(四)艾滋病梅毒丙肝檢測(cè)及結(jié)果意義

1、艾滋病梅毒丙肝實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及艾滋病梅毒丙肝實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及影響結(jié)果因素分析影響結(jié)果因素分析內(nèi)容提要：內(nèi)容提要：1.1.艾滋病檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。艾滋病檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。2.2.梅毒檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。梅毒檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。3.3.丙肝檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。丙肝檢測(cè)程序、方法應(yīng)用和注意事項(xiàng)。4.4.影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的因素分析影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的因素分析艾滋病檢測(cè)方法艾滋病檢測(cè)方法常用常用HIVHIV病原學(xué)檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)方法: : 1.1. 核酸檢測(cè)核酸檢測(cè)（ PCRPCR、病毒載量、病毒載量） 2. 2. 病毒培養(yǎng)分離病毒培養(yǎng)分離 3.3. P

2、24P24抗原檢測(cè)抗原檢測(cè)常用常用HIVHIV抗體檢測(cè)方法抗體檢測(cè)方法: : 初篩：初篩：1.1.酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法 ELISAELISA：第三代、第四代第三代、第四代 2. 2.快速檢測(cè)快速檢測(cè) RT RT：金標(biāo)、硒標(biāo)金標(biāo)、硒標(biāo) 3.3.簡(jiǎn)單法簡(jiǎn)單法 PA: PA: 明膠顆粒凝集明膠顆粒凝集 確證：免疫印跡法確證：免疫印跡法 WB:WB:（Western BlotWestern Blot）、RIBARIBA其他相關(guān)檢測(cè)方法其他相關(guān)檢測(cè)方法: : 免疫功能測(cè)定：免疫功能測(cè)定：CD4/CD8CD4/CD8檢測(cè)檢測(cè)HIVHIV抗體檢測(cè)目的抗體檢測(cè)目的 1 HIV1 HIV抗體檢測(cè)可用于診

3、斷、血液篩查、監(jiān)測(cè)等?？贵w檢測(cè)可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測(cè)等。 2 2 以診斷為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體以診斷為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體HIVHIV感染狀況，感染狀況，包括臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的包括臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。體檢等。 3 3 以血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播以血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播HIVHIV，包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。 4 4 以監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群以監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群HIVHIV感染率感染率及其變化趨勢(shì)，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般及其變化趨勢(shì)，

4、包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群。人群。 1 1 根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。 2 2 嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室SOPSOP。 3 3 篩查試驗(yàn)陽(yáng)性，須作確證試驗(yàn)。篩查試驗(yàn)陽(yáng)性，須作確證試驗(yàn)。 4 4 篩查試驗(yàn)陰性，篩查試驗(yàn)陰性， 不應(yīng)做確證試驗(yàn)。不應(yīng)做確證試驗(yàn)。 5 5 篩查及確證試驗(yàn)陽(yáng)性均應(yīng)做好咨詢工篩查及確證試驗(yàn)陽(yáng)性均應(yīng)做好咨詢工作。作。HIVHIV抗體檢測(cè)的要點(diǎn)抗體檢測(cè)的要點(diǎn) 樣品樣品初篩試驗(yàn)初篩試驗(yàn)篩查試劑篩查試劑陽(yáng)性反應(yīng)陽(yáng)性反應(yīng)陰性反應(yīng)陰性反應(yīng)復(fù)檢試驗(yàn)復(fù)檢試驗(yàn)原有試劑原有試劑 + +另一不同原理另一不同原理（或廠家或廠家 ）試劑或另外兩種

5、試劑或另外兩種不同原理不同原理 （或廠家或廠家 ）試劑試劑均陽(yáng)性反應(yīng)均陽(yáng)性反應(yīng)一陰一陽(yáng)一陰一陽(yáng)均陰性反應(yīng)均陰性反應(yīng)確證試驗(yàn)確證試驗(yàn)報(bào)告陰性報(bào)告陰性圖圖1 1 HIVHIV抗體篩查檢測(cè)流程抗體篩查檢測(cè)流程HIVHIV抗體篩查檢測(cè)流程抗體篩查檢測(cè)流程初篩試驗(yàn)初篩試驗(yàn) 1 1、HIVHIV抗體檢測(cè)分為篩查試驗(yàn)（包括初篩和復(fù)抗體檢測(cè)分為篩查試驗(yàn)（包括初篩和復(fù)檢）和確證試驗(yàn)。檢）和確證試驗(yàn)。 2 2、根據(jù)檢測(cè)目的選用符合要求的篩查試劑對(duì)、根據(jù)檢測(cè)目的選用符合要求的篩查試劑對(duì)樣品進(jìn)行初篩檢測(cè)，對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可樣品進(jìn)行初篩檢測(cè)，對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具出具HIVHIV抗體陰性（抗體陰性（- -）報(bào)告

6、；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的）報(bào)告；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，需要進(jìn)一步做復(fù)檢試驗(yàn)和確證試驗(yàn)。樣品，需要進(jìn)一步做復(fù)檢試驗(yàn)和確證試驗(yàn)。 復(fù)檢試驗(yàn)復(fù)檢試驗(yàn) 對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，應(yīng)使用原有試劑和另外一對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，應(yīng)使用原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)。同廠家的試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)。 如果初篩檢測(cè)使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復(fù)檢必須包如果初篩檢測(cè)使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復(fù)檢必須包括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。 如兩種試劑復(fù)檢均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告如兩種試劑復(fù)檢均呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIVHI

7、V抗體陰性抗體陰性（- -）；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，需送艾滋病確證）；如均呈陽(yáng)性反應(yīng)，或一陰一陽(yáng)，需送艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證試驗(yàn)。 如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)，而抗體試劑如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)，而抗體試劑檢測(cè)為陰性反應(yīng)，則應(yīng)考慮進(jìn)行檢測(cè)為陰性反應(yīng)，則應(yīng)考慮進(jìn)行HIV-1 p24HIV-1 p24抗原或核酸檢抗原或核酸檢測(cè)，必要時(shí)進(jìn)行隨訪。測(cè)，必要時(shí)進(jìn)行隨訪。確證試驗(yàn)確證試驗(yàn) 1 1 確證試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)確證試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。 2 2 確證樣品可采用血清、血漿

8、、濾紙干血斑樣品。確證樣品可采用血清、血漿、濾紙干血斑樣品。 3 3 確證方法包括免疫印跡試驗(yàn)（確證方法包括免疫印跡試驗(yàn)（WBWB）、條帶免疫）、條帶免疫試驗(yàn)、放射免疫沉淀試驗(yàn)（試驗(yàn)、放射免疫沉淀試驗(yàn)（RIPARIPA）及免疫熒光試）及免疫熒光試驗(yàn)（驗(yàn)（IFAIFA）等。）等。HIVHIV抗體不確定（抗體不確定（） 結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4 4周后隨訪檢測(cè)，如帶周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間型沒有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不

9、滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8 8周。如帶型沒有進(jìn)周。如帶型沒有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足HIVHIV抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)性，不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)性，不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。否繼續(xù)隨訪。 隨訪期間可根據(jù)需要，檢測(cè)病毒核酸或隨訪期間可根據(jù)需要，檢測(cè)病毒核酸或P24P24抗原作抗原作為輔助診斷。如果出現(xiàn)為輔助診斷。如果出現(xiàn)HIV-2HIV-2型的特異性指示條帶，根型的特異性指示條帶，根據(jù)實(shí)際情況需用據(jù)實(shí)際情況需用HIV-2HIV-2型免疫印跡試劑再做型免疫印跡試劑再做HIV-

10、2HIV-2的抗的抗體確證試驗(yàn)或體確證試驗(yàn)或HIV-2HIV-2核酸檢測(cè)，以進(jìn)一步明確核酸檢測(cè)，以進(jìn)一步明確HIV-2HIV-2感感染狀態(tài)，疑難樣品送國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步分染狀態(tài)，疑難樣品送國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步分析。析。 HIV-2HIV-2抗體陽(yáng)性抗體陽(yáng)性 出現(xiàn)出現(xiàn)HIV-2HIV-2型特異性指示帶的樣品：如果同時(shí)型特異性指示帶的樣品：如果同時(shí)呈呈HIV-1HIV-1抗體陽(yáng)性反應(yīng)，報(bào)告抗體陽(yáng)性反應(yīng)，報(bào)告HIV-1HIV-1抗體陽(yáng)性，抗體陽(yáng)性，不推薦進(jìn)一步做不推薦進(jìn)一步做HIV-2HIV-2抗體確證試驗(yàn)；如果同抗體確證試驗(yàn)；如果同時(shí)呈時(shí)呈HIV-1HIV-1抗體不確定或陰性反應(yīng)，需

11、用抗體不確定或陰性反應(yīng)，需用HIV-HIV-2 2型確證試劑再做型確證試劑再做HIV-2HIV-2的抗體確證試驗(yàn)。的抗體確證試驗(yàn)。 同時(shí)符合以下二條標(biāo)準(zhǔn)，即出現(xiàn)至少同時(shí)符合以下二條標(biāo)準(zhǔn)，即出現(xiàn)至少2 2條條envenv帶帶（gp36gp36和和gp140/ gp105gp140/ gp105），和試劑盒提供），和試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，可判為的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，可判為HIV-2HIV-2抗體陽(yáng)性?？贵w陽(yáng)性。艾滋病病毒感染產(chǎn)婦所生兒童12個(gè)月進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)用另一種不同原理或不同廠家生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測(cè)18個(gè)月時(shí)再進(jìn)行HIV抗體篩查試驗(yàn)用另一種不同原理或不同廠家生產(chǎn)的篩查試劑再次檢測(cè)確證試

12、驗(yàn)報(bào)告HIV抗體檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性提供咨詢，繼續(xù)隨訪，4周后再次進(jìn)行確證試驗(yàn)陰性陽(yáng)性陰性陰性陰性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陰性報(bào)告HIV抗體檢測(cè)結(jié)果陰性不確定圖圖4 艾艾滋滋病病感感染染產(chǎn)產(chǎn)婦婦所所生生兒兒童童HIV抗抗體體檢檢測(cè)測(cè)流流程程孕產(chǎn)婦新生兒檢測(cè)孕產(chǎn)婦新生兒檢測(cè)艾滋病快速檢測(cè)試驗(yàn)（艾滋病快速檢測(cè)試驗(yàn)（RTRT） 是在是在ELISAELISA基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種檢測(cè)技術(shù)，基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種檢測(cè)技術(shù)，它用膠體金或硒標(biāo)記抗原、抗體后以層析方法它用膠體金或硒標(biāo)記抗原、抗體后以層析方法進(jìn)行檢測(cè)。進(jìn)行檢測(cè)。 突出優(yōu)點(diǎn)為快速、試劑便于保存、檢測(cè)不需要突出優(yōu)點(diǎn)為快速、試劑便于保存、檢測(cè)不需要特殊設(shè)備并可以單份檢測(cè)

13、特殊設(shè)備并可以單份檢測(cè) ，比較適用于基層，比較適用于基層醫(yī)療單位和標(biāo)本初篩。醫(yī)療單位和標(biāo)本初篩。 挑戰(zhàn)：進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度和特異性，實(shí)現(xiàn)挑戰(zhàn)：進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度和特異性，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)多元化，進(jìn)行定量和半定量檢測(cè)膠體金紙檢測(cè)多元化，進(jìn)行定量和半定量檢測(cè)膠體金紙條將會(huì)更加廣泛地應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域。條將會(huì)更加廣泛地應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域。 快速試劑使用中存在的問(wèn)題快速試劑使用中存在的問(wèn)題 快速檢測(cè)只是初篩檢測(cè)，存在較高的假陽(yáng)性率和假陰快速檢測(cè)只是初篩檢測(cè)，存在較高的假陽(yáng)性率和假陰性率；性率； 技術(shù)上屬于主觀判讀，不具備標(biāo)準(zhǔn)化條件；技術(shù)上屬于主觀判讀，不具備標(biāo)準(zhǔn)化條件； 快速檢測(cè)的質(zhì)量控制問(wèn)題目前沒有有效方法；快

14、速檢測(cè)的質(zhì)量控制問(wèn)題目前沒有有效方法； 價(jià)格是常規(guī)技術(shù)的價(jià)格是常規(guī)技術(shù)的5 5倍。行政經(jīng)費(fèi)政策不支持，個(gè)人支倍。行政經(jīng)費(fèi)政策不支持，個(gè)人支付價(jià)位高；付價(jià)位高； 存在較大的批間誤差，加上不屬于政策規(guī)定項(xiàng)目，風(fēng)存在較大的批間誤差，加上不屬于政策規(guī)定項(xiàng)目，風(fēng)險(xiǎn)較大，基層醫(yī)療衛(wèi)生單位不愿意承擔(dān)責(zé)任。險(xiǎn)較大，基層醫(yī)療衛(wèi)生單位不愿意承擔(dān)責(zé)任。 擔(dān)心敏感性不夠高，不敢出陰性報(bào)告；擔(dān)心敏感性不夠高，不敢出陰性報(bào)告；HIV-1HIV-1抗原檢測(cè)的抗原檢測(cè)的用途：用途： 1 HIV-11 HIV-1感染窗口期、感染窗口期、HIVHIV抗體不確定或抗體不確定或HIV-HIV-1 1陽(yáng)性母親所生嬰兒的鑒別診斷。陽(yáng)性母

15、親所生嬰兒的鑒別診斷。 2 2 第四代第四代HIVHIV檢測(cè)試劑的陽(yáng)性結(jié)果的輔助診斷。檢測(cè)試劑的陽(yáng)性結(jié)果的輔助診斷。 3 3 監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展或抗病毒治療效果。監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展或抗病毒治療效果。 4 HIV4 HIV分離培養(yǎng)，病毒復(fù)制狀況的監(jiān)測(cè)。分離培養(yǎng)，病毒復(fù)制狀況的監(jiān)測(cè)。 HIV-1HIV-1抗原檢測(cè)方法和結(jié)果報(bào)告抗原檢測(cè)方法和結(jié)果報(bào)告 方法：方法：ELISAELISA，有定量檢測(cè)。，有定量檢測(cè)。 結(jié)果報(bào)告和解釋：結(jié)果報(bào)告和解釋： HIV-1 P24HIV-1 P24抗原篩選試驗(yàn)有反應(yīng)的標(biāo)本必須經(jīng)過(guò)中和抗原篩選試驗(yàn)有反應(yīng)的標(biāo)本必須經(jīng)過(guò)中和試驗(yàn)確證以后才能判斷陽(yáng)性或陰性。試驗(yàn)確證以后才能判斷陽(yáng)性或陰

16、性。 HIV-1 P24HIV-1 P24抗原陽(yáng)性僅作為抗原陽(yáng)性僅作為HIVHIV感染的輔助診斷依據(jù)，感染的輔助診斷依據(jù)，不能據(jù)此確診。不能據(jù)此確診。 HIV-1 P24HIV-1 P24抗原陰性結(jié)果不能排除抗原陰性結(jié)果不能排除HIVHIV感染。感染。 監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展或抗病毒治療效果應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)病程進(jìn)展或抗病毒治療效果應(yīng)進(jìn)行HIV-1 P24HIV-1 P24抗抗原的定量檢測(cè)。原的定量檢測(cè)。HIVHIV核酸檢測(cè)核酸檢測(cè)的意義的意義 1 1 早期診斷：嬰幼兒或成人有急性早期診斷：嬰幼兒或成人有急性HIVHIV感染綜合癥或流行感染綜合癥或流行病學(xué)史，且不同時(shí)間的兩次病學(xué)史，且不同時(shí)間的兩次HIVHIV

17、核酸檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，核酸檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，即可診斷。使用多樣品集合的方法，即可診斷。使用多樣品集合的方法，HIVHIV抗體陰性的高?？贵w陰性的高危人群樣品進(jìn)行集合核酸檢測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)窗口期感染。人群樣品進(jìn)行集合核酸檢測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)窗口期感染。 2 2 疑難樣本的輔助診斷：幫助提供疑難樣本的輔助診斷：幫助提供HIVHIV感染早期或終末期感染早期或終末期的證據(jù)。的證據(jù)。 3 3 遺傳變異監(jiān)測(cè)：用于遺傳變異監(jiān)測(cè)：用于HIV-1HIV-1和和HIV-2HIV-2感染的鑒別診斷、感染的鑒別診斷、HIVHIV感染傳播鏈的分析、感染傳播鏈的分析、HIVHIV基因亞型和重組病毒的鑒定基因亞型和重組病毒的鑒定和分

18、析以及人群和分析以及人群HIVHIV遺傳變異趨勢(shì)的監(jiān)測(cè)。遺傳變異趨勢(shì)的監(jiān)測(cè)。 4 4 耐藥性監(jiān)測(cè)：了解耐藥性病毒株流行的態(tài)勢(shì)和指導(dǎo)臨耐藥性監(jiān)測(cè)：了解耐藥性病毒株流行的態(tài)勢(shì)和指導(dǎo)臨床醫(yī)生判斷抗病毒治療效果和修改抗病毒治療方案。床醫(yī)生判斷抗病毒治療效果和修改抗病毒治療方案。 5 5 病程監(jiān)控及預(yù)測(cè)：有助于確定疾病發(fā)展的階段，以確病程監(jiān)控及預(yù)測(cè)：有助于確定疾病發(fā)展的階段，以確定相應(yīng)的治療方案。定相應(yīng)的治療方案。 6 6 指導(dǎo)抗病毒治療及療效判定指導(dǎo)抗病毒治療及療效判定艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIVHIV感染早期診斷檢測(cè)流程感染早期診斷檢測(cè)流程 HIV感染產(chǎn)婦所生嬰兒盡快采集第二份

19、血樣本，送檢出生后6周采集第一份血樣本（可制備成濾紙片干血斑（DBS），或EDTA抗凝全血），送檢繼續(xù)隨訪報(bào)告陽(yáng)性嬰兒滿3個(gè)月，再次采集血樣本，送檢盡快再次采集血樣本，送檢報(bào)告陰性呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)呈陰性反應(yīng)HIV-1HIV-1耐藥檢測(cè)耐藥檢測(cè) 1 1 耐藥監(jiān)測(cè)耐藥監(jiān)測(cè) 用于用于HIV-1HIV-1感染人群和抗病毒治療人群。用于新近感感染人群和抗病毒治療人群。用于新近感染人群的耐藥性監(jiān)測(cè)，了解耐藥毒株流行的情況；用染人群的耐藥性監(jiān)測(cè)，了解耐藥毒株流行的情況；用于治療前人群的監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)制定一線抗病毒治療方案；于治療前人群的監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)制定一線抗病

20、毒治療方案；用于抗病毒治療人群的耐藥性監(jiān)測(cè)，進(jìn)行用于抗病毒治療人群的耐藥性監(jiān)測(cè)，進(jìn)行HIV-1HIV-1耐藥耐藥發(fā)生、發(fā)展趨勢(shì)以及影響因素的分析，指導(dǎo)和完善大發(fā)生、發(fā)展趨勢(shì)以及影響因素的分析，指導(dǎo)和完善大規(guī)模公共衛(wèi)生模式抗病毒治療的程序，以及制定二線規(guī)模公共衛(wèi)生模式抗病毒治療的程序，以及制定二線治療方案。治療方案。.2 .2 耐藥檢測(cè)耐藥檢測(cè) 用于個(gè)體患者的耐藥檢測(cè)。在抗病毒治療前進(jìn)行耐藥用于個(gè)體患者的耐藥檢測(cè)。在抗病毒治療前進(jìn)行耐藥檢測(cè)，可指導(dǎo)臨床醫(yī)生制定抗病毒治療方案，保證抗檢測(cè)，可指導(dǎo)臨床醫(yī)生制定抗病毒治療方案，保證抗病毒治療的效果；在抗病毒治療過(guò)程中進(jìn)行耐藥檢測(cè)，病毒治療的效果；在抗病

21、毒治療過(guò)程中進(jìn)行耐藥檢測(cè)，可指導(dǎo)臨床醫(yī)生分析治療失敗的原因，并制定補(bǔ)救治可指導(dǎo)臨床醫(yī)生分析治療失敗的原因，并制定補(bǔ)救治療方案。療方案。梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)病原體檢測(cè)病原體檢測(cè) 暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查 鍍銀染色鍍銀染色 熒光抗梅毒螺旋體單克隆抗體法熒光抗梅毒螺旋體單克隆抗體法血清學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè) 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（非特異性試驗(yàn)）非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（非特異性試驗(yàn)） 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（特異性試驗(yàn)）梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)（特異性試驗(yàn)）病原體檢測(cè)病原體檢測(cè)暗視野顯微鏡檢查暗視野顯微鏡檢查 螺旋狀，纖細(xì)、白色、螺旋狀，纖細(xì)、白色、有折光的。有折光的。 長(zhǎng)約為兩個(gè)紅細(xì)胞

22、，有長(zhǎng)約為兩個(gè)紅細(xì)胞，有6-126-12個(gè)螺旋。個(gè)螺旋。 具有旋轉(zhuǎn)、蛇行及伸縮具有旋轉(zhuǎn)、蛇行及伸縮等等3 3種特征性的運(yùn)動(dòng)方種特征性的運(yùn)動(dòng)方式。式。 病原體檢測(cè)病原體檢測(cè)鍍銀染色檢查鍍銀染色檢查方法方法: : 涂片干燥涂片干燥 固定固定 洗滌洗滌 媒染媒染 銀染銀染 鏡檢鏡檢 可見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。可見到染成棕褐色的梅毒螺旋體。病原體檢測(cè)病原體檢測(cè)直接熒光法直接熒光法 FITCFITC熒光素標(biāo)記的抗梅毒螺旋體單克隆抗體與樣本中的熒光素標(biāo)記的抗梅毒螺旋體單克隆抗體與樣本中的梅毒螺旋體結(jié)合，在熒光顯微鏡下，可見到發(fā)黃綠色熒光梅毒螺旋體結(jié)合，在熒光顯微鏡下，可見到發(fā)黃綠色熒光的梅毒螺旋體。的

23、梅毒螺旋體。病原體檢測(cè)病原體檢測(cè) 具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。具有快速、方便、易操作的特點(diǎn)。 是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法。是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最好方法。 未見到梅毒螺旋體，不能排除罹患梅毒，可讓患者復(fù)查及未見到梅毒螺旋體，不能排除罹患梅毒，可讓患者復(fù)查及進(jìn)行血清學(xué)檢查。進(jìn)行血清學(xué)檢查。血清學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè) 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) 性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（VDRLVDRL） 不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（USRUSR） 快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（RPRRPR、TRUSTTRUST） 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅

24、毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) 熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA-ABSFTA-ABS） 梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（TPHATPHA） 梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPATPPA） 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（TP-ELISATP-ELISA） 梅毒螺旋體快速診斷試驗(yàn)（梅毒螺旋體快速診斷試驗(yàn)（TP-RTTP-RT）非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) 以心磷脂、卵磷脂、膽固醇為抗原以心磷脂、卵磷脂、膽固醇為抗原, ,檢測(cè)抗類脂質(zhì)抗體（反檢測(cè)抗類脂質(zhì)抗體（反應(yīng)素），主要是應(yīng)素），主要是

25、IgMIgM和和IgGIgG混合體。混合體。 方法簡(jiǎn)單、快速、價(jià)格低廉、敏感性和特異性較好，適用方法簡(jiǎn)單、快速、價(jià)格低廉、敏感性和特異性較好，適用于大量人群的篩查。于大量人群的篩查。 治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)為陰性，可作為療效觀察、判治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)為陰性，可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染指征。愈、復(fù)發(fā)或再感染指征。 梅毒治療后部份病人存在血清固定現(xiàn)象。梅毒治療后部份病人存在血清固定現(xiàn)象。 用于鑒別先天梅毒與被動(dòng)反應(yīng)素血癥。用于鑒別先天梅毒與被動(dòng)反應(yīng)素血癥。 VDRLVDRL試驗(yàn)主要用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查。試驗(yàn)主要用于神經(jīng)梅毒的腦脊液檢查。 艾滋病人合并感染梅毒，血清試驗(yàn)呈陰性。艾

26、滋病人合并感染梅毒，血清試驗(yàn)呈陰性。 存在一定的假陽(yáng)性。存在一定的假陽(yáng)性。 不同試驗(yàn)的結(jié)果沒有可比性。不同試驗(yàn)的結(jié)果沒有可比性。前帶現(xiàn)象前帶現(xiàn)象 指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒。又象二期梅毒。 將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)陽(yáng)性的結(jié)果。將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)陽(yáng)性的結(jié)果。 有前帶現(xiàn)象的病人在臨床治療中應(yīng)注意有前帶現(xiàn)象的病人在臨床治療中應(yīng)注意“賈赫氏反應(yīng)賈赫氏反應(yīng)”。血清固定（耐血清性）血清固定（耐血清性） 指經(jīng)抗梅毒治療

27、后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)，而保持低滴度陽(yáng)性（時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)，而保持低滴度陽(yáng)性（1 1：4 4以內(nèi)）的反應(yīng)。以內(nèi)）的反應(yīng)。 早期的血清固定常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、早期的血清固定常與治療量不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。 晚期血清固定與梅毒的類型及開始治療的時(shí)間早晚有關(guān)。晚期血清固定與梅毒的類型及開始治療的時(shí)間早晚有關(guān)。對(duì)于這種病人，在經(jīng)過(guò)詳細(xì)的檢查，特別是在除外神經(jīng)、對(duì)于這種病人，在經(jīng)過(guò)詳細(xì)的檢查，特別是在除外神經(jīng)、心臟與其他內(nèi)臟梅毒后，應(yīng)停止治療，作定期隨訪

28、。心臟與其他內(nèi)臟梅毒后，應(yīng)停止治療，作定期隨訪。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法方法原理原理優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)FTA-FTA-ABS ABS 完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原抗原, ,吸收過(guò)的梅毒患者血吸收過(guò)的梅毒患者血清清熒光素標(biāo)記的抗人熒光素標(biāo)記的抗人IgIg。陽(yáng)性。陽(yáng)性可見蘋果綠色熒光的螺旋體可見蘋果綠色熒光的螺旋體 最敏感最敏感特異性高特異性高“金標(biāo)準(zhǔn)金標(biāo)準(zhǔn)操作繁瑣操作繁瑣技術(shù)要求高技術(shù)要求高TPHA TPHA 超聲裂解的梅毒螺旋體致敏超聲裂解的梅毒螺旋體致敏紅細(xì)胞，產(chǎn)生肉眼可見的凝紅細(xì)胞，產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應(yīng)集反應(yīng) 敏感性好敏感性好操作簡(jiǎn)單操作

29、簡(jiǎn)單紅細(xì)胞易產(chǎn)紅細(xì)胞易產(chǎn)生非特異性生非特異性凝集凝集TPPATPPA原理與原理與TPHATPHA相同，以人工合相同，以人工合成的惰性明膠作為載體成的惰性明膠作為載體試劑穩(wěn)定試劑穩(wěn)定結(jié)果清晰結(jié)果清晰 早期梅毒敏早期梅毒敏感性低于感性低于FTA-ABS FTA-ABS TP-TP-ELISAELISA超聲裂解或重組的梅毒螺旋超聲裂解或重組的梅毒螺旋體抗原，雙抗原夾心法體抗原，雙抗原夾心法 價(jià)格較低價(jià)格較低大樣本，大樣本，自動(dòng)化自動(dòng)化 廠家間敏感廠家間敏感性和特異性性和特異性差異較大差異較大 TP-RTTP-RT雙抗原夾心法，膠體金標(biāo)記雙抗原夾心法，膠體金標(biāo)記免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)免疫層析或免疫滲濾

30、試驗(yàn) 簡(jiǎn)便快速簡(jiǎn)便快速無(wú)需儀器無(wú)需儀器敏感性特異敏感性特異性有待評(píng)估性有待評(píng)估 梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的假陽(yáng)性反應(yīng)梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的假陽(yáng)性反應(yīng)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)感染因素感染因素肺結(jié)核肺結(jié)核病毒性肝炎病毒性肝炎肺炎球菌性肺炎肺炎球菌性肺炎亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性單核細(xì)胞增多癥水痘、麻疹、鉤端螺旋體病水痘、麻疹、鉤端螺旋體病麻風(fēng)麻風(fēng)傳染性單核細(xì)胞增多癥傳染性單核細(xì)胞增多癥麻風(fēng)麻風(fēng)萊姆病萊姆病瘧疾瘧疾非感染因素非感染因素自身免疫性疾?。ㄏ到y(tǒng)性紅斑自身免疫性疾病（系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)

31、節(jié)炎、干燥狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征等）綜合征等）毒品成癮者毒品成癮者肝硬化肝硬化衰老衰老甲狀腺炎甲狀腺炎系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡梅毒血清學(xué)試驗(yàn)假陽(yáng)性反應(yīng)的對(duì)策梅毒血清學(xué)試驗(yàn)假陽(yáng)性反應(yīng)的對(duì)策 技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng) 由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)菌污染或由于標(biāo)本的保存不當(dāng)（如細(xì)菌污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成，溶血）、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成，可通過(guò)重復(fù)試驗(yàn)來(lái)排除?？赏ㄟ^(guò)重復(fù)試驗(yàn)來(lái)排除。 生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng) 是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性。非梅毒螺旋體抗原的生變化

32、，使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性。非梅毒螺旋體抗原的血清學(xué)試驗(yàn)可做血清學(xué)試驗(yàn)可做FTA-ABSFTA-ABS、TPHATPHA（TPPATPPA）等確證試驗(yàn)進(jìn)行）等確證試驗(yàn)進(jìn)行排除。梅毒螺旋體抗原的血清學(xué)試驗(yàn)時(shí)應(yīng)對(duì)病人進(jìn)行全面排除。梅毒螺旋體抗原的血清學(xué)試驗(yàn)時(shí)應(yīng)對(duì)病人進(jìn)行全面檢查、密切隨訪。檢查、密切隨訪。梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果USRUSRRPRRPRVDRLVDRLTPHATPHATPPATPPAFTA-ABSFTA-ABS 意意 義義 - - - -排除梅毒排除梅毒一期梅毒的早期一期梅毒的早期艾滋病患者合并梅毒艾滋病患者合并梅毒 + + + +現(xiàn)癥梅毒（梅毒孕婦所生嬰兒除外）現(xiàn)癥梅毒

33、（梅毒孕婦所生嬰兒除外） + + - -生物學(xué)假陽(yáng)性生物學(xué)假陽(yáng)性 - - + +早期梅毒經(jīng)治療后早期梅毒經(jīng)治療后梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果 非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) ( (確證是否為現(xiàn)癥病人確證是否為現(xiàn)癥病人) ) 互為確證互為確證 梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn) ( (確證是否為感染者確證是否為感染者) )胎傳梅毒的實(shí)驗(yàn)診斷方法胎傳梅毒的實(shí)驗(yàn)診斷方法 早期先天梅毒早期先天梅毒 暗視野檢查：胎盤、臍帶、鼻分泌物、皮膚黏膜。暗視野檢查：胎盤、臍帶、鼻分泌物、皮膚黏膜。 血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查 晚期先天梅毒晚期先天梅毒 血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查胎傳梅毒的實(shí)

34、驗(yàn)診斷胎傳梅毒的實(shí)驗(yàn)診斷 暗視野檢查梅毒螺旋體陽(yáng)性。暗視野檢查梅毒螺旋體陽(yáng)性。 患兒非梅毒螺旋體血清抗體滴度持續(xù)上升?；純悍敲范韭菪w血清抗體滴度持續(xù)上升。 患兒非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)結(jié)果比母親高患兒非梅毒螺旋體血清學(xué)定量試驗(yàn)結(jié)果比母親高4 4倍。倍。 患兒檢出患兒檢出19S-IgM19S-IgM抗體?？贵w。神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷 梅毒血清學(xué)檢查陽(yáng)性。梅毒血清學(xué)檢查陽(yáng)性。 腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果異常。腦脊液細(xì)胞計(jì)數(shù)蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果異常。 腦脊液腦脊液VDRLVDRL試驗(yàn)陽(yáng)性。試驗(yàn)陽(yáng)性。 腦脊液檢測(cè)到腦脊液檢測(cè)到IgMIgM抗體?？贵w。丙肝實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)丙肝實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 抗-

35、HCV檢測(cè) HCV 抗原檢測(cè) 定量HCV RNA檢測(cè) HCV基因型和亞型檢測(cè)HCV-RNAHCV-RNA檢測(cè)檢測(cè)1.HCV RNAHCV RNA測(cè)定定性套式測(cè)定定性套式PCR.PCR.2.HCV RNA2.HCV RNA定量方法包括定量方法包括DNADNA探針技術(shù)、競(jìng)爭(zhēng)探針技術(shù)、競(jìng)爭(zhēng)PCRPCR法、熒光定量法等，法、熒光定量法等， 3.3.定量測(cè)定有助于了解病毒復(fù)制程度、抗病毒治定量測(cè)定有助于了解病毒復(fù)制程度、抗病毒治療的選擇及療效評(píng)估等。療的選擇及療效評(píng)估等。4.4.對(duì)對(duì)HCV RNAHCV RNA尚可進(jìn)行基因分型，方法包括序列尚可進(jìn)行基因分型，方法包括序列測(cè)定、測(cè)定、PCRPCR、酶切、探

36、針雜交等。、酶切、探針雜交等。 4 4影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的因素分析影響實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的因素分析每一個(gè)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都有可能得出假陽(yáng)性或假陰每一個(gè)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都有可能得出假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果性的結(jié)果生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性用以下三種參數(shù)來(lái)描述生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性用以下三種參數(shù)來(lái)描述: : 敏感性敏感性 特異性特異性 （陰、陽(yáng)性）預(yù)示值（陰、陽(yáng)性）預(yù)示值 應(yīng)考慮人群感染率應(yīng)考慮人群感染率4.14.1檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的計(jì)算檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的計(jì)算檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果真實(shí)的狀態(tài)真實(shí)的狀態(tài)合計(jì)合計(jì)感染感染未感染未感染陽(yáng)性陽(yáng)性A AB BA+BA+B陰性陰性C CD DC+DC+D合計(jì)合計(jì)A+CA+CB+DB+DA+B+C+DA+B+C+DA= A= 感染，檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果感染，檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果( (真陽(yáng)性真陽(yáng)性) )B= B= 未感染，檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果未感染，檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果( (假陽(yáng)性假陽(yáng)性) )C= C= 感染，檢測(cè)陰性結(jié)果感染，檢測(cè)陰性結(jié)果( (假陰性假陰性) )D= D= 未感染，檢測(cè)陰性結(jié)果未感染，檢測(cè)陰性結(jié)果( (真陰性真陰性) )