普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)整理全套(共57頁(yè))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容提要本書共編入20個(gè)實(shí)驗(yàn)，包括顯微鏡的使用、細(xì)胞、動(dòng)植物組織、個(gè)體解剖以及制片、標(biāo)本的制作等方面的內(nèi)容，能幫助學(xué)生印證理論，學(xué)習(xí)和訓(xùn)練基本實(shí)驗(yàn)技能。實(shí)驗(yàn)后附有思考題，能啟發(fā)和開闊學(xué)生的思路，培養(yǎng)綜合與分析問(wèn)題的能力。本書適合我院本科、基地班及大專生物工程專業(yè)學(xué)生作為普通生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教材，也可供有關(guān)專業(yè)人員和中學(xué)教師參考。目 錄實(shí)驗(yàn) 一 顯微鏡的構(gòu)造和使用實(shí)驗(yàn) 二 生物繪圖技術(shù)實(shí)驗(yàn) 三 細(xì)胞的形態(tài)與結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn) 四 細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn) 五 植物組織實(shí)驗(yàn) 六 植物組織制片技術(shù)實(shí)驗(yàn) 七 葉綠體的制備及其對(duì)染料的還原作用實(shí)驗(yàn) 八 植物根的形態(tài)與結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn) 九 植物莖

2、的形態(tài)與結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn) 十 植物葉的形態(tài)與結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)十一 植物的繁殖器官實(shí)驗(yàn)十二 植物臘葉標(biāo)本的制作實(shí)驗(yàn)十三 動(dòng)物組織（一）實(shí)驗(yàn)十四 動(dòng)物組織（二）實(shí)驗(yàn)十五 ABO血型鑒定實(shí)驗(yàn)十六 人體動(dòng)脈血壓的測(cè)量實(shí)驗(yàn)十七 血細(xì)胞的計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)十八 原索動(dòng)物及脊椎動(dòng)物類群（一）魚類實(shí)驗(yàn)十九 脊椎動(dòng)物鳥類實(shí)驗(yàn)二十 脊椎動(dòng)物類群（二）哺乳類實(shí)驗(yàn)一 顯微鏡的構(gòu)造和使用一、目的要求 了解普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和各部分的性能，學(xué)習(xí)本掌握正確的使用技術(shù)二、材料和用品 生物切片標(biāo)本；顯微鏡；二甲苯、香柏油三、方法和步驟（一）、了解顯微鏡的構(gòu)造和性能 光學(xué)顯微鏡是研究生物學(xué)的常用工具，由一組光學(xué)放大系統(tǒng)和支持及調(diào)節(jié)它的機(jī)械系統(tǒng)組成，有的

3、還帶有光源部分。其結(jié)構(gòu)見圖1。圖1 顯微鏡的結(jié)構(gòu)1、機(jī)械系統(tǒng)（1）、鏡座和鏡柱 鏡座是顯微鏡底部的沉重部分，它使顯微鏡重心較低，以使之不致傾倒。其上直立的短柱部分為鏡柱，支持鏡臂和鏡臺(tái)。（2）、鏡臺(tái) 又名載物臺(tái)，是放置玻片標(biāo)本的平板。其中央有一圓孔，稱鏡臺(tái)孔，以便從下方來(lái)的光線由此通過(guò)。鏡臺(tái)上有壓片夾用以固定標(biāo)本。較好的顯微鏡裝有標(biāo)本移動(dòng)器（或稱推進(jìn)尺），既可固定載玻片又可轉(zhuǎn)動(dòng)螺旋前后左右移動(dòng)標(biāo)本。有的標(biāo)本移動(dòng)器上還帶有標(biāo)尺，可利用標(biāo)尺上的刻度尋找所要觀察的標(biāo)本位置。（3）、鏡臂 為鏡柱之上彎曲的部分，以便于持握，有些老式顯微鏡的鏡臂與鏡柱之間有一個(gè)能活動(dòng)的傾斜關(guān)節(jié)，可使鏡身向前后傾斜，便于觀

4、察。新式顯微鏡的鏡筒已是傾斜的，而且能轉(zhuǎn)動(dòng)，沒(méi)有傾斜關(guān)節(jié)。（4）、鏡筒 為鏡臂上端的圓筒部分。其頂端安置目鏡，下端連接鏡頭和轉(zhuǎn)換器。由物鏡到目鏡的光線便由此通過(guò)。（5）、鏡頭轉(zhuǎn)換器 是鏡筒下端一個(gè)可旋轉(zhuǎn)的圓盤。其上可裝置數(shù)個(gè)接物鏡，以便觀察時(shí)換用不同倍數(shù)的物鏡。（6）、調(diào)焦螺旋 有粗調(diào)節(jié)器和細(xì)調(diào)節(jié)器，能使鏡筒或鏡臺(tái)升降，調(diào)節(jié)物鏡和觀察材料間的距離，以求得清晰的圖像。粗調(diào)節(jié)器升降鏡筒的距離較大，約為50毫米，主要用于尋找目的物。由低倍鏡觀察標(biāo)本時(shí)，用粗調(diào)節(jié)器調(diào)焦距。細(xì)調(diào)節(jié)器升降的幅度較小，約為1.82.2毫米，能精確地對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)，取得更清晰的物象。使用時(shí)，一般擰動(dòng)不超過(guò)一圈。由低倍鏡轉(zhuǎn)高倍鏡觀察時(shí)

5、，則用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)焦。調(diào)焦螺旋是顯微鏡上的一個(gè)重要裝置，因?yàn)閷?duì)不準(zhǔn)焦距就看不清被觀察的物體。2、光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)包括照明系統(tǒng)和成像系統(tǒng)。前者由反光鏡、聚光器和虹彩光圈組成。后者由接物鏡和接目鏡組成。（1）、反光鏡 為一圓形的平、凹雙面鏡，位于顯微鏡的下方，接受外來(lái)光線本將光線反射到聚光器。平面鏡反光較弱，用于光線較強(qiáng)的情況下。凹面鏡的方向可以任意轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)節(jié)，便于收集來(lái)自任何方向的光線，以選擇適合的鏡面和適當(dāng)?shù)慕嵌取＃?）、聚光器 在載物臺(tái)的下面，由二、三塊凹透鏡組成。作用是聚集來(lái)自反光鏡的光線，使光線增強(qiáng)，射入鏡筒中，并使整個(gè)物鏡所包括的視野均勻受光，提高物鏡的鑒別能力。聚光器可以升降，其上還附有

6、光圈，以調(diào)節(jié)進(jìn)入物鏡的光線。所以在使用高倍鏡時(shí)，必須配以聚光器。（3）、虹彩光圈（可變光闌）位于聚光器下面，由許多金屬片組成。推動(dòng)操縱光圈的調(diào)節(jié)桿，就可調(diào)節(jié)光圈的大小，合上行的光線的強(qiáng)弱適宜，便于觀察。（4）、接物鏡（物鏡）由數(shù)組透鏡組成，可放大物體。透鏡的直徑越小，放大倍數(shù)越高。每架顯微鏡均備有幾個(gè)倍數(shù)不同的目鏡，其上放大40倍（40×）以下的叫低倍鏡，一般為10倍（10×）；放大40倍（40×）以上的叫高倍鏡子；放大100（100×）倍以上的叫油鏡。物鏡不同的目鏡，是顯微鏡取得物象的主要部件，其作用為聚集來(lái)自任何一點(diǎn)的光比重和利用入射光對(duì)被觀察的物體

7、做第一放大的造像。每個(gè)物鏡上通常標(biāo)有表示物鏡主要性能的參數(shù)。如10倍物鏡上標(biāo)有10/0.25和160/0.17，10為物鏡的放大倍數(shù)（即10×）；0.25為數(shù)值孔徑（N.A）；160為鏡筒長(zhǎng)度（160毫米）；0.17為所要求的蓋玻片厚度（稱為鏡口角）的一半正弦值和玻片與物鏡間介質(zhì)的折射北的乘積，可用以下公式表示：N·An sin式中，n介質(zhì)折射率最大入射角的半數(shù)，即鏡孔角的半數(shù)。因此，光線投射到物鏡的角度愈大，顯微鏡的效能就越大，該角度的大小決定于物鏡的直徑和焦距。顯微鏡的分辨力是指顯微鏡能夠辨別兩點(diǎn)之間最小距離的能力。它與接物鏡的數(shù)值孔徑成正比，與光波長(zhǎng)度成反比，因此，接

8、物鏡的數(shù)值孔徑愈大，光波長(zhǎng)度愈短，則顯微鏡的分辨力愈大，被檢物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)也愈能區(qū)別。 一個(gè)高的分辨力意味著一個(gè)小的分辨距離，二者成反比關(guān)系。能辨別兩點(diǎn)之間的最小距離 人們?nèi)庋鬯芨惺艿墓獠ㄆ骄L(zhǎng)度為0.55微米，假如用數(shù)值孔徑為0.65的接物鏡（高倍鏡），它可分辨的兩點(diǎn)之間最小距離為0.42微米，而在0.42微米以下的兩點(diǎn)距離就分辨不出，即便使用倍數(shù)更高的接目鏡，增加顯微鏡的總放大率，也仍然分辨不出。只有改用數(shù)值孔徑更大的接物鏡，增加其分辨力才行。所以，顯微鏡的放大倍數(shù)與其分辨力是有區(qū)別的。油鏡頭的焦距短，鏡口角小，因而其N·A愈高，光波就愈短，則所能辨析的物體愈小。另外，滴香柏油

9、作為介質(zhì)使用時(shí)，物鏡與載玻片之間僅隔一層油性物質(zhì)（其他的物鏡與載玻片之間隔著一層空氣）。由于香柏油的折射率等于1.52，與玻璃相同，所以當(dāng)光線通過(guò)載玻片后，可直接通過(guò)香柏油進(jìn)入物鏡而不發(fā)生折射，可使視野光線充足。相反，玻片與物鏡之間的介質(zhì)為空氣時(shí)，當(dāng)光線通過(guò)玻片后，受到折射發(fā)生散射現(xiàn)象，進(jìn)入物鏡的光線顯然減少，這樣就減低了視野的照明度，影響分辨力。（5）、接目鏡（目鏡） 是一個(gè)金屬的圓筒，上端裝有一塊較小的透鏡，下端裝有一塊較大的透鏡，其作用是將物鏡所放大和鑒別了物象進(jìn)行再放大。目鏡內(nèi)可附加指針和測(cè)微尺。每架顯微鏡常備有幾個(gè)倍數(shù)不同的目鏡，其上也刻有5×、10×、12.5&

10、#215;等放大倍數(shù)，顯微鏡的放大倍數(shù)即是所用的目鏡紡錠倍數(shù)跟所用物鏡的放大倍數(shù)的乘積。（二）、了解顯微鏡的成像原理光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)的成像原理，觀察生物體的結(jié)構(gòu)。首先利用反光鏡將可見光反射到聚光器中，把光線匯聚成束，穿過(guò)生物制片（觀察），進(jìn)入到物鏡的透鏡上。因此所觀察的制片都要很薄（一般為810微米），光線才能夠穿透制片，經(jīng)過(guò)物鏡將制片上的結(jié)構(gòu)放大為倒立的實(shí)像。這一倒立的實(shí)像經(jīng)過(guò)目鏡的放大，映入眼球被成為放大的倒立的虛像。（三）、顯微鏡的使用方法1、安放顯微鏡打開鏡箱，右手緊握鏡臂，左手平托鏡座，輕放桌上使鏡臂正對(duì)自己的左胸，距離桌子邊緣幾厘米處。2、檢查 檢查各部分部件是否完好，鏡身、鏡

11、頭必須清潔。3、對(duì)光顯微鏡的光源一般用天然光源，也可用日光燈或顯微鏡燈，但不能用直射日光。因直射日光影響圖像的清晰，損壞光源裝置和鏡頭，而且刺傷眼睛。對(duì)光時(shí)，首先將光圈的孔徑調(diào)至最大，將升到最高點(diǎn)，再將低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)孔，鏡頭離載物臺(tái)約有1厘米。這時(shí)，一面把反光鏡轉(zhuǎn)向光源，一面用左眼（兩眼睜開）從目鏡中觀察，宜用平面鏡；光線過(guò)弱時(shí)，宜用凹面鏡。對(duì)好光后不要再移動(dòng)顯微鏡，否則有需要重新對(duì)光。此外，在鏡檢全過(guò)程中，根據(jù)所需光線的強(qiáng)弱，還可通過(guò)擴(kuò)大或縮小光圈、升降聚光器和旋轉(zhuǎn)反光鏡以調(diào)節(jié)之。4、調(diào)焦光線對(duì)好后，就可將制片放在載物臺(tái)上，有蓋片的一面朝上，被檢物體對(duì)準(zhǔn)圓孔正中，用壓夾壓緊，或用標(biāo)本移動(dòng)器卡

12、緊，開始調(diào)焦。先用低倍鏡觀察，因?yàn)榈捅稊?shù)視野范圍較大，易于全面地觀察材料和尋找材料中需要重點(diǎn)觀察的部分。轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡筒緩緩下降，這時(shí)必須由側(cè)面仔細(xì)觀察，右眼也要睜開。這樣，不僅便于繪圖，而且眼睛也不易疲勞。同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡筒緩緩上升（注意：擰動(dòng)調(diào)節(jié)器的方向，切勿弄錯(cuò)，以免物鏡與載玻片碰撞，否則，既壓碎玻片又損壞鏡頭），直至看清標(biāo)本物像。然后，再輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，以便得到更清晰的物像。5、低倍鏡觀察低倍鏡下調(diào)焦距找物像時(shí)，若被檢物體不在中央，可用標(biāo)本移動(dòng)器略微移動(dòng)玻片，使物像恰好位于視野中央。若光線不適，可撥動(dòng)虹彩光圈的操縱桿，調(diào)節(jié)光線，使物像最清晰為止。6、高倍鏡觀察推動(dòng)轉(zhuǎn)換器，將

13、高倍接物鏡頭轉(zhuǎn)至鏡筒正下方（轉(zhuǎn)換時(shí)切勿動(dòng)調(diào)節(jié)器）。這時(shí)，只要將細(xì)調(diào)節(jié)器向反時(shí)針?lè)较蜉p輕轉(zhuǎn)動(dòng)，就可看清楚目的物。注意：此時(shí)不可用粗調(diào)節(jié)器，否則會(huì)壓碎玻片本損傷鏡頭。由于顯微鏡所觀察的生物材料是立體的，故在觀察時(shí)必須隨時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器，才能了解不同光學(xué)平面的情況。在高倍鏡下，將制片中的被檢物按從上到下，從左到右的順序移動(dòng)，觀察一遍。再換成低倍鏡本又轉(zhuǎn)高倍鏡反復(fù)觀察幾次，以熟練高倍鏡的使用。用高倍鏡觀察完后，若有必要，可再換用油鏡頭觀察。7、油鏡觀察用粗調(diào)節(jié)器將鏡筒拉起約1.52厘米，將油鏡頭轉(zhuǎn)至鏡筒下方。滴加一滴香柏油于載玻片相接觸，但注意不能相碰，以免壓碎玻片和損傷鏡頭。然后從目鏡中觀察，首先調(diào)節(jié)

14、光圈與聚光器，使光亮適當(dāng)加大，用粗調(diào)節(jié)器極其緩慢地提升鏡筒至出現(xiàn)物像為止。再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)至物像清晰。如果鏡頭已提升出香柏油面而未見物像時(shí)，應(yīng)按上述過(guò)程重復(fù)操作。使用完畢，取下載玻片，用擦鏡紙擦去鏡頭上的香柏油，再去擦鏡紙沾取少量二甲苯擦鏡頭，然后用干凈擦鏡紙擦去鏡頭上殘留的二甲苯。二甲苯用量不宜過(guò)多，擦拭時(shí)間應(yīng)短。8、復(fù)原顯微鏡使用完畢，先將鏡筒升高，取下玻片，擦凈載物臺(tái)和物鏡，將各部分還原，反光鏡垂直于鏡座，本轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，將物鏡從鏡臺(tái)孔挪開，成八字形，并將鏡筒降至最低處，同時(shí)把聚光鏡降下，扶下鏡身，裝鏡入箱。（四）、示范實(shí)驗(yàn)室常用的幾種顯微鏡1、雙目生物顯微鏡2、雙目立體顯微鏡（雙目解剖

15、顯微鏡）3、攝影生物顯微鏡四、作業(yè)與思考1、了解顯微鏡的結(jié)構(gòu)，熟悉各部分名稱和用途2、如何正確使用顯微鏡觀察生物標(biāo)本？使用時(shí)應(yīng)注意什么？3、鏡檢玻片標(biāo)本時(shí)，為什么要先用低倍鏡觀察，而不能直接用高倍鏡或油鏡觀察？4、如何正確使用油鏡？圖2 雙子葉植物葉的結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)二 生物繪圖技術(shù)一、目的要求1、了解生物繪圖的主要技法。2、學(xué)會(huì)生物繪圖的基本技術(shù)。二、材料與用品蠶豆葉下表皮玻片標(biāo)本；顯微鏡、鉛筆、橡皮、小刀、直尺、繪圖紙。三、方法與步驟（一）、了解生物繪圖的主要技法生物繪圖的技法可概括為“線”、“點(diǎn)”、“涂”、“染”四個(gè)字。根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)要求主要是“線”和“點(diǎn)”的技法。1、線在黑白墨線圖中，通常估計(jì)

16、約有70%左右是運(yùn)用線條來(lái)表現(xiàn)物體的輪廓、特征、層次和明暗的，所以運(yùn)用線條對(duì)生物繪圖是很重要的。生物繪圖對(duì)線條的要求是：. 線條均勻，一般不可時(shí)粗時(shí)細(xì)。. 圓潤(rùn)而光滑，線條邊緣不能毛糙不整。. 行筆要流暢，不能中間頓促凝滯。常用的線條可分以下幾種類型：（1）長(zhǎng)線 指延長(zhǎng)而連貫的線條，用它主要表現(xiàn)物體的外圍輪廓、主要的脈紋、大型的皺褶等部位，長(zhǎng)線的操作要點(diǎn)是：. 圖紙下面墊以塑料板或玻璃臺(tái)板，務(wù)必使紙面平整，以免造成線條中途停頓或不勻，影響長(zhǎng)線連續(xù)光滑的效果。. 用力須均勻，可以一筆繪成的線條，力求一氣呵成，防止線條粗細(xì)不均。. 運(yùn)筆時(shí)必須順著手勢(shì)，由左下角向右上方做較大幅度的運(yùn)動(dòng)，方能順利地繪

17、成較長(zhǎng)的線條。. 由多段線條連接完成的長(zhǎng)線條，銜接必須準(zhǔn)確無(wú)勿，防止錯(cuò)位或首尾銜接粗細(xì)不勻。為使線條銜接準(zhǔn)確，可執(zhí)筆先稍離紙面，順著原來(lái)線段末端的方向，以接線的動(dòng)作，空筆試接幾次，待手勢(shì)動(dòng)作有了把握后，再將線段接上。（2）短線 指運(yùn)筆起落頻繁，線段短促的線條，主要用于表現(xiàn)細(xì)部特征，如網(wǎng)狀的脈紋、鱗片、細(xì)胞壁、纖毛等。生物繪圖中，短線比較容易掌握，但往往會(huì)造成畫面雜亂、輕率毛糙結(jié)局，一般下筆時(shí)不可先重后輕，造成粗細(xì)不勻或拖尾現(xiàn)象，應(yīng)用力均勻地從頭移動(dòng)的尾再挪開筆尖。（3）曲線 指運(yùn)筆時(shí)隨著物體的轉(zhuǎn)折，方向多變，彎曲不直的線條。用于勾畫物體的形態(tài)輪廓，表現(xiàn)內(nèi)部構(gòu)造，區(qū)分各部分的界線，以及表現(xiàn)毛發(fā)、

18、脈紋、鱗甲等等。與直線相比較，描繪曲線就比較自由，它可以根據(jù)各種生物體的不同形態(tài)，作相應(yīng)的變換，給人以靈活機(jī)動(dòng)、生動(dòng)自然的感覺(jué)。運(yùn)用好曲線，主要有三條原則：. 變而不亂 曲線具有彎曲多變、描畫自由等特點(diǎn)。在運(yùn)用曲線表現(xiàn)結(jié)構(gòu)時(shí)，應(yīng)隨時(shí)注意從變化中找規(guī)律，從繁雜中抓主流，線道數(shù)要適宜，不可信手勾畫，造成畫面零亂不堪 結(jié)果。. 曲而得體 以彎曲的線條描繪物體，并非可以隨心所欲，必須按照所觀察的結(jié)構(gòu)上每條線的彎曲和運(yùn)筆方向準(zhǔn)確無(wú)誤。觀察不細(xì)，曲線的彎度不當(dāng)，不僅使畫面形象失真，還可能導(dǎo)致科學(xué)性的差錯(cuò)。. 粗中有細(xì) 生物繪圖中的用線，一般要求均勻一致，但根據(jù)物體結(jié)構(gòu)的要求也有例外。例如，表現(xiàn)毛發(fā)、褶紋等

19、就需根據(jù)其自然形態(tài)，自基部向尖端逐漸細(xì)小，這樣就可避免用線生硬呆板，使物體描繪更加逼真。2、點(diǎn)用點(diǎn)來(lái)表現(xiàn)物體和其結(jié)構(gòu)，也是生物科學(xué)繪圖中的主要技法之一，需要認(rèn)真研究和練習(xí)。由于用點(diǎn)描繪的生物圖畫具有獨(dú)到的韻味和對(duì)物體結(jié)構(gòu)不同質(zhì)量感的表現(xiàn)能力，所以在生物繪圖中，已被普遍應(yīng)用。點(diǎn)主要用來(lái)襯陰影，以表現(xiàn)細(xì)膩、光滑、柔軟、肥厚、肉質(zhì)和半透明等物質(zhì)特點(diǎn)，有時(shí)也用點(diǎn)來(lái)表現(xiàn)色塊和斑紋。點(diǎn)的一般要求是：（1）點(diǎn)形圓滑光潔 指組成畫面的每個(gè)小點(diǎn)必須成圓形，周遍界線清晰，邊緣不毛不缺，切忌“釘頭鼠尾”和邊緣過(guò)于凸凹的點(diǎn)子出現(xiàn)，這就要求使用的鉛筆尖而圓滑，打點(diǎn)時(shí)必須垂直上下，不可傾斜打點(diǎn)。（2）排列勻稱協(xié)調(diào) 襯陰影

20、時(shí)，由明部到暗部的過(guò)渡要漸變，即點(diǎn)子是由全無(wú)到稀疏再到濃密的有計(jì)劃的進(jìn)行布點(diǎn)，每一個(gè)點(diǎn)子也不能重疊。（3）大小疏密適宜 點(diǎn)子的大小和密度須適宜。暗處和明處的點(diǎn)子可適當(dāng)有大小變化，但又不能明顯地相差太多，更不可在同一明暗階層中夾入過(guò)于粗大的點(diǎn)子，點(diǎn)子的不可盲目地一處濃，一處稀，或有堆積現(xiàn)象。下面介紹幾種點(diǎn)的作用和特點(diǎn)：精密點(diǎn) 指點(diǎn)子的面積較大，且點(diǎn)與點(diǎn)之間的距離較近，一般用來(lái)表現(xiàn)背光、凹陷或色彩濃重的部位，故一般粗點(diǎn)是伴隨緊密的排列而出現(xiàn)的。細(xì)疏點(diǎn) 與粗密點(diǎn)相反，細(xì)小稀疏的點(diǎn)子，主要用來(lái)表現(xiàn)受光或劃色彩淡的部分。連續(xù)點(diǎn) 點(diǎn)與點(diǎn)之間按照一定的方向，均勻地連接成線即為連續(xù)點(diǎn)，它主要用來(lái)取代線條的作用

21、，以顯示物體珠輪廓和各部分之間的邊界線。自由點(diǎn) 即點(diǎn)與點(diǎn)之間的排列沒(méi)有一定的格式和紋樣，操作比較自由。這種點(diǎn)適宜表現(xiàn)明暗漸次轉(zhuǎn)變成具有花紋斑點(diǎn)的各種物體。（二）、起稿在繪圖之前，必須對(duì)被畫的對(duì)象（如動(dòng)物、植物的各個(gè)組織、器官等）作細(xì)心的觀察，對(duì)其外部形成、內(nèi)部構(gòu)造和其各部分的位置關(guān)系、比例、附屬物等特征，有完整的感性認(rèn)識(shí)。同時(shí)要把政黨的、一般的結(jié)構(gòu)與偶然的、人為的一些“結(jié)構(gòu)”區(qū)分開。然后選那些有代表性的典型的部位起稿。起稿就是構(gòu)圖、勾畫輪廓，可根據(jù)所觀察對(duì)象的需要，把必須在畫幅上表現(xiàn)的內(nèi)容適當(dāng)?shù)亟M織起來(lái)，構(gòu)成一個(gè)協(xié)調(diào)完整的畫面，給人以層次清楚，美觀大方的感覺(jué)。所畫對(duì)象的主要部分，應(yīng)盡可能安排在

22、圖幅的主要位置，一般應(yīng)盡可能把圖畫大一些，如畫細(xì)胞圖，為了清楚地表現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，所畫細(xì)胞不宜過(guò)多，只畫1-2個(gè)即可。如畫輪廓圖或圖解圖，也不一定把全部切面畫出，只畫1/61/8部分即可。起稿時(shí)落筆要輕，線條要簡(jiǎn)潔，要求盡可能少改不擦。一般用HB鉛筆或芯質(zhì)較硬的4-5H鉛筆。畫好后，要再與顯微鏡下實(shí)物對(duì)照，檢查是否有遺漏或錯(cuò)誤。（三）、定稿對(duì)圖稿進(jìn)行全面的檢核和審定，經(jīng)修正或補(bǔ)充，便可定稿。畫面完成后，及時(shí)將各個(gè)結(jié)構(gòu)部位作簡(jiǎn)明圖注。圖中所有文字應(yīng)盡量按印刷字體的規(guī)格，認(rèn)真書寫。一般以仿宋字體、黑體、楷體為宜，并用平行的短線指出相應(yīng)的結(jié)構(gòu)位置。四、作業(yè)與思考1、在生物繪圖中如何正確運(yùn)用點(diǎn)和線。2

23、、生物繪圖有哪些基本步驟。實(shí)驗(yàn)三 細(xì)胞的形態(tài)與結(jié)構(gòu)一、目的要求1、了解真核細(xì)胞的各種形態(tài)和基本結(jié)構(gòu)，以及動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)的異同點(diǎn)。2、了解原核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及其與真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的主要不同點(diǎn)。3、學(xué)習(xí)臨時(shí)裝片標(biāo)本的制作方法。二、材料與用品洋蔥頭、菠菜、顫藻（或念珠藻）、各種形成細(xì)胞和細(xì)胞核的切片標(biāo)本、黃豆根尖細(xì)胞高爾基體切片標(biāo)本、洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞線粒體標(biāo)本片、兔脊神經(jīng)節(jié)鍍銀法切片標(biāo)本、兔肝細(xì)胞線粒體蘇木精染色片標(biāo)本、蛙胚囊胚細(xì)胞鐵蘇木精染色切片標(biāo)本。顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、消毒牙簽、小刀、吸水紙、拭鏡紙。0.1摩爾/升稀碘液、蒸餾水、醋酸洋紅染液、0.9%生理鹽水、0.1%堿性湖藍(lán)

24、BB溶液、香柏油、二甲苯。三、方法與步驟（一）、細(xì)胞形態(tài)的觀察（示范）顯微鏡下觀察各種形態(tài)細(xì)胞的標(biāo)本片。（二）、細(xì)胞核形態(tài)的觀察（示范）高倍鏡下觀察各種形態(tài)的細(xì)胞核的標(biāo)本片。（三）、植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片標(biāo)本的制作與觀察（1）制片方法. 取一洗凈的載玻片，用紗布擦干，于玻片中央滴1滴蒸餾水。用尖頭鑷子從洋蔥肉質(zhì)鱗片內(nèi)表撕下一小塊表皮，鋪在水滴上，用解剖針輕輕將其壓入水中，使入展平。. 鑷子夾住洗凈擦干的蓋玻片的一邊，使另一邊接觸水滴的邊緣，然后慢慢地放下，以便驅(qū)走蓋玻片下的空氣，不致產(chǎn)生氣泡。. 用吸水紙吸去蓋玻片周圍的水，置顯微鏡下觀察。（2）觀察.在低倍鏡下，可見洋蔥表

25、皮細(xì)胞略成長(zhǎng)方形，排列緊密，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)有一圓形或扁圓形的細(xì)胞核。.為了更清楚地顯示洋蔥表皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，可用稀碘液染色。染色時(shí)，將玻片從鏡臺(tái)上取下，于蓋玻片的一側(cè)加1滴碘液，用吸水紙從蓋玻片另一側(cè)吸引，使碘液通過(guò)洋蔥表皮以染色，再置顯微鏡下觀察。. 先用低倍鏡找一個(gè)清楚的細(xì)胞移至視野中央，再換高倍鏡觀察?？梢娂?xì)胞最外面為棕黃色細(xì)胞壁所包圍，細(xì)胞壁以內(nèi)是著色較淺，近于透明的細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有一個(gè)或幾個(gè)，或大或小的透明的液泡，在細(xì)胞中央或靠近細(xì)胞壁，有一細(xì)胞核，核內(nèi)有染色成棕黃色的核仁。細(xì)胞質(zhì)外圍有一薄層細(xì)胞質(zhì)膜，在生活細(xì)胞中不易分清。2、菠菜葉肉細(xì)胞葉綠體的觀察取一新鮮菠菜葉片，用鑷子撕去一小塊表

26、皮，用小刀輕輕刮取一點(diǎn)葉肉細(xì)胞，制作菠菜葉肉細(xì)胞臨時(shí)裝片標(biāo)本。將所制標(biāo)本先置低倍鏡下再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察，注意葉肉細(xì)胞內(nèi)葉綠體的形態(tài)、數(shù)目。3、黃豆根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞高爾基體的觀察（示范）在高倍鏡下觀察黃豆根尖細(xì)胞切片標(biāo)本，注意在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分散著許多黑色顆粒狀的高爾基體。4、洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞線粒體的觀察（示范）在高倍鏡下觀察洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞線粒體標(biāo)本片，注意細(xì)胞質(zhì)中分散著顆粒狀、啞鈴狀的線粒體。（四）、動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、人口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片標(biāo)本的制作與觀察（1） 滴一滴0.9%生理鹽水于載玻片中央，將消毒牙簽粗的一端伸入口腔內(nèi)，在口腔頰內(nèi)輕輕刮幾下，將刮下的白色粘性物質(zhì)放入載玻片上的液滴內(nèi)，分散均勻，蓋

27、上玻片，吸去多余的液體。（2） 將此裝片置低倍鏡下尋找較分散的單個(gè)細(xì)胞觀察，可見人口腔上皮細(xì)胞呈扁圓形和扁平多邊形。（3） 若觀察不夠清楚，可用醋酸洋紅染色（方法同碘液染色）后，再置低倍鏡下并轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。可見細(xì)胞外圍僅有一大致可辯的細(xì)胞界限，細(xì)胞核呈鮮紅色位于細(xì)胞中央或近中央，細(xì)胞質(zhì)呈淺紅色。2兔脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞高爾基體的觀察（1）取兔脊神經(jīng)節(jié)鍍銀法切片標(biāo)本，于低倍鏡下尋找成黃色的脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞體，這些細(xì)胞體成圓形、大小不一。（2）換高倍鏡觀察，可見脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞體中央一染色極淺的圓形細(xì)胞核，在細(xì)胞質(zhì)黃色背景上分布著染成棕黑色的高爾基體。選擇染色較淺、結(jié)構(gòu)較清晰的區(qū)域置于視野中央，換油鏡觀察。（3）

28、在油鏡下緩慢移動(dòng)標(biāo)本，可見高爾基體在脊神經(jīng)節(jié)細(xì)胞體中的數(shù)量、分布、形態(tài)和大小都不盡相同。有的胞體中高爾基體含量較多；有的胞體中較少。有的僅分布在近核的細(xì)胞質(zhì)中，包繞著核；有的分散存在于細(xì)胞質(zhì)中。有的成延綿不斷的線狀，或粗或細(xì)、彎曲盤繞成網(wǎng)；有的則成間斷狀態(tài)。3兔肝細(xì)胞線粒體的觀察（1）取兔肝細(xì)胞線粒體鐵蘇木精染色切片標(biāo)本，先在低倍鏡下后轉(zhuǎn)高倍鏡下觀察，注意區(qū)別細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。肝細(xì)胞較大，呈多邊形，細(xì)胞中央有大而圓的細(xì)胞核，染色很淡。細(xì)胞質(zhì)呈天藍(lán)色，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分布著染成藍(lán)黑色的線粒體。選擇一染色較淡，結(jié)構(gòu)較清晰的區(qū)域置視野中央，換油鏡觀察。（2）在油鏡下緩慢移動(dòng)標(biāo)本，可見肝細(xì)胞中的線粒體數(shù)量多

29、少不一，分布或疏或密，在細(xì)胞核周圍特別多。其形態(tài)大小也不盡相同，呈顆粒狀、線條狀等。4蛙胚囊胚細(xì)胞中心體的觀察（示范）在高倍鏡下觀察蛙胚囊胚細(xì)胞鐵蘇木精染色切片標(biāo)本，可見細(xì)胞有絲分裂中期時(shí)，中心體位于細(xì)胞兩極，為一不著色的球狀物，其四周有許多放射狀的星絲。（五）、原核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)1、取新鮮顫藻，用解剖針挑少許絲狀體，置載玻片上的水滴中，使藻絲分散后，用吸水紙將水吸去。再加一滴0.1%的堿性湖藍(lán)BB溶液，染色12分鐘，蓋上蓋玻片。2、將所制裝片置低倍鏡下觀察，可見顫藻的藻絲由單列細(xì)胞組成，細(xì)胞呈短圓柱狀或盤狀，藻絲頂端細(xì)胞呈帽狀。轉(zhuǎn)高倍鏡觀察，可清楚看到呈深藍(lán)色的中央體。在細(xì)胞壁以內(nèi)，中央體四周未

30、著色的是周質(zhì)。四、試劑的配制醋酸洋紅染色質(zhì)取45%醋酸溶液100毫升，放入錐形瓶?jī)?nèi)，加洋紅1克，煮沸（沸騰時(shí)間不超過(guò)30秒）或加熱回流煮沸，冷卻過(guò)濾即成。也可再加入12%鐵明礬水溶液510滴，至此液變成暗紅色而不發(fā)生沉淀。五、作業(yè)與思考1、繪洋蔥鱗葉表皮細(xì)胞和人口腔上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖。2、高等植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有何異同點(diǎn)3、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上最主要的不同點(diǎn)是什么？4、細(xì)胞核和細(xì)胞在形態(tài)、大小上有何相關(guān)性？實(shí)驗(yàn)四 細(xì)胞的有絲分裂一、目的要求1、觀察細(xì)胞有絲分裂過(guò)程，掌握有絲分裂各期的主要特征。2、學(xué)習(xí)植物根尖染色體的制片方法。二、材料與用品洋蔥頭、洋蔥根尖縱切片標(biāo)本、蛙胚細(xì)胞有絲分裂

31、切片標(biāo)本；普通光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、解剖針、恒溫培養(yǎng)箱、小刀、小試劑瓶、小燒杯（或培養(yǎng)皿）、酒精燈、火柴、濾紙片；卡諾固定液或FAA固定液、0.050.1%秋水仙素溶液或?qū)Χ缺斤柡腿芤夯?.0020.004摩爾/升8-羥基喹啉水溶液、90%酒精、70%、1摩爾/升鹽酸或濃鹽酸和95%酒精或0.5%果膠酶和0.5%纖維素酶、醋酸洋紅染液、蒸餾水。三、方法與步驟（一）、洋蔥根尖臨時(shí)壓片標(biāo)本的制作1、取材將洋蔥頭置于盛水的小燒杯上，使其鱗莖浸入水中，放在25恒溫箱中培養(yǎng)。待根長(zhǎng)到2厘米左右時(shí)，于夜晚12時(shí)至1時(shí)切取長(zhǎng)約1厘米左右的根尖。2、前處理可用下述方法之一前處理所切取的根尖。（1

32、）用0.050.1%秋水仙堿水溶液于室溫下處理24小時(shí)。（2）在室溫下，用對(duì)二氯苯飽和水溶液處理35小時(shí)。（3）在室溫下，用0.0020.004摩爾/升8-羥基喹啉水溶液處理34小時(shí)。（4）將材料浸入蒸餾水內(nèi)，放置冰箱（04）中24小時(shí)。3、固定將材料從前處理的藥物中取出，用水沖洗23次，放入卡諾氏或FAA固定液中，固定24小時(shí)，固定液用量應(yīng)為材料體積的15倍以上。如固定的材料當(dāng)時(shí)不用，可以先在90%酒精中泡半小時(shí)，然后在70%酒精泡半個(gè)小時(shí)，再換入70%酒精中，置04冰箱內(nèi)可保存半年。經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間保存的材料，進(jìn)行觀察前再用固定處理一次，效果較好。4、解離將固定后的根尖用清水漂洗數(shù)次，再用下述

33、方法之一進(jìn)行解離后，清水漂洗。（1）用1摩爾/升鹽酸在60恒溫箱內(nèi)處理620分鐘。（2）在室溫下，用95%酒精和濃鹽酸（3：1）配成的混合溶液處理820分鐘。（3）用0.5%果膠酶和0.5%纖維素酶的等量混合液，在25處理25小時(shí)，或37處理0.51小時(shí)。5、染色和壓片（1）將解離后的根尖，切取12毫米長(zhǎng)的分生組織，放在載玻片上，加1滴醋酸洋紅染液，放置約10分鐘。然后在酒精燈上緩慢往復(fù)34次，微微加熱（不可煮沸），隨即用解剖針將材料撥碎，蓋上蓋玻片，覆以吸水紙。（2）對(duì)準(zhǔn)蓋玻片下的材料，用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲擊，再用拇指適當(dāng)用力下壓，但注意勿使蓋片滑動(dòng)。壓好的片子中，材料鋪展成均勻的

34、、單層細(xì)胞的薄層。（二）、洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的觀察先用自制的洋蔥根尖分生組織壓片，再取洋蔥根尖縱切片標(biāo)本置顯微鏡下觀察。先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)，再轉(zhuǎn)高倍鏡，選擇較典型的有絲分裂各期圖象，仔細(xì)觀察。1、間期細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯變化，體積有所增大。核仁核膜較清楚，核內(nèi)染色質(zhì)呈細(xì)網(wǎng)狀。2、前期細(xì)胞核脹大，核內(nèi)染色質(zhì)最初表現(xiàn)為極細(xì)盤曲的染色絲，以后染色絲逐漸縮短變粗形成染色體。染色體形態(tài)逐漸清楚，著絲點(diǎn)逐漸明顯。在前期結(jié)束時(shí)，核仁核膜消失。3、中期紡錘體形成。染色體排列在細(xì)胞中央的赤道面上，從細(xì)胞極端觀察，可同時(shí)看到全部染色體；從側(cè)面觀察，則染色體排列成“一”字形。此時(shí)染色體變短變粗，其形態(tài)和數(shù)目都較

35、清楚。4、后期染色體著絲點(diǎn)分裂，每一染色體的二條單體成為二條獨(dú)立的子染色體。全部染色體分為兩組，分別向細(xì)胞的兩極移動(dòng)。5、末期兩組子染色體分別到達(dá)兩極，染色體逐漸伸長(zhǎng)變粗，分散在核內(nèi)成為染色質(zhì)；紡錘體逐漸消失，核仁核膜重新出現(xiàn)，形成兩個(gè)新核。在兩新核之間赤道面上，出現(xiàn)細(xì)胞板，并逐漸形成細(xì)胞壁，最后分成兩個(gè)子細(xì)胞。（三）、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂的觀察（示范）在高倍鏡下觀察蛙胚細(xì)胞有絲分裂切片標(biāo)本，注意動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中的特點(diǎn)。四、試劑的配置1、卡諾固定液的兩種配方（1）95%酒精15毫升+冰醋酸5毫升（3：1液）（2）純酒精30毫升+氯仿15毫升+冰醋酸5毫升（6：3：1液）2F·A&#

36、183;A固定保存液（福爾馬林5毫升+冰醋酸6毫升）用于一般植物組織及胚胎學(xué)材料。同時(shí)也是優(yōu)良的保存劑。用以保存材料時(shí)，可加入5%甘油以防止蒸發(fā)及材料變硬。五、作業(yè)與思考1、繪出你所觀察到的植物細(xì)胞有絲分裂各期的圖象。2、細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中哪一時(shí)期是觀察染色體形態(tài)和進(jìn)行染色體記數(shù)的最好時(shí)期？3、動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程有什么不同的特點(diǎn)？實(shí)驗(yàn)五 植物組織一、目的要求了解植物的分生組織、薄壁組織、保護(hù)組織、輸導(dǎo)組織和機(jī)械組織構(gòu)造上的特點(diǎn)及其與機(jī)能的關(guān)系。二、材料與用品玉米根尖切片標(biāo)本、新鮮蠶豆莖、新鮮小麥幼莖、小白菜或蠶豆葉片、南瓜莖和馬尾松莖的橫切片和叢切片標(biāo)本、梨、顯微鏡、載玻片、蓋玻

37、片、鑷子、解剖針、刀片、滴瓶、吸水紙；番紅、碘。三、方法與步驟（一）、分生組織分生組織是由具有分裂機(jī)能的細(xì)胞所組成。根據(jù)它在植物體中所處的位置來(lái)分，可分為三種：頂端分生組織、側(cè)生分生組織和居間分生組織。1、 頂端分生組織取玉米根尖的叢切片標(biāo)本，于低倍鏡下觀察。罩在根尖端的一團(tuán)組織，靠生長(zhǎng)點(diǎn)的細(xì)胞較小，靠外圍的細(xì)胞較大，排列比較疏松，這是根冠，具有保護(hù)生長(zhǎng)點(diǎn)和開路先鋒的作用。緊接根冠之后是生長(zhǎng)點(diǎn)，即根尖的頂端分生組織。它的形態(tài)學(xué)特征是細(xì)胞較小，在叢切片上呈正方形或長(zhǎng)方形；細(xì)胞壁??；原生質(zhì)豐富；細(xì)胞核大，位于細(xì)胞的中央；沒(méi)有液泡或僅有分散的小液泡；細(xì)胞排列緊密。它們具有旺盛的生活了力，其分裂產(chǎn)生的

38、細(xì)胞，向前形成根冠，向后產(chǎn)生根的各種結(jié)構(gòu)。2、側(cè)生分生組織取蠶豆新鮮莖段，作徒手橫切片制片，用1%番紅溶液染色，作臨時(shí)水封片，置于顯微鏡下觀察，可以看到排列成環(huán)狀的維管束。在木質(zhì)部與韌皮部之間，可以清楚地看到就層扁平的細(xì)胞，排列也較緊密，這就是形成層。其細(xì)胞分裂的結(jié)果可使莖加粗，故名側(cè)生分生組織。3、居間分生組織取玉米或小麥幼莖，作徒手縱切片臨時(shí)水封乍或取切片于顯微鏡下觀察，在節(jié)間基部可以看到一些體積較小，排列比較緊密，具有分生能力的細(xì)胞群，這就是居間分生組織。它的活動(dòng)結(jié)果可使禾谷類作物拔節(jié)長(zhǎng)高。（二）、薄壁組織薄壁組織是構(gòu)成植物體最基本的組織，故也稱基本組織植物體內(nèi)大部分生活細(xì)胞都是薄壁組織

39、，廣泛分布于根、莖、葉、花、果實(shí)和種子等各個(gè)器官。本實(shí)驗(yàn)僅觀察南瓜莖中主要的薄壁組織。取南瓜莖橫切片標(biāo)本，在低倍鏡下觀察，可以看到在南瓜式內(nèi)，薄壁組織分布很廣。雖然細(xì)胞的大小不同，但均為薄壁的生活細(xì)胞，形狀為圓形、橢圓形或多角形，細(xì)胞的分化程度不高。皮層內(nèi)的薄壁細(xì)胞有兩種排列：一是成束分布于表皮之下；二是由兩、三層細(xì)胞組成的圓環(huán)，這兩者間又聯(lián)成一體，這些細(xì)胞多為長(zhǎng)圓形，排列較整齊，含有可行光合作用的葉綠體，故又稱同化組織?？壳o中心的薄壁細(xì)胞內(nèi)可看到一些貯藏物質(zhì)，故又稱貯藏組織。（三）、保護(hù)組織保護(hù)組織位于植物體表，包括表皮和木栓兩種類型，具有保護(hù)內(nèi)部組織的作用。1、表皮與氣孔將雙子葉植物小白菜

40、葉片纏繞在左手食指上，以左手大拇指和中指夾住纏繞的葉片，令葉片的背面向上。然后用尖頭鑷子輕輕撕下一小塊下表皮來(lái)，平鋪在載玻片的水滴中，蓋上蓋玻片。將上述裝片放在低倍鏡下觀察，可見表皮細(xì)胞排列非常緊密，細(xì)胞的側(cè)壁凸凹不齊，彼此嵌合，沒(méi)有縫隙。表皮上分布著氣孔，它是由兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞組成的。保衛(wèi)細(xì)胞也是生活細(xì)胞，呈腎形，具細(xì)胞核和葉綠體。兩個(gè)保衛(wèi)細(xì)胞以凹入的一面相向，在相向面的中部，細(xì)胞壁較厚并彼此游離形成空隙，此即為氣孔。它是體內(nèi)氣出入的門戶。2、表皮毛與腺毛用鑷子撕取南瓜葉下表皮，制成臨時(shí)裝片在顯微鏡下觀察，可見在表皮上有許多先端尖銳的毛狀結(jié)構(gòu)，叫表皮毛。各種植物表皮毛形態(tài)結(jié)構(gòu)不同，例如有多細(xì)胞或

41、單細(xì)胞的毛，具腺的或無(wú)腺的毛，鱗片狀或盾狀毛等。用棉花莖的切片標(biāo)本可看到腺毛。3、木栓層取老樹枝，作徒手橫片，用1%番紅水溶液臨時(shí)裝片鏡檢，可觀察到在莖切片的邊緣有幾層扁平形的細(xì)胞，排列整齊而又緊密的是周皮，其中染成紅色，無(wú)內(nèi)含物的死細(xì)胞為木栓層，是次生保護(hù)組織。木栓層一層細(xì)胞的木栓形成層和最內(nèi)面的幾層栓內(nèi)層細(xì)胞合起來(lái)構(gòu)成周皮。（四）、輸導(dǎo)組織輸導(dǎo)組織基本上分為兩類：一類是運(yùn)輸水分與無(wú)機(jī)鹽的導(dǎo)管和管胞；一類是運(yùn)輸可溶性有機(jī)物質(zhì)的篩管。1、導(dǎo)管和管胞導(dǎo)管和管胞在形成時(shí)，細(xì)胞壁增厚有種種情況，形成不同的紋理。一般來(lái)說(shuō)，環(huán)紋和螺紋的導(dǎo)管或管胞是在器官形成初期產(chǎn)生的，梯紋、網(wǎng)紋和孔紋的導(dǎo)管和管胞在器官

42、發(fā)育中出現(xiàn)較遲，是在引伸生長(zhǎng)停止以后形成的。圖3 椴科植物莖取絲瓜莖的縱切片標(biāo)本， 在顯微鏡下可看到染色的木質(zhì)部中，導(dǎo)管由一列列相連而成，各相鄰細(xì)胞間的端壁消失，成為貫通的管道，很有利于水分與無(wú)機(jī)鹽的運(yùn)輸。其中，各灶導(dǎo)管基本上是由小到大，依次排列著環(huán)紋導(dǎo)管、螺紋導(dǎo)管和梯紋一網(wǎng)紋導(dǎo)管（圖3）再取馬尾松的縱切片，在低倍鏡下可見木質(zhì)都含有大量長(zhǎng)形的兩端尖細(xì)、略呈紡錘形的細(xì)胞。細(xì)胞壁增厚并木質(zhì)化。壁上分布著許多具緣紋孔，特別是在各細(xì)胞尖端彼此貼合的部分更為稠密。細(xì)胞內(nèi)容物大都消失，成為死細(xì)胞，這就是管胞。管胞絕大多數(shù)蕨類植物和裸子植物的導(dǎo)水機(jī)構(gòu)，兼有支持功能。2、篩管和伴胞篩管和伴胞是運(yùn)輸有機(jī)養(yǎng)分的機(jī)

43、構(gòu)。取南瓜莖的縱切片，在顯微鏡下可見到染成綠色的篩管是由多數(shù)柱形細(xì)胞連接而成，細(xì)胞壁不增厚，也不木質(zhì)化。相鄰兩細(xì)胞間的橫隔壁為分布著許多小孔（篩孔）的篩管細(xì)胞內(nèi)含有生活原生質(zhì)體，細(xì)胞核消失，但有的有核仁。相鄰細(xì)胞的胞質(zhì)通過(guò)篩孔相連。在篩管旁邊有一或多個(gè)小型薄壁的生活細(xì)胞即伴胞。形狀為柱形，其內(nèi)可見到細(xì)胞核、液泡和細(xì)胞質(zhì)（五）、機(jī)械組織機(jī)械組織有兩種類型：厚角組織和厚壁組織，厚壁組織又包括纖維和石細(xì)胞，主要起支持作用。取南瓜莖的橫切片標(biāo)本置顯微鏡下觀察。1、厚角組織在南瓜莖的橫切片上，可見表皮下有一圈由數(shù)層厚角細(xì)胞組成的圓環(huán)，而在莖的突起部位則成束存在，與同化組織相間排列。各相鄰細(xì)胞在角隅處增厚

44、，但不木質(zhì)化。在叢切面上，可見厚角組織的細(xì)胞呈長(zhǎng)形，細(xì)胞壁增厚部分成叢行的棱條，細(xì)胞內(nèi)有原生質(zhì)體。顯然，厚角組織的此種結(jié)構(gòu)，非常適合于支持正在生長(zhǎng)著的器官。2、厚壁組織（1）纖維 在南瓜莖的皮層內(nèi)有一圈由多層纖維細(xì)胞組成的圓環(huán)。其細(xì)胞壁明顯增厚，并木質(zhì)化，細(xì)胞內(nèi)生活內(nèi)容消失，成為死細(xì)胞。在叢切面上，可見到一排染成紅色的細(xì)長(zhǎng)而兩端尖細(xì)或鈍圓的細(xì)胞。每個(gè)細(xì)胞均屹器先端插入其它若干纖維之間而彼此緊密貼合起來(lái)，形成一種極為堅(jiān)牢的結(jié)構(gòu)。（2）石細(xì)胞 在潔凈的載玻片上滴一滴蒸餾水，用解剖針挑取少許梨果肉細(xì)胞移入水液中，將其搗碎，并用另一載玻片蓋上，將其壓碎，然后換一蓋玻片蓋上置顯微鏡下觀察。梨果肉的石細(xì)胞

45、形狀象薄壁組織細(xì)胞，但其細(xì)胞壁極度增厚并木質(zhì)化，細(xì)胞腔小，單紋孔引伸成管狀，或匯合成分枝狀態(tài)，原生質(zhì)消失成為死細(xì)胞。四、作業(yè)與思考1、繪圖表示南瓜莖的篩管和伴胞的結(jié)構(gòu)。2、植物有哪幾種主要組織，對(duì)植物的生命活動(dòng)各有何作用？3、植物組織的構(gòu)造與機(jī)能的關(guān)系怎樣？4、導(dǎo)管和伴胞有何異同？哪種導(dǎo)水效能大些？并聯(lián)系進(jìn)化來(lái)考慮。實(shí)驗(yàn)六 植物組織制片技術(shù)一、目的要求植物組織制片技術(shù)是認(rèn)識(shí)植物體結(jié)構(gòu)的有效手段，是植物生物學(xué)的重要組成部分。用光學(xué)顯微鏡觀察的樣品，必須是透明的薄片，因此，要首先把觀察的材料制成透明的切片后才能在顯微鏡下觀察。顯微鏡的制片可分為永久制片和臨時(shí)制片。永久制片的方法和步驟比較復(fù)雜，臨時(shí)

46、制片是利用新鮮材料直接作成的切片，方法比較簡(jiǎn)單。（一）、徒手切片法徒手切片法是指手拿刀片把新鮮材料切成薄片，制成臨時(shí)裝片的方法。此法簡(jiǎn)單方便，不需設(shè)備即可保留植物活體狀態(tài)。1、材料：實(shí)驗(yàn)材料及夾持物。2、儀器設(shè)備：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刀片、鑷子、濾紙、滴管。3、方法：進(jìn)行切片的準(zhǔn)備工作，如截取材料，削平切面，均應(yīng)用解刨刀或雙面刀片（避免刀刃變鈍或有缺口），切出合乎要求的切片。徒手做切片時(shí)，最重要的是要切下一小片平而薄的組織，而不是要求切下一個(gè)完整的切片。例如切一莖的橫切片，不要求切下圓形的一片，而只需切下一小部分即可。切片時(shí)首先應(yīng)該正確地拿住刀片及材料，即用左手三個(gè)手指拿住材料，使材料突出

47、于手指上面，這樣進(jìn)行切片時(shí)才不至于割傷手指。右手平穩(wěn)地拿住刀片，兩手應(yīng)該可以自由活動(dòng)，切時(shí)兩臂不要過(guò)于緊張，也不要使肘臂緊靠身體或壓在桌子上，要用臂力而不要用腕力而且不要用力過(guò)大。切片時(shí)，把刀刃放在經(jīng)過(guò)削平的平面上，然后輕輕地壓住它，以均勻的力量和平穩(wěn)的動(dòng)作，從刀刃的右側(cè)，斜著向左的方向切，不能用刀片直接擠壓材料，或拉鋸式切割材料。假如刀刃切入材料過(guò)深過(guò)厚，應(yīng)該把刀片從切口處取出，重新做切片。切片時(shí)為了避免材料枯干，應(yīng)使材料的切面及刀刃上保持有水，呈濕潤(rùn)狀態(tài)。在切片時(shí)還應(yīng)注意，所切的材料和刀片一定要保持水平方向。如果斜向切下材料，雖然切片很薄，但會(huì)由于細(xì)胞切面偏斜而影響觀察。薄的切片應(yīng)該是透明

48、的，切片可留在刀刃上，繼續(xù)切片，一連切幾個(gè)切片，然后用鑷子或解刨針取下，切下的切片放在滴有水的載玻片上。過(guò)于柔軟的器官，如葉片，難于直接拿在手中進(jìn)行切片，所以切時(shí)需夾在維持物中。維持物一般用萵苣莖、胡蘿卜根或泡沫塑料，將要切的材料夾在其中，然后進(jìn)行切片。切片也可簡(jiǎn)易染色，以便使結(jié)構(gòu)更便于觀察。染色方法是將切片放在載玻片上，用吸水紙吸去多余水分，滴上一滴染料，經(jīng)過(guò)12分鐘后，用水沖洗一下，蓋上蓋玻片觀察。常用染料有0、1%亞價(jià)基藍(lán)、0、5%中性紅或1%番紅水溶液（木質(zhì)化、栓質(zhì)化的細(xì)胞壁及細(xì)胞核染成紅色）、I2_KI溶液（淀粉粒呈蘭色，細(xì)胞核呈黃色）。（二）、壓片法 壓片法是植物的器官或組織未經(jīng)處

49、理或經(jīng)過(guò)處理后，被涂抹或壓在載玻片上，使細(xì)胞成一薄層，便于進(jìn)行觀察的一種制片方法。1、材料：實(shí)驗(yàn)材料及夾持物2、儀器設(shè)備：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、刀片、鑷子、濾紙、滴管3、方法：（1） 取材：用鋒利的雙面刀片截取生長(zhǎng)良好的植物根尖或莖尖，長(zhǎng)度不超過(guò)3mm。（2） 預(yù)處理：利用預(yù)處理液如秋水仙素、對(duì)二 氯苯或8-羥基奎寧處理材料，使細(xì)胞分裂停留在有絲分裂的中期，并使染色體縮短變粗。預(yù)處理的時(shí)間視不同植物而定。觀察有絲分裂各期特點(diǎn)和減數(shù)分裂的幼小花粉的制片則不需要預(yù)處理。（3） 固定：用固定劑迅速殺死正在分裂的細(xì)胞，使其盡量保持分裂的狀態(tài)。常用的固定劑是卡諾固定劑，固定時(shí)間為1h-24h。（4）

50、解離：用酶或鹽酸處理固定后的材料，使正在分裂的細(xì)胞分離，便于壓片。解離時(shí)要掌握好時(shí)間，特別是用鹽酸解離時(shí)，時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞不易分開；時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則染色困難。（5） 染色：常用堿性品紅或醋酸洋紅等染核的染料進(jìn)行染色。（6） 壓片：壓片時(shí)，將新鮮的或經(jīng)固定的材料放在載玻片上，用解樸刀或鑷子后端壓住材料，并往載玻片的另一邊拖過(guò)去，注意用力均勻。也可以將載玻片上的材料蓋上蓋玻片，用解刨針或鉛筆輕輕敲擊，使組織或細(xì)胞分散，再用拇指擠壓蓋玻片，使細(xì)胞成一薄層。前者常用于花粉和小孢子母細(xì)胞，后者用于根尖、莖尖和幼葉等幼嫩器官。（7） 鏡檢：將壓片置于顯微鏡下觀察，選取目標(biāo)細(xì)胞。用記號(hào)筆在載玻片和蓋玻片上分別作記

51、號(hào)。（8） 照相或制成永久制片：好的壓片可以直接照相，也可以通過(guò)冷凍干燥后制成永久制片。（三）、離析法離析法是用一些化學(xué)藥品使細(xì)胞間的胞間層溶解，細(xì)胞彼此分離，從而得到單個(gè)、完整細(xì)胞的方法，便于研究細(xì)胞的立體結(jié)構(gòu)。1、 鉻酸-硝酸離析法適用于木質(zhì)化組織，如木材、纖維等。把材料切成長(zhǎng)約1cm、火柴棒大小的小條，放入小玻璃管中，加入離析液，其量約為材料的20倍。蓋緊瓶蓋放在30。C-40。C的溫箱中。離析的時(shí)間因材料的性質(zhì)而異，一般為1-2天。如果2天后仍未離析，可換新的離析液，再放置幾天。檢查材料是否離析，可取出材料少許，放在載玻片上，用解刨針末端輕輕敲打，若材料分離，表明離析時(shí)間已足夠。這時(shí)移

52、去離析液，用水清洗干凈，保存在50%或70%的乙醇中備用。2、 鹽酸-草酸銨離析法此法較前法緩和，適用于草本植物的薄壁組織和葉肉組織等。把材料切成小塊，約1cm×0.5cm×0.2cm大小，放入3：1的70%或90%乙醇和濃鹽酸中。若材料有空氣，應(yīng)抽氣，抽氣后更換一次離析液。24h后，用水清洗干凈。放入0、5%草酸銨水溶液中，時(shí)間的長(zhǎng)短視材料的性質(zhì)而定?？梢悦扛?-2天作檢查。其余與上法相同。（四）、滑走切片法 滑走切片法是利用滑走切片機(jī)切新鮮的或保存的材料，亦可以切經(jīng)由石蠟制片法包埋的材料。此法切出的切片后薄均勻、結(jié)構(gòu)完整，適用于一些比較堅(jiān)硬的材料。1、儀器設(shè)備：滑走切片

53、機(jī)、切片刀、載玻片、蓋玻片、雙面刀片、毛筆、培養(yǎng)皿、濾紙、滴管和軟木2、實(shí)驗(yàn)材料：新鮮材料、若直徑小于1cm、可分割成3cm長(zhǎng)的小段；若大于1cm，則應(yīng)將材料劈開，使切面的面積小于1cm2為宜。新鮮材料可直接用于切片，也可以經(jīng)處理后再進(jìn)行切片。處理時(shí)，用FAA固定液固定一天，然后轉(zhuǎn)入軟化劑如甘油、氫氟酸中軟化，軟化時(shí)間視不同材料而定。在木材制品中，也可以用水煮法排出木材中的空氣并軟化部分組織，然后轉(zhuǎn)入軟化劑乙二胺中，軟化合適后，用聚乙二醇包埋。經(jīng)由石蠟制片法包埋的材料也可以利用滑走切片法切片。3、方法：滑走切片機(jī)由機(jī)身、升降夾物裝置、切片刀的夾刀滑行部分組成。先把切片刀固定在夾刀上，然后將材料

54、固定在兩片軟木中，材料露出木片約0、5cm，再固定在切片機(jī)的平物裝置上。調(diào)好材料的高度，使刀刃靠近材料的切面，并使材料與刀刃平行。用高速厚度調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)，使其符合切片的要求。切片時(shí)用右手扶切片刀的夾刀滑行部分，均勻用力往自己方向移動(dòng)，切片便被切下并粘在刀的表面上。用濕毛筆把切片取下，放入盛水的培養(yǎng)皿里，然后把刀推回。當(dāng)把刀向后推時(shí)，夾物裝置就按調(diào)節(jié)好的厚度上升。如此循環(huán)往復(fù)?？蓪⑶衅瞥膳R時(shí)裝片或進(jìn)行簡(jiǎn)單的顯微化學(xué)染色后觀察，亦可以通過(guò)固定、脫水、染色和封固等程序，制成永久制片。（五）、石蠟切片法 石蠟切片法是用石蠟作為包埋劑的一種顯微制片方法，是顯微技術(shù)中最重要、最常用的方法之一。它的優(yōu)點(diǎn)是能

55、夠切出薄而均勻的連續(xù)切片，便于進(jìn)行器官的立體重構(gòu)。此法多用手搖切片機(jī)切片。對(duì)于較硬的材料，也可以使用滑走切片機(jī)。 石蠟切片法的操作程序包括：取材、固定、脫水、透明、浸蠟、包埋、修塊、切片、粘片、染色和封片。1、材料：材料的大小不超過(guò)0、5cm3-1 cm3。2、固定：將選取的材料放入固定液中，固定液的體積大約是材料的20倍。固定是用化學(xué)試劑迅速殺死細(xì)胞的過(guò)程。目的是盡可能使細(xì)胞中的各個(gè)組分保持生活狀態(tài)的結(jié)構(gòu)，并固定在它們?cè)瓉?lái)的位置上。常用的固定劑有FAA、卡諾和納瓦興固定液。前兩種固定液的固定時(shí)間是2-24h，后者是12-48h。FAA既是良好的固定劑，也是保存劑，材料可以在其中長(zhǎng)久保存。而卡諾固定液和納瓦興固定液則不能長(zhǎng)久保留材料，固定后，應(yīng)盡快清洗，轉(zhuǎn)入70%酒精中保存。若材料含有空氣，固定是需要抽氣。3、脫水：固定好的材料經(jīng)各級(jí)乙醇脫水至無(wú)水乙醇。各級(jí)乙醇的濃度為：30%、50%、70%、85%、95%和100%。4、透明：純乙醇中的植物材料用1/2純乙醇和1/2二甲苯混合液處理2-3h，轉(zhuǎn)入純二甲苯中，處理兩次。由于石蠟溶于二甲苯而不溶于乙醇，因此透明的作用除了使材料變得透明外，另一方面是將材料中的乙醇除去。5、浸蠟：使石蠟慢