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文檔簡介
1、會計學1化學毒物致突變作用及其評價化學毒物致突變作用及其評價第1頁/共54頁突變突變?nèi)笔笔?deletion):(deletion):重復重復(duplication):(duplication):倒位倒位 (inversion):(inversion):易位易位(translocation):(translocation):整倍體(整倍體(euploideuploid)非整倍體非整倍體(polyploid)(polyploid)數(shù)目異常數(shù)目異常結(jié)構(gòu)異常結(jié)構(gòu)異?;蛲蛔兓蛲蛔儔A基置換堿基置換(錯配)(錯配)框移突變框移突變(缺失、插入)大段損傷大段損傷臂間倒位臂間倒位臂內(nèi)倒位臂內(nèi)倒位染色體
2、畸變?nèi)旧w畸變轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)換(transition)(transition)顛換顛換(transversion)(transversion)第2頁/共54頁TGAC轉(zhuǎn)換顛換基因突變基因突變-轉(zhuǎn)換與顛換示意圖轉(zhuǎn)換與顛換示意圖第3頁/共54頁 A T G C T G G C T A C G A C C G A T G C A C T G T A C G T G A C A c G T T G G C T G C A A C C G原原 DNA顛換顛換轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)換第4頁/共54頁 C A T C A T C T C A T C A T C A T C A T C 組組 組組 組組 組組 組組 組組 組組 C
3、A T C A T C T C A T C A T C A T C A T 組組 組組 亮亮 異亮異亮 異亮異亮 異亮異亮 異亮異亮移碼突變以后A第5頁/共54頁第6頁/共54頁Fig 7.4b Metaphase human chromosomes stained with acridine orange to show R banding.第7頁/共54頁人類23對染色體核型第8頁/共54頁第9頁/共54頁 重復是指染色體的片段出現(xiàn)多個拷貝。 重復往往可 改變基因劑量,可能造成表型的顯著改變。第10頁/共54頁第11頁/共54頁第12頁/共54頁第13頁/共54頁第14頁/共54頁第15頁
4、/共54頁倒位(倒位(inversioninversion)第16頁/共54頁第17頁/共54頁第18頁/共54頁第19頁/共54頁第20頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第21頁/共54頁第22頁/共54頁第23頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第24頁/共54頁第25頁/共54頁第26頁/共54頁第27頁/共54頁體細胞突變生殖細胞突變 良性腫瘤存活突變惡性轉(zhuǎn)化細胞衰老未分化胚胎細胞受損動脈硬化癌變未知疾病 功能或結(jié)構(gòu)畸形流產(chǎn)與死胎胚胎綜合癥生育功能障礙遺傳性疾病基因負荷 老化已分化胚胎細胞
5、受損 DNA受損受損顯性致死隱性致死修復的效率修復的效率突變后果示意圖第28頁/共54頁第29頁/共54頁(一)光修復(一)光修復光修復酶光修復酶(photolyase)(photolyase) UV第30頁/共54頁UvrAUvrBUvrCOHPDNADNA聚合酶聚合酶OHP (二)切除修復(二)切除修復DNADNA連接酶連接酶ATP的切除修復的切除修復機制機制目目 錄錄第31頁/共54頁(三)重組修復(三)重組修復第32頁/共54頁(四)(四)SOSSOS修復修復 當當DNADNA損傷廣泛難以繼續(xù)復制時,由此而誘損傷廣泛難以繼續(xù)復制時,由此而誘發(fā)出一系列復雜的反應。發(fā)出一系列復雜的反應。
6、在在E. coliE. coli,各種與修復有關(guān)的基因,組成,各種與修復有關(guān)的基因,組成一個稱為調(diào)節(jié)子一個稱為調(diào)節(jié)子(regulon)(regulon)的網(wǎng)絡式調(diào)控系的網(wǎng)絡式調(diào)控系統(tǒng)。統(tǒng)。 這種修復特異性低,對堿基的識別、選擇能這種修復特異性低,對堿基的識別、選擇能力差。通過力差。通過SOSSOS修復,復制如能繼續(xù),細胞修復,復制如能繼續(xù),細胞是可存活的。然而是可存活的。然而DNADNA保留的錯誤較多,導保留的錯誤較多,導致較廣泛、長期的突變。致較廣泛、長期的突變。第33頁/共54頁第34頁/共54頁 突變型細菌突變型細菌 野生型細菌野生型細菌正向突變回復突變Ames試驗原理示意圖第35頁/共
7、54頁第36頁/共54頁第37頁/共54頁第38頁/共54頁第39頁/共54頁 收集細胞收集細胞低低滲滲固定固定染染色色閱片閱片照相照相第40頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第41頁/共54頁 5%Giemsa染色抗凝血抗凝血BrdU BrdU PRMI16404ml 37oC避光培養(yǎng)48h 37oC培養(yǎng)24h秋水仙素 培養(yǎng)2-4h離心低滲固定制片紫外線照射30min閱片第42頁/共54頁第43頁/共54頁第44頁/共54頁第45頁/共54頁X YX Y+ XXX X + XYX X + XYX XX XX YX YXXXXXYXYXYXYF
8、1F2XYXY誘變劑誘變劑誘變劑誘變劑SLRL 試驗原理試驗原理第46頁/共54頁1.0%NMA 0.7%LMA100ul+細胞混懸液0.7%LMA 溶解(4oC至少4h)展開20min 電泳25v 300mA 中性化(3-5次) 染色鏡檢加蓋玻片第47頁/共54頁第48頁/共54頁Image Analyses Tail lengthComet lengthtail with low intensityTail with high intensity (big tail moment)Intensitylength第49頁/共54頁Image Analyses Evaluation of different parameters:migrationcomet lengt
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