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文檔簡介
1、高鎰酸鉀的吸收曲線的繪制和含量測定適用對象藥學(xué)、藥物制劑、中藥學(xué)、制藥工程、中藥學(xué)(國際交流方向)、生物工程專業(yè)實驗學(xué)時3學(xué)時一、實驗?zāi)康? .熟悉72型或721型分光光度計的使用方法2 .熟悉光譜曲線的繪制方法,能從吸收光譜曲線中選擇最大吸收波長-max3 .掌握分光光度計比色法的操作和測定有色物質(zhì)含量的方法.二、實驗原理1 .選擇合適的波長間隔手工繪制KMnO4的吸收曲線并找出最大吸收波長max.2 .從吸收光譜選定的max為測定波長用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定樣品溶液的含量.三、儀器設(shè)備容量瓶25mL,50mL)1000mL吸耳球/洗瓶500mL滴管/坐標(biāo)紙/鏡頭紙/移液管10mL、5mL、2mL、
2、1mL分光光度計721型分析純KMnO4(實驗用)四、相關(guān)知識點1 .分光光度法的原理2 .移液管的使用方法3 .吸收定律4?比色測定方法5 .標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制6 .定量分析的原理7 .最大吸收波長的選擇依據(jù)8 .標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置方法五、實驗步驟(一)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備準(zhǔn)確稱取基準(zhǔn)物KMnO40.1250g,在小燒杯中溶解后全部轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中,用蒸儲水稀釋到刻度,搖勻,每ml含KMnO4為0.1250mg。(二)比色測定(用721型分光光度計)1. 吸收曲線的繪制精密吸取上述KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液20ml于50ml容量瓶中,加蒸儲水至標(biāo)線,搖勻,以蒸儲水為空白,依次選擇440,450,460,4
3、70,480,490,500,510,520,525,530,535,540,545,550,560,580,600,620,640,660,680,700nm波長為測定點,依法測出的各點的吸收度A。以測定波長為橫坐標(biāo),以相應(yīng)測出的吸光度Ai為縱坐標(biāo),繪制吸收曲線;從吸收曲線處找出最大吸收波長max.2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取6支25ml容量瓶,分別加入0.00,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00KMnO4標(biāo)準(zhǔn)液,用蒸餾水稀釋到刻度,搖勻。以第一管蒸餾水為空白,在最大吸收波長處,依次測定各溶液的吸光度A,然后以濃度Cs(mg/ml)為橫坐標(biāo),相應(yīng)的吸光度As為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。3. 樣品的測定用一支25ml容量瓶,家樣品溶液5ml(約含KMnO4為0.5mg),用蒸餾水稀釋到刻度,搖勻,依上法操作,測出相應(yīng)的A值。(三)計算C樣(KMnO4)(g/ml)=C供nC樣為測樣品中KMn04的濃度(g/ml)C供為標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得的供試液的濃度(lg/ml)n:樣品溶液稀釋為供試液的倍數(shù)6、 實驗報告要求要求有原始數(shù)據(jù),實驗時間,注意事項,并討論誤差的產(chǎn)生原因及以后在類似實驗中要提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確度,需要采取那些方法7、 思考題1. 怎樣選擇測定波長2. 比色測定的注意事項8、 實驗成績評定辦法實驗成績的評定包括實驗操作(包括容量瓶的使用、移液管的使用、分光
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