大學(xué)分子生物學(xué)試題及參考答案_第1頁(yè)
大學(xué)分子生物學(xué)試題及參考答案_第2頁(yè)
大學(xué)分子生物學(xué)試題及參考答案_第3頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、填空題1、分子生物學(xué)研究?jī)?nèi)容主要包括以下四個(gè)方面: DNA重組技術(shù) 、基因表達(dá)調(diào)控研究 基因組、功能基因組與生物信息學(xué) 和 生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究 2、原核生物中一般只有一條染色體且大都帶有單拷貝基因,只有很少數(shù)基因是以多拷貝形式存在,整個(gè)染色體DNA幾乎全部由 功能基因 與 調(diào)控序列 所組成。 3、核小體是由H2A、H2B、H3、H4各兩個(gè)分子生成的 八聚體 和由大約200bp DNA組成的。八聚體在中間,DNA分子盤(pán)繞在外,而 H1 則在核小體的外面。4、錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)根據(jù)“ 保存母鏈 ,修正子鏈 ”的原則,找出錯(cuò)誤堿基所在的DNA鏈,進(jìn)行修復(fù)。 5、基因表達(dá)包括 轉(zhuǎn)錄 和 翻譯 兩個(gè)階段

2、, 轉(zhuǎn)錄階段是基因表達(dá)的核心步驟,翻譯 是基因表達(dá)的最終目的。 6、10位的 TATA 區(qū)和35位的 TTGACA 區(qū)是RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn),能與因子相互識(shí)別而具有很高的親和力。 7、核糖體小亞基負(fù)責(zé) 對(duì)模板mRNA進(jìn)行序列特異性識(shí)別 ,大亞基負(fù)責(zé) 攜帶氨基酸及tRNA的功能 8、DNA后隨鏈合成的起始要一段短的_ RNA引物_,它是由_ DNA引發(fā)酶_ 以核糖核苷酸為底物合成的。 9、幫助DNA解旋的_單鏈DNA結(jié)合蛋白_與單鏈DNA結(jié)合,使堿基仍可參與模板反應(yīng)。 10、真核生物的mRNA加工過(guò)程中,5端加上_帽子結(jié)構(gòu)_,在3端加上_多腺苷化尾_,后者由_ poly(A)聚合酶_催

3、化。如果被轉(zhuǎn)錄基因是不連續(xù)的,那么,_內(nèi)含子_一定要被切除,并通過(guò)_剪接_過(guò)程將_外顯子_連接在一起。這個(gè)過(guò)程涉及很多RNA分子,如U1和U2等,它們被統(tǒng)稱(chēng)為_(kāi) snRNA _。它們分別與一組蛋白質(zhì)結(jié)合形成_ snRNP _,并進(jìn)一步地組成40S或60S的結(jié)構(gòu),叫_剪接體_。二、選擇題 1、c 2、a 3、d 4、b 5、b 6、ace 7、c 8、bc 9、ac 10、cd1、證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是:肺炎鏈球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是:( C ) (a)從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA,作為疾病的致病劑 (b)DNA突變導(dǎo)致毒

4、性喪失 (c)生物體吸收的外源DNA(而并非蛋白質(zhì))改變了其遺傳潛能 (d)DNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的,因此它一定是一種非常保守的分子 2、1953年Watson和Crick提出:( A ) (a)多核苷酸DNA鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋 (b)DNA的復(fù)制是半保留的,常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈 (c)三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼 (d)遺傳物質(zhì)通常是DNA 而非RNA 3、原核細(xì)胞信使RNA含有幾個(gè)功能所必需的特征區(qū)段,它們是:( D ) (a)啟動(dòng)子,SD序列,起始密碼子,終止密碼子,莖環(huán)結(jié)構(gòu) (b)啟動(dòng)子,轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),前導(dǎo)序列,由順?lè)醋娱g區(qū)序列隔開(kāi)的SD序列和ORF,尾部序列,

5、莖環(huán)結(jié)構(gòu) (c)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),尾部序列,由順?lè)醋娱g區(qū)序列隔開(kāi)的SD序列和ORF,莖環(huán)結(jié)構(gòu) (d)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),前導(dǎo)序列,由順?lè)醋娱g區(qū)序列隔開(kāi)的SD序列和ORF,尾部序列 4、下面哪一項(xiàng)是對(duì)三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的正確描述( B ) (a)因子、核心酶和雙鏈DNA在啟動(dòng)子形成的復(fù)合物 (b)全酶、模板DNA和新生RNA形成的復(fù)合物 (c)三個(gè)全酶在轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)形成的復(fù)合物 (d)因子、核心酶和促旋酶形成的復(fù)合物 5、色氨酸操縱子的調(diào)控作用是受兩個(gè)相互獨(dú)立的系統(tǒng)控制的,其中一個(gè)需要前導(dǎo)肽的翻譯,下面哪一個(gè)調(diào)控這個(gè)系統(tǒng)?( B ) (a)色氨酸 (b)色氨酰-tRNATrp (c)色氨酰-tRNA (d)cA

6、MP 二)多選題 6、DNA的變性:( ACE ) (a)包括雙螺旋的解鏈 (b)可以由低溫產(chǎn)生 (c)是可逆的 (d)是磷酸二酯鍵的斷裂 (e)包括氫鍵的斷裂 7、DNA在30nm纖絲中壓縮多少倍?( C ) (a)6倍 (b)10倍 (c)40倍 (d)240倍8、tRNA參與的反應(yīng)有:( BC ) (a)轉(zhuǎn)錄 (b)反轉(zhuǎn)錄 (c)翻譯 (d)前體mRNA的剪接 9、對(duì)于一個(gè)特定的起點(diǎn),引發(fā)體的組成包括:( AC ) (a)在起始位點(diǎn)與DnaG引發(fā)酶相互作用的一個(gè)寡聚酶 (b)一個(gè)防止DNA降解的單鏈結(jié)合蛋白 (c)DnaB解旋酶和附近的DnaC,DnaT,PriA等蛋白 (d)DnaB,

7、單鏈結(jié)合蛋白, DnaC,DnaT,PriA蛋白和DnaG引發(fā)酶 (e)DnaB解旋酶,DnaG引發(fā)酶和DNA聚合酶lll 10、下面哪些真正是乳糖操縱子的誘導(dǎo)物?( CD ) (a)乳糖 (b)ONPG (c)異丙基-半乳糖苷 (d)異乳糖 三、判斷題1、錯(cuò) 2、錯(cuò) 3、正確 4、正確 5、正確 6、錯(cuò) 7。對(duì)8、對(duì)9、對(duì) 10對(duì)1、高鹽和低鹽條件下由DNA 單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性,這一過(guò)程可看作是一個(gè)復(fù)性(退火)反應(yīng)。( ) 2、B型雙螺旋是DNA的普遍構(gòu)型,而Z型則被確定為僅存在于某些低等真核細(xì)胞中。( ) 3、所謂半保留復(fù)制就是以DNA親本鏈作為合成新子鏈DNA的模

8、板,這樣產(chǎn)生的新的雙鏈DNA分子由一條舊鏈和一條新鏈組成。( ) 4、“模板”或“反義”DNA鏈可定義為:模板鏈?zhǔn)潜籖NA 聚合酶識(shí)別并合成一個(gè)互補(bǔ)的mRNA,這一mRNA是蛋白質(zhì)合成的模板。( ) 5、DNA的5-3合成意味著當(dāng)在裸露3-OH的基團(tuán)中添加dNTP時(shí),除去無(wú)機(jī)焦磷酸DNA鏈就會(huì)伸長(zhǎng)。( ) 6、在先導(dǎo)鏈上DNA沿5-3方向合成,在后隨鏈上則沿3-5方向合成。( ) 7、多順?lè)醋觤RNA是協(xié)同調(diào)節(jié)的原因。( ) 8、Lac阻遏物是一種由4個(gè)相同的亞基組成的四聚體。( ) 9、CAP和CRP蛋白是相同的。( ) 10、AraC蛋白既可以作為激活蛋白,又可以作為阻遏蛋白起作用。( )

9、 三、判斷題四、名詞解釋 2、堿基切除修復(fù) 研究發(fā)現(xiàn),所有細(xì)胞中都帶有不同類(lèi)型、能識(shí)別受損核酸位點(diǎn)的糖苷水解酶,它能特異性切除受損核苷酸上的N-糖苷鍵,在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點(diǎn),統(tǒng)稱(chēng)為AP位點(diǎn)。DNA分子中一旦產(chǎn)生了AP位點(diǎn),AP核酸內(nèi)切酶就會(huì)把受損核苷酸的糖苷-磷酸鍵切開(kāi),并移去包括AP位點(diǎn)核苷酸在內(nèi)的小片段DNA,由DNA聚合酶I合成新的片段,最終由DNA連接酶把兩者連成新的被修復(fù)的DNA鏈。 3、有意義連(sense strand) 與mRNA序列相同的那條DNA鏈稱(chēng)為編碼鏈(coding strand)或稱(chēng)有意義連(sense strand)。4、鋅指結(jié)構(gòu) 鋅指結(jié)構(gòu)家族蛋白大

10、體可分為鋅指、鋅鈕(twist)和鋅簇(cluster)結(jié)構(gòu),其特有的半胱氨酸和組氨酸殘基之間氨基酸殘基數(shù)基本恒定,有鋅參與時(shí)才具備轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性。重復(fù)的鋅指樣結(jié)構(gòu)都是以鋅將一個(gè)螺旋與一個(gè)反向平行片層的基部以鋅原子為中心,通過(guò)與一對(duì)半胱氨酸和一對(duì)組氨酸之間形成配位鍵相連接,鋅指環(huán)上突出的賴(lài)氨酸、精氨酸參與DNA的結(jié)合。 5、物理圖 人類(lèi)基因組的物理圖是指以已知核苷酸序列的DNA片段(序列標(biāo)簽位點(diǎn),sequence-tagged site,STS)為“路標(biāo)”,以堿基對(duì)(bp,kb,Mb)作為基本測(cè)量單位(圖距)的基因組圖。任何DNA序列,只要知道它在基因組中的位置,都能被用作STS標(biāo)簽。物理圖的主

11、要內(nèi)容是建立相互重疊連接的“相連DNA片段群”(contigs),并用PCR方法予以證實(shí)。五、簡(jiǎn)答題 1、解釋在DNA復(fù)制過(guò)程中,后隨鏈?zhǔn)窃鯓雍铣傻?。后隨鏈的引發(fā)過(guò)程往往由引發(fā)體(primosome)來(lái)完成。引發(fā)體由6種蛋白質(zhì)n、n'、n''、Dna B、C和I共同組成,只有當(dāng)引發(fā)前體(preprimosome)把這6種蛋白質(zhì)合在一起并與引發(fā)酶(primase)進(jìn)一步組裝后形成引發(fā)體,才能發(fā)揮其功效。引發(fā)體像火車(chē)頭一樣在滯后鏈分叉的方向上前進(jìn),并在模板上斷斷續(xù)續(xù)地引發(fā)生成滯后鏈的引物RNA短鏈,再由DNA聚合酶III作用合成DNA,直至遇到下一個(gè)引物或?qū)槠螢橹?。由R

12、Nase H降解RNA引物并由DNA聚合酶I將缺口補(bǔ)齊,再由DNA連接酶將兩個(gè)岡崎片段連在一起形成大分子DNA。 3、轉(zhuǎn)座作用的遺傳學(xué)效應(yīng)。轉(zhuǎn)座引起插入突變。轉(zhuǎn)座產(chǎn)生新的基因。轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的染色體畸變。轉(zhuǎn)座引起的生物進(jìn)化。 4、因子的作用。 亞基可能與核心酶的組裝及啟動(dòng)子識(shí)別有關(guān),并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用。因子可以極大地提高RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子區(qū)DNA序列的親和力。 因子的作用是負(fù)責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始,它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物,使酶專(zhuān)一性識(shí)別模板上的啟動(dòng)子。因子不僅增加聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的親和力,還降低了它對(duì)非專(zhuān)一位點(diǎn)的親和力。 5、原核與真核生物mRNA的特征比較。 原核生物mRN

13、A的特征:1. 半衰期短。2. 許多原核生物mRNA以多順?lè)醋拥男问酱嬖凇?. 原核生物mRNA的5端無(wú)帽子結(jié)構(gòu),3端沒(méi)有或只有較短的多聚(A)結(jié)構(gòu)。 真核生物mRNA的特征:1. 真核生物mRNA的5端存在“帽子”結(jié)構(gòu)。2. 絕大多數(shù)真核生物mRNA具有多聚(A)尾巴。 6、I類(lèi)內(nèi)含子的自我剪切過(guò)程。 在I類(lèi)內(nèi)含子切除體系中,鳥(niǎo)苷或鳥(niǎo)苷酸的3-OH作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子5端的磷酸二酯鍵,從上游切開(kāi)RNA鏈。再由上游外顯子的自由3-OH作為親核基團(tuán)攻擊內(nèi)含子3位核苷酸上的磷酸二酯鍵,使內(nèi)含子被完全切開(kāi),上下游兩個(gè)外顯子通過(guò)新的磷酸二酯鍵相連。 7、Sanger雙脫氧鏈終止法。 英國(guó)劍橋大學(xué)分子

14、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的F. Sanger等人于1977年發(fā)明了利用DNA聚合酶的雙脫氧鏈終止原理測(cè)定核苷酸序列的方法。由于這種方法要求使用一種單鏈DNA模板和一種適當(dāng)?shù)腄NA引物,因此有時(shí)也稱(chēng)為引物合成法或酶催引物合成法。它利用了DNA聚合酶所具有的兩種酶催反應(yīng)的特性:第一,DNA聚合酶能夠利用單鏈的DNA作模板,合成出準(zhǔn)確的DNA互補(bǔ)鏈;第二,DNA聚合酶能夠利用2',3'-雙脫氧核苷三磷酸作底物,將其摻入到寡核苷酸鏈的3'-末端,從而終止DNA鏈的生長(zhǎng)。 9、假定你從一新發(fā)現(xiàn)的病毒中提取了核酸。請(qǐng)用最簡(jiǎn)單的方法確定:1)它是DNA還是RNA?(2)它是單鏈還是雙鏈?確定堿基

15、比率。如果有胸腺嘧啶,為DNA,如果有尿嘧啶,則為RNA。如果為雙鏈分子,那么A與T(或U)的量以及G或C的量應(yīng)相等。10、熱激蛋白調(diào)控的基因表達(dá)機(jī)制。 許多生物在最適溫度范圍以上,能受熱誘導(dǎo)合成一系列熱休克蛋白(heat shock protein)。受熱后,果蠅細(xì)胞內(nèi)Hsp70 mRNA水平提高1 000倍,就是因?yàn)闊峒ひ蜃樱╤eat shock factor,HSF)與hsp70基因TATA區(qū)上游60bp處的HSE相結(jié)合,誘發(fā)轉(zhuǎn)錄起始。 在沒(méi)有受熱或其他環(huán)境脅迫時(shí),HSF主要以單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)和核內(nèi)。單體HSF沒(méi)有DNA結(jié)合能力,Hsp70可能參與了維持HSF的單體形式。受到熱激或

16、其他環(huán)境脅迫時(shí),細(xì)胞內(nèi)變性蛋白增多,它們都與HSF競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合Hsp70,從而釋放HSF,使之形成三體并輸入核內(nèi)。HSF一旦形成三體,便擁有與HSE特異結(jié)合、促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄的功能。這種能力可能還受磷酸化水平的影響,因?yàn)闊峒ひ院螅琀SF不但形成三體,還會(huì)迅速被磷酸化。HSF與HSE的特異性結(jié)合,引起包括Hsp70在內(nèi)的許多熱激應(yīng)答基因表達(dá),大量產(chǎn)生Hsp70蛋白。隨著熱激溫度消失,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量游離的Hsp70蛋白,它們與HSF相結(jié)合,形成沒(méi)有DNA結(jié)合能力的單體并脫離DNA。 六、問(wèn)答題 1、描述蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程。 要點(diǎn):蛋白質(zhì)的生物合成是一個(gè)比DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄更為復(fù)雜的過(guò)程。它包括:翻譯的起始

17、核糖體與mRNA結(jié)合并與氨基酰-tRNA生成起始復(fù)合物。  肽鏈的延伸由于核糖體沿mRNA5' 端向3' 端移動(dòng),開(kāi)始了從N端向C端的多肽合成,這是蛋白質(zhì)合成過(guò)程中速度最快的階段。 肽鏈的終止及釋放。核糖體從mRNA上解離,準(zhǔn)備新一輪合成反應(yīng)。 2、比較原核生物和真核生物基因調(diào)控的異同點(diǎn)。 1、轉(zhuǎn)錄因子是與稱(chēng)之效應(yīng)成分的特殊的DNA序列相互作用的DNA結(jié)合蛋白,效應(yīng)成分位于基因的調(diào)節(jié)區(qū)或啟動(dòng)子區(qū)。 在細(xì)菌系統(tǒng)中,這些效應(yīng)成分稱(chēng)為操縱基因部位。轉(zhuǎn)錄因子激活還是阻遏轉(zhuǎn)錄取決于啟動(dòng)子前后序列和細(xì)胞的生理狀態(tài)。轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合活性常常可以被效應(yīng)分子調(diào)節(jié)。2、E.

18、coli 中的lac操縱子是由一套編碼用于乳糖代謝的酶的基因。這些基因被轉(zhuǎn)錄為單一一條順?lè)醋觤RNA的一部分。lac操縱子的轉(zhuǎn)錄受到LacI阻遏物和CAP的調(diào)控。乳糖和其它的半乳糖苷,例如IPTG結(jié)合LacI阻遏物并且使它的特殊序列結(jié)合活性下降1000倍。在乳糖存在下,lac操縱子被轉(zhuǎn)錄,合成乳糖代謝需要的蛋白質(zhì)。 3、CAP是lac操縱子的正調(diào)節(jié)劑,當(dāng)存在乳糖(LacI是非活性的)并且葡萄糖水平低時(shí),它能夠很強(qiáng)地促進(jìn)lac表達(dá)。在這樣的條件下,CAP-cAMP復(fù)合物結(jié)合lac操縱基因并直接與RNA聚合酶的亞基相互作用。人們認(rèn)為這種相互作用可以促進(jìn)RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)子和開(kāi)放起始復(fù)合物的形成。

19、 4、ara操縱子受到AraC活性的正調(diào)節(jié),AraC既可以作為ara操縱子轉(zhuǎn)錄的阻遏物,也可以作為它的激活劑,主要取決于細(xì)胞內(nèi)阿拉伯糖和葡萄糖的濃度。在缺少阿拉伯糖時(shí),AraC是一個(gè)阻遏物結(jié)合位于ara操縱子內(nèi)的兩個(gè)分開(kāi)的操縱基因部位,導(dǎo)致一個(gè)抑制DNA環(huán)的形成。然而當(dāng)阿拉伯糖存在以及CAP-cAMP復(fù)合物存在時(shí),抑制DNA環(huán)被破壞,CAP-cAMP復(fù)合物能促進(jìn)ara操縱子的轉(zhuǎn)錄。 5、trp操縱子從兩個(gè)水平上控制色氨酸生物合成酶的生產(chǎn), 取決于細(xì)胞內(nèi)色氨酸的濃度。當(dāng)色氨酸水平高時(shí),Trp阻遏物-色氨酸復(fù)合物形成,Trp阻遏物結(jié)合trp操縱子抑制轉(zhuǎn)錄。 第二水平調(diào)控稱(chēng)之衰減作用,當(dāng)Trp-tR

20、NATrp豐富時(shí)和一個(gè)終止結(jié)構(gòu)形成時(shí),衰減作用使得轉(zhuǎn)錄提前終止,導(dǎo)致RNA聚合酶從DNA上脫落下來(lái)。   6、甾類(lèi)激素受體是配體依賴(lài)性的轉(zhuǎn)錄因子,它們通過(guò)與靶基因應(yīng)答成分結(jié)合將激素信號(hào)直接轉(zhuǎn)導(dǎo)到核。這些受體是誘導(dǎo)還是阻遏轉(zhuǎn)錄取決于配體的可利用性和啟動(dòng)子的前后序列。甾類(lèi)激素受體以同源二聚體與回文DNA序列結(jié)合。  7、大多數(shù)轉(zhuǎn)錄因子都含有功能結(jié)構(gòu)域,這些因子中的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域大體有螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋(helix-turn-helix)、鋅指(zinc fingers)和亮氨酸拉鏈(leucine zippers)3種主要類(lèi)型。螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋基元由兩個(gè)-螺旋和一個(gè)-轉(zhuǎn)角組成,

21、用來(lái)結(jié)合許多原核生物和某些真核生物中的特異的DNA序列;鋅指基元是由鋅離子通過(guò)配位鍵與組氨酸和半胱氨酸殘基形成的,不同蛋白中的鋅指數(shù)目不同,鋅指蛋白TFIIIA通過(guò)結(jié)合于基因的轉(zhuǎn)錄部分內(nèi)的控制區(qū)調(diào)控小的核糖體RNA(5SrRNA)的轉(zhuǎn)錄。 在亮氨酸拉鏈基元中相鄰鏈內(nèi)的亮氨酸象兩手手指那樣交叉鎖住,提供了可將兩個(gè)-螺旋結(jié)合在一起的疏水堆積相互作用。這種基元被不同的真核生物轉(zhuǎn)錄因子用來(lái)產(chǎn)生用于結(jié)合DNA的二聚體結(jié)構(gòu)。3、衰減作用如何調(diào)控大腸桿菌中色氨酸操縱子的表達(dá)? 轉(zhuǎn)錄的弱化理論認(rèn)為mRNA轉(zhuǎn)錄的終止是通過(guò)前導(dǎo)肽基因的翻譯來(lái)調(diào)節(jié)的。因?yàn)樵谇皩?dǎo)肽基因中有兩個(gè)相鄰的色氨酸密碼子,所以這個(gè)前導(dǎo)肽的翻譯

22、必定對(duì)tRNATrp的濃度敏感。當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸的濃度很低時(shí),負(fù)載有色氨酸的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過(guò)兩個(gè)相鄰色氨酸密碼子的速度就會(huì)很慢,當(dāng)4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時(shí),核糖體才進(jìn)行到1區(qū)(或停留在兩個(gè)相鄰的trp密碼子處),這時(shí)的前導(dǎo)區(qū)結(jié)構(gòu)是2-3配對(duì),不形成3-4配對(duì)的終止結(jié)構(gòu),所以轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進(jìn)行,直到將trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因全部轉(zhuǎn)錄。 而當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸濃度高時(shí),核糖體可順利通過(guò)兩個(gè)相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前,核糖體就到達(dá)2區(qū),這樣使2-3不能配對(duì),3-4區(qū)可以自由配對(duì)形成莖-環(huán)狀終止子結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄停止,trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因被關(guān)閉而不再合成色氨酸。所以,弱化子對(duì)RNA聚合酶的影

23、響依賴(lài)于前導(dǎo)肽翻譯中核糖體所處的位置。 一、填空(每空1分,共15分)1.DNA修復(fù)包括3個(gè)步驟: 核酸外切 酶對(duì)DNA鏈上不正常堿基的識(shí)別與切除, DNA聚合酶I 酶對(duì)已切除區(qū)域的重新合成, 連接 酶對(duì)剩下切口的修補(bǔ)。 2.真核生物的序列大致可以分為: 不重復(fù)序列 ,中度重復(fù)序列和高度重復(fù)序列; 3.轉(zhuǎn)座子的類(lèi)型有 單拷貝序列 和 復(fù)合轉(zhuǎn)座子 ,TnA家族和轉(zhuǎn)座噬菌體; 4.RNA的轉(zhuǎn)錄包括轉(zhuǎn)錄啟始, 延伸(延長(zhǎng)) 和終止三過(guò)程; 5.tRNA的種類(lèi)有起始tRNA, 延伸tRNA ,同工tRNA和校正tRNA; 6.蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)可分為兩大類(lèi):若某個(gè)蛋白質(zhì)的合成和運(yùn)轉(zhuǎn)是同時(shí)發(fā)生的,則屬于 翻譯運(yùn)

24、轉(zhuǎn)同步機(jī)制 運(yùn)轉(zhuǎn)同步機(jī)制;若蛋白質(zhì)從核糖體上釋放后才發(fā)生運(yùn)轉(zhuǎn),則屬于 翻譯后運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制 運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制; 7.在PH8.0時(shí)核酸分子帶 負(fù) 電,在電場(chǎng)下向 正 級(jí)移動(dòng); 8.質(zhì)粒DNA及其分離純化的方法主要有 氯化銫密度梯度離心 和堿變性法; 9.乳糖操縱子的體內(nèi)功能性誘導(dǎo)物是 別乳糖 ; 10.染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)呈Y型結(jié)構(gòu),稱(chēng)為 復(fù)制叉 ; 二、選擇選擇 1.C;2.D;3.C;4.A;5.D;6.A;7.A;8.A;9.B;10.C 1.DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)指:(C ); A:是指4種核苷酸的連接及其排列順序,表示了該DNA分子的化學(xué)構(gòu)成; B:是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤(pán)繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)

25、; C:是指兩條多核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。 2.下列哪一種蛋白不是組蛋白的成分( D ) A:H1 B: H2A 、H2B C:H3、H4 D:H5 3.下面那一項(xiàng)不屬于原核生物mRNA的特征( C ) A:半衰期短 B:存在多順?lè)醋拥男问?C:5端有帽子結(jié)構(gòu) D:3端沒(méi)有或只有較短的多聚(A)結(jié)構(gòu) 4.1972年,第一個(gè)用于構(gòu)建重組體的限制性?xún)?nèi)切核酸酶是( A ) A:EcoR I B:EcoB C:EcoC D:EcoR II 5.下面那項(xiàng)不屬于原核生物操縱元的結(jié)構(gòu) DA:?jiǎn)?dòng)子 B:終止子 C:操縱子 D:內(nèi)含子 6.下列敘述不正確的是: AA:共有20個(gè)不同的密碼子代表

26、遺傳密碼 B:每個(gè)核苷三聯(lián)體編碼一個(gè)氨基酸 C:不同的密碼子可能編碼同一個(gè)氨基酸 D:密碼子的第三位具有可變性 7.反密碼子中那個(gè)堿基對(duì)參與了密碼子的簡(jiǎn)并性(搖擺)( A ) A:第一個(gè) B:第二個(gè) C:第一個(gè)與第二個(gè) D:第三個(gè) 8.Shine-Dalgarno順序(SD-順序)是指: AA.在mRNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序 B.在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前8-13個(gè)核苷酸處的順序C.16srRNA3'端富含嘧啶的互補(bǔ)順序 D.啟動(dòng)基因的順序特征 9.下列有關(guān)TATA盒(Hognessbox)的敘述,哪個(gè)是正確的: BA:它位于第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因處 B:它和RNA聚合酶結(jié)

27、合 C:它編碼阻遏蛋白 D:它和反密碼子結(jié)合 10.tRNA的分子結(jié)構(gòu)特征是: CA:密碼環(huán) B:5'-端有-C-C-A C:有反密碼環(huán)和3'-端-C-C-A D:有反密碼環(huán)和5'端-C-C-A 三、  判斷題(每題1分,共10分)1.×2.×3.×4.;5.;×6.;7.×8.×9.;10.;1    雙鏈DNA中作為模板的那條鏈稱(chēng)為有意義鏈;( ) 2    轉(zhuǎn)錄原點(diǎn)記為+1,其上游記為正值,下游記為負(fù)值;( ) 3  

28、;  tRNA都必須通過(guò)A位點(diǎn)到達(dá)P位點(diǎn),再由E位點(diǎn)離開(kāi)核糖體;( ) 4    瓊脂糖凝膠分辨DNA片段的范圍為0.250kb之間,聚丙烯酰胺凝膠,其分辨范圍為1個(gè)堿基對(duì)到1000個(gè)堿基對(duì)之間;( ) 5    在先導(dǎo)鏈上DNA以5>3方向合成,在后隨鏈上則沿3>5方向合成;( ) 6    DNA的復(fù)制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶;( ) 7    在轉(zhuǎn)錄終止子柄部的AT堿基對(duì)可以增強(qiáng)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性;( ) 8    R

29、NA聚合酶同操縱基因結(jié)合( ) 9    轉(zhuǎn)座要求供體和受體位點(diǎn)之間有同源性 10.高等真核生物的大部分DNA是不編碼蛋白質(zhì)的( ) 1突變是指可以通過(guò)復(fù)制而遺傳的DNA結(jié)構(gòu)的任何永久性改變。2啟動(dòng)子是一段位于結(jié)構(gòu)基因5端上游區(qū)的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之與范本DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。 3.翻譯指以新生的mRNA為模板,把核苷酸三聯(lián)遺傳密碼子翻譯成氨基酸序列、合成多肽鏈的過(guò)程,是基因表達(dá)的最終目的。4.基因工程是指在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)粒或其它載體分子,構(gòu)成遺傳物質(zhì)的新組合,使之進(jìn)入原先沒(méi)有這類(lèi)分子的寄主細(xì)胞內(nèi)并進(jìn)行持續(xù)穩(wěn)定的繁殖

30、和表達(dá)。5. 細(xì)菌轉(zhuǎn)化是指一種細(xì)菌菌株由于捕獲了來(lái)自另一種細(xì)菌菌株的DNA而導(dǎo)致性狀特征發(fā)生遺傳改變的生命過(guò)程。6.  基因家族是指真核細(xì)胞中許多相關(guān)的基因常常按功能成套組合,被稱(chēng)為基因家族9.       PCR是一種在體外快速擴(kuò)增特定基因或DNA序列的方法, 即在DNA聚合酶作用下,經(jīng)過(guò)DNA解鏈(變性)、引物與模板DNA相結(jié)合(退火)、DNA合成(鏈的延伸)三步,不斷重復(fù),最終將目的核酸擴(kuò)增的技術(shù)。7. 應(yīng)答元件是指能與某個(gè)(類(lèi))專(zhuān)一蛋白因子結(jié)合,從而控制基因特異表達(dá)的DNA上游序列簡(jiǎn)答題

31、1 簡(jiǎn)述真核生物與原核生物轉(zhuǎn)座模式的異同點(diǎn); 相似處: 靶位點(diǎn)中 stagger cut 序列以DR形式出現(xiàn)在轉(zhuǎn)座因子兩側(cè) 轉(zhuǎn)座因子的IR序列是轉(zhuǎn)座酶的識(shí)讀和作用的位點(diǎn) 轉(zhuǎn)座子的準(zhǔn)確切除將引起靶基因的回復(fù)突變 不同點(diǎn); 原核生物:copy 的復(fù)制與轉(zhuǎn)移;轉(zhuǎn)座與切除是不同的事件;非準(zhǔn)確切除表現(xiàn)缺失,倒位效應(yīng)。真核生物:copy 的復(fù)制與轉(zhuǎn)移,但多 數(shù)情況為切除后再整合;切除、整合、轉(zhuǎn)座為同一事件的不同過(guò)程;非準(zhǔn)確切除主要表現(xiàn)footprint效應(yīng)。2  簡(jiǎn)述原核生物RNA聚合酶各組成部分的主要功能;位于前端的因子使雙鏈解鏈為單鏈;位于尾端的因子使單鏈新聚合為雙鏈、因子的作用是負(fù)責(zé)模板鏈

32、的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始,它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物,使酶專(zhuān)一性識(shí)別模板上的啟動(dòng)子、因子完成 NTP之間的磷酸酯鍵的連接、 因子促使RNApol與非模板鏈(sense strand)結(jié)合 3  簡(jiǎn)述核糖體的活性位點(diǎn)有那些; 核糖體包括至少5個(gè)活性中心,即mRNA結(jié)合部位、結(jié)合或接受AA- tRNA部位(A位)、結(jié)合或接受肽基tRNA的部位、肽基轉(zhuǎn)移部位(P位)及形成肽鍵的部位(轉(zhuǎn)肽酶中心),此外還有負(fù)責(zé)肽鏈延伸的各種延伸因子的結(jié)合位點(diǎn)。 4  簡(jiǎn)述抗菌素對(duì)蛋白質(zhì)合成抑制的可能作用方式; 抗菌素對(duì)蛋白質(zhì)合成的作用可能是阻止mRNA與核糖體結(jié)合(氯霉素),或阻止AA-tRNA與核糖體結(jié)合(四

33、環(huán)素類(lèi)),或干擾AA-tRNA與核糖體結(jié)合而產(chǎn)生錯(cuò)讀(鏈霉素、新霉素、卡那霉素等),或作為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑抑制蛋白質(zhì)合成。5 簡(jiǎn)述分子生物學(xué)研究的三大理論和兩大技術(shù)保證; 三大理論基礎(chǔ):1. 40年代確定了遺傳信息的攜帶者,即基因的分子載體是DNA而不是蛋白質(zhì),解決了遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)問(wèn)題; 2. 50年代提示了DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型和半 保留復(fù)制機(jī)制,解決了基因的自我復(fù)制和世代交替問(wèn)題; 3. 50年代末至60年代,相繼提出了"中心法則"和操縱子學(xué)說(shuō),成功地破譯了遺傳密碼,充分認(rèn)識(shí)了遺傳信息的流動(dòng)和表達(dá)。兩大技術(shù)保證:1.DNA的體外切割和連接,2.DNA的核苷酸序

34、列分析技術(shù)生物學(xué)研究的三大理論和兩大技術(shù)保證; 6  簡(jiǎn)述核酸雜交的原理; 將帶有互補(bǔ)的特定核苷酸序列的單鏈DNA或RNA混合在一起,其相應(yīng)的同源區(qū)段就會(huì)退火形成雙鏈結(jié)構(gòu)。如果退火的核酸來(lái)自不同的生物有機(jī)體,所形成的雙鏈分子就被稱(chēng)為雜種核酸分子8. 述原核生物的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控方式;(1)可誘導(dǎo)調(diào)節(jié) (2)可阻遏調(diào)節(jié)  (1)可誘導(dǎo)調(diào)節(jié)  是指一些基因在特殊的代謝物或化合物的作用下,由原來(lái)關(guān)閉的狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楣ぷ鳡顟B(tài),即在某些物質(zhì)的誘導(dǎo)下使基因活化。 (2)可阻遏調(diào)節(jié)  這類(lèi)基因平時(shí)都是開(kāi)啟的,處在產(chǎn)生蛋白質(zhì)或酶的工作過(guò)程中,由于一些特殊代謝物或化合物的

35、積累而將其關(guān)閉,阻遏了基因的表達(dá)。 六、問(wèn)答題 區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控方式。 A卷           一、填空題: 1.  分子生物學(xué)是從   分子水平     研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)。生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。2.  人類(lèi)基因組包括兩個(gè)部分DNA即 染色體DNA (或單倍體DNA)(核內(nèi)DNA 0.5分)和 染色體外DNA(線(xiàn)粒體DNA)(核外DNA0.5分) 3.   主要的DNA修復(fù)方式: 重組修復(fù)   

36、;   、   切除修復(fù)      和SOS修復(fù)。4. 真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過(guò)   順式作用元件   、  反式作用因子   和RNA聚合酶的相互作用來(lái)完成。5可用于分析基因轉(zhuǎn)錄水平變化的技術(shù)有Northern blot (DNA芯片)(核酸分子雜交0.5分)  和  RT-PCR       。6.  反義

37、RNA    是指能與mRNA互補(bǔ)配對(duì)的RNA分子。7.        基因突變主要是DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變,其分子機(jī)制可以是替換、  插入     或     缺失       等。8.        基因治療的策略:  基因添加(增補(bǔ)) 、 基因干預(yù)   、 基因置換    &

38、#160;、導(dǎo)入自殺基因、基因修飾。9.        在特定環(huán)境信號(hào)刺激下,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為開(kāi)放或增強(qiáng),這種表達(dá)方式稱(chēng)為誘導(dǎo)表達(dá)   ,相反,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降,這種表達(dá)方式稱(chēng)為  阻遏表達(dá)       。10.    寫(xiě)出三種真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法   磷酸鈣共沉淀法  、    電穿孔法       、    DEAE葡

39、聚糖法  、 顯微注射法   、 脂質(zhì)體介導(dǎo)法       。二、單項(xiàng)選擇題:  1.增強(qiáng)子的作用是                                             ( B )

40、A.增強(qiáng)DNA復(fù)制   B.增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄   C.增強(qiáng)基因穩(wěn)定性   D.增強(qiáng)RNA的穩(wěn)定性2.反式作用因子的激活方式不包括                               ( D )A.表達(dá)式調(diào)節(jié)    B.共價(jià)修飾    C.蛋白質(zhì)相互作用    D.DNA成環(huán)3

41、.以下哪項(xiàng)不是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法               ( D )A.基因芯片技術(shù)   B.表達(dá)系列分析   C.差異顯示PCR   D.Western blot4.無(wú)義突變是                            

42、;                     ( B )A.產(chǎn)生另一種氨基酸序列不同的蛋白質(zhì)      B.突變后產(chǎn)生縮短的多肽鏈C.產(chǎn)生的一種氨基酸序列相同的蛋白質(zhì)      D.突變毫無(wú)意義5.質(zhì)粒是                     

43、60;                               ( A )A.環(huán)狀雙鏈DNA   B.線(xiàn)性雙鏈DNA   C.環(huán)狀單鏈DNA   D.線(xiàn)性單鏈DNA6.可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是               &#

44、160;                   ( C )A.生物質(zhì)譜技術(shù)    B.雙向電泳    C.Southern blot    D.RNAi7.以下哪種因素不直接影響轉(zhuǎn)錄的是                          &#

45、160;  ( D )A.啟動(dòng)子    B.阻礙蛋白    C.基因激活蛋白    D.SD序列8.限制性核酸內(nèi)切酶可對(duì)                                       ( A )A.雙鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割  

46、60;B.單鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割 C.多肽鏈的特異部位進(jìn)行切割     D.mRNA的特異部位進(jìn)行切割 9.以下哪項(xiàng)是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)                         ( C ) A.由DNA或RNA組成       B.有單鏈、雙鏈之分 C.操縱子結(jié)構(gòu)         

47、;    D.與組蛋白結(jié)合10.以下哪項(xiàng)屬于啟動(dòng)子和上游啟動(dòng)子元件                        ( C )A.內(nèi)含子    B. 外顯子    C.TATA盒   D.終止子三、簡(jiǎn)答題:     2.簡(jiǎn)述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu) 有三個(gè)結(jié)構(gòu)基因Z、Y、A,(1分),啟動(dòng)子(P)、(1分),操縱元件(O)、(1 分)CAP結(jié)合位點(diǎn)

48、、(1 分),啟動(dòng)子、操縱元件和CAP結(jié)合位點(diǎn)一起構(gòu)成糖操縱子的調(diào)控區(qū)、(1 分)(如果不寫(xiě)調(diào)控區(qū),寫(xiě)I基因是調(diào)節(jié)基因,編碼阻遏蛋白。可給1分)。3.什么是SOS修復(fù)?   指DNA損傷嚴(yán)重時(shí),應(yīng)急而誘導(dǎo)產(chǎn)生的修復(fù)作用,稱(chēng)為SOS修復(fù)。(1)當(dāng)DNA雙鏈發(fā)生高密度大片段損傷, 原有的DNA聚合酶活性減低。(1)細(xì)胞緊急啟動(dòng)應(yīng)急修復(fù)系統(tǒng),誘導(dǎo)產(chǎn)生新的DNA聚合酶或修飾原有的DNA聚合酶。(1) 這種新的DNA聚合酶或修飾的DNA聚合酶活性低, 識(shí)別堿基的精度差,無(wú)校對(duì)功能,(1)因此易造成DNA復(fù)制錯(cuò)誤,甚至引起基因突變。(1)4.什么是錯(cuò)義突變?   &

49、#160;                  由于DNA分子中堿基的取代(1),經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA后,相應(yīng)的密碼子發(fā)生了變化1分, 使決定某一氨基酸的密碼子變?yōu)榱硪环N氨基酸的密碼子, (1) 能使它所編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸組成和排列順序都發(fā)生了改變1分。這種基因突變叫錯(cuò)義突變。(1)5.What is RNA interference (RNAi) ?     RNAi 即RNA干擾(涉)。(1)是將一段短雙鏈的RNA 1分序列導(dǎo)入機(jī)體或細(xì)胞中,

50、(1)誘導(dǎo)機(jī)體或細(xì)胞中與之有同源的序列mRNA發(fā)生降解,(1)導(dǎo)致基因的表達(dá)受到抑制,甚至表達(dá)受到完全抑制的現(xiàn)象。(1)6.簡(jiǎn)述PCR的應(yīng)用?進(jìn)行DNA 1分體外擴(kuò)增1分 , 基因克隆 1分, 分析基因拷貝數(shù)1分, 基因診斷1分。7.What is gene therapy?   基因治療(1分)是將目的基因1分導(dǎo)入靶細(xì)胞內(nèi)(1分),成為宿主細(xì)胞遺傳物質(zhì)的一部分(1分),目的基因表達(dá)產(chǎn)物對(duì)疾病起治療作用(1分)。8.簡(jiǎn)述人類(lèi)基因組計(jì)劃的研究目標(biāo)及研究?jī)?nèi)容研究目標(biāo):  闡明構(gòu)成人類(lèi)的全部DNA的結(jié)構(gòu)(1分);闡明基因的編碼方式和分布特點(diǎn)(1分); 理解基因

51、及其調(diào)控序列之間的相互關(guān)系(1分);理解DNA全部序列所蘊(yùn)藏的意義(1分)。研究?jī)?nèi)容:完成遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜分析(1分)。四、論述題:1.已知一個(gè)基因的cDNA序列,現(xiàn)在要把該基因插入質(zhì)粒載體中,論述其基因克隆的過(guò)程。獲得目的基因(1分).根據(jù)該基因的cDNA序列從cDNA文庫(kù)中獲得(1分); 人工合成(1分); 提取mRNA,RT-PCR擴(kuò)增獲得目的基因(1分). 選擇合適的載體(1分).DNA分子的體外連接(1分). 粘性末端法;平端連接(1分);人工接頭法;同聚體尾法;(1分).將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞(1分).用轉(zhuǎn)化法(1分); 轉(zhuǎn)染法(1分).目的基因的篩選和鑒定

52、(1分).遺傳學(xué)方法(或答抗生素法.或藍(lán)白篩選) (1分);免疫學(xué)方法; 核酸雜交法; PCR技術(shù)(1分); 酶切鑒定.回答問(wèn)題清晰(1分). 2.   論述核酸分子雜交(Southern blot 和Northern blot)的基本原理及其在基因診斷中的應(yīng)用。核酸分子雜交是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)技術(shù)之一,從整體上可分為Southern blot和Northern blot兩大類(lèi)Southern blot用于基因DNA分子的檢測(cè)(1分)。如果基因拷貝數(shù)發(fā)生變化(增多或減少),但基因序列沒(méi)有改變,就可以根據(jù)基因序列合成探針(1分);利用同源互補(bǔ)序列可以退火形成異源雙鏈(1分)

53、的原理,探測(cè)染色體上能與探針結(jié)合的DNA序列(1分)。如果將兩部分綜合起來(lái)作答,需緊扣“探針”、“同源互補(bǔ)序列”、“異源雙鏈”等關(guān)鍵點(diǎn),如用“同源/互補(bǔ)序列”給1分;如答“不同來(lái)源的互補(bǔ)核酸序列”給1分)。Southern blot在基因診斷中多用于檢測(cè)特異性DNA的存在(1分),包括DNA片段的定位和測(cè)定分子量(1分);進(jìn)行限制性酶譜分析(1分)及基因突變分析(1分)。Northern blot則用于RNA分子的檢測(cè),其原理和操作基本過(guò)程與Southern blot相似(1分)。在基因診斷中用于RNA的定性及相對(duì)定量B卷題        &#

54、160; 一、     填空題: 12.   真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過(guò)  順式作用元件(啟動(dòng)子) 、 反式作用因子(轉(zhuǎn)錄因子)  和RNA聚合酶的相互作用來(lái)完成。13.   反義RNA是指能與  mRNA  互補(bǔ)配對(duì)的   RNA      分子。14.  基因突變主要是DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變,其分子機(jī)制可以是替換、   插入   或  &#

55、160;  缺失(倒位)    等。5.Southern blot可用于檢測(cè)DNA ,Northern blot可用于檢測(cè)  RNA        ,  Western blot可用于檢測(cè)  蛋白質(zhì)      6.人類(lèi)基因組計(jì)劃要完成的圖譜有  遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜 和轉(zhuǎn)錄圖譜。7.基因組學(xué)是指闡明整個(gè)  基因組(遺傳物質(zhì))  的

56、結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及基因之間相互作用的科學(xué)。8.在基因治療中常用的抑制基因表達(dá)的方法是   反義RNA   、  RNAi(基因敲除)、核酶或者三鏈DNA技術(shù)。9.基因診斷的主要技術(shù)有  核酸分子雜交     、 PCR擴(kuò)增(RT-PCR)、 DNA序列測(cè)定、DNA芯片技術(shù)。        10.目前腫瘤基因診斷的主要策略有:檢測(cè)腫瘤染色體異位及融合基因,檢測(cè)癌基因和  抑癌基因 

57、  ,檢測(cè)腫瘤相關(guān)病毒,檢測(cè) 腫瘤標(biāo)志物    或mRNA等。二、 單項(xiàng)選擇題:1.能導(dǎo)致蛋白質(zhì)翻譯提前終止的基因突變是_B_A錯(cuò)義突變; B.無(wú)義突變;C同義突變; D移碼突變;2.可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是 A     A. Southern blot   B.雙向電泳   C. 酵母雙雜交   D. RNAi3.生物質(zhì)譜技術(shù)常用于  D     的研究中。A.基因組學(xué)   

58、B.RNA組學(xué)   C.轉(zhuǎn)錄子組學(xué)   D.蛋白質(zhì)組學(xué)4.限制性核酸內(nèi)切酶可對(duì)_A_A雙鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割   B.單鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割 C.多肽鏈的特異部位進(jìn)行切割    D. mRNA的特異部位進(jìn)行切割 5遺傳病的間接基因診斷是檢測(cè)與致病基因連鎖的_C_A.基因突變    B.多態(tài)性   C.遺傳標(biāo)志   D.基因重排6.以下哪項(xiàng)不是基因診斷的特點(diǎn)  D     A.高靈敏度&

59、#160;  B.結(jié)果穩(wěn)定     C.早期診斷   D.依賴(lài)表型改變7.將特定的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞,通過(guò)定位重組,矯正原有的缺陷基因的基因治療策略是   A    A.基因置換   B.基因添加   C.基因干預(yù)  D.基因修飾8.在基因治療中基因轉(zhuǎn)移的生物學(xué)方法是以  B     作為基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng),A.質(zhì)粒載體  B.病毒載體 &

60、#160;C.脂質(zhì)體  D.粘粒9.適合制備單鏈DNA的載體是  B    A.粘性質(zhì)粒     B.M13噬菌體    C.逆轉(zhuǎn)錄病毒     D.腺病毒10分子生物學(xué)是從    D     研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。A.細(xì)胞水平   B.轉(zhuǎn)錄水平    C.翻譯水平   D.分子水平

61、0;       三、 簡(jiǎn)答題:       1. 什么是基因診斷?基因診斷(1分)是利用分子生物學(xué)技術(shù), 從DNA或RNA水平(1分)檢測(cè)基因的存在(1分)、分析結(jié)構(gòu)的變異和表達(dá)狀態(tài)(1分),應(yīng)用基因重組、PCR、核酸雜交、基因芯片的各種分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)疾病或癥狀進(jìn)行診斷基因突變(1分)指遺傳物質(zhì)發(fā)生的可遺傳的變異(1分)?;虻暮塑账嵝蛄薪M成及數(shù)目發(fā)生改變(1分)。常涉及DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)(1分);其分子機(jī)制可以是替換,插入,缺失,重排等(1分)。3. 簡(jiǎn)述切除修復(fù)的大致過(guò)程。切除修復(fù)是修復(fù)DNA損傷最為普遍的方

62、式。修復(fù)過(guò)程需要多種酶的一系列作用(1分),基本步驟如下首先由核酸酶識(shí)別(1分)DNA的損傷位點(diǎn),在損傷部位的5'側(cè)切開(kāi)磷酸二酯鍵。不同的DNA損傷需要不同的特殊核酸內(nèi)切酶來(lái)識(shí)別和切割;由5'3'核酸外切酶將有損傷的DNA片段切除(1分);在DNA聚合酶的催化下,以完整的互補(bǔ)鏈為模板,按5'3'方向DNA鏈,填補(bǔ)已切除的空隙(1分);由DNA連接酶將新合成的DNA片段與原來(lái)的DNA斷鏈連接起來(lái)。這樣完成的修復(fù)能使DNA恢復(fù)原來(lái)的結(jié)構(gòu)(1分)。4. PCR在基因分析和基因診斷中有哪些應(yīng)用?進(jìn)行DNA體外擴(kuò)增1分、基因克隆 1分(或PCR原理2分), 分析基

63、因拷貝數(shù)1分(定性定量分析)(PCR-SSCP或DNA序列分析或甲基化分析) 1分,基因突變的診斷1分5. RNAi技術(shù)的原理是什么?長(zhǎng)雙鏈RNA被細(xì)胞內(nèi)的雙鏈RNA(1分)特異性核酸酶切成21-23個(gè)堿基對(duì)的短雙鏈RNA,稱(chēng)為小干擾性RNA(1分),siRNA與細(xì)胞內(nèi)的某些酶和蛋白質(zhì)形成復(fù)合體(1分),該復(fù)合體可識(shí)別與siRNA有同源序列的mRNA(1分),并在特異的位點(diǎn)將該mRNA切斷(1分)。(或基本意思一致也給分)。6. 葡萄糖不存在和乳糖存在時(shí)乳糖操縱子如何進(jìn)行復(fù)合調(diào)控?葡萄糖不存在CAP1分發(fā)揮正調(diào)控作用1分,乳糖存在,阻遏蛋白由于誘導(dǎo)劑的存在1分而失去負(fù)調(diào)控作用1分,基因被打開(kāi),

64、啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄1分(或基本意思一致也給分)7. 什么是誘導(dǎo)表達(dá)和阻遏表達(dá)?在特定環(huán)境信號(hào)刺激下1,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為開(kāi)放或增強(qiáng)1,這種表達(dá)方式稱(chēng)為誘導(dǎo)表達(dá)1,相反有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降1,這種表達(dá)方式稱(chēng)為阻遏表達(dá)1。(或基本意思一致也給分)8. 基因治療的基本策略有哪些?基因置換(1分):指將特定的目的基因?qū)胩囟?xì)胞,通過(guò)定位重組,以導(dǎo)入的正常基因置換基因組內(nèi)原有的缺陷基因?;蛱砑樱?分):通過(guò)導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因?;蚋深A(yù)(1分):采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá),或者通過(guò)破壞某個(gè)基因的結(jié)構(gòu)而使之不能表達(dá),以達(dá)到治療疾病的目的。自殺基因治療(1分):將“自殺”基

65、因?qū)胨拗骷?xì)胞中,這種基因編碼的酶能使無(wú)毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性代謝物,誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)生“自殺”效應(yīng)1分。(或答基因修飾,基因抑制也給分)  一、判斷題;對(duì)的打“”,錯(cuò)的打“X”)1.現(xiàn)代分子生物學(xué)的研究幾乎都是圍繞核酸和蛋白質(zhì)進(jìn)行的。              ( )          2.原核生物翻譯效率受SD序列順序的影響,與SD序列的位置無(wú)關(guān)。        

66、0;( X )3.重組修復(fù)是先進(jìn)行復(fù)制再進(jìn)行切除修復(fù)。                              ( )4.在同樣的環(huán)境條件下,具有不同遺傳背景的人發(fā)病的幾率或病情的進(jìn)展不同。( )5.點(diǎn)突變是指一個(gè)嘌呤堿基被嘧啶堿基取代或一個(gè)嘧啶堿基被嘌呤堿基取代。 ( X )6.基因診斷可檢測(cè)基因突變引起的疾病,不能檢測(cè)外源性致病基因引起的疾病。( X )7.基因置換是通過(guò)導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞

67、表達(dá)其本身不表達(dá)的基因。         ( )8.差異顯示PCR是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法之一。                ( )9.Northern blot常用于檢測(cè)RNA,  Western blot常用于檢測(cè)DNA。           ( X )10.反義RNA可增強(qiáng)基因表達(dá),RNA干涉可沉默基因表達(dá)。 

68、                    ( X )                二、單項(xiàng)選擇題:  1. 以下哪項(xiàng)屬于真核生物基因的順式作用元件 :   ( C )A.內(nèi)含子    B. 外顯子    C.增強(qiáng)子   D.操縱子      

69、0;  2. 以下哪種病毒的基因組是單股負(fù)鏈RNA:    B )A.SARS冠狀病毒         B.H5N1禽流感病毒         C.呼腸孤病毒            D.人類(lèi)免疫缺陷病毒3. 原核生物與真核生物基因組比較,以下哪項(xiàng)是原核生物的特點(diǎn): ( A )A.基因密度高      

70、0;     B.無(wú)操縱子結(jié)構(gòu)   C.有多基因家族和假基因  D.多復(fù)制起點(diǎn)4.以下不產(chǎn)生高度多態(tài)性的重復(fù)序列是:    ( A )A.大衛(wèi)星DNA  B.小衛(wèi)星DNA  C.微衛(wèi)星DNA   D.回文結(jié)構(gòu)5.當(dāng)DNA損傷嚴(yán)重時(shí),應(yīng)急而誘導(dǎo)產(chǎn)生的修復(fù)作用是以下哪項(xiàng): ( D )A.直接修復(fù)   B.切除修復(fù)   C.重組修復(fù)   D.SOS修復(fù)  

71、0;6.反式作用因子的激活方式不包括:    ( C )A.表達(dá)式調(diào)節(jié)  B.共價(jià)修飾  C. DNA成環(huán)  D. 蛋白質(zhì)相互作用7.真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用主要是反式作用因子與順式作用元件結(jié)合后影響以下哪項(xiàng)的形成:      ( B )A. RNA聚合酶  B. 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物  C.啟動(dòng)子  D.DNA結(jié)合域8.可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是:     ( C )A.生物質(zhì)譜技術(shù)&

72、#160;   B.雙向電泳    C.PCR    D.RNAi9.可用于分析基因轉(zhuǎn)錄水平的變化的是   ( A )A.RT-PCR   B. PCR-SSCP   C.Southern blot   D.DNA測(cè)序10.Southern 雜交的原理是根據(jù)基因序列合成探針,利用同源互補(bǔ)序列可以退火形成: ( A )A. 雜交雙鏈DNA             B. 雜交三鏈DNA C. 雜交雙鏈DNA-RNA         D. 雜交雙鏈RNA11

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