表面活性劑論文生物表面活性劑論文

1、表面活性劑 論文生物表面活性劑論文正交優(yōu)選表面活性劑提取山楂黃酮的工藝研究摘要 目的：優(yōu)選用表面活性劑提取山楂中黃酮的最佳工藝條件。方法：以總黃酮含量為指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定最佳提取工藝。結(jié)果：山楂中黃酮的最佳提取工藝條件為，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5%的吐溫80水溶液，在90提取1 h，提取2次，料液比為120，提取率為4.55%，比傳統(tǒng)的乙醇回流提取山楂黃酮的提取率增加了16.97%。結(jié)論：該法以溶有少量表面活性劑的水替代高濃度的醇進(jìn)行活性成分的提取，能大大降低提取成本，并提高提取率，是較理想的一種提取新工藝。 關(guān)鍵詞 表面活性劑；山楂；黃酮；正交試驗(yàn) Optimum flavono

2、ids extraction from hawthorn fruits with surfactant PAN Fangfang, GAO Jia, CHEN Jing (College of Bioengineering, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China) Abstract Objective: To optimum extraction technology of flavonoids from hawthorn fruits with surfactant. Methods: Single facto

3、r and orthogonal test were used to study the extraction conditions to extract flavonoids from hawthorn fruits. Results: The optimum extracting condition of extracting flavones from hawthorn was showed as follows, mass fraction of Tween 80 solution 1.5%; temperature of estraction 90; time of extracti

4、on 1 h; twice and the solid- liquid ratio 140 (g/ml). Conclusion: The method is low cost, high yeild and no need for organic solvent and can be applied multipurposely. Key words Surfactan; Hawthorn; Flavones; Orthogonal test 山楂為薔薇科植物山楂（Crataegus Pinnatifida Bunge）、山里紅（Crataegus pinnatifida Bunge vat

5、.Major N.E.Br.）及野山楂（Crataegus cuneata Sieb et Zucc.）的干燥成熟果實(shí)。山楂性酸、甘、味溫，歸脾、胃、肝經(jīng)，具有消食化積、活血化瘀的功效。山楂含有豐富的黃酮類化合物，對(duì)心腦血管疾病有顯著療效，具有降血脂、抗心肌缺血及再灌注損傷、增加冠狀動(dòng)脈流量等作用1。 山楂黃酮的提取主要有有機(jī)溶劑浸提、微波輔助提取2、超聲波輔助提取3和超臨界萃取等。而表面活性劑具有雙親結(jié)構(gòu)，能降低表面張力，增強(qiáng)溶劑對(duì)物料的潤濕性和滲透性，且對(duì)天然產(chǎn)物的有效成分具有增溶作用，從而增加浸出效能和萃取率，目前在天然產(chǎn)物提取中得到較多的應(yīng)用4-5。目前，尚無使用表面活性劑輔助提取山楂

6、黃酮的相關(guān)報(bào)道。故本實(shí)驗(yàn)利用表面活性劑的增溶作用，以溶有少量表面活性劑的水替代高濃度的醇或其他有機(jī)溶劑進(jìn)行活性成分的提取，能大大降低提取成本，并提高提取率，為山楂資源的深度開發(fā)利用提供技術(shù)支持。 1 材料與儀器 1.1 藥物與試劑 山楂，經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室姚振生教授鑒定為Crataegus Pinnatifida Bunge的干燥成熟果實(shí)；吐溫80（Tween-80）溫州清明化工有限公司；平平加（Peregal）上海文華化工顏料公司；聚乙二醇（PEG）上海文華化工顏料公司；烷基糖苷（APG）北京信諾久恒料貿(mào)有限公司；椰子油脂肪酸二乙醇酰胺（CDEA）北京信諾久恒料貿(mào)有限公司；其他試劑均

7、為分析純。 1.2 儀器 電子天平SPS402F型，梅特勒-拖利多（常州）稱重設(shè)備系統(tǒng)有限公司制造；TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。 2 方法與結(jié)果 2.1 提取工藝流程 準(zhǔn)確稱取山楂粉末5 g，加入一定質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表面活性劑水溶液進(jìn)行回流提取，合并浸提液，濃縮得黃酮提取液。 2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 準(zhǔn)確稱量蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品0.003 8 g，加60乙醇溶解并定容至50 ml。精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0、1、2、3、4 ml，分別置于10 ml刻度管中，加5%亞硝酸鈉溶液0.5 ml，放置5 min，加10%硝酸鋁溶液0.5 ml，搖勻后放置6 min，加1 mol/

8、L氫氧化鈉溶液4 ml，再加60%乙醇定容至10 ml，以相應(yīng)試劑為空白，在508 nm波長處測(cè)定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=0.049 6X+0.000 4，r=0.999 6（n=6）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蘆丁濃度在7.630.4 g/ml與吸光度（=508 nm）線性關(guān)系良好。 2.3 單因素試驗(yàn) 選定5個(gè)因素即表面活性劑、提取次數(shù)、提取時(shí)間、提取溫度、料液比研究其對(duì)總黃酮提取率的影響。 表面活性劑對(duì)吸光度的影響稱取山楂5 g，加入10倍量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的不同表面活性劑，80回流提取1 h，提取1次，見表1。由表1可知，同樣條件下，所采用的表面活性劑中，

9、以吐溫80提取效果最好，故選擇吐溫80作為該工藝研究中使用的增溶劑。按照上述方法，以吐溫80為增溶劑考察吐溫80質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)于山楂黃酮提取率的影響，結(jié)果見圖1。由圖1可知，當(dāng)吐溫80質(zhì)量分?jǐn)?shù)在2%左右時(shí)，黃酮提取率最大。因此， 選擇吐溫80質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%2%作為進(jìn)一步優(yōu)化范圍。 提取時(shí)間對(duì)吸光度的影響稱取山楂5 g，加入10倍量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的吐溫80水溶液，80回流提取1次，見圖2。由圖2可以看出，隨著提取時(shí)間的增加，吸光度呈先增大后減小的趨勢(shì)。綜合考慮，選擇提取時(shí)間12 h進(jìn)一步優(yōu)化范圍。 料液比對(duì)吸光度的影響稱取山楂5 g，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的吐溫80水溶液，80回流提取1次，回流提取2

10、h，見圖3。從圖3可以看出，隨料液比的增大，吸光度增大。本著節(jié)約原則，選擇料液比120140作為提取黃酮的考察條件。 溫度對(duì)吸光度的影響稱取山楂5 g，加入30倍量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的吐溫80水溶液，回流提取1次，提取2 h，見圖4。從圖4可以看出，隨溫度的升高，吸光度增加。選擇提取溫度80100作為提取黃酮的考察條件。 提取次數(shù)對(duì)吸光度的影響稱取山楂5 g，加入10倍量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%吐溫80水溶液，80回流提取1 h，見圖5。從圖5可知，隨著提取次數(shù)的增加，提取率增加，但是提取2次后，增加的不明顯。本著節(jié)約原則，選擇提取2次。 2.4 正交試驗(yàn) 因各因素之間存在相互影響，為了獲得最佳工藝條件，利

11、用正交“均勻分散”的特點(diǎn)，以溫度、吐溫80質(zhì)量分?jǐn)?shù)、料液比為主要考察因素，以測(cè)得的浸提樣品中黃酮含量為主要考察指標(biāo)，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)因素水平如表2所示。選用L9（34）正交表，試驗(yàn)結(jié)果如表3、4所示。 由表3、4正交試驗(yàn)和方差分析結(jié)果得，表面活性劑提取山楂黃酮的最佳工藝條件為：提取溫度為90，吐溫80質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5%，提取時(shí)間為1 h，提取2 次，料液比為120。 2.5 對(duì)比試驗(yàn) 取同一批山楂粉末6份。根據(jù)優(yōu)化工藝條件，對(duì)3份山楂粉末進(jìn)行總黃酮提取。另取3份按單純回流提取法6（加20倍量75乙醇提取1 h，提取溫度90）提取2次，分別計(jì)算提取率，試驗(yàn)結(jié)果見表5。由表5可知，表面活性劑

12、提取優(yōu)化工藝穩(wěn)定可靠。用表面活性劑提取工藝比僅用乙醇提取山楂黃酮的提取率增加了16.97%。 3 分析與討論 通過單因素和正交分析，得到表面活性劑提取山楂黃酮的最佳工藝條件為：提取溫度為90，吐溫80水溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5%，提取時(shí)間為1 h，料液比為120，提取率為4.55%。 用表面活性劑水溶液提取，提取率提高的原因可能是由于表面活性劑具有特定的雙親分子結(jié)構(gòu)，可降低細(xì)胞膜與水溶液間的界面張力，更利于水溶液通過毛細(xì)管或細(xì)胞間隙滲透進(jìn)入細(xì)胞壁內(nèi)，溶解可溶的山楂中黃酮，使細(xì)胞內(nèi)外濃度差增大，水不斷滲透進(jìn)入細(xì)胞組織，提高細(xì)胞內(nèi)部系統(tǒng)含水量，從而提高了它的浸出效能和提取率。用該方法比傳統(tǒng)的乙醇回流提取山楂黃酮的提取率增加了16.97%。結(jié)果表明， 該法以溶有少量表面活性劑的水替代高濃度的醇或其他有機(jī)溶劑進(jìn)行活性成分的提取，能大大降低提取成本，并提高提取率，是較理想的一種提取新工藝。 參考文獻(xiàn) 1王春雷,蘆柏震,侯桂蘭.山楂的化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用J.海峽藥學(xué),2010,22(3):75-78. 2高岐,劉宏文.洋蔥中總黃酮的微波提取法J.食品工業(yè)科技,2008,29(1):218-219. 3陳永剛,劉曉涵,林勵(lì),等.超聲波提取法提取化橘紅中黃酮類物質(zhì)的工藝優(yōu)選