體內(nèi)藥物分析方法進展參考模板

1、體內(nèi)藥物分析方法進展李亞捷（江川縣人民醫(yī)院  云南江川  652600)【中圖分類號】R917    【文獻標識碼】A    【文章編號】1672-5085 (2010)18-0382-02     【摘要】  體內(nèi)藥物分析是藥物分析的重要分支，能獲得藥物在體內(nèi)的各種信息。隨著近年的科技進步，體內(nèi)藥物分析發(fā)展迅速，更快速、更高靈敏度、更高選擇性、更高自動化的分析方法已成為今后體內(nèi)藥物分析發(fā)展的新方向。通過查閱文獻，本文綜述了體內(nèi)藥物分析方法的進展?！娟P(guān)鍵詞】

2、0; 體內(nèi)藥物分析  色譜法  毛細管電泳法  免疫分析  聯(lián)用        體內(nèi)藥物分析是藥物分析的重要分支，是一門研究生物機體中藥物及其代謝物和內(nèi)源性物質(zhì)的質(zhì)與量變化規(guī)律的分析方法學1。體內(nèi)藥物分析借助于現(xiàn)代化的儀器與技術(shù)來分析藥物在體內(nèi)數(shù)量與質(zhì)量的變化，以獲得藥物在體內(nèi)的各種信息，有助于從生產(chǎn)、研究、臨床使用等方面對藥物作出估計與評價，從而改進和發(fā)展2。目前，應(yīng)用于體內(nèi)藥物分析的方法有很多，歸納起來主要有以下幾類：     &#

3、160;   1  色譜法        色譜(Chromatography )技術(shù)具備分離和分析的雙重功能，且有很高的選擇性和靈敏度，可同時分析結(jié)構(gòu)相似的藥物和代謝物等，一直是研究體內(nèi)藥物及其代謝物最強有力的手段。色譜法可分為薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)等。其中以高效液相色譜法最為常用，特別是反相高效液相色譜法，現(xiàn)已成為體內(nèi)藥物分析方法中最重要的方法，并常作為體內(nèi)藥物分析中評價其它方法的參比方法。     

4、;   1.1 柱切換技術(shù)        柱切換技術(shù)(column switching, CS)是指用閥來改變流動相走向和流動相系統(tǒng)，從而使洗脫液在一特定時間內(nèi)從預處理柱進入到分析柱的在線固相分離技術(shù)。CS技術(shù)具有以下優(yōu)點：(1)分辨率和選擇性高；(2)使待測組分富集，靈敏度高；(3)在一個色譜網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)中實現(xiàn)多個分離目標；(4)可在線衍生化，靈敏度高和重現(xiàn)性好；(5)在線純化樣品，使預處理過程自動化。CS技術(shù)近年來發(fā)展迅速，已廣泛應(yīng)用于體內(nèi)藥物分析。    

5、0;   1.2 手性色譜技術(shù)        為了評價藥物對映體的生物學活性，檢查其光學純度，近年來藥物對映體測定技術(shù)尤其是拆分和定量方法有了迅速發(fā)展。測定藥物對映體的方法有直接法和間接法，在體內(nèi)藥物分析中，待測藥物濃度很低，一般采用直接法（即在色譜中運用手性固定相或手性流動相添加劑）進行測定。目前，在藥物分析領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛的手性固定相主要有環(huán)糊精手性固定相、蛋白質(zhì)手性固定相及Pirkle型手性固定相。常用的手性流動相添加劑有手性蛋白、環(huán)糊精手性試劑、手性冠醚等。   &

6、#160;    1.3  超臨界流體色譜        超臨界流體色譜法是以超臨界流體為流動相的新型色譜技術(shù)。超臨界流體是指物質(zhì)在高于其臨界溫度和臨界壓力時的一種物質(zhì)形態(tài)，此物態(tài)的物質(zhì)兼有氣體的低粘度、液體的高密度以及介于氣液之間的擴散系數(shù)等特征。CO2是一個較理想的流動相，在SFC中應(yīng)用最為廣泛。        1.3.1 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)      

7、  色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用是應(yīng)用于藥物分析中最為活躍的技術(shù)，能夠使樣品的分離、定性、定量一次完成。目前，色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)主要包括氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS) 聯(lián)用和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)聯(lián)用。文紅梅等3用LC/ESI/TOF/MS測定了環(huán)維黃楊星D在Beagle犬血漿中的濃度，對環(huán)維黃楊星D在犬體內(nèi)的藥動學進行了研究。于治國等用LC-MS鑒別出6,7-二甲氧基香豆素在大鼠體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物。        1.3.2 色譜與核磁共振聯(lián)用技術(shù)      &

8、#160; 近年來，隨著核磁共振(NMR)儀在靈敏度、分辨率、動態(tài)范圍等方面技術(shù)的提高，色譜(特別是HPLC)與NMR儀直接聯(lián)用已成為可能，并已經(jīng)成為體內(nèi)藥物分析中有力的結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù)之一。目前HPLC-NMR聯(lián)用進行體內(nèi)藥物分析研究主要集中于對尿液中代謝產(chǎn)物的研究。為了解決NMR的靈敏度低的問題，目前一般采用截流模式或采用高頻儀器來提高系統(tǒng)的靈敏度。這些均為LC-NMR聯(lián)用技術(shù)關(guān)鍵問題的解決提供了有利條件。        1.4 膠束色譜法       

9、膠束色譜(micellar chromatography, MC)法是一種在常規(guī)色譜柱上實現(xiàn)體液樣品直接進樣分析的色譜方法。MC使用表面活性劑SDS的水溶液作為可溶解血清蛋白的流動相，使血清蛋白保持溶解狀態(tài)而不干擾測定。早期MC的主要缺點是分辨率低，對蛋白質(zhì)與固定相之間以及蛋白質(zhì)與表面活性劑之間相互作用的研究顯示，降低流動相中SDS的濃度使其低于CMC，提高流動相中有機溶劑(如甲醇)的濃度，既能對生物樣品作直接進樣分析，還可以得到較高的分辨率。        2  高效毛細管電泳法   

10、;     高效毛細管電泳是近年來發(fā)展較快的一種分離、分析技術(shù)，HPCE和高效液相色譜法(HPLC)相比，相同處在于都是高效分離技術(shù)，儀器操作均可自動化，且均有多種不同分離模式。差異在于：HPCE用遷移時間取代HPLC中的保留時間，分析時間比HPLC短；對HPCE而言，從理論上推得其理論塔板高度和溶質(zhì)擴散系數(shù)成正比，對擴散系數(shù)小的生物大分子而言，其柱效就要比HPLC高得多；HPCE所需樣品為nL級，最低可達270 fL，流動相用量也只需幾毫升，而HPLC所需樣品為L級，流動相則需幾百毫升乃至更多；但HPCE僅能實現(xiàn)微量制備，而HPLC可作常量制備。HPC

11、E和普通電泳相比，由于采用高電場，分離速度要快得多；檢測器除了未能和原子吸收及紅外光譜連接以外，其他類型檢測器均可連接檢測；一般電泳定量精度差，而HPCE和HPLC相近；HPCE操作自動化程度比普通電泳要高得多。胡晉紅等以MECC分離模式，以酮康唑為內(nèi)標，建立了適合環(huán)孢菌素A臨床治療監(jiān)測的定量分析方法。        3   免疫分析法        免疫分析法的原理是被分析藥物(Ag)和標記后的該藥物(Ag*)與該藥物的專屬性抗體(Ab)競爭有限的結(jié)合部位，未標記藥物(Ag)的濃度決定于標記藥物(Ag*)與專屬性抗體(Ab)結(jié)合的量。它將分析方法與免疫原理相結(jié)合，進行超微量分析，具有靈敏度高、選擇性強、操作簡便、快速、用量少、樣品一般不需進行預處理等優(yōu)點。因此，該法特別適合分析大批量低濃度的體液樣品。其缺點是測定藥