透皮實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程

1、_透皮實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程一、透皮儀的使用1、操作面板介紹：2、操作方法：（1）多功能旋鈕 (面板右部的大旋鈕 )的用法：旋轉(zhuǎn) (選項(xiàng) )按一下 (選中 )旋轉(zhuǎn)(設(shè)置)按一下 (確認(rèn))（2）順時(shí)針旋動(dòng)大旋鈕，功能指示燈按序從左至右點(diǎn)亮：(測(cè)溫設(shè)溫加熱調(diào)速 )3、溫度設(shè)定轉(zhuǎn)動(dòng)大旋鈕選中“設(shè)溫”燈亮，按下。在緩慢左右旋至所需溫度數(shù)據(jù)后按下，確認(rèn)。4、預(yù)加熱設(shè)溫完畢，轉(zhuǎn)動(dòng)大旋鈕指示燈前進(jìn)一步至“加熱”燈亮，按下，此時(shí)溫度窗口旁的加熱狀態(tài)燈亮，加熱開(kāi)始。5、調(diào)速設(shè)定-可編輯修改 -_轉(zhuǎn)動(dòng)大旋鈕選中“調(diào)速”燈亮，按下，再緩慢左右選至所需轉(zhuǎn)速按下，確認(rèn)。6、運(yùn)行 /暫停水溫加熱至預(yù)置溫度后， 放入樣品，按下“運(yùn)行

2、/暫停”鍵開(kāi)始計(jì)時(shí)，再次按下，時(shí)鐘停止計(jì)時(shí)。7、透皮儀使用注意事項(xiàng)（1） 若發(fā)現(xiàn)六個(gè)攪拌頭有不轉(zhuǎn)的現(xiàn)象，請(qǐng)打開(kāi)其底板檢查， 若傳動(dòng)帶脫落或損壞請(qǐng)換上備用皮帶。（2）嚴(yán)禁水箱內(nèi)無(wú)水時(shí)開(kāi)機(jī)。平時(shí)儀器不用時(shí)請(qǐng)將水放盡。（3）儀器及環(huán)境經(jīng)常保持清潔，請(qǐng)勿任意拆下機(jī)件或儀器內(nèi)部元件。二、實(shí)驗(yàn)步驟1、配置生理鹽水 (即質(zhì)量濃度為 0.9% 的氯化鈉溶液 )，準(zhǔn)備棉球2、離體鼠皮的制備將小鼠斷頸處死后， 立即用充電式修剪器將小鼠腹部毛剃干凈，立即剪取腹部皮膚，將取下的皮膚平鋪于干凈的玻璃板上，角質(zhì)層朝下， 仔細(xì)用沾有生理鹽水的棉球擦除皮下脂肪層和結(jié)締組織，用生理鹽水反復(fù)沖洗干凈， 置于生理鹽水中，于 4冰箱

3、保存?zhèn)溆茫?實(shí)驗(yàn)前自然解凍， 并用生理鹽水浸泡0.5h ，于 1 周內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。每次實(shí)驗(yàn)前目視檢查鼠皮的完整性，不能有任何破損。3、接收液的配置根據(jù)所選藥物的溶解度， 選擇接收液， 水溶性藥物一般選用生理鹽水，難溶性藥物一般選用生理鹽水+適量的表面活性劑（如乙醇，丙二醇，但其用量一般不超過(guò) 30% ，v/v ），以便增加其溶解度，符合其漏槽條件。注：漏槽條件一般釋放介質(zhì)的體積為藥物飽和溶液所需介質(zhì)體積的3-7-可編輯修改 -_倍。（即選擇的接收液對(duì)藥物的溶解能力要好。）4、擴(kuò)散池的檢漏將皮膚固定于已加有攪拌子的Franz 擴(kuò)散池上，使角質(zhì)層面向上， 用彈簧夾固定，在供給池中加滿水，放置一段時(shí)間

4、看其液面是否下降，若有滲漏情況，則調(diào)整彈簧夾，至不漏為止。5、加接收液用注射器慢慢將接收液加入接收池中，加完后檢查皮膚與接收液接觸界面間是否有氣泡，如果有氣泡，將擴(kuò)散池稍稍?xún)A斜排除氣泡，加滿接收液。6、加樣品溶液用注射器慢慢將樣品溶液加入供給池中，加入量一般為 1-2mL ，加入后用保鮮膜將供給池封閉。7、取樣用彎頭取樣針緩緩抽出適量接收液(一般 0.5-1mL) ，注意不要有氣泡進(jìn)入接收池，若有氣泡產(chǎn)生，則將擴(kuò)散池稍稍?xún)A斜排除氣泡，補(bǔ)加等量的新鮮接收液。8、樣品處理將取出的接收液蒸干 (根據(jù)不同藥物的性質(zhì)，選擇蒸干溫度)，用甲醇復(fù)溶，13000 轉(zhuǎn)離心 15min ，取上清液進(jìn)樣檢測(cè)。9、皮

5、膚滯留量的測(cè)定透皮結(jié)束后， 將皮膚從擴(kuò)散池上取下， 剪取透皮面積部分的鼠皮， 用純凈水沖洗透皮表面3 遍，再用酒精棉球擦拭鼠皮表面3 遍，以除盡殘留于表面的藥物，再將鼠皮剪碎置于含有1mL 甲醇的離心管中，超聲提取60min ，13000 轉(zhuǎn)離心 15 分鐘，取上清液，進(jìn)樣檢測(cè)。-可編輯修改 -_10 、鼠皮切片透皮結(jié)束后， 將皮膚從擴(kuò)散池上取下， 剪取透皮面積部分的鼠皮， 用純凈水沖洗透皮表面3 遍，再用酒精棉球擦拭鼠皮表面3 遍，以除盡殘留于表面的藥物。將上述樣品按照 0-15 m，15-30 m，30-45 m 切片 (若含量較低， 則可平行多次 )，將所得各層皮膚分別置于含有1mL 甲醇的離心管中，超聲提取60min