化學(xué)毒物致突變作用及其評價PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1化學(xué)毒物致突變作用及其評價化學(xué)毒物致突變作用及其評價第1頁/共54頁突變突變?nèi)笔笔?deletion):(deletion):重復(fù)重復(fù)(duplication):(duplication):倒位倒位 (inversion):(inversion):易位易位(translocation):(translocation):整倍體（整倍體（euploideuploid）非整倍體非整倍體(polyploid)(polyploid)數(shù)目異常數(shù)目異常結(jié)構(gòu)異常結(jié)構(gòu)異?；蛲蛔兓蛲蛔儔A基置換堿基置換（錯配）（錯配）框移突變框移突變（缺失、插入）大段損傷大段損傷臂間倒位臂間倒位臂內(nèi)倒位臂內(nèi)倒位染色體

2、畸變?nèi)旧w畸變轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)換(transition)(transition)顛換顛換(transversion)(transversion)第2頁/共54頁TGAC轉(zhuǎn)換顛換基因突變基因突變-轉(zhuǎn)換與顛換示意圖轉(zhuǎn)換與顛換示意圖第3頁/共54頁 A T G C T G G C T A C G A C C G A T G C A C T G T A C G T G A C A c G T T G G C T G C A A C C G原原 DNA顛換顛換轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)換第4頁/共54頁 C A T C A T C T C A T C A T C A T C A T C 組組 組組 組組 組組 組組 組組 組組 C

3、A T C A T C T C A T C A T C A T C A T 組組 組組 亮亮 異亮異亮 異亮異亮 異亮異亮 異亮異亮移碼突變以后A第5頁/共54頁第6頁/共54頁Fig 7.4b Metaphase human chromosomes stained with acridine orange to show R banding.第7頁/共54頁人類23對染色體核型第8頁/共54頁第9頁/共54頁 重復(fù)是指染色體的片段出現(xiàn)多個拷貝。 重復(fù)往往可 改變基因劑量，可能造成表型的顯著改變。第10頁/共54頁第11頁/共54頁第12頁/共54頁第13頁/共54頁第14頁/共54頁第15頁

4、/共54頁倒位（倒位（inversioninversion）第16頁/共54頁第17頁/共54頁第18頁/共54頁第19頁/共54頁第20頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第21頁/共54頁第22頁/共54頁第23頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第24頁/共54頁第25頁/共54頁第26頁/共54頁第27頁/共54頁體細胞突變生殖細胞突變 良性腫瘤存活突變惡性轉(zhuǎn)化細胞衰老未分化胚胎細胞受損動脈硬化癌變未知疾病 功能或結(jié)構(gòu)畸形流產(chǎn)與死胎胚胎綜合癥生育功能障礙遺傳性疾病基因負荷 老化已分化胚胎細胞

5、受損 DNA受損受損顯性致死隱性致死修復(fù)的效率修復(fù)的效率突變后果示意圖第28頁/共54頁第29頁/共54頁（一）光修復(fù)（一）光修復(fù)光修復(fù)酶光修復(fù)酶(photolyase)(photolyase) UV第30頁/共54頁UvrAUvrBUvrCOHPDNADNA聚合酶聚合酶OHP （二）切除修復(fù)（二）切除修復(fù)DNADNA連接酶連接酶ATP的切除修復(fù)的切除修復(fù)機制機制目目 錄錄第31頁/共54頁（三）重組修復(fù)（三）重組修復(fù)第32頁/共54頁（四）（四）SOSSOS修復(fù)修復(fù) 當當DNADNA損傷廣泛難以繼續(xù)復(fù)制時，由此而誘損傷廣泛難以繼續(xù)復(fù)制時，由此而誘發(fā)出一系列復(fù)雜的反應(yīng)。發(fā)出一系列復(fù)雜的反應(yīng)。

6、在在E. coliE. coli，各種與修復(fù)有關(guān)的基因，組成，各種與修復(fù)有關(guān)的基因，組成一個稱為調(diào)節(jié)子一個稱為調(diào)節(jié)子(regulon)(regulon)的網(wǎng)絡(luò)式調(diào)控系的網(wǎng)絡(luò)式調(diào)控系統(tǒng)。統(tǒng)。 這種修復(fù)特異性低，對堿基的識別、選擇能這種修復(fù)特異性低，對堿基的識別、選擇能力差。通過力差。通過SOSSOS修復(fù)，復(fù)制如能繼續(xù)，細胞修復(fù)，復(fù)制如能繼續(xù)，細胞是可存活的。然而是可存活的。然而DNADNA保留的錯誤較多，導(dǎo)保留的錯誤較多，導(dǎo)致較廣泛、長期的突變。致較廣泛、長期的突變。第33頁/共54頁第34頁/共54頁 突變型細菌突變型細菌 野生型細菌野生型細菌正向突變回復(fù)突變Ames試驗原理示意圖第35頁/共

7、54頁第36頁/共54頁第37頁/共54頁第38頁/共54頁第39頁/共54頁 收集細胞收集細胞低低滲滲固定固定染染色色閱片閱片照相照相第40頁/共54頁 2003 John Wiley and Sons Publishers第41頁/共54頁 5%Giemsa染色抗凝血抗凝血BrdU BrdU PRMI16404ml 37oC避光培養(yǎng)48h 37oC培養(yǎng)24h秋水仙素 培養(yǎng)2-4h離心低滲固定制片紫外線照射30min閱片第42頁/共54頁第43頁/共54頁第44頁/共54頁第45頁/共54頁X YX Y+ XXX X + XYX X + XYX XX XX YX YXXXXXYXYXYXYF

8、1F2XYXY誘變劑誘變劑誘變劑誘變劑SLRL 試驗原理試驗原理第46頁/共54頁1.0%NMA 0.7%LMA100ul+細胞混懸液0.7%LMA 溶解（4oC至少4h）展開20min 電泳25v 300mA 中性化（3-5次） 染色鏡檢加蓋玻片第47頁/共54頁第48頁/共54頁Image Analyses Tail lengthComet lengthtail with low intensityTail with high intensity (big tail moment)Intensitylength第49頁/共54頁Image Analyses Evaluation of different parameters:migrationcomet lengt