診斷試劑性能指標(biāo)評估

1、體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則 2013.04.25目錄 1.檢測限 2.線性范圍 3.可報告范圍 4.準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)） 5.準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對） 6.精密度 7.干擾實(shí)驗(yàn) 8.穩(wěn)定性 9.參考值（參考區(qū)間）基本要求 實(shí)驗(yàn)人員 儀器設(shè)備 試劑檢測限（limit of detection） 1、定義：檢測限是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，也稱檢測低限或最小檢出濃度，有時也稱分析靈敏度。 2、檢測方法：一次運(yùn)行中將空白樣本重復(fù)測定20次。 3、空白樣本制備：空白樣本應(yīng)不含被測物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測常規(guī)樣本相同。若空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據(jù)測定項(xiàng)目選用相應(yīng)基

2、質(zhì)樣本，但應(yīng)將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。 4、數(shù)據(jù)處理記錄：記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。 統(tǒng)計(jì)：計(jì)算20次結(jié)果的均值X與標(biāo)準(zhǔn)差SD。 5、結(jié)果報告 以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差報告方法的檢測限。（即X+2SD）線性范圍線性：測量結(jié)果與樣品中被測量的值直接成比例的能力。樣本要求 樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似。 樣本不得含有干擾物質(zhì)：溶血、脂血、黃疸等。實(shí)驗(yàn)過程 建立線性范圍：在預(yù)期線性范圍內(nèi)選擇9-11個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定3-4次。 驗(yàn)證線性范圍：測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復(fù)測定3-4次。線性范圍數(shù)據(jù)處理 記錄原始數(shù)據(jù) 計(jì)算精密度，剔除離群值 進(jìn)行線性回歸 線性范圍應(yīng)符合一定要求可報告

3、范圍（reportable range） 可報告范圍包括可報告低限和可報告高限 樣本要求低值樣本：接近方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。高值樣本：含有被測物的高值樣本，必要時可加入被分析物純品，并計(jì)算出理論值。將該高值樣本稀釋使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選擇3個高濃度樣本?？蓤蟾娣秶╮eportable range） 實(shí)驗(yàn)過程在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定3次。 數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：分別計(jì)算AVE、SD、CV值。對于可報告高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差?？蓤?/p>

4、告范圍（低限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV可報告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（%）可報告范圍（reportable range） 結(jié)果報告可報告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報告低限?？蓤蟾娣秶呦蓿哼x取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標(biāo)示的界值時的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報告范圍的高限。準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)） 準(zhǔn)確度：一個測量值與可接受的參考值之間

5、的一致程度。 樣本制備1、選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3-4份。2、在其中2-3份樣本中加入不同量的待測物標(biāo)準(zhǔn)，制成2-3個不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測物的濃度。3、在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。注意事項(xiàng)1、加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)2、加入待測物的濃度：保證總濃度在方法分析測量范圍內(nèi)。3、標(biāo)準(zhǔn)物濃度：因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高。準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）accuracy（recovery） 實(shí)驗(yàn)過程：用待評價方法對回收樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測定，通常對樣本進(jìn)行2-3次重

6、復(fù)分析，取其均值進(jìn)行計(jì)算。 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告1、計(jì)算回收率：回收率=（回收樣本濃度-基礎(chǔ)樣本濃度）/加入濃度100%2、計(jì)算平均回收率：平均回收率=（回收率1+回收率2+回收率3）/3100%3、計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=100%-平均回收率4、可接受判斷：比例系統(tǒng)誤差應(yīng)不大于相關(guān)規(guī)定。范例-某法測定血清葡萄糖回收率1、樣本制備基礎(chǔ)樣本：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃度22mmol/L）回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃:55mmol/L）2、數(shù)據(jù)結(jié)果3、計(jì)算平均回收率：平均回收率=（103+99

7、）/2100%=101%4、計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=/100%-101%/=1%測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本5.00回收樣本17.062.002.06103回收樣本29.955.004.9599精密度 批內(nèi)精密度：嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳精密度。 批間精密度：指在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間內(nèi)（一般為一個月或20個工作日）對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。精密度 樣本要求1、至少評估兩個濃度水平的樣本，若兩個濃度樣本的精密度由顯著差異，則建議增加第三個濃度水平樣

8、本；2、樣本濃度在測量范圍內(nèi)，至少有一個濃度在醫(yī)學(xué)決定水平左右；3、不要為了得到較小的精密度，而選擇高值樣本，也不要選擇靠近檢出限的樣本；4、如果不存在醫(yī)學(xué)決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個濃度。精密度 只評估批內(nèi)精密度 1、試劑和標(biāo)準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號的試劑和校準(zhǔn)物。2、方法：在一次檢測中，對同一樣本至少進(jìn)行20次重復(fù)測定。3、數(shù)據(jù)處理：記錄所有數(shù)據(jù)，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。4、離群值：結(jié)果與總均值的差值超過4個標(biāo)準(zhǔn)差時，可認(rèn)為該結(jié)果為離群值。一次評估只能有一個離群值，當(dāng)離群值超過一個時，應(yīng)懷疑該方法的穩(wěn)定性及操作者的熟練程度。精密度 同時評價批內(nèi)和批間精密度依據(jù)樣品的情況選擇實(shí)驗(yàn)方法1、每天做2個批次的測試，每批對同一樣品作雙份測量，工作20天，共80 個測試結(jié)果。2、每天做1個批次的測試，每批對同一樣品作4次測量，工作20天，共80 個測試結(jié)果。3、每天做2個批次的測試，每批對同一樣品作8次測量，工作5天，共80 個測試結(jié)果。穩(wěn)定性（stabili