丙二醇_月桂氮_酮_胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究(精)

1、科研簡報(bào)丙二醇/月桂氮酮 胰島素傳遞體體外透皮吸收的研究郭偉英，王佩琪,王曉紅，錦州 121001）微孔濾膜除菌，得胰島素的傳遞體溶液。取 1mL 做透皮給藥實(shí)驗(yàn)。2.3 丙二醇/月桂 氮酮胰島素傳遞體的制備按上述方法制備胰島素傳遞體，體積先稀釋到4mL,超聲處理后，按總體積5mL加入 10%丙二醇，再分別加入不同量的月桂氮 2.4 丙二醇/月桂氮察酮，最后再由緩沖液稀釋到 5mL,取 1mL 做透皮實(shí)驗(yàn)。酮胰島素傳遞體的形態(tài)觀 盧靜華（錦州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，遼寧中圖分類號(hào)：R943 43 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào)：1001-2494（2005）03-0231-02 胰島素的透皮吸收效率是目前研究

2、的主攻方向，而高效的透皮吸收促滲劑系統(tǒng)是胰 島素透皮吸收制劑的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)篩選了多種促滲劑組成了復(fù)合促滲劑胰島素傳 遞體系統(tǒng)，確立體外最佳滲透系統(tǒng)，獲得了較為滿意的效果。1 藥品與儀器昆明種小鼠（體重 1822g 本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）;胰島素原料藥（28IU mg-1,江蘇萬邦 生化醫(yī)藥股份有限公司，批號(hào) 020602）;大豆磷脂酰膽堿（上海金伴藥業(yè)有限公司，批 號(hào)20020904）去氧膽酸鈉（上?；瘜W(xué)制劑供應(yīng)站）；其他試劑均為分析純。TP-3 型智 能透皮擴(kuò)散儀（南京新聯(lián)電子設(shè)備有限公司）；放射免疫計(jì)數(shù)器（西安核儀器廠 FJ- 2008免疫計(jì)數(shù)器） ;微孔濾膜 （0.45 m,大連依利特科學(xué)儀

3、器有限公司）;PHS-3C 型酸度 計(jì) （上海偉業(yè)儀器廠）;125I 胰島素放射免疫試劑盒（濰坊開發(fā)區(qū)三維生物工程有限公 司,3V20030110 版）。JEM-1200EX 透射電鏡（日本）。2 實(shí)驗(yàn)方法21 胰島素放射免疫分析工作曲線的建立以 B/B0% logC 做標(biāo)準(zhǔn)曲線。B/B0%為不同濃度的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品存在下 125I 標(biāo)記 胰島素抗體復(fù)合物的放射計(jì)數(shù)占最大結(jié)合的 I 標(biāo)記胰島素抗體復(fù)合物的放射計(jì)數(shù) 的百分比。C 為胰島素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度（U mL-1）。2.2 胰島素傳遞體的制備參照文獻(xiàn)報(bào)道的方法，稱取 8mg 胰島素，加入 352mg 大豆磷脂酰膽堿,48mg 去氧膽 酸鈉,0.4

4、mL 乙醇用 0.01mol L-1 三乙醇胺 HCI 緩沖液（pH=6 2）稀釋到 5mL。混懸 液經(jīng)超聲波粉碎處理后用基金項(xiàng)目：遼寧省教育廳科研項(xiàng)目（9805211048）1253%磷鎢酸鈉，使用前用 1mol L-1NaOH 調(diào) pH=6.5 左右，將其滴加到蠟板上，另將原 濃度的樣品滴加到銅網(wǎng)正面，用濾紙吸去過多的樣品液，負(fù)染色 10min,用濾紙吸去 過多的染液，晾干，在透射電鏡下觀察并照相。2.5 丙二醇/月桂氮測(cè)定 酮胰島素傳遞體包封率的用粒徑為 100300 m的 Sephedex G50于蒸餾水中溶脹后填充為凝膠柱(25cm 0.8cm),在室溫下進(jìn)行色譜，洗脫液為 0.01

5、mol L-1 三乙醇胺 HCI 緩沖液，取 1.0mL 丙 二醇/月桂氮酮胰島素傳遞體上柱，緩慢加入保持液面平移，流速 0.5mL min-1,每 2.0mL 收集一次，用放射免疫分析 法測(cè)定游離胰島素的量。包封率=(W 總-W 游)/W 總 100%。W 總表示胰島素總 量,W 游表示游離胰島素量。2.6 皮膚制備取小鼠背部皮膚，除毛，剝離脂肪層，生理鹽水浸泡洗凈，置-200C 以下冷凍保存，備 用。2.7 透皮給藥實(shí)驗(yàn)方法剪取適當(dāng)形狀大小的備用皮夾于直立式擴(kuò)散池兩室間，面積為(2.5!0.2)cm2,接受池 充滿生理鹽水，定時(shí)取樣時(shí)將其全部取出，并補(bǔ)充全量生理鹽水，放射免疫測(cè)濃度。 樣品

6、和對(duì)照均平行做 6 次。3 結(jié)果與討論3.1 丙二醇/月桂氮酮胰島素傳遞體的形態(tài)酮胰島素從電鏡照片可見，丙二醇/月桂氮傳遞體的形態(tài)為球形，較為規(guī)整粒徑基本在 200nm 以下，見圖 1。同法觀察未加丙 二醇和月桂氮酮的胰島素傳遞體。大部分也為球形或近球形，只是規(guī)整性稍差，有 些粒徑大于 200nm。見圖 2。作者簡介:郭偉英,男教授，研究生導(dǎo)師 Tel:(0416)4673196 Email:wyi 40 期2005February,40 3加藥物的溶解度，提高藥物的經(jīng)皮滲透量，丙二醇單獨(dú)應(yīng)用效果往往不佳，但如果與 其他促進(jìn)劑合用，則可在起到增加藥物及促滲劑溶解度的同時(shí)發(fā)揮協(xié)同作用。因此 本實(shí)

7、驗(yàn)在傳遞體的基礎(chǔ)上又嘗試加入了滲透促進(jìn)劑月桂氮酮和丙二醇。 由于高濃 度的丙二醇可能對(duì)皮膚產(chǎn)生刺激和損害，同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)高濃度丙二醇可使傳遞 體膜增加溶解性導(dǎo)致藥物圖 1 丙二醇/月桂氮酮胰島素傳遞體透射電鏡照片的滲漏，因此我們采用 10%的丙二醇,改變?cè)鹿鸬臐舛龋Y(jié)果表明,月桂氮酮在 2%8%濃度下促滲作用均很強(qiáng),超過 10%作用下降。3.5 丙二醇，月桂氮酮胰島素傳遞體穩(wěn)定性觀察 固定丙二醇和月桂氮酮濃度分別為 10%和6%下，按?2 3#方法制備復(fù)合促滲劑 胰島素傳遞體，置于溫度 10?下，分別于當(dāng)天，第 123,4,5,7 天進(jìn)行透皮吸收實(shí)驗(yàn),測(cè)定滲透量。結(jié)果表明,3d 內(nèi) 8h

8、 累積滲透量都可 達(dá)到 8%9%,3d 后滲透量Fig1 Tran smissio nelectro nphotomicrographoftra nsfersuli nsys temwithAz oneand1,2圖 2 胰島素傳遞體透射電鏡照片F(xiàn)ig2 Tran smissio nelectro nphotomicrographoftra nsfersuli nsys tem則明顯降低。這比傳統(tǒng)的胰島素傳遞體需當(dāng)天配制當(dāng)天使用，放置時(shí)間有所延長，可能是該復(fù)合促滲劑系統(tǒng)對(duì)傳遞體的穩(wěn)定性提供了一定的有利條件或促進(jìn)作用。此外，有報(bào)道 pH=6.5脂質(zhì)體最穩(wěn)定，本實(shí)驗(yàn)采取的 pH=6.2 緩沖液也許

9、對(duì)傳遞體的穩(wěn)定 酮胰島素傳性有所幫助。4 結(jié)論丙二醇/月桂氮酮胰島素傳遞體經(jīng)皮給藥系統(tǒng)可進(jìn)一步提高胰島素傳遞體的體外透皮滲透效率，同時(shí)，傳遞體的穩(wěn)定性也有所（收稿日期:2003 12 16）3.2 丙二醇/月桂氮定結(jié)果酮胰島素傳遞體包封率測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，丙二醇/月桂氮遞體的出峰體積為 1420mL，游離胰島素的出峰體積為 2642mL,游離胰島素柱回收率為(98.95!1.95)%,丙二醇/月桂氮酮胰島素傳遞體的包封率為(29.25!2.35)%( n=5)，包封率還有待于進(jìn)一步提高，這主要是由于胰島素的親水 性所致。3.3 胰島素傳遞體的透皮吸收加入胰島素傳遞體后，胰島素的透皮吸收大為增加，

10、為不加傳遞體的 11 倍,累積經(jīng)皮 滲透量(Q)達(dá) 3%以上,給藥 23h 左右濃度可達(dá)最大，而后趨于平穩(wěn)，作用時(shí)間較長,證明了傳遞體在胰島素經(jīng)皮轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用。3.4 丙二醇和月桂氮收的影響月桂氮酮對(duì)胰島素傳遞體透皮吸超濾法測(cè)定龍膽苦苷的血漿蛋白結(jié)合率王長虹，王崢濤*(上海中醫(yī)藥大學(xué)中藥研究所，上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心,上海 201203)中圖分類號(hào)：R917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001-2494(2005)03-0232-03胰島素傳遞體溶液加入了丙二醇和不同濃度的酮，累積經(jīng)皮滲透量 Q。比不加促滲劑的胰島素傳遞體增加滲透量 23 倍。月桂氮酮作為吸收促進(jìn)劑應(yīng)用較為廣泛。丙二醇屬低級(jí)醇類，能溶脹和提取角質(zhì)層 中的類脂，增基金項(xiàng)目：上海市科學(xué)技術(shù)發(fā)展基金(02DZ1