即是如此。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑4 4、滅活時(shí)間和滅活溫度、滅活時(shí)間和滅活溫

46、度一般來說，一般來說，隨滅活時(shí)間的延長(zhǎng)，滅活效愈加確隨滅活時(shí)間的延長(zhǎng)，滅活效愈加確實(shí)，但不是越長(zhǎng)越好實(shí)，但不是越長(zhǎng)越好，如乙烯亞胺滅活結(jié)束后就，如乙烯亞胺滅活結(jié)束后就對(duì)抗原呈現(xiàn)破壞作用，所以達(dá)到滅活時(shí)間后及時(shí)對(duì)抗原呈現(xiàn)破壞作用，所以達(dá)到滅活時(shí)間后及時(shí)中止滅活。中止滅活。滅活的溫度一般選擇滅活的溫度一般選擇3737，溫度升高可以加快溫度升高可以加快滅活速度。但溫度過高對(duì)抗原損害嚴(yán)重滅活速度。但溫度過高對(duì)抗原損害嚴(yán)重。曾有學(xué)者研究，口蹄疫病毒在曾有學(xué)者研究，口蹄疫病毒在3030滅活時(shí)對(duì)抗滅活時(shí)對(duì)抗原損害低。原損害低。一、滅活與滅活劑一、滅活與滅活劑5 5、有機(jī)物質(zhì)對(duì)滅活的影響、有機(jī)物質(zhì)對(duì)滅活的影響有機(jī)物