中藥生物堿類化合物藥動(dòng)學(xué)研究現(xiàn)狀與思考

1、中藥生物堿類化合物藥動(dòng)學(xué)研究現(xiàn)狀與思考         11-04-23 15:49:00     編輯：studa20               作者：劉麗麗 ，劉小寒，陳麗華，朱衛(wèi)豐，許可敏，衣文嬌，趙益【摘要】  對近年來國內(nèi)外關(guān)于中藥生物堿類化合物藥動(dòng)學(xué)研究的文獻(xiàn)進(jìn)行檢索、整理分析和歸納總結(jié)，介紹其在體內(nèi)的測定方法、及

2、生物堿單體、有效部位及復(fù)方的藥動(dòng)學(xué)研究情況，同時(shí)指出了今后生物堿類化合物藥動(dòng)學(xué)研究中需要關(guān)注的問題。 【關(guān)鍵詞】  生物堿; 分析方法; 藥動(dòng)學(xué)Abstract：To retrieve, analyze and summarize the literatures on the pharmacokinetic study of alkaloid compounds at home and abroad in recent years and to introduce the analytical method in vivo, the processes of the pharmaco

3、kinetics of active alkaloids, extract and prescription. At the same time the problem which needs to pay attention to for the future pharmacokinetic studies or alkaloid compounds was pointed out.Key words： Alkaloid; Analytical method; Pharmacokinetic生物堿廣泛存在于植物界中，如麻黃、貝母、黃連、烏頭等都主要含有生物堿成分，在臨床上已有很多應(yīng)用。生物堿

4、結(jié)構(gòu)多樣，實(shí)驗(yàn)證明其具有廣泛的生理和藥理活性，包括抗菌消炎、止咳平喘，抗瘧、抗心律失常、抗癌等，因此對該類化合物的研究已成為國內(nèi)外醫(yī)藥界研究的熱門課題。近年來，隨著靈敏度高、特異性強(qiáng)檢測技術(shù)的發(fā)展，生物堿類化合物的藥動(dòng)學(xué)過程得到進(jìn)一步的揭示，為生物堿類藥物的篩選和臨床應(yīng)用提供了數(shù)據(jù)。現(xiàn)將近年來生物堿類化合物藥動(dòng)學(xué)研究進(jìn)展綜述如下。1 生物樣品分析方法在生物堿類化合物的藥動(dòng)學(xué)研究中，要對生物樣品中生物堿及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析。首先應(yīng)該重視生物分析方法的確證，符合生物分析方法確證的指導(dǎo)原則1。目前最普遍的方法是高效液相色譜法，由于生物樣品(包括血漿、尿、唾液等)含有大量的內(nèi)源性物質(zhì)，必須對樣品進(jìn)

5、行適當(dāng)預(yù)處理。1.1 生物樣品前處理方法生物樣品測定前須進(jìn)行樣品預(yù)處理, 預(yù)處理是進(jìn)行分析測定過程的重要環(huán)節(jié)。通過預(yù)處理可以達(dá)到以下目的：多數(shù)生物樣品必須經(jīng)過均勻化處理后才能測定;排除內(nèi)源性雜質(zhì)和代謝物的干擾;濃縮被測組份以滿足儀器檢測靈敏度的要求;對呈結(jié)合狀態(tài)的藥物進(jìn)行水解處理。目前最常用的有液-液萃取和液-固萃取，后者又稱為固相萃取(solid phase extraction, SPE)。比較簡單的處理方法是將生物樣品堿化后用甲醇、乙醇、乙腈等常見的蛋白沉淀試劑沉淀蛋白，高速離心后取上清液，吹干復(fù)溶后進(jìn)樣。丁志平等2在測定鹽酸小檗堿大鼠體內(nèi)血藥濃度時(shí)，將1 ml乙腈加入到0.5 ml血清

6、中，超聲振蕩1 min，4 000 r·min-1離心15 min，取0.8 ml上清液于50減壓揮干，殘?jiān)?.4 ml流動(dòng)相溶解，高速離心(14 000 r·min-1)10 min，取上清液50 l進(jìn)樣。回收率分別為(101.86±2.89)%，(99.38±2.29)%和(98.92±2.34)%。沉淀蛋白直接進(jìn)樣雖方法簡單，但需要沉淀試劑對樣品和內(nèi)標(biāo)有較高的溶解度。張蕾等3測定大鼠灌胃給予三物黃芩湯后血漿中苦參堿、氧化苦參堿和氧化槐果堿含量時(shí)，比較了氯仿、二氯甲烷-異丙醇(955)和二氯甲烷-正己烷-異丙醇(100505)對苦參堿、氧

7、化苦參堿和氧化槐果堿的回收率，其中氯仿對待測物和內(nèi)標(biāo)的提取回收率較其他兩種混合溶劑高而且穩(wěn)定。SPE是近十幾年迅速發(fā)展起來的一種生物樣品預(yù)處理技術(shù)，其具有快速分離，回收率、精密度均較好，無乳化現(xiàn)象等諸多優(yōu)點(diǎn)，近幾年來在國內(nèi)外得到廣泛應(yīng)用。Yu等4測定黃連中多種生物堿類成分在大鼠血漿濃度時(shí)，將SPE小柱，用甲醇2 ml活化，1 ml去離子水洗去甲醇。精密吸取血漿樣品0.1 ml，加至SPE小柱，先用1 ml去離子水沖洗，再分別用1 ml甲醇溶液洗脫2次，收集甲醇液，45氮?dú)獯蹈桑?00 l流動(dòng)相溶解殘?jiān)?，高速離心后取10 l進(jìn)樣。2 藥動(dòng)學(xué)研究2.1 生物堿單體藥動(dòng)學(xué)研究生物活性成分是中藥發(fā)揮

8、療效的物質(zhì)基礎(chǔ)，其藥動(dòng)學(xué)研究方法與化學(xué)合成藥物相似。從中藥中發(fā)現(xiàn)具有藥理活性的單體，研究其藥動(dòng)學(xué)規(guī)律，是新藥創(chuàng)制的重要途徑。小檗堿為黃連、黃柏、三棵針或其他小檗植物中提取的生物堿，具有廣譜抗菌、降低血壓及擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、抗膽堿酯酶作用。人口服0.4 g，30 min后，血中濃度為1 g·ml-1左右，不易吸收。采用同位素標(biāo)記法9對小檗堿進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)研究，結(jié)果表明大鼠靜脈注射后，主要經(jīng)尿排泄，糞排泄很少;膽汁中有較多放射性排泄，存在著肝腸循環(huán);血藥濃度-時(shí)間曲線符合二室模型。苦參堿型生物堿均具有以苦參堿為代表的基本結(jié)構(gòu)，屬于喹諾里西啶類生物堿，具有抗腫瘤、抗肝炎、抗心律失常、抑制中樞神經(jīng)系

9、統(tǒng)等廣泛的藥理作用和生物活性10。目前對苦參堿型生物堿中苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、槐果堿、槐胺堿、拉馬寧堿等單一生物堿的藥物動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了廣泛深入的研究。Wu等8研究氧化苦參堿在人體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)規(guī)律，結(jié)果顯示氧化苦參堿及其體內(nèi)代謝產(chǎn)物苦參堿分別符合二室及一室模型，靜注給藥后只有小部分氧化苦參堿轉(zhuǎn)化為苦參堿。吳永江等11建立了一種液-質(zhì)聯(lián)用測定家兔血漿中槐定堿、槐果堿和苦參堿濃度的方法，結(jié)果表明槐定堿和槐果堿符合二室模型，而苦參堿則符合三室模型。關(guān)附甲素為毛莨科植物黃花烏頭的塊根-關(guān)白附子中提取分離得到的活性單體化合物。藥理研究表明，關(guān)附甲素能減慢心律，顯著降低CaC12誘發(fā)的大鼠室顫發(fā)生率和死亡率

10、，有穩(wěn)定心肌細(xì)胞膜及阻斷鈉通道等電生理活性。犬靜脈注射鹽酸關(guān)附甲素的藥-時(shí)曲線符合開放三室模型12，與文獻(xiàn)報(bào)道的人體內(nèi)結(jié)果較為一致，但T1/2和T1/2值較人體內(nèi)為長，說明鹽酸關(guān)附甲素在兩者的代謝有種屬間差異。烏頭堿是存在于烏頭屬多種植物中的一種雙酯型劇毒生物堿，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗癲癇、抗腫瘤、提高免疫功能等多種生理活性，但因其具有強(qiáng)烈的心臟毒性和神經(jīng)毒性，安全系數(shù)小，治療劑量與中毒劑量接近，限制了對該化合物作為藥用的進(jìn)一步研究。Tazawat T等13采用酶聯(lián)免疫法分析烏頭堿在大鼠體內(nèi)的血藥濃度，結(jié)果表明按0.02 mg·kg-1劑量給大鼠靜脈注射烏頭堿，血藥濃度-時(shí)間曲線符合二室

11、模型。2.2 生物堿提取物(有效部位)及其制劑藥動(dòng)學(xué)生物堿提取物藥動(dòng)學(xué)研究報(bào)道有烏蘇里藜蘆堿、馬錢子總堿、貝母總生物堿等，有關(guān)制劑的藥動(dòng)學(xué)研究有片劑、膠囊、固體自微乳、速釋微球、滴丸、注射液、乳劑及脂質(zhì)體等方面。烏蘇里藜蘆堿為烏蘇里藜蘆根提取得到的總生物堿，近年研究發(fā)現(xiàn)其具有很強(qiáng)的抗栓作用，在大鼠頸動(dòng)脈點(diǎn)刺激模型中能明顯延長血管栓塞時(shí)間(OT)，顯示很好的量效關(guān)系和時(shí)效關(guān)系;但其有效劑量僅g級水平，有效血藥濃度極低，通?；瘜W(xué)測定法難以檢測，故采用藥理效應(yīng)法以O(shè)T為指標(biāo)，經(jīng)效應(yīng)-劑量-時(shí)間三維轉(zhuǎn)換，得量-時(shí)曲線為二室模型14。馬錢子為劇毒中藥，有效劑量和中毒劑量比較接近，臨床常用其治療一些慢性頑

12、癥且較長期地給患者服用。徐曉月等5用HPLC法研究馬錢子砂燙炮制品中生物堿在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)，結(jié)果顯示大鼠靜脈注射馬錢子總堿后，其主要成分士的寧、馬錢子堿、士的寧氮氧化物和馬錢子堿氮氧化物的代謝均符合二室開放模型。貝母生物堿是貝母中止咳平喘主要活性成分，現(xiàn)已被開發(fā)成多種制劑，曾令杰等15對大鼠靜注伊犁貝母總生物堿后體內(nèi)各生物堿代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了探討，研究結(jié)果顯示西貝素苷消除快，符合一室模型，而其苷元西貝素的消除慢，符合兩室模型，伊貝堿苷A的消除同樣比西貝素快，符合一室模型。朱錦秀等16比較磷酸川芎嗪滴丸劑與片劑在健康人體內(nèi)的生物等效性，采用HPLC法測定血清中的藥物濃度，并用DAS2.0藥動(dòng)學(xué)程

13、序計(jì)算其藥動(dòng)學(xué)參數(shù)和相對生物利用度，兩者的體內(nèi)過程均符合一室房室模型，受試制劑的相對生物利用度為(115.1±35.4)%，磷酸川芎嗪滴丸劑和片劑具有生物等效性。此外，羥基喜樹堿固體自微乳和速釋微球的結(jié)腸定位膠囊，漢防己甲素微球、苦參總堿注射液、氧化苦參堿生物黏附緩釋片及三尖杉酯堿高、低包裹率脂質(zhì)體在動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)行為及體內(nèi)分布亦有相繼報(bào)道。2.3 中藥復(fù)方中生物堿藥動(dòng)學(xué)研究 由于中藥方劑中有效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用方式極其復(fù)雜，因此中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究是中藥藥動(dòng)學(xué)研究的難點(diǎn)。近年來，中藥復(fù)方生物堿藥動(dòng)學(xué)研究逐漸增多。 麻黃湯中君藥麻黃所含生物堿類成分基本可看成是麻黃藥理作用的代表性成分，賀

14、豐等17借助于GC-MS手段，用血藥濃度法進(jìn)行了中藥復(fù)方麻黃湯中麻黃堿和偽麻黃堿的人體動(dòng)力學(xué)研究，結(jié)果顯示所有藥時(shí)曲線均符合一房室模型，從藥動(dòng)學(xué)角度研究中藥復(fù)方配伍組方原則提供參考依據(jù)。補(bǔ)陽還五湯由黃芪、當(dāng)歸、赤芍、桃仁、川芎、紅花、地龍7味中藥組成，具有補(bǔ)氣、活血通絡(luò)之功效，方中主要代表成分為黃芪甲苷、川芎嗪、紅花苷、蛋白質(zhì)和多糖等。賀福元等(中藥復(fù)方藥物動(dòng)力學(xué)數(shù)學(xué)模型的建立及對補(bǔ)陽還五湯的研究.成都中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文，2006)對大鼠靜注補(bǔ)陽還五湯總方及總生物堿后藥動(dòng)學(xué)規(guī)律進(jìn)行了探討，結(jié)果顯示兩組方中川芎嗪藥動(dòng)學(xué)均為二室模型且藥動(dòng)學(xué)參數(shù)相近，但與單味川芎、純品川芎嗪的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)相差很大，提示中藥復(fù)方配伍能改變有效成分或部位制劑的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。四逆湯由附子、干姜、炙甘草組成，是中醫(yī)回陽救逆的經(jīng)典名方，具有強(qiáng)心、抗休克作用。李銳等18應(yīng)用中醫(yī)方藥血藥PK-PD模型，以烏頭生物堿為指標(biāo)成分，探討四逆湯精制物藥動(dòng)學(xué)與藥