生物技術(shù)復(fù)習(xí)資料

1、第二章 生命起源與進(jìn)化1. 怎樣用一系列相關(guān)特征來表述“生命”？生物體以細(xì)胞為基本結(jié)構(gòu)單位并應(yīng)具備生 長、繁殖、應(yīng)答與新陳代謝等特征2. 五界分類系統(tǒng)分別是指什么？原核生物：原核生物界真核生物：原生生物界、真菌界、植物界、動物界3. 目前較為普遍接受的生命起源假說是什 么？其中 和 是生命進(jìn)化的兩大飛躍?；瘜W(xué)起源 （1）光合作用的出現(xiàn)意味著一個飛躍：異養(yǎng)型自養(yǎng)型（2）有氧呼吸的產(chǎn)生是生命進(jìn)化的一大飛躍4. 研究物種變遷的兩大工具（1）化石除琥珀和深凍猛犸外，化石是研究古 代生物的主要依據(jù)。（2）根據(jù)同位素衰變計算地層年齡第三章 生命的物質(zhì)基礎(chǔ)1. 生命活動所必需的生物元素有多少種？按在生物 體

2、內(nèi)的多少，可分為 和 。 在28種生命必需的元素中，按體內(nèi)含量的高低可分為宏量元素（常量元素）和微量元素。2. 生物小分子和生物大分子分別指哪些？ ?。核?、氨基酸、單糖、核苷酸、脂類大：蛋白質(zhì)、核酸、多糖3. 核苷酸分子由哪幾部分組成？（1）堿基：嘧啶、嘌呤 （2）五碳糖：核糖或脫氧核糖 （3）磷酸4. 構(gòu)成DNA和RNA的堿基分別是什么？DNA胸腺嘧啶（T） RNA尿嘧啶（U）5. A，G，C，T和U分別是指什么堿基？ 腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鳥嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T，DNA專有）尿嘧啶（U，RNA專有）6. 生物體內(nèi)有哪三大常見脂類？（1）甘油三酯（油脂） （2）磷脂和鞘脂 （3）固

3、醇 7. 蛋白質(zhì)、糖和核酸分別由哪些共價鍵連接而成？ 肽鍵 糖苷鍵 磷酸二酯鍵8. 肽鏈、糖鏈和核酸的方向性分別是指什么？肽鏈有方向性：氨基端（N端），羧基端（C端）多糖鏈也有方向性：有還原端和非還原端。核酸鏈也有方向性：一端的核苷酸，其5-C沒有進(jìn)入 磷酸二酯鍵，稱為 5末端；另一端的核苷酸，其3-C沒有進(jìn) 入磷酸二酯鍵，稱為 3末端。9. 蛋白質(zhì)一級、二級、三級和四級結(jié)構(gòu)的概念。一級結(jié)構(gòu)：肽鏈中氨基酸的排列順序； ü二級結(jié)構(gòu)：鄰近幾個氨基酸形成的一定的結(jié)構(gòu)形 狀；如：-螺旋，-折疊，-轉(zhuǎn)角 ü三級結(jié)構(gòu)：整條肽鏈盤繞折疊形成一定的空間結(jié)構(gòu)形狀。 ü四級結(jié)構(gòu)：各條

4、肽鏈之間的位置和結(jié)構(gòu)，所以，四級結(jié)構(gòu)只存在于由兩條肽鏈以上組成蛋白質(zhì) 。第四章 生命活動的基本結(jié)構(gòu)單位細(xì)胞1.目前公認(rèn)的細(xì)胞學(xué)說主要包括哪些方面？公認(rèn)的細(xì)胞學(xué)說：（1）細(xì)胞是所有動、植物的基本結(jié)構(gòu)單位。 （2）每個細(xì)胞相對獨立，一個生物體內(nèi)各細(xì)胞之間協(xié)同配合。 （3）新細(xì)胞由老細(xì)胞繁殖產(chǎn)生。 2.細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能?（1）細(xì)胞膜的框架，就是脂雙層，還有蛋白質(zhì)“鑲嵌” 其中。1970s提出的流動鑲嵌學(xué)說，強(qiáng)調(diào)了生物膜 中脂分子和蛋白質(zhì)分子的運(yùn)動。（2）細(xì)胞內(nèi)膜是真核細(xì)胞內(nèi)，除了細(xì)胞膜以外的其他 膜結(jié)構(gòu)，它構(gòu)成了許多細(xì)胞器的界膜，將各細(xì)胞 器與胞質(zhì)溶膠分開。 3.各種細(xì)胞器的主要功能？（1）細(xì)胞核

5、：雙層生物膜，遺傳信息貯藏、DNA復(fù)制和RNA合成場所；（2）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：單層生物膜，蛋白質(zhì)合成、修飾和分泌，脂類合成場所；（3）高爾基體：單層生物膜，與蛋白質(zhì)修飾和分泌有關(guān)。（4）溶酶體：單層生物膜，生物大分子分解場所；（5）線粒體：雙層生物膜，生物氧化、產(chǎn)生能量場所；（6）細(xì)胞質(zhì)：有多種蛋白質(zhì)和酶，糖酶解和糖原合成等反應(yīng)場所；（7）細(xì)胞骨架：由蛋白質(zhì)亞基組裝而成，與細(xì)胞形狀、遷移、信息傳導(dǎo)等有關(guān)；（8）核糖體：由RNA和蛋白質(zhì)形成的大顆粒，蛋白質(zhì)合成場所 4.與動物細(xì)胞相比，植物細(xì)胞有哪些不同？與動物細(xì)胞相比，有幾點不同：植物細(xì)胞：有細(xì)胞壁 有中央液泡 有葉綠體 動物細(xì)胞：沒有葉綠體 沒有細(xì)胞

6、壁 沒有中央液泡 6. 細(xì)胞為什么會分裂？（1）隨著細(xì)胞生長，細(xì)胞體積增大，而細(xì)胞表面積和體積之比（表面積/體積）卻在變小。 （2）活細(xì)胞不斷進(jìn)行新陳代謝，細(xì)胞表面擔(dān)負(fù)著輸入養(yǎng)分，排出廢物的重任。 ü（3）表面積/體積比值的下降，意味著代謝速率的受限和下降。所以，細(xì)胞分裂是細(xì)胞生長過程中保持足夠表面積，維持一定的生長速率的重要措施。 6.大多數(shù)真核生物的體細(xì)胞和生殖細(xì)胞分別以什么方式進(jìn)行分裂？大多數(shù)真核生物是多細(xì)胞生物。體細(xì)胞的分裂稱為有絲分裂；生殖細(xì)胞形成過程中，則為減數(shù)分裂。7. 細(xì)胞有絲分裂一個分裂周期可以分為哪幾個階段？ 細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束到后一次分裂完成，稱為 一個細(xì)胞周

7、期。通常，細(xì)胞周期可以區(qū)分為四個階段： M期：分裂期，在這個階段可以在顯微鏡下看到細(xì)胞 分裂過程。 G1期：DNA復(fù)制之前的細(xì)胞生長期。 S期：DNA復(fù)制期。 G2期：DNA復(fù)制之后到細(xì)胞分裂之前的時期8. 染色質(zhì)和染色體的概念。PPT：處于分裂間期的細(xì)胞，細(xì)胞核內(nèi)的DNA分子，在一些蛋白質(zhì)的幫助下，有一定程度的盤繞，形成核小體。多個核小體串在一起形成染色質(zhì)。所以，染色質(zhì)是在細(xì)胞分裂間期遺傳物質(zhì)存在的形式。核小體直徑10nm，光鏡下看不到。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入M期時，染色質(zhì)折疊包裝，大約壓縮8400倍，形成光鏡下可以看到的染色體。百度：染色質(zhì)是遺傳物質(zhì)的載體。染色質(zhì)是指間期細(xì)胞核內(nèi)由DNA、組蛋白、非組

8、蛋白及少量RNA組成的線性復(fù)合結(jié)構(gòu)，是間期細(xì)胞遺傳物質(zhì)存在的形式。染色體是指細(xì)胞在有絲分裂或減數(shù)分裂的特定階段，由染色質(zhì)聚縮而成的棒狀結(jié)構(gòu)。8減數(shù)分裂的特點。一是子細(xì)胞染色體數(shù)減半；二是子細(xì)胞基因組合大為豐富。 9. 細(xì)胞分化的概念。細(xì)胞發(fā)育過程中細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程。 10. 細(xì)胞壞死和細(xì)胞凋亡的概念。多細(xì)胞生物個體的一生中，不斷發(fā)生構(gòu)成身體的細(xì)胞的死亡。有兩種細(xì)胞死亡：（1）因環(huán)境因素突變或病原物入侵而死亡，稱為病理死亡，或細(xì)胞壞死。（2）因個體正常生命活動的需要，一部分細(xì)胞必定在一定階段死去，稱細(xì)胞凋亡。第五章 生命活動的基本過程-新陳代謝 新陳代謝、物質(zhì)代謝、能量

9、代謝、同化作 用、異化作用等概念。新陳代謝：生物體與外界環(huán)境之間的物質(zhì)和能量交換以及生物體內(nèi)物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)變過程。物質(zhì)代謝：生物體與外界環(huán)境之間物質(zhì)的交換和生物體內(nèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)變過程。能量代謝：生物體與外界環(huán)境之間能量的交換和生物體內(nèi)能量的轉(zhuǎn)變過程。同化作用（合成代謝）：生物體把從外界環(huán)境中獲取的營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)變成自身的組成物質(zhì)，并且儲存能量的變化過程。異化作用（分解代謝）：生物體把自身的一部分組成物質(zhì)加以分解，釋放出其中的能量，并且把分解的終產(chǎn)物排出體外的變化過程。 酶的本質(zhì)是什么？有哪些特點？酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或核酸催化劑可以加快化學(xué)反應(yīng)的速度，酶是生物催化劑，它的突出優(yōu)點是：催化效率高 專一性

10、（特異性） 可以調(diào)節(jié) 酶催化的機(jī)理是。降低活化能 生物體能量流通的貨幣。ATP 光合作用，光反應(yīng)和暗反應(yīng)概念。光合作用：綠色植物和光合細(xì)菌利用太陽能產(chǎn)生有機(jī)物和氧氣的過程。光反應(yīng)：在葉綠體參與下，把光能用來劈開水分子，放出O2，同時造成一種高能化合物ATP和一種還原性物質(zhì)NADPH。暗反應(yīng)：把ATP和NADPH中的能量，用于固定CO2， 生成糖類化合物。這個過程不需要光。 葉綠體主要吸收哪些顏色的光？葉綠素a和葉綠素b吸收紅光和藍(lán)紫光,葉黃素和胡蘿卜素吸收藍(lán)紫光 生物體有機(jī)物氧化的特點。A.生物體內(nèi)氧化比燃燒過程緩慢的多，不是猛然地發(fā)出光和熱； B.生物體內(nèi)氧化在水環(huán)境中進(jìn)行； C.生物體內(nèi)的

11、氧化由酶催化； D.生物體內(nèi)氧化分步驟進(jìn)行，逐步產(chǎn)生能量貯存 在ATP中 與葡萄糖氧化分解有關(guān)的三條途徑，以及分別產(chǎn)生哪些物質(zhì)？（1）糖酵解途徑六個碳的葡萄糖分解為兩個三碳的丙酮酸，凈得兩個ATP，同時還產(chǎn)生兩個NADH。在無氧情況下， 產(chǎn)生的丙酮酸可以產(chǎn)生乙醇、乳酸等其他物質(zhì)；在有氧情況下，丙酮酸進(jìn)入三羧酸循環(huán)，最終產(chǎn)生CO2和H20。（2）三羧酸循環(huán)三羧酸循環(huán)一定需要氧才能進(jìn)行。在三羧酸循環(huán)中脫下的氫，形成NADH和FADH2，然后再逐步傳遞給氧。（3）呼吸鏈三羧酸循環(huán)脫下的氫可以看作是電子加上質(zhì)子。在呼吸鏈起端，電子處在高能水平，傳遞到O2時，處于低能水平。傳遞過程中釋放出的能量，用于產(chǎn)

12、生ATP。 蛋白質(zhì)合成分為哪兩個步驟？第一步，由DNA指導(dǎo)mRNA（信使RNA）的合成。DNA中遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄體現(xiàn)在mRNA分子的核苷酸排列順序中。第二步，由mRNA指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。mRNA中攜帶的遺傳信息通過翻譯轉(zhuǎn)而體現(xiàn)為蛋白質(zhì)大分子的氨 基酸的排列順第六章 生命的延續(xù)與發(fā)展-遺傳與變異 遺傳學(xué)的三個規(guī)律分別指什么？分離定律、自由組合定律、連鎖交換規(guī)律 生物性別由哪些方式?jīng)Q定？（1）性染色體決定性別 XY型（幾乎所有哺乳類、某些兩棲類和魚類，許多昆蟲、雌雄異株的植物。）和ZW 型（鳥類、家蠶及某些兩棲類、爬行類）（2）基因決定性別 （玉米雌雄花序） （3）染色體倍數(shù)決定性別 （蜜蜂的蜂王（

13、雙倍體）和雄蜂（單倍體）（4）環(huán)境決定性別 （一些龜鱉類和所有鱷魚） 等位基因間的相互作用包括完全顯性、不完全顯性和并顯性，其分別指什么？（1）完全顯性 兩個不同的遺傳因子同時存在時，只完全表現(xiàn)其中的顯性因子，雜合體Cc與顯性純合體CC在性狀上幾乎完全一樣不能區(qū)別，這種等位基因間的相互作用稱為完全顯性。（2）不完全顯性F1：雙親中間類型或不同于雙親的新類型 F2：父本類型、中間類型（新類型）和母本3類，呈1:2:1的比例 金魚草花色遺傳（3）并顯性/共顯性一對等位基因的兩個成員在雜合體中都表達(dá)的遺傳現(xiàn)象，稱為并顯性。 等位基因和復(fù)等位基因的概念。等位基因一般指位于一對同源染色體的相同位置上控制

14、著相對性狀的一對基因。在群體中的不同個體，在同一基因座上含有兩種以上等位基因，它們都影響同一性狀的狀態(tài)和性質(zhì)，這個座位上的一系列等位基因總稱為復(fù)等位基因。 數(shù)量性狀和質(zhì)量性狀概念。數(shù)量性狀：生物性狀的變異不易區(qū)分，相對性狀存在著一系列中間過渡類型，這些具有連續(xù)變異的性狀稱為數(shù)量性狀。如農(nóng)作物產(chǎn)量，人的身高、體重等。質(zhì)量性狀：生物性狀是明顯的不連續(xù)變異，在表型上存在著質(zhì)的差別、呈現(xiàn)不連續(xù)變異的相對性狀稱為質(zhì)量性狀。如豌豆的紅花和白花，果蠅的白眼和紅眼，人類的色盲和非色盲等。 何為核外遺傳，包括哪些？有一些基因存在于染色體之外，這些基因并不是隨同染色體的復(fù)制和分裂而均等的分配給兩個子代細(xì)胞，而是在

15、細(xì)胞質(zhì)中傳遞給子代，這種遺傳方式稱為核外遺傳。線粒體遺傳 葉綠體遺傳 質(zhì)粒遺傳 基因突變的概念，其有哪些特點？基因突變：遺傳物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的改變 稀有性 可逆性 多方向性 基因突變方式包括 和 。 堿基替換和移碼突變 堿基替換又可以分為 、 、 、 。同義突變 中性突變 無義突變 錯義突變第七章 生物分類與生物多樣性 現(xiàn)代生物分類采用的7個分類階元分別指什么？ 界 門 綱 目 科 屬 種 物種的概念。自然界能夠交配、產(chǎn)生可育后代，占有一定的生態(tài)空間，并與其他種群有生殖隔離的群體；物種是分類的基本單元，又是繁殖單元。如意大利蜜蜂（Apis melliferaL.）就是一個物種 什么是雙名法，三名法

16、？學(xué)名：每個物種的科學(xué)名稱，由屬名和種名兩個拉丁詞匯組合而成雙名法：屬名+種名+(命名人) 棉蚜：Aphis gossypiiGlover Ø三名法：屬名+種名+亞種名+(命名人) 東亞飛蝗：Locusta migratoria manilensisMeyen 學(xué)名書寫的四個要點是指什么？1斜體 2屬名的第1個字母大寫，其余字母小寫，種名和亞 種名全部小寫；定名人正體，第1字母大寫，其余 字母小寫，如意大利蜜蜂Apis melliferaLinnaeus。 Ø3如果只鑒定到屬而尚不知道種名，則用sp.來表示， 如Apissp.表示蜜蜂屬1個種；多于1個種時用spp.， 如A

17、pisspp.表示蜜蜂屬的2個或多個種。 Ø4種名在一篇文章中首次出現(xiàn)需全寫，如果再次出 現(xiàn)時，屬名可以縮寫（A. mellifera）。第八章 環(huán)境與生態(tài) 生態(tài)學(xué)是研究什么的一門科學(xué)？ 研究生物與非生物環(huán)境及生物與 生物之間相互作用的一門學(xué)科 種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)和生物圈的概念種群(population) 在特定的時間和一定的空間中生活和繁殖的同種個體的總和群落(community) 在特定的時間和一定的空間中各種生物種群的總和生態(tài)系統(tǒng) (ecosystem) 一定地區(qū)內(nèi)的所有生物和環(huán)境物理因素的總和稱為生態(tài)系統(tǒng)，注重研究物質(zhì)循環(huán)、能量流動和生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性等。生物圈 (biosp

18、here)地球上生物及其生存環(huán)境的總稱。只占地球表面的一個薄層，由大氣、水、土壤、巖石及生活在第九章 生物技術(shù)總論 什么叫生物技術(shù)？生物技術(shù)（biotechnology）：指人們以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合其他基礎(chǔ)學(xué)科的科學(xué)原理，采用先進(jìn)的工程技術(shù)手段，按照預(yù)先的設(shè)計改造生物體或加工生物原料，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達(dá)到某種目的。 現(xiàn)代生物技術(shù)包括哪些內(nèi)容？基因工程 Ø細(xì)胞工程 Ø酶工程 Ø發(fā)酵工程 Ø蛋白質(zhì)工程 生物技術(shù)的核心技術(shù)是什么？基因工程DNA重組技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)以什么為標(biāo)志？以DNA重組技術(shù)的建立為標(biāo)志。第十章 基因工程 基因工程研究的理論依據(jù)

19、是什么？基因工程研究的理論依據(jù) 2.1 不同基因具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ) 遺傳物質(zhì)：DNA DNA的組成和基本結(jié)構(gòu)都是一樣的 、不同生物的基因是可以重組互換的2.2 基因是可以切割的2.3 基因是可以轉(zhuǎn)移的2.4 多肽與基因之間存在對應(yīng)關(guān)系 一種多肽就有一種相對應(yīng)的基因2.5 遺傳密碼是通用的 在所有生物中，三聯(lián)密碼子同氨基酸之間的對應(yīng)關(guān)系都是相同的。2.6 基因可以通過復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代 基因工程操作的基本技術(shù)路線。 DNA變性與復(fù)性的概念。DNA變性：雙鏈DNA在高溫條件下會發(fā)生氫鍵的斷開而解鏈成單鏈DNA的過程。一般在90時，就可以使DNA完全變形。 pDNA復(fù)性：高溫變形的DNA被逐

20、漸冷卻時，分開的兩條單鏈DNA又會重新結(jié)合成雙鏈DNA的過程。 什么叫啟動子、基因編碼區(qū)和終止子？啟動子（promoter）：RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個組成部分，具有相對的保守性。SD序列：原核生物中，mRNA啟始密碼子上游4-7 個堿基處富含嘌呤的AGGAGG序列，稱為SD序列，其為30S核糖體亞基的識別和結(jié)合位點?；蚓幋a區(qū)：指轉(zhuǎn)錄mRNA上起始密碼AUG（少數(shù)情況是GUG）至終止密碼UAG（或UAA、 UGA）的各種遺傳密碼的核苷酸序列。終止子（terminator）：位于基因編碼區(qū)下游，使轉(zhuǎn)錄終止的一段核苷酸序列。富含GC的反向互補(bǔ)重復(fù)序列。 什么叫內(nèi)含子、

21、外顯子？限制性內(nèi)切酶的知識點 限制性內(nèi)切酶是一類什么酶？限制性內(nèi)切核酸酶：是一類能識別雙鏈DNA中特殊核苷酸序列，并在合適的反應(yīng)條件下使每條鏈一定位點上的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生具有5-磷酸基和3-羧基的DNA片段的內(nèi)切脫氧核糖核酸酶。 限制性內(nèi)切酶識別序列的共性。限制性內(nèi)切核苷酸酶的識別序列(一般為6個核苷酸對)識別序列的共性：左右互補(bǔ)對稱 什么叫平末端、黏性末端？ PCR是指什么技術(shù)？PCR（Polymerase Chain Rection，聚合酶鏈反應(yīng)）是一種利用DNA變性和復(fù)性原理在體外進(jìn)行特定 DNA片段高效擴(kuò)增的技術(shù)。它以DNA互補(bǔ)鏈聚合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過靶DNA變性、引物與模板DNA

22、一側(cè)的互補(bǔ)序列復(fù)性雜交、耐熱性DNA聚合酶催化引物延伸等過程的多次循環(huán)，產(chǎn)生待擴(kuò)增的特異性DNA片段。 PCR過程的三部曲，反應(yīng)的五要素各指的是什么？PCR三部曲： 變性 退火 延伸 DNA連接酶有哪兩種，它們各有什么特點？E. coliDNA連接酶：只能催化雙鏈DNA片段互補(bǔ)黏性末端之間的連接。T4 DNA連接酶：即可連接黏性互補(bǔ)末端，也可連接平末端，但平末端連接效率較低。 DNA重組的實質(zhì)？DNA重組：實際上是兩種DNA片段的連接，如果待連接的兩種DNA片段各含有一個以上的基因，這樣的DNA重組也稱為基因重組。 克隆載體的概念，其應(yīng)具備哪些條件？基因克隆載體：能夠承載外源基因，并將其帶入受

23、體細(xì)胞得以穩(wěn)定維持的DNA分子?；蚩寺≥d體應(yīng)具備的條件： 有多種限制性內(nèi)切酶單一酶切位點，可以進(jìn)行 外源DNA片段的插入； 有復(fù)制起點，能在受體細(xì)胞中能進(jìn)行復(fù)制； 克隆載體必須是安全的 有供選擇轉(zhuǎn)化子的標(biāo)記基因。 什么是質(zhì)粒，它具備哪些特點？質(zhì)粒（plasmid）是一種獨立于細(xì)胞染色體外的環(huán)狀雙鏈DNA分子， 一個質(zhì)粒就是一個DNA分子；能在宿主細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，具有穩(wěn)定的拷貝數(shù)；大小多數(shù)在10kb左右；存在于原核生物大腸桿菌、乳酸桿菌、藍(lán)藻和真核生物酵母中。 克隆載體有些種類，其主要用途是什么？ （模糊答案）噬菌體克隆載體：可包裝原DNA長度的75%105%的DNA片段，即包裝后的DNA長度

24、必需在36.451kb之間，相當(dāng)于能插入7.9kb-22.5kb。適合用于cDNA基因文庫的構(gòu)建。cosmid載體：是一種環(huán)狀雙鏈DNA分子，有質(zhì)粒 DNA和上述DNA組成。其大小一般在10kb以下， 可承載更大容量的外源DNA片段。植物病毒克隆載體種類繁多 構(gòu)建策略： 消除對植物的致病基因，保留其轉(zhuǎn)染進(jìn)入植物細(xì) 胞的特性。 應(yīng)用： 應(yīng)用局限性比較大，且含有由Ti質(zhì)粒改建的其他 載體，所以應(yīng)用并不普遍。動物病毒克隆載體動物轉(zhuǎn)基因不能應(yīng)用質(zhì)粒載體，只能運(yùn)用動物病 毒克隆載體。 種類： 痘苗病毒、腺病毒、桿狀病毒、猿猴空泡病毒和 反轉(zhuǎn)錄病毒等。·MCS，人工染色體，同源重組的概念。Mcs

25、：多克隆位點人工染色體：能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制，并準(zhǔn)確傳遞給子細(xì)胞的人工構(gòu)建的染色體，它能承載 100kb以上的外源DNA分子。同源重組：兩個不同的DNA分子在同源序列處發(fā)生重組，將各自攜帶的處于同源序列內(nèi)的遺傳信息互相交換。 基因組文庫和cDNA文庫概念。 基因組文庫：把某種生物基因組的全部信息通過克隆載體貯存在一個受體菌克隆子群體中，這個群體即為這種生物的基因組文庫。cDNA文庫：某種生物基因組轉(zhuǎn)錄的全部mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的各種cDNA片段分別與克隆載體重組，貯存在一種受體菌克隆子群體中，這樣的群體稱為cDNA文庫。 核酸探針概念。化學(xué)及生物學(xué)意義上的探針(probe)，是指與特定的靶分

26、子發(fā)生特異性相互作用，并可被特殊的方法探知的分子。 DNA探針 RNA探針 寡核苷酸探針 從基因組文庫或cDNA文庫中，怎樣根據(jù)已知核苷酸序列篩選出目的基因？ 受體細(xì)胞概念。受體細(xì)胞（recipient cell）能攝取外源DNA，并使其穩(wěn)定維持的細(xì)胞，可以是原核細(xì)胞，也可以是真核細(xì)胞。 轉(zhuǎn)化的概念。轉(zhuǎn)化（transformation）：通過生物學(xué)、物理學(xué)和化學(xué)等方法使外源裸露DNA進(jìn)入受體細(xì)胞，并在 受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)的過程。 克隆子的概念?？寺∽樱汉型庠碊NA分子并在其中穩(wěn)定維持的 受體細(xì)胞稱為克隆子，也稱轉(zhuǎn)化子。 載體標(biāo)記基因篩選轉(zhuǎn)化子的原理。、在構(gòu)建基因工程載體系統(tǒng)時，通常在載

27、體DNA分子中組裝一種或兩種選擇標(biāo)記基因，在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，呈現(xiàn)出特殊的表型或遺傳學(xué)特性。當(dāng)受體細(xì)胞在含有選擇性培養(yǎng)基上生長時，只有轉(zhuǎn)化了克隆載體的轉(zhuǎn)化子才能生長，起到了篩選的作用。 怎樣通過抗性篩選和藍(lán)白斑篩選得到DNA重組的克隆子？ DNA分子在瓊脂糖凝膠中電泳主要根據(jù)哪兩個原理？ DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。 Southern, Northern, Western的概念及其作用。Southern印跡雜交：待分析DNA經(jīng)限制性內(nèi)切核酸酶酶切及瓊脂糖凝膠電泳分帶，轉(zhuǎn)移到用于雜交的膜上，變性處理后再用DNA探針與其雜交。 Northern雜交：類似于Souther

28、n雜交，不同的是用DNA探針監(jiān)測RNA分子Western印跡法：將蛋白質(zhì)電泳、印跡和免疫測定結(jié)合在一起的蛋白質(zhì)監(jiān)測方法。 SDS在蛋白質(zhì)電泳中的作用。1. SDS是一種強(qiáng)陰離子去污劑，能使蛋白質(zhì)亞基解離、變性； 2. SDS覆蓋在蛋白質(zhì)表面，把原來的電荷封閉，并使蛋白質(zhì)表面帶負(fù)電，從而使蛋白質(zhì)在電泳時向正極移動； 3. SDS與多肽結(jié)合的含量和多肽的分子量成正比，而與序列無關(guān)，使得蛋白質(zhì)在電泳時的遷移率只與多肽的大小有關(guān)。第十一章 細(xì)胞工程 細(xì)胞工程中的三個基本操作技術(shù)是什么？ 無菌操作技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 細(xì)胞融合技術(shù) 植物組織培養(yǎng)的概念、理論基礎(chǔ)及操作步驟（包含其中的一些概念）。組織培養(yǎng)：在

29、無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的全能性(細(xì)胞的全能性是指生物體的細(xì)胞具有使后代 細(xì)胞形成完整個體的潛能。)1.1 預(yù)備階段A. 選擇合適的外植體B. 除去病原菌及雜菌C. 配制適宜的培養(yǎng)基1.2 誘導(dǎo)去分化階段 去分化：又稱脫分化，指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過程。愈傷組織：經(jīng)細(xì)胞與組織培養(yǎng)產(chǎn)生的可傳代的未 分化細(xì)胞團(tuán)1.3 繼代增殖階段愈傷組織長出后經(jīng)過4-6周的迅速細(xì)胞分裂，原有培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分不能滿足愈傷組織的生長， 需要移植到新的

30、培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。1.4 生根發(fā)芽階段（再分化階段） 再分化：愈傷組織重新分化生長出具有芽端和根端的胚狀體的過程。1.5 移栽成活階段 煉苗 次生代謝物生產(chǎn)的兩種方法及其優(yōu)缺點。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)：有利于細(xì)胞的快速增值，但不利于次生代謝物的積累。 Ø固定化細(xì)胞培養(yǎng)：有利于次生代謝物的積累；不利于細(xì)胞的快速增值 植物原生質(zhì)體融合的一般方法。A. 化學(xué)誘導(dǎo)融合 聚乙二醇（PEG）結(jié)合高鈣高pH誘導(dǎo)法 B. 物理誘導(dǎo)融合 電激法 什么是單倍體植物、其有什么優(yōu)勢？單倍體生物：細(xì)胞中僅含一組染色體的生物，絕 大部分動、植物的配子為單倍體，配子未經(jīng)結(jié)合而直接發(fā)育起來的生物也是單倍體。優(yōu)點： 明顯縮短了

31、育種年限 后代穩(wěn)定遺傳 人工種子的基本構(gòu)造。人工種子：即人為制造的種子，它是一種含有植物胚狀體或芽、營養(yǎng)成分、激素以及其他成分的人工膠囊。 什么組織或器官適用于植物脫毒，為什么？分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚至沒有病毒在植物體內(nèi)主要以維管束進(jìn)行傳播，在植物 莖尖和根尖尚無維管束。 動物細(xì)胞組織培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的差異。 培養(yǎng)絕大多數(shù)哺乳動物的細(xì)胞具有一個顯著特點 （ ），所以培養(yǎng)時要（ ）。培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞的一個顯著特點： 貼壁生長為了增加細(xì)胞培養(yǎng)的支持界面 A. 微導(dǎo)管培養(yǎng)法 B. 微載體培養(yǎng)法 C. 微膠囊培養(yǎng)法 動物細(xì)胞長期保存一般用哪兩種方法？ 經(jīng)典傳代法，冷凍保存法（-70）

32、 動物細(xì)胞融合的一般方法？ 2.1 病毒誘導(dǎo)融合 雙親本細(xì)胞分別制成細(xì)胞懸浮液混合離心雙親細(xì)胞 沉淀混勻細(xì)胞凝集細(xì)胞融合選擇培養(yǎng)2.2 化學(xué)誘導(dǎo)融合 PEG誘導(dǎo)融合法（主要手段）2.3 電激誘導(dǎo)融合 什么叫抗原、抗體？ 抗原：能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生 特異性免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)的免疫產(chǎn)物（抗體）在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)，一般是一些外源生物（細(xì)菌）或生物大分子（蛋白質(zhì)）?？贵w：是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、 并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白，抗體由B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生 單克隆抗體的概念，原理及過程。單克隆抗體：對某個特定B淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，產(chǎn)生大量遺傳性狀高度一致的細(xì)胞群，由此分泌的

33、專一性抗體稱為單克隆抗體。1、本過程利用了哪些原理？答：免疫原理，細(xì)胞融合原理和動物細(xì)胞培養(yǎng)原理。2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？答：這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺 傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有 無限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。 克隆的概念，了解“多莉”產(chǎn)生的過程。 什么叫干細(xì)胞，按分化潛能可分為哪幾類？干細(xì)胞（stell cell）：一類具有自我更新和多向分化潛能的原始細(xì)胞。按分化潛能：全能干細(xì)胞 多能干細(xì)胞 單能干細(xì)胞 按發(fā)育狀態(tài)：胚胎干細(xì)胞 成體干細(xì)胞 植物細(xì)胞、原核細(xì)胞和真菌細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分分別是什么？第十二章 發(fā)酵工程 發(fā)酵的

34、概念。發(fā)酵（fermentation）利用微生物在有氧或無氧條件下的生命活動來制 備微生物菌體或其代謝產(chǎn)物的過程。 微生物發(fā)酵有哪些類型，請舉例。微生物菌體發(fā)酵 以獲得具有某種用途的菌體為目的。 如：面包制作（酵母發(fā)酵）； 微生物菌體蛋白； 藥用真菌； 微生物殺蟲劑等。微生物酶發(fā)酵 以利用微生物發(fā)酵產(chǎn)生的酶為目的。如：淀粉酶（葡萄糖）； 堿性蛋白酶（洗衣粉）； 葡萄糖氧化酶（檢測葡萄糖含量） 微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵 以利用微生物代謝產(chǎn)物為目的。初生代謝產(chǎn)物：在菌體對數(shù)生長期所產(chǎn)生，是菌體生長繁殖所必需的物質(zhì)，如氨基酸、核苷酸、 蛋白質(zhì)、核酸和糖類等p次生代謝產(chǎn)物：在菌體靜止期所產(chǎn)生的，與菌體 生長

35、繁殖無明顯關(guān)系的物質(zhì)，如抗生素、生物堿、 細(xì)菌毒素和植物生長因子等。微生物的轉(zhuǎn)化發(fā)酵 利用微生物細(xì)胞的一種或多種酶，把一種化合物 轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)相關(guān)的更有經(jīng)濟(jì)價值的產(chǎn)物。 如：醋酸發(fā)酵（醋酸菌） CH3CH2OHCH3CHOCH3COOH 1.5 生物工程細(xì)胞的發(fā)酵 以利用生物工程技術(shù)所獲得的細(xì)胞的發(fā)酵產(chǎn)物為 目的。 如：胰島素、干擾素；單克隆抗體等。 p 發(fā)酵工業(yè)中的常用微生物有哪些?主要為細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌。 發(fā)酵培養(yǎng)基由哪些成分組成？碳源、氮源、無機(jī)鹽和微量元素、生長因子、水、產(chǎn)物形成的誘導(dǎo)物、前體和促進(jìn)劑 簡述發(fā)酵的一般過程或主要內(nèi)容。（1）菌種的選育 （2）培養(yǎng)基的配制 （3）培

36、養(yǎng)基和設(shè)備的滅菌 （4）擴(kuò)大培養(yǎng)與接種 （5）發(fā)酵過程 （6）產(chǎn)品的分離與純化 什么叫液體深層發(fā)酵？液體深層發(fā)酵：指在液體培養(yǎng)基內(nèi)部進(jìn)行的微生物培養(yǎng)過程。 什么是抗生素？抗生素（antibiotics）：生物體在生命活動中產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物，具有抑制或殺滅活細(xì)胞的功能，而且有很強(qiáng)的選擇性。第十三章 酶工程 什么是酶，它具有哪些催化特點？酶（Enzyme）：是具有生物催化功能的生物大分子，包括蛋白質(zhì)和核酸。 酶的催化特點： 專一性強(qiáng)，催化效率高，反應(yīng)溫和等。 酶工程是指什么，包括哪些內(nèi)容？ 酶工程：研究酶的生產(chǎn)和應(yīng)用的一門技術(shù)性學(xué)科， 包括酶制劑的制備、酶的固定化、酶的修飾與改造、以及酶的反

37、應(yīng)器等方面內(nèi)容。 為什么現(xiàn)在酶的生產(chǎn)主要來源于微生物的發(fā)酵？商業(yè)用酶來源于動植物和微生物，現(xiàn)更多的求助 于微生物。 微生物產(chǎn)酶的優(yōu)勢： A. 生長繁殖快，產(chǎn)量高； B. 培養(yǎng)簡單，原料豐富而價格低廉； C. 菌株種類繁多，酶的品種齊全； D. 適應(yīng)和應(yīng)變能力強(qiáng)，可通過誘導(dǎo)、基因工程等 方法培育新的產(chǎn)酶菌株。 根據(jù)酶分子的不同特性，可采取哪些純化方法，請舉例？根據(jù)酶分子大小和形狀的分離方法A. 離心分離 B. 凝膠過濾 C. 透析與超濾 根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的分離方法A. 離子交換層析 B. 電泳（聚丙烯凝膠電泳，PAGE） C. 等電聚焦電泳 根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的分離方法 A. 親和層析 B.

38、 染料配體親和層析 C. 共價層析 根據(jù)分配系數(shù)的分離方法 某些聚合物與一些無機(jī)鹽（或另一種聚合物）混 合后，當(dāng)濃度達(dá)到一定范圍時，體系會自動分為 兩相。蛋白質(zhì)在兩相中具有不同的分配比，從而 達(dá)到分離的目的。 常用于生物物質(zhì)分離的體系有：聚乙二醇（PEG） /葡聚糖（Dextran）、PEG/硫酸氨、PEG/磷酸鹽 等。 酶分子修飾與酶蛋白質(zhì)工程的區(qū)別？ 酶的固定化方法有哪些，各有何優(yōu)缺點？載體結(jié)合法：物理吸附法、離子結(jié)合法、螯合法、 共價結(jié)合法共價交聯(lián)法：包埋法：聚合物包埋法、疏水相互作用、微囊、 脂質(zhì)體包埋 何為酶反應(yīng)器、生物傳感器？酶反應(yīng)器概念：以酶為催化進(jìn)行反應(yīng)所需要的設(shè)備。生物傳感器

39、概念：用生物活性物質(zhì)做敏感器件，配以適當(dāng)?shù)?換能器所構(gòu)成的分析工具。第十四章 蛋白質(zhì)工程 蛋白質(zhì)工程概念。蛋白質(zhì)工程（Protein Engineering） 以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ)，通過化學(xué)和 物理手段，對目標(biāo)基因按預(yù)期設(shè)計進(jìn)行修飾和改造，合成新的蛋白；對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)加以定向改造、設(shè)計和構(gòu)建，最終生產(chǎn)出比自然界存在的蛋白質(zhì)更優(yōu)良、更符合人類需求的功能蛋白質(zhì)。 簡述反向生物學(xué)的途徑。 （按期望的結(jié)構(gòu)尋找最合適的氨基酸序列，通過計算機(jī)設(shè)計，進(jìn)而模擬特定的氨基酸序列在細(xì)胞內(nèi)或在體內(nèi)環(huán)境中進(jìn)行多肽折疊而成三維結(jié)構(gòu)的全過程，并預(yù)測蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和表達(dá)出生物學(xué)功能的可能及其生物活性的高低。）

40、什么是蛋白質(zhì)組學(xué)？研究基因組編碼的所有蛋白質(zhì)及其動態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)。第十五章 生物技術(shù)與農(nóng)業(yè) 何為雄性不育？雄性不育（male-sterility）：是指不能產(chǎn)生有功能 的雄性配子而失去生殖功能的特性。雄性不育性 在植物界普遍存在，其中包括玉米、水稻、小麥、 高粱、油菜、棉花等主要農(nóng)作物。 三系雜交稻為哪三系？三系是指雄性不育系、保持系和恢復(fù)系。不育系為生產(chǎn)大量的雜交種子提供了可能性，借助保持系來繁殖不育系，用恢復(fù)系給不育系授粉來生產(chǎn) 雄性恢復(fù)且有優(yōu)勢的雜交稻。 簡述蘇云金芽孢桿菌的殺蟲機(jī)理。 何為生物農(nóng)藥，有什么優(yōu)缺點？生物農(nóng)藥：用來防治病、蟲、草等有害生物的生物體本身或源于生物體，并可作為

41、“農(nóng)藥”的各種生理活性物質(zhì)?？煞譃樯矬w農(nóng)藥和生物化學(xué)農(nóng)藥。優(yōu)點： 對人畜毒性小、只殺害蟲、與環(huán)境相容性好、病蟲不易產(chǎn)生抗性。缺點： 在生產(chǎn)、儲藏、運(yùn)輸和使用過程中對環(huán)境條件的要求十分苛刻；田間效應(yīng)不一致；成本上無法與化學(xué)農(nóng)藥競爭；適用面窄低等。 胚胎移植與核移植的概念。胚胎移植：將一頭良種母畜配種后的早期胚胎取出，移植到另一頭同種的生理狀態(tài)相同的母畜體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成為新個體。核移植：將動物早期胚胎或體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的受精卵或成熟卵母細(xì)胞中、重新構(gòu)建新的胚胎，使重構(gòu)胚發(fā)育為與供核細(xì)胞基因型相同后代的技術(shù)，又稱動物克隆技術(shù)。第十六章 生物技術(shù)與食品 什么是單細(xì)胞蛋白？ 單細(xì)胞蛋白（s

42、ingle cell protein, SCP）： 也稱微生物蛋白，它是通過單細(xì)胞或絲狀微生物個體生產(chǎn)出來的蛋白，是一種混合物。 酒精發(fā)酵微生物主要是指什么？ 釀酒酵母，這種微生物可以利用單糖，將它們轉(zhuǎn)化成酒精。 奶制品發(fā)酵主要依靠哪種微生物？ 乳酸桿菌 舉例說明食品發(fā)酵的用途。第十七章 生物技術(shù)與人類健康 什么是疫苗？疫苗（vaccine）：用減毒或殺死的病原生物(細(xì)菌、病毒、立克次體等)或其抗原性物質(zhì)所制成的，可使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫的生物制劑。 細(xì)胞免疫和體液免疫的概念。細(xì)胞免疫：抗原進(jìn)入機(jī)體后，產(chǎn)生致敏T淋巴細(xì)胞，然后T淋巴細(xì)胞破壞被病原體感染的細(xì)胞而殺滅病原體。（T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫）

43、體液免疫：通過抗體與體液中的致病源結(jié)合形成復(fù)合物，直接消滅致病源。（抗體介導(dǎo)的免疫） RFLP是指什么？限制性片段長度多態(tài)性（Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP）：由于堿基的改變 導(dǎo)致DNA上的某個限制性內(nèi)切核酸酶水解位點增加或減少，當(dāng)用限制性酶水解時，產(chǎn)生的DNA片段數(shù)將相應(yīng)的增加或減少，這種DNA片段的變化稱為限制性片段長度多態(tài)性。 什么是基因治療，有何優(yōu)點？基因治療（gene therapy）： 將正常有功能的基因?qū)肴梭w，以基因作為藥物治療疾病。（1）基因治療的特異性，針對性強(qiáng)； （2）藥物本質(zhì)為DNA； DNA在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)

44、成 為蛋白質(zhì)； （3）基因治療作用的持續(xù)性。第十八章 生物技術(shù)與能源 什么是生物燃料？ 生物燃料（Biofuel）：利用植物及植物資源生產(chǎn)的燃料，包括生物乙醇（bioethanol）和生物柴油（biodiesel）。 為什么當(dāng)今世界要積極發(fā)展生物質(zhì)能源？ 1. 滿足未來的能源需求2. 減少溫室氣體的排放第十九章 生物技術(shù)與環(huán)境 生物修復(fù)的概念。生物修復(fù)（bioremediation）：利用生物，特別是微生物的代謝活動來減少或清除污染環(huán)境中的化學(xué)污染物的過程。第二十章 對生物技術(shù)創(chuàng)新發(fā)明的保護(hù) 專利的概念、特性。專利：由專利局授權(quán)許可的一種合法權(quán)利，它以國家立法形式賦予發(fā)明創(chuàng)造以產(chǎn)權(quán)屬性（經(jīng)濟(jì)權(quán)

45、利和精神權(quán)利），并以國家行政和司法力量確保 這些權(quán)利得以實現(xiàn)。專利權(quán)的三個特性：獨占性；地域性；時間性。 發(fā)明專利必備的條件。授予專利的發(fā)明必須滿足4個條件： 發(fā)明必須具有實用性； 發(fā)明必須具有創(chuàng)造性； 發(fā)明必須具有新穎性； 在申請專利說明書中對發(fā)明做詳盡的描述，使在同一領(lǐng)域的其他人能夠了解執(zhí)行。 基因技術(shù)的專利客體包括哪些？基因技術(shù)的專利客體： 基因序列專利 基因技術(shù)專利 轉(zhuǎn)基因生物專利 中國轉(zhuǎn)基因生物專利： 轉(zhuǎn)基因微生物（只對技術(shù)處理過的微生物進(jìn)行保護(hù)） 轉(zhuǎn)基因植物（只對方法進(jìn)行專利保護(hù)） 轉(zhuǎn)基因動物（不進(jìn)行專利保護(hù)） 生物類制品專利 對生物技術(shù)發(fā)明的主要保護(hù)手段及其優(yōu)缺點。保護(hù)形式： 專

46、利、商業(yè)秘密和一些特殊的保護(hù)形式。一、專利保護(hù)專利保護(hù)的缺陷 Ø為了在全球范圍內(nèi)獲得專利權(quán)，專利發(fā)明人必須 在每一個國家都提出專利申請，這樣不僅浪費(fèi)金錢，而且成效有限； Ø在申請專利時必須將專利內(nèi)容公布，一旦專利失 效，則可以為任何人所利用。二、商業(yè)秘密商業(yè)秘密是除專利以外的另一種保護(hù)形式。 優(yōu)勢： 保密的信息不公開而使得競爭對手無法利用，并且保護(hù)的時間可以無限長。 缺點： 執(zhí)行困難，法律保護(hù)不夠完善三、生物技術(shù)發(fā)明的其他保護(hù)形式 防御性出版 未披露信息 實驗數(shù)據(jù) 新藥證書網(wǎng)上找的一些樣卷資料：樣卷一、 名詞解釋 1. 基因工程：分子水平的遺傳

47、工程，按照人的意愿將某一生物的遺傳信息轉(zhuǎn)移到另一生物體內(nèi)，以改變其生物機(jī)能或創(chuàng)造新生物物種的技術(shù)。 2.蛋白質(zhì)工程：通過改造與蛋白質(zhì)相對應(yīng)的基因中堿基順序，或設(shè)計合成新的基因，將它克隆到受體細(xì)胞，通過基因表達(dá)獲得新的特性的蛋白質(zhì)技術(shù)。 3.同尾酶：指識別序列不同，但是酶切DNA分子產(chǎn)生的DNA片段具有相同的粘性末端的一組限制性內(nèi)切核酸酶。 4.轉(zhuǎn)化：通過生物學(xué)、物理學(xué)和化學(xué)等方法使外源裸露DNA進(jìn)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)的過程。 5.包埋法：是將酶包埋在高聚物凝膠網(wǎng)格中或高分子半透膜內(nèi)的固定方法。 6.cDNA文庫：某種生物基因

48、組轉(zhuǎn)錄的全部mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的各種cDNA片段分別與克隆載體重組，貯存在一種受體菌克隆子群體之中，這樣的群體稱為cDNA文庫。 7.基因組DNA文庫：將某一種基因DNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖袛嗪?，與載體DNA重組，再全部轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，得到含全部基因組DNA的種群，稱為基因組DNA文庫。 8.發(fā)酵：利用微生物在有氧或無氧條件下的生命活動來制備微生物菌體或其代謝產(chǎn)物的過程。 9.生物技術(shù)：綜合運(yùn)用現(xiàn)代生物學(xué)、化學(xué)、工程手段，直接或間接的利用物體、生命體系和生命活動過程生產(chǎn)物質(zhì)的一門高級應(yīng)用技術(shù)科學(xué)。 10.基因克隆載體：把能夠承載外源基因，并將其帶入受體細(xì)胞得

49、以穩(wěn)定維持的DNA分子稱為基因克隆載體。 11.蛋白質(zhì)組學(xué)：研究細(xì)胞內(nèi)所有蛋白質(zhì)及其動態(tài)變化規(guī)律的科學(xué)，在蛋白質(zhì)組層次上揭示生命活動的本質(zhì)及其規(guī)律。 12.基因組文庫:把某種生物基因組的全部遺傳信息通過載體貯存在一個受體菌克隆子群體中，這個群體即為這種生物的基因組文庫。 13.限制性內(nèi)切核酸酶（基因工程P21）:是一類能識別雙鏈DNA中特殊核苷酸序列，并在合適的反應(yīng)條件下使每條鏈一定位點上的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生具有5磷酸基和3羥基的DNA片段的內(nèi)切脫氧核糖核酸酶。 二、填空題 1.脫氧核苷酸分子由脫氧核糖、堿基、磷酸基團(tuán)。2.青霉素發(fā)酵后處理的

50、四個步驟：過濾、提煉、脫色、結(jié)晶。 3.微生物發(fā)酵過程可以分為  好氧性發(fā)酵  過程和  厭氧性發(fā)酵  過程兩大類。 4.酶的發(fā)酵生產(chǎn)方式有兩種：一種是固體發(fā)酵，另一種是  液體深層發(fā)酵  。 5.基因工程操作流程主要包括目的基因分離、與克隆載體重組、轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞、篩選和鑒定克隆子。 6.液體深層發(fā)酵主要有（分批發(fā)酵）（連續(xù)發(fā)酵）（補(bǔ)料發(fā)酵）三種類型。28.DNA的重組類型有（插入重組）（置換重組）。 7.先進(jìn)的工程技術(shù)手段是

51、指：基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程、蛋白質(zhì)工程。其中基因工程是核心技術(shù)。 8.原生質(zhì)體制備過程包括取材與除菌、（酶解）、（分離）、洗滌和鑒定。 9.生物技術(shù)與其他高新技術(shù)一樣具有“六高”的特征既：高效益、高智力、高投入、高競爭、高風(fēng)險、高勢能。 三、簡答題 1.簡述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成。   答：1.碳源 2.氮源 3.無機(jī)鹽和微量元素 4.生長因子 5.水 6.產(chǎn)物形成的誘導(dǎo)物、前體和促進(jìn)劑 2.簡述發(fā)酵的一般過程   答：一般包括

52、菌體制備、種子培養(yǎng)、發(fā)酵和提取精制等幾個過程。 3.簡述酶制劑的制備流程。   答：酶制劑的制備流程一般包括破碎細(xì)胞溶劑提取、離心、過濾、濃縮和干燥這幾個步驟。4. 酶可分成哪幾類？ 答：氧化還原酶類；轉(zhuǎn)移酶類；水解酶類；裂合酶類；異構(gòu)酶類；連接酶（合成酶）類 5. 蛋白質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)主要包括哪些？ 答：氨基酸組成、肽鍵數(shù)目、末端組成、氨基酸排列順序、二硫鍵位置。 6.由于載體的物理性質(zhì)對酶與底物作用的影響，酶的性質(zhì)會發(fā)生哪些變化？ 答：1酶活力的變化；2酶穩(wěn)定提高；3最適pH的變化；4

53、最適溫度的變化；5動力學(xué)常數(shù)的變化。 7.分子標(biāo)記技術(shù)與動物育種的方法的作用 答：1構(gòu)建分子遺傳圖譜和基因定位；2基因的檢測、分離和克?。?親緣關(guān)系的分析；4DNA標(biāo)記輔助育種；5性別鑒定與控制。 8.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的分離方法有哪些？ 答：1離子交換層析；2層析聚焦；3電泳；4等電聚焦電泳。 9.簡述植物組織培養(yǎng)要經(jīng)歷的階段。 答：預(yù)備階段。誘導(dǎo)去分化階段。繼代增殖階段。生根發(fā)芽階段。移栽成活階段。 10.現(xiàn)代發(fā)酵工程的主要內(nèi)容是什么？ 答：1.生產(chǎn)菌種的選育 2.發(fā)酵條件的優(yōu)化與控制 &#

54、160;3.反應(yīng)器的設(shè)計與產(chǎn)物的分離  4.提取與精制。 11.作為基因克隆載體一般應(yīng)具備的條件是什么？ 答：（1）具有與特定受體細(xì)胞相適應(yīng)的復(fù)制位點或整合位點。 （2）進(jìn)入受體細(xì)胞后能進(jìn)行自我復(fù)制。（3）含有供選擇轉(zhuǎn)化子的標(biāo)記基因。（4）必須具有安全性。 13.酶的發(fā)酵生產(chǎn)過程中，提高酶產(chǎn)量的措施有？ 1）添加誘導(dǎo)物。2）控制阻遏物濃度。3）表面活性劑。4）添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑。 14.基因工程的理論依據(jù)？ 1）不同基因具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ)。2）基因是可以切割的。3）基因是可以轉(zhuǎn)移的。4）多肽與基因之間存在對應(yīng)

55、關(guān)系。5）遺傳密碼是通用的。6）基因可以通過復(fù)制吧遺傳信息傳遞給下一代。 15.雙親本原生質(zhì)體經(jīng)融合后形成的雜合體的鑒別與篩選方法？ 1）顯微鏡鑒別。2）互補(bǔ)法篩選雜合細(xì)胞。3）采用細(xì)胞與分子生物學(xué)的方法鑒別雜合體。4）根據(jù)再生長出的植株的形態(tài)特征進(jìn)行鑒別。 1、目前已知具有生產(chǎn)價值的發(fā)酵類型？ 1）微生物菌體發(fā)酵。2)微生物酶發(fā)酵。3）微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵。4）微生物的轉(zhuǎn)化發(fā)酵。5）生物工程細(xì)胞的發(fā)酵。 16.蛋白質(zhì)工程的基本途徑？ 從預(yù)期功能出發(fā)，設(shè)計期望的結(jié)構(gòu)，合成目的基因且有效克隆表達(dá)或通過誘變、定向修飾和改造等一系列工序，合成

56、新型優(yōu)良蛋白質(zhì)。 17.分離目的基因的途徑有哪些？  （1）酶切法 （2）PCR法 （3）化學(xué)合成法 （4）基因組或cDNA文庫法 18.酶固定化方法有哪些？ 答：（1）載體結(jié)合法：物理吸附法、離子結(jié)合法、螯合法和共價結(jié)合法 （2）共價交聯(lián)法（3）包埋法：聚合物包埋法、疏水相互作用、微膠囊和脂質(zhì)體包埋 19.根據(jù)氨基酸中側(cè)鏈R基的極性性質(zhì)，組成蛋白質(zhì)的20種常見的氨基酸可以分為哪幾組？ 答：（1）非極性R基氨基酸。（2）不帶電荷的極性R基氨基酸。（3）帶正電荷的R基氨基酸。（4）帶負(fù)電

57、荷的R基酸性氨基酸。 20.簡述載體的功能。 答：運(yùn)送外源基因高效轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞。為外源基因提供復(fù)制能力或整合能力。為外源基因的擴(kuò)增或表達(dá)提供必要的條件。 四.問答題 1.下游加工過程包括哪幾個階段？ 答：1.發(fā)酵液預(yù)處理；2.提??；3.精制；4.成品加工。 酶進(jìn)行修飾時應(yīng)注意：1.修飾劑的要求； 2.酶性質(zhì)的了解； 3.反應(yīng)條件的選擇。 2. 蛋白質(zhì)的主要功能是什么？ 答：1. 執(zhí)行酶的催化作用，使新陳代謝有序進(jìn)行，從而表現(xiàn)出各種生命現(xiàn)象；2. 激素的調(diào)節(jié)作用，確保

58、正常的生理活動；3. 抗體蛋白，具有防御疾病和抵抗外界病原侵襲的免疫能力；4. 生物膜的重要組成成分，物質(zhì)和信息交流的通路和能量轉(zhuǎn)換的場所 3. 蛋白質(zhì)工程基本任務(wù)是什么? 答：研究蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律與生物學(xué)功能的關(guān)系，對蛋白質(zhì)加以定向修飾改造、設(shè)計與剪切，或設(shè)計全新的蛋白質(zhì)，構(gòu)建生物學(xué)功能更優(yōu)良的新型蛋白質(zhì)。 4. 微生物深層培養(yǎng)的優(yōu)點有： 答：1.微生物懸浮培養(yǎng)許多微生物的最適生長環(huán)境；2.菌體及營養(yǎng)物、產(chǎn)物易于擴(kuò)散，使發(fā)酵可在勻質(zhì)條件下進(jìn)行，便于控制，易于擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模；3.液體輸送方便，易于機(jī)械化操作；4.廠房面積小，生產(chǎn)效率高，已與自動化控制，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定；5.產(chǎn)品易于提取、精制