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情境七:蛋白質(zhì)和酶任務(wù)九:碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶活力知識(shí)點(diǎn):碘-淀粉比色法測(cè)定淀粉酶活力課程:化學(xué)及生物物料的識(shí)用一、基本原理淀粉遇碘產(chǎn)生藍(lán)色,可以在一定量的淀粉中加入不同量的淀粉酶制劑,一定時(shí)間后,不出現(xiàn)藍(lán)色且酶制劑用量最少的那個(gè)試液可以認(rèn)為剛好將淀粉全部分解,可根據(jù)酶制劑的用量、淀粉的用量以及反應(yīng)時(shí)間來(lái)計(jì)算該淀粉酶的活力。二、操作步驟(1)給比色管編號(hào) 110。(2)在10只比色管中分別加入5mL淀粉試液,另取一只比色管,內(nèi)盛蒸餾水,插入溫度計(jì)。(3)一起放入恒溫水浴鍋中保溫(BF-7658 酶(細(xì)菌淀粉酶的一種) 60,胰酶40)。(4)當(dāng)溫度恒定在所需溫度后,按管號(hào)分別加入1.01.9mL(間隔為0.1mL)配制好的酶制劑溶液,計(jì)時(shí)保溫60min。二、操作步驟 (5)60min后,在每管中加入數(shù)滴c(I2)=0.1molL-1碘溶液。記錄不呈藍(lán)色且加入酶制劑溶液最少的試管中加入酶制劑溶液的體積V(mL)。(6)計(jì)算 酶活力=mg (gh)-1= V5000V100052121mmmm式中:ml稱取淀粉的質(zhì)量,g; m2稱取酶制劑的質(zhì)量,g; V不呈藍(lán)色試管中淀粉酶用量最少所加酶制劑溶液的體積,mL。三、注意事項(xiàng) 由于酶制劑的活力變化較大,如完全按上述操作,所加酶制劑溶夜體積可能不一定在測(cè)試范圍中,因此可以先加大酶制劑溶液體積的間隔,找到一個(gè)大致用量,再在其左右用0.1m
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