浮游植物的采集、計(jì)數(shù)與定量方法

1、n浮游植物（浮游植物（Phytoplankon）又稱浮游藻類，又稱浮游藻類，是水中懸浮生活的若干種藻類的總稱。是水中懸浮生活的若干種藻類的總稱。浮浮游植物及其生產(chǎn)力的作用：游植物及其生產(chǎn)力的作用：n水生態(tài)系統(tǒng)的重要成員與重要功能之一：水生態(tài)系統(tǒng)的重要成員與重要功能之一：n是魚類天然餌料的重要組成部分；是魚類天然餌料的重要組成部分；n由于浮游植物對(duì)環(huán)境的變化十分敏感，故由于浮游植物對(duì)環(huán)境的變化十分敏感，故在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，也有重要作用。在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，也有重要作用。浮游植物的現(xiàn)存量：浮游植物的現(xiàn)存量：定義：定義：指的是某一瞬間單位水體中所存在的浮游植物指的是某一瞬間單位水體中所存在的浮游植物的量。的量

2、。兩種表示方法：兩種表示方法： 用用數(shù)目數(shù)目單位表示的密度，一般用單位表示的密度，一般用個(gè)升個(gè)升為單位，五、六十為單位，五、六十年代用之；年代用之； 用用重量重量單位（單位（mg/L）表示的現(xiàn)存量稱為生物量（表示的現(xiàn)存量稱為生物量（Biomass）。）。70年代以來(lái)被廣泛使用。年代以來(lái)被廣泛使用。不同水體，不同不同水體，不同種類種類的藻類在的藻類在個(gè)體個(gè)體上有很大上有很大差異差異，僅僅用僅僅用數(shù)量數(shù)量就很難評(píng)價(jià)。這就要求，浮游植物的定就很難評(píng)價(jià)。這就要求，浮游植物的定量工作，必須以測(cè)算生物量為目標(biāo)。量工作，必須以測(cè)算生物量為目標(biāo)。 n在早期在早期不同水體餌料生物不同水體餌料生物的豐欠調(diào)查中，的

3、豐欠調(diào)查中，人們往往只注重浮游植物的種類或數(shù)量，人們往往只注重浮游植物的種類或數(shù)量，其其原因原因在于：在于：n浮游植物生物量測(cè)算繁瑣。浮游植物生物量測(cè)算繁瑣。一、采樣：一、采樣：1、工具、工具25 目目2采樣點(diǎn)的選擇及采樣層次的確定采樣點(diǎn)的選擇及采樣層次的確定n選擇采樣點(diǎn)的原則是，采樣點(diǎn)在平面上的分布要選擇采樣點(diǎn)的原則是，采樣點(diǎn)在平面上的分布要有代表有代表性性。根據(jù)調(diào)查的目的而定。根據(jù)調(diào)查的目的而定。n一般要求一般要求湖心、庫(kù)心、江心湖心、庫(kù)心、江心必須采樣，有條件時(shí)采樣點(diǎn)必須采樣，有條件時(shí)采樣點(diǎn)可適當(dāng)多設(shè)一些，如可適當(dāng)多設(shè)一些，如大的湖灣、庫(kù)灣、河流大的湖灣、庫(kù)灣、河流的上、中、的上、中、下

4、游水體的下游水體的沿岸帶、淺水區(qū)沿岸帶、淺水區(qū)等也要設(shè)點(diǎn)采集。等也要設(shè)點(diǎn)采集。n凡水深凡水深不超過(guò)不超過(guò)2米米者，可于采樣點(diǎn)水下者，可于采樣點(diǎn)水下0.5m處采水，處采水，n水深水深210米米以內(nèi)，應(yīng)距底以內(nèi)，應(yīng)距底0.5米米處另采一個(gè)樣，處另采一個(gè)樣，n水深水深超過(guò)超過(guò)10米米時(shí)。應(yīng)于時(shí)。應(yīng)于中層中層增采一個(gè)水樣。增采一個(gè)水樣。池塘：池塘：樣點(diǎn)可設(shè)在距樣點(diǎn)可設(shè)在距岸邊岸邊1m處。水深處。水深小于小于2m時(shí)采一中時(shí)采一中層水樣。若水深層水樣。若水深大于大于2m時(shí)，最好采時(shí)，最好采上、中、下層上、中、下層水樣。水樣。亞表層：水下亞表層：水下20cm左右。左右。中中 層：水體中間部分。層：水體中間部

5、分。下下 層：離底層：離底20cm左右。左右。水庫(kù)及河流：水庫(kù)及河流：樣點(diǎn)可設(shè)在樣點(diǎn)可設(shè)在上、中、下游上、中、下游。上游：設(shè)十個(gè)點(diǎn)（亞表層或中層）上游：設(shè)十個(gè)點(diǎn)（亞表層或中層）中游：水在中游：水在23米深時(shí)設(shè)一個(gè)點(diǎn)，采米深時(shí)設(shè)一個(gè)點(diǎn)，采2個(gè)樣（上中層和中個(gè)樣（上中層和中下層）下層）下游：設(shè)下游：設(shè)23個(gè)樣點(diǎn)。中心點(diǎn)個(gè)樣點(diǎn)。中心點(diǎn)3個(gè)樣（上、中、下層），個(gè)樣（上、中、下層），兩測(cè)點(diǎn)各一個(gè)樣（中層）兩測(cè)點(diǎn)各一個(gè)樣（中層）湖泊：湖泊：中心區(qū)設(shè)一點(diǎn)。中心區(qū)設(shè)一點(diǎn)。進(jìn)水口進(jìn)水口和和出水口出水口也應(yīng)設(shè)點(diǎn)。也應(yīng)設(shè)點(diǎn)。 3采樣量及采樣次數(shù)采樣量及采樣次數(shù)n每一個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)采水每一個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)采水1000ml。n若

6、系一般性調(diào)查，可將若系一般性調(diào)查，可將各層采的水等量混合各層采的水等量混合，取，取1000ml混合水樣固定混合水樣固定；n或者或者分層采水分層采水，分別計(jì)數(shù)分別計(jì)數(shù)后取平均值。后取平均值。（分層采水可以了解每一采樣點(diǎn)各層水中浮游植物的數(shù)量和種類）（分層采水可以了解每一采樣點(diǎn)各層水中浮游植物的數(shù)量和種類）n采樣次數(shù)可多可少。有條件時(shí)還可采樣次數(shù)可多可少。有條件時(shí)還可逐月采樣逐月采樣一次，一次，一般情況可采樣一次，最低限度應(yīng)在一般情況可采樣一次，最低限度應(yīng)在春季、夏季春季、夏季末、秋初末、秋初各采樣一次。各采樣一次。 二、二、n魯哥氏液魯哥氏液即將即將6克克碘化鉀碘化鉀溶于溶于20ml水中，水中，

7、待其完全溶解后，加入待其完全溶解后，加入4克克碘碘充分搖動(dòng)，充分搖動(dòng)，待碘全部溶解后定容到待碘全部溶解后定容到100ml即配成魯哥即配成魯哥氏液。氏液。沉淀濃縮：沉淀濃縮：n上述水樣，搖勻后倒入上述水樣，搖勻后倒入1000ml瓶子瓶子中沉中沉淀淀24小時(shí)小時(shí)，用，用虹吸管虹吸管小心抽出上面不含小心抽出上面不含藻類的藻類的“清液清液”。剩下。剩下3050ml沉淀物沉淀物轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入50ml的定量瓶的定量瓶中；再用上述虹吸出中；再用上述虹吸出來(lái)的來(lái)的“清液清液”少許沖洗三次沉淀器，沖少許沖洗三次沉淀器，沖洗液轉(zhuǎn)入定量瓶中。洗液轉(zhuǎn)入定量瓶中。n濃縮時(shí)濃縮時(shí)切不可攪動(dòng)底部切不可攪動(dòng)底部，萬(wàn)一動(dòng)了應(yīng)重，萬(wàn)一

8、動(dòng)了應(yīng)重新靜止沉淀。新靜止沉淀。n凡以凡以碘液固定碘液固定的水樣固定的水樣，瓶塞的水樣固定的水樣，瓶塞要要擰緊。擰緊。還要加入還要加入24的甲醛固定液的甲醛固定液（福爾馬林），即每（福爾馬林），即每100ml樣品需另加樣品需另加4ml福爾馬林，以利于福爾馬林，以利于長(zhǎng)期保存長(zhǎng)期保存。采水時(shí)，每瓶樣品必須采水時(shí)，每瓶樣品必須貼上標(biāo)簽貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽上，標(biāo)簽上藥劑在藥劑在采集的時(shí)間、地點(diǎn)、采水體積采集的時(shí)間、地點(diǎn)、采水體積等等，其他詳細(xì)內(nèi)容應(yīng)另行做好記錄，以備，其他詳細(xì)內(nèi)容應(yīng)另行做好記錄，以備查對(duì)，避免錯(cuò)誤。查對(duì)，避免錯(cuò)誤。三、計(jì)數(shù)方法三、計(jì)數(shù)方法 工具：工具：將濃縮沉淀后水樣充分搖勻后，立將濃縮沉

9、淀后水樣充分搖勻后，立即用即用0.1ml吸量管吸量管吸出吸出0.1ml樣品樣品，注入，注入0.1ml計(jì)數(shù)框計(jì)數(shù)框內(nèi)（計(jì)數(shù)框的內(nèi)（計(jì)數(shù)框的表面積表面積最好是最好是2020），小心蓋上），小心蓋上蓋玻片蓋玻片（22222），在蓋蓋玻片時(shí)，要求），在蓋蓋玻片時(shí)，要求計(jì)數(shù)框計(jì)數(shù)框內(nèi)沒(méi)內(nèi)沒(méi)有有氣泡氣泡，樣品不溢出計(jì)數(shù)框。然后在，樣品不溢出計(jì)數(shù)框。然后在10或或40倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。倍顯微鏡下計(jì)數(shù)。每瓶標(biāo)本計(jì)數(shù)數(shù)量：每瓶標(biāo)本計(jì)數(shù)數(shù)量：計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)兩片兩片取其平均值取其平均值，每片大約計(jì)算，每片大約計(jì)算50100個(gè)個(gè)視野視野，但視野，但視野數(shù)可按數(shù)可按浮游植物的多少而酌情增減浮游植物的多少而酌情增減。如平均如平均

10、每個(gè)視野每個(gè)視野不超過(guò)不超過(guò)12個(gè)時(shí)，要數(shù)個(gè)時(shí)，要數(shù)200個(gè)視野以上，如果平均每個(gè)視野有個(gè)視野以上，如果平均每個(gè)視野有56個(gè)時(shí)要數(shù)個(gè)時(shí)要數(shù)100個(gè)視野，如果平均每個(gè)視野個(gè)視野，如果平均每個(gè)視野有十幾個(gè)時(shí)數(shù)有十幾個(gè)時(shí)數(shù)50個(gè)視野就可以了。個(gè)視野就可以了。n同一樣品的兩片同一樣品的兩片計(jì)算結(jié)果和計(jì)算結(jié)果和平均數(shù)平均數(shù)之差之差如不大于其如不大于其均數(shù)均數(shù)的的15，其均數(shù)視為，其均數(shù)視為有效結(jié)果，有效結(jié)果，否則還必須測(cè)第三篇。否則還必須測(cè)第三篇。n在計(jì)數(shù)過(guò)程中，常碰到在計(jì)數(shù)過(guò)程中，常碰到某些個(gè)體一部分某些個(gè)體一部分在視野在視野中，另一部分在視野外，這時(shí)可中，另一部分在視野外，這時(shí)可規(guī)定出在視野規(guī)定出在

11、視野上半圈者上半圈者計(jì)數(shù)，出現(xiàn)在計(jì)數(shù)，出現(xiàn)在下下半圈者半圈者不計(jì)數(shù)。不計(jì)數(shù)。n數(shù)量最好用數(shù)量最好用細(xì)胞表示細(xì)胞表示，對(duì)不宜用細(xì)胞數(shù)，對(duì)不宜用細(xì)胞數(shù)表示的表示的群體或絲狀體群體或絲狀體，可求出其平均細(xì)，可求出其平均細(xì)胞數(shù)胞數(shù)?。n計(jì)算時(shí)優(yōu)勢(shì)種類盡可能鑒別到種或?qū)?，?jì)算時(shí)優(yōu)勢(shì)種類盡可能鑒別到種或?qū)?，注意不要把注意不要把浮游植物?dāng)作雜質(zhì)浮游植物當(dāng)作雜質(zhì)而漏計(jì)。而漏計(jì)。四、數(shù)量與生物量的計(jì)算：四、數(shù)量與生物量的計(jì)算：1一升水中的浮游植物的一升水中的浮游植物的數(shù)量數(shù)量（N）可用可用下列公式計(jì)算：下列公式計(jì)算：式中：式中：Cs 計(jì)數(shù)框面積（計(jì)數(shù)框面積（2），一般為），一般為4002。Fs 每個(gè)視野的面積（

12、每個(gè)視野的面積（2），），R2，視野半徑視野半徑r可用臺(tái)微尺測(cè)可用臺(tái)微尺測(cè)出（一定倍數(shù)下）。出（一定倍數(shù)下）。Fn 計(jì)數(shù)過(guò)的視野數(shù)。計(jì)數(shù)過(guò)的視野數(shù)。V 一升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的體積（一升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的體積（ml）U 計(jì)數(shù)框的體積（計(jì)數(shù)框的體積（ml）為為0.1ml。Pn 計(jì)數(shù)出的浮游植物個(gè)數(shù)。計(jì)數(shù)出的浮游植物個(gè)數(shù)。此常數(shù)用此常數(shù)用K表示，則上述公式可簡(jiǎn)化為：表示，則上述公式可簡(jiǎn)化為：N=KPn。PnUVFnFsCsNnPn代表代表某種藻類的個(gè)數(shù)某種藻類的個(gè)數(shù)，計(jì)算結(jié)果，計(jì)算結(jié)果N只只表示一升水中表示一升水中這種藻類的數(shù)量這種藻類的數(shù)量；nPn若代表若代表各種藻類的總數(shù)各種藻類的總數(shù)，計(jì)算結(jié)果

13、，計(jì)算結(jié)果N則表示一升水中則表示一升水中浮游植物的總數(shù)浮游植物的總數(shù)。n前者若求浮游植物數(shù)量將各計(jì)算結(jié)果相前者若求浮游植物數(shù)量將各計(jì)算結(jié)果相加即可。加即可。2生物量一般按生物量一般按體積體積來(lái)?yè)Q算來(lái)?yè)Q算 這是因?yàn)楦∮沃参飩€(gè)體積小，這是因?yàn)楦∮沃参飩€(gè)體積小，直接稱重直接稱重較困難，且其細(xì)胞較困難，且其細(xì)胞比重多接近于比重多接近于1?？捎谩？捎眯螒B(tài)相近似的幾何體積公式形態(tài)相近似的幾何體積公式計(jì)算細(xì)胞體計(jì)算細(xì)胞體積。細(xì)胞體積的毫升數(shù)相當(dāng)于細(xì)胞重量積。細(xì)胞體積的毫升數(shù)相當(dāng)于細(xì)胞重量的克數(shù)。的克數(shù)。下列體積公式，可供計(jì)算生物量時(shí)參考：下列體積公式，可供計(jì)算生物量時(shí)參考：圓錐體：圓錐體：V=1/3RR2

14、2h h圓柱體：圓柱體：V=RR2 2h h球球 體：體：V=4/3RR3 3橢圓體：橢圓體：V4/3ab2（a a為長(zhǎng)軸半徑，為長(zhǎng)軸半徑，b b為短軸半徑）為短軸半徑）圓臺(tái)體：圓臺(tái)體：V V1/3H1/3H（ + + ）長(zhǎng)方體與正方體長(zhǎng)方體與正方體ababh h或或a a3 3不規(guī)則性藻類不規(guī)則性藻類可分可為幾個(gè)部分計(jì)算?？煞挚蔀閹讉€(gè)部分計(jì)算。 n硅藻細(xì)胞的計(jì)算通式：硅藻細(xì)胞的計(jì)算通式：V殼面面積殼面面積帶帶面平均高度面平均高度 每種藻類至少隨機(jī)測(cè)量每種藻類至少隨機(jī)測(cè)量20個(gè)以上個(gè)以上，求出，求出這種藻類這種藻類個(gè)體種的平均值個(gè)體種的平均值，一般都制成，一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升水種該附表供查找。此平均值乘上一升水種該種藻類的數(shù)量，即得到一升水中這種藻種藻類的數(shù)量，即得到一升水中這種藻類的生物量（類的生物量（mg/L）。）。 由于同一種類的細(xì)胞大小可能有較大的由于同一種類的細(xì)胞大小可能有較大的差別，同一屬內(nèi)的差別就更大了，因此差別，同一屬內(nèi)的差別就更大了，因此必須實(shí)測(cè)必須實(shí)測(cè)每次水樣中每次水樣中主要種類主要種類（即優(yōu)勢(shì)（即優(yōu)勢(shì)種）的細(xì)胞大小并計(jì)算平均重量，其他種）的細(xì)胞大小并計(jì)算平均重量，其他種類可以參考附表計(jì)算。種類可以參考附表計(jì)算。n藻類