寄生蟲糞便檢查法

1、實驗一寄生蟲糞便檢查法一、目的要求掌握糞便中寄生蟲蟲卵檢查的飽和鹽水漂浮法；應用顯微鏡觀察糞便中蟲卵的形態(tài)結構。 二、方法概述用以檢查蠕蟲卵、原蟲的包囊、滋養(yǎng)體和卵囊。方法簡便，連續(xù)作3次涂片，可提高檢出率。 1、蠕蟲卵檢查： 2、原蟲檢查：1）活滋養(yǎng)體檢查2）包囊的碘液染色檢查3）隱孢子蟲卵囊染色檢查：改良抗酸染色法（一）直接涂片法（二）浮聚法 原理：利用比重較大的液體，使原蟲包囊或蠕蟲卵上浮，集中于液體表面。常用的方法有三種： 1、飽和鹽水浮聚法 2、硫酸鋅離心浮聚法 3、蔗糖離心浮聚法蟲卵比重與漂浮液比重蟲卵種類蟲卵種類 比重比重 漂浮液的種類漂浮液的種類 比重比重 賈第蟲包囊1.040

2、-1.060飽和鹽水 1.171.19豬蛔蟲卵 1.045硫酸鋅溶液 1.14鉤蟲卵 1.0851.09氯化鈣溶液 1.05毛圓線蟲卵 1.1151.13氯化鈣溶液 1.25豬后圓線蟲卵1.200硫代硫酸鈉 1.371.39肝片吸蟲卵 1.200飽和硫酸鎂 1.26姜片吸蟲卵 1.200飽和硝酸鈉 1.21.49華枝睪蟲卵 1.200甘油 1.226復腔吸蟲卵 1.200飽和蔗糖溶液1.28飽和鹽水漂浮法操作示意圖1. 自糞便不同處挑取如蠶豆大小的糞塊，置于盛有少量飽和鹽水的漂浮管中2. 將糞便搗碎，與鹽水攪勻，再加飽和鹽水 3. 將滿時，改用滴管，加至略高于管口但不超出為止 4. 取潔凈載玻

3、片一張蓋在管口上，靜止30分鐘左右5. 如圖垂直向上提起載玻片6. 敏捷地翻轉，覆以蓋片鏡檢（三）沉淀法 原蟲包囊和蠕蟲卵的比重大可沉集于水底，有助于提高檢出率。但比重較小的鉤蟲卵和某些原蟲包囊則效果較差。 1、自然沉淀法 2、離心沉淀法（四）漂浮-沉淀法 該法的原理是利用糞便中各種蟲卵及糞渣中其它成份比重的差別，將不同比重的蟲卵分別集中進行檢查，即先按漂浮法檢查比重較小的蟲卵，然后將管中上層液倒掉，取沉淀物檢查不能上浮而沉在下面的比重較大的卵，所以，該法可用于檢查比重大小各異的寄生蟲卵。（五）拭子檢查法適用于在肛周、皮膚產卵（蟯蟲），或常在肛門附近發(fā)現(xiàn)蟲卵（帶絳蟲）的蟲卵檢查法。1、棉簽拭子

4、法2、透明膠紙法 漏斗幼蟲分離法(貝爾曼法)。取糞便15-20g，放在漏斗內的金屬篩上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一個小試管。加入40到淹沒糞球為止，靜置1-3小時。此時大部分幼蟲游走于水中，并沉淀于試管底部。取試管底部沉渣制成涂片鏡檢。 平皿法。取被檢糞球3-4個，放于平皿中，加適量40溫水，浸泡10-15min后，除去糞球，留下的液體在低倍顯微鏡下檢查。（六）糞便內蠕蟲幼蟲檢查法 1、幼蟲分離法：網尾線蟲、類圓線蟲 2、糞便內蟲卵培養(yǎng)法：圓形線蟲目 3、毛蚴孵化法：結腸小袋纖毛蟲Balantidium coli十二指腸賈第蟲Giardia duodenalis 球蟲隱孢子蟲肝片形吸蟲蟲卵

5、日本血吸蟲蟲卵蛭形巨吻棘頭蟲膜殼絳蟲蟲卵犬復孔絳蟲卵豬帶絳蟲蟲卵細粒棘球絳蟲蟲卵莫尼茨絳蟲蟲卵犬鞭蟲卵鉤蟲卵犬弓首蛔蟲卵鴿毛細線蟲卵，球蟲卵囊肉鴿蛔蟲卵豬蛔蟲卵通常的鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片，一般將lmm等分為100格，每格長l0m，是專門用來校正目鏡測微尺的。 通常的目鏡測微尺是一塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長度刻成50等分、把10 mm長度刻成100等分或將1mm長度刻成100等分。 測微尺的使用漏斗架2個/組；漏篩6個/組；小燒杯（50ml）12個/組；500ml燒杯2個/組；100mL燒杯1個/組；青霉素瓶6個/組；離心管6個/組；滴管1個/人；飽和鹽水1瓶/組；甘

6、油水1瓶/組；100mL量筒1個/組；小方瓷盤1個/組；擦鏡紙1平皿/組；小棉塊1份/組；載玻片、蓋玻片1份/組；離心機、小天平各1臺；鑷子2個/組；顯微鏡；試管架1個/組；動物糞便1份/班；50mL燒杯兩個用于配平。一）、實驗用品三、試驗內容1. 每2人操作1份飽和鹽水漂浮法靜置濾液 30分鐘；2. 直接涂片法（每2人操作1份）；3. 離心沉淀法（每2人操作1份）；4. 繼續(xù)“1”未完的操作。二）實驗安排六、注意事項1.高倍鏡下觀察必須加蓋玻片2.采用直接涂片法時，不要涂得太多，必須分散 開，均勻3.觀察寄生蟲卵前，需校對目鏡每格的長度；先在低倍鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)后換為高倍鏡4.使用離心機前，需配平離心管七、作業(yè)：繪制糞便樣品鏡檢看到的蟲卵八、思考題：糞便中蟲卵、卵囊的檢查需要注意那些問題？蟲卵比重與漂浮液比重蟲卵種類蟲卵種類 比重比重 漂浮液的種類漂浮液的種類 比重比重 賈第蟲包囊1.040-1.060飽和鹽水 1.171.19豬蛔蟲卵 1.045硫酸鋅溶液 1.14鉤蟲卵 1.0851.09氯化鈣溶液 1.05毛圓線蟲卵 1.1151.13氯化鈣溶液 1.25豬后圓線蟲卵1.200硫代硫酸鈉 1.371.39肝片吸蟲卵 1.200飽和硫酸鎂 1.26姜片吸蟲卵 1.200