培養(yǎng)基模擬灌裝方案

1、種*種藥業(yè)有限公司驗證方案*生產(chǎn)線培養(yǎng)基灌裝版本頒布日期版本描述00*原始版本小組主要成員及職責(zé)根據(jù)確認(rèn)與驗證管理規(guī)程規(guī)定，組織成立*培養(yǎng)基灌裝驗證小組，驗證小組成員及職責(zé)如下表:組長姓名崗位部門職責(zé)驗證QA質(zhì)量保證部總體負(fù)責(zé)本次驗證；協(xié)調(diào)安排驗證小組成員工作。組織 起草驗證方案；組織驗證實施；組織分析驗證結(jié)果；匯 總起草驗證報告；對驗證結(jié)果負(fù)責(zé)；負(fù)責(zé)組織沉降菌、 浮游菌、表面微生物取樣；督促驗證過程偏差及漏項的 處理；負(fù)責(zé)驗證資料歸檔。驗證QA質(zhì)量保證部負(fù)責(zé)復(fù)核試驗方案版本、格式正確性及報告內(nèi)容是 否完整、正確、符合邏輯；負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)試驗實施過程中各 部門間工作、組織調(diào)查處理試驗中的偏差事件。技

2、術(shù)主管制造二部負(fù)責(zé)協(xié)助起草驗證方案及報告，負(fù)責(zé)驗證生產(chǎn)中的過程 監(jiān)控安排，安排驗證時間，安排操作人員，督促驗證方 案及報告的起草、審核、歸檔。參與驗證過程偏差及漏 項的處理。質(zhì)量監(jiān)督室主管質(zhì)量保證部負(fù)責(zé)協(xié)助起草驗證方案及報告，負(fù)責(zé)安排QA人員進行 現(xiàn)場監(jiān)控及相關(guān)檢測，參與驗證過程偏差及漏項的處 理。生測室主管質(zhì)量檢驗部負(fù)責(zé)協(xié)助起草驗證方案及報告，負(fù)責(zé)相關(guān)的檢測工作安 排，參與驗證過程偏差及漏項的處理。理化室主管方案會簽及審批起草人日期年 月日小組會簽組長：驗證QA:組員：項目 審批、職位簽名日期一級審核質(zhì)量保證部 負(fù)責(zé)人年 月 日二級審核制造部 負(fù)責(zé)人年 月 日批準(zhǔn)質(zhì)量管理 負(fù)責(zé)人年 月 日一

3、、概述51 .驗證原因52 .驗證原理5二、驗證目的6三、參考文件61 .參考標(biāo)準(zhǔn)62 .公司規(guī)程6四、風(fēng)險評估7五、驗證范圍13六、驗證計劃13七、方案培訓(xùn)13八、驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)13九、驗證內(nèi)容141 .配制142 .冷藏、除菌過濾153 .洗瓶154 .灌封175 .環(huán)境及人員衛(wèi)生監(jiān)測（動態(tài)）176 .培養(yǎng)187 .培養(yǎng)基灌裝后清潔確認(rèn)19十、漏項與偏差處理20十一、再驗證周期20十二、確立文件20十三、附件21附件1： 22一、概述1 .驗證原因公司*按照2010版GMP附錄1無菌藥品的要求進行設(shè)計，潔凈區(qū)級別分為A級、B級、C、級、D級，該線用于小容量注射劑非最終滅菌產(chǎn)品（*）生產(chǎn)使用

4、?，F(xiàn)按2010版GMP附錄1要求對*生產(chǎn)線進行產(chǎn)品培養(yǎng)基灌裝驗證，以考察該線的無菌保證水平。本次 為第四次培養(yǎng)基模擬灌裝（上次驗證報告編號R.4-001/2015），故只進行一個批次的驗證活動。驗證關(guān)鍵生產(chǎn)工藝流程圖如下：2 .驗證原理將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實際生產(chǎn)完成工藝操作。對裝 有培養(yǎng)基的密閉容器進行培養(yǎng)以檢查微生物的生長并評價結(jié)果，確定實際生產(chǎn)中產(chǎn)品污染的可能性。對于 失敗的驗證進行菌種分析并調(diào)查，確認(rèn)并解決可能造成失敗的原因后，重新進行驗證。3 .驗證的先決條件參與培養(yǎng)基驗證的人員經(jīng)過培訓(xùn)。涉及培養(yǎng)基灌裝試驗使用的配液系統(tǒng)、冷藏系統(tǒng)、除菌過濾系

5、統(tǒng)、灌封系統(tǒng)、洗瓶機、殺菌干燥 機、空調(diào)系統(tǒng)、水系統(tǒng)、壓縮空氣系統(tǒng)、純蒸汽系統(tǒng)、脈動真空滅菌器均確認(rèn)合格。用于培養(yǎng)基灌裝試驗使用培養(yǎng)基具備合格報告。涉及培養(yǎng)基灌裝試驗使用的配液系統(tǒng)、冷藏系統(tǒng)、除菌過濾系統(tǒng)、灌封系統(tǒng)、洗瓶機、容器具清 潔驗證均合格。用于培養(yǎng)基灌裝試驗使用設(shè)備、系統(tǒng)清潔檢查項目的檢驗方法驗證合格，取樣方法驗證合格。各關(guān)鍵設(shè)備、系統(tǒng)及方法驗證報告見附件1.二、驗證目的1 .通過該工藝驗證活動證明小容量注射劑生產(chǎn)線（三）采用既定的無菌生產(chǎn)工藝能保證產(chǎn)品的無菌要 求；2 .通過該工藝驗證活動證明無菌操作相關(guān)人員資格，降低人員帶入無菌的風(fēng)險；3 .通過該工藝驗證活動確保生產(chǎn)符合現(xiàn)行GMP

6、法規(guī)要求。三、參考文件1.參考標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)/資料名稱編制單位發(fā)布時間中華人民共和國藥典國家藥典委員會2010 年藥品生產(chǎn)驗證指南國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品安全監(jiān)管司 國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認(rèn)證管理中心2003 年藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂國家食品藥品監(jiān)督管理局2011 年藥品GMP指南國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認(rèn)證管理中心2011 年2.公司規(guī)程文件名稱原件存放處執(zhí)行時間RRU2053超聲波立式洗瓶機安全操作規(guī)程設(shè)備保障部2015 年HQL3640隧道式滅菌干燥機安全操作規(guī)程設(shè)備保障部2015 年ALF4080拉絲灌封機安全操作規(guī)程設(shè)備保障部2015 年5000L稀配罐安全操作規(guī)程設(shè)

7、備保障部2015 年XG1.0D脈動真空滅菌器安全操作規(guī)程設(shè)備保障部2015 年*生產(chǎn)線洗瓶崗位SOP產(chǎn)品制造部2015 年*生產(chǎn)線配制崗位SOP產(chǎn)品制造部2015 年*生產(chǎn)線灌封準(zhǔn)備崗位SOP產(chǎn)品制造部2015 年*生產(chǎn)線灌封崗位SOP產(chǎn)品制造部2015 年*生產(chǎn)線無菌工衣清洗SOP產(chǎn)品制造部2015 年潔凈室(區(qū))監(jiān)測管理規(guī)程質(zhì)量保證部2015 年四、風(fēng)險評估運用失效模式風(fēng)險管理工具，對培養(yǎng)基模擬灌裝進行風(fēng)險評估，確認(rèn)本次驗證活動主要項目及驗證重點。1.風(fēng)險評估標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)險系數(shù)分?jǐn)?shù)水平定義嚴(yán)重程度S (severity)4極高直接影響檢驗過程要素或與檢驗數(shù)據(jù)的可靠性、完整性或可跟蹤性。此 風(fēng)險

8、可導(dǎo)致檢驗結(jié)論不能使用，直接影響GMP原則，危害檢驗的活動3高直接影響檢驗過程要素或與檢驗數(shù)據(jù)的可靠性、完整性或可跟蹤性。此 風(fēng)險可導(dǎo)致檢驗無效，未能符合一些GMP原則，可能引起檢查或?qū)徲?中產(chǎn)生偏差2中盡管不存在對產(chǎn)品或數(shù)據(jù)的相關(guān)影響，但仍間接影響檢驗過程要素或與 檢驗數(shù)據(jù)的可靠性、完整性或可跟蹤性。此風(fēng)險可能造成資源的極度浪 費或?qū)ζ髽I(yè)形象產(chǎn)生較壞影響1低盡管不存在對產(chǎn)品或數(shù)據(jù)產(chǎn)生最終影響，但對檢驗過程要素或與檢驗數(shù) 據(jù)的可靠性、完整性或可跟蹤性仍產(chǎn)生較小影響發(fā)生率P(probability)4極高必然的問題，每次都發(fā)生。3高反復(fù)出現(xiàn)的問題，通常會發(fā)生。2中偶爾出現(xiàn)的問題，有時發(fā)生。1低不

9、太可能出現(xiàn)的問題，或很少發(fā)生。可預(yù)知性D (detection)4極高問題總是檢測不到，沒有可行的檢測手段，可認(rèn)為是無法檢測到的。3高問題有時能被檢測到，但是更傾向于檢測不到。2中出了問題有方向能檢測到，發(fā)生的時候很有可能檢測到。1低只要出了問題就能被檢測到。總風(fēng)險評估系數(shù)(RPN=SxPxD)RPN風(fēng)險水平評估RPN8低可接受8RPN16高不可接受，或需要整改RPN32極高不可接受，必須整改2.風(fēng)險點及評估風(fēng)險描述嚴(yán)重 程度 (S)發(fā)生 率 (P)可預(yù) 知性 (D)總風(fēng) 險評 估系數(shù) (RPN)風(fēng) 險 水 平風(fēng)險控制措施驗證項目生產(chǎn)環(huán)境達(dá)不到相關(guān) 要求42324高建立廠房清潔消毒規(guī)程，定期

10、環(huán)境監(jiān)測并趨勢分析培養(yǎng)基灌裝全程對環(huán)境進行動態(tài)監(jiān)測人員造成污染42324高人員培訓(xùn)并更衣考核上崗，每 批對進入無菌區(qū)人員取樣監(jiān)控所有相關(guān)人員，模擬生 產(chǎn)實際活動后取樣，對 最多允許人數(shù)進行挑 戰(zhàn)滅菌后的衣服，器具等 發(fā)生二次污染42324高驗證滅菌后儲存方式和有效 期，操作人員培訓(xùn)考核上崗， 生產(chǎn)過程中進行嚴(yán)格監(jiān)控，生 產(chǎn)結(jié)束后與產(chǎn)品接觸表面取樣相關(guān)驗證操作與正常 生產(chǎn)一致，生產(chǎn)結(jié)束后 對關(guān)鍵表面取樣，儲存 方式和有效期在相關(guān) 清潔驗證完成滅菌效果未達(dá)到42216高所有滅菌裝載和參數(shù)須經(jīng)過驗 證，按經(jīng)驗證的操作方式滅菌在設(shè)備驗證中完成配液/灌封超過規(guī)定時 限要求4218中工藝規(guī)程中明確規(guī)定時限

11、按照工藝規(guī)定工序最大時間挑戰(zhàn)進行驗證灌封設(shè)備故障并維修4218中人員培訓(xùn)，使用前通過試機， 并定期設(shè)備維護保養(yǎng)模擬維修操作進行挑 戰(zhàn)驗證過濾系統(tǒng)有效性和污 染4218中使用前進行清潔和滅菌處理， 過濾前后對除菌過濾器進行完整性測試在無菌過濾系統(tǒng)工藝 驗證中完成，取樣工具、記錄等傳入 污染32318高所有相關(guān)工具，記錄等進入無 菌區(qū)需消毒或滅菌按物料凈化SOP規(guī)定進 行清潔工具和清潔消毒 劑使用帶來的污染32318高清潔工具需滅菌，清潔消毒劑 需除菌過濾后進入無菌區(qū)在清潔消毒效果和設(shè) 備驗證中完成灌封所用安甑造成污 染42324高按經(jīng)驗證確認(rèn)的清洗和滅菌參 數(shù)運行設(shè)備進行安甑清洗在洗烘線驗證中完

12、成 滅菌效果和單向流保 護，動態(tài)監(jiān)測灌封前區(qū) 域壓縮空氣帶來的污染42216高壓縮空氣加終端過濾器，并定 期確認(rèn)過濾器的完整性，周期 性進行壓縮空氣系統(tǒng)驗證和監(jiān) 測壓縮空氣系統(tǒng)驗證中 完成生產(chǎn)過程中，異常操作 造成的風(fēng)險32212中嚴(yán)格異常操作的要求，對于可 能污染的藥品報廢處理模擬中控、倒破瓶停機 維修等情況進行挑戰(zhàn) 驗證產(chǎn)品暴露過長帶來的 風(fēng)險2136低嚴(yán)格控制允許的灌封速度挑戰(zhàn)工藝規(guī)程中允許 的最長灌封時限進行 灌封培養(yǎng)基灌裝后殘留污 染4114低灌裝結(jié)束后按SOP規(guī)定清潔方 法處理設(shè)備及系統(tǒng)檢查設(shè)備及系統(tǒng)清潔 處理效果，進行殘留檢 測抑菌因素造成假陰性 結(jié)果42324高1、設(shè)定合理灌裝

13、量確保培養(yǎng) 基和安甑充分接觸；2、消毒劑不能超出正常生產(chǎn) 時使用頻率；3、班次輪換時不進行消毒清 場。模擬試驗按控制措施 對抑菌因素進行控制3.風(fēng)險評估經(jīng)風(fēng)險評估，共計風(fēng)險項15項，低風(fēng)險項2項，中風(fēng)險項4項，高風(fēng)險項9項，極高風(fēng)險項0項。 按風(fēng)險評估結(jié)果進行本次培養(yǎng)基灌裝驗證活動，并確認(rèn)所采取的風(fēng)險控制措施有效。根據(jù)風(fēng)險評估確認(rèn)的驗證項目涉及的驗證條件如下：3.1 培養(yǎng)基選擇首先培養(yǎng)基支持微生物生長的菌譜范圍應(yīng)寬，能促進革蘭氏陽性、革蘭氏陰性、酵母菌和霉菌的生長； 其次培養(yǎng)基應(yīng)澄明，便于觀察由于污染導(dǎo)致的混濁和沉淀現(xiàn)象。我公司已確定該生產(chǎn)線只用于參附注射液、生脈注射液的生產(chǎn)，該兩個品種均不充

14、氮，故培養(yǎng)基選取 需氧培養(yǎng)基（大豆胰蛋白胨肉湯培養(yǎng)基）。在培養(yǎng)結(jié)束后進行微生物促生長挑戰(zhàn)試驗。根據(jù)我公司歷年對環(huán)境監(jiān)控和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的菌均為普 通菌，因此培養(yǎng)微生物促生長挑戰(zhàn)試驗選取藥典規(guī)定菌種。促菌生長試驗的接種量應(yīng)不超過100CFU。如 促生長試驗失敗，應(yīng)進行調(diào)查并重復(fù)培養(yǎng)基灌裝試驗。3.2 運行試驗次數(shù)及頻率根據(jù)藥品GMP指南（無菌藥品）要求，生產(chǎn)線初始驗證時，培養(yǎng)基灌裝應(yīng)進行至少3批次，以確 保結(jié)果的一致性和有效性。初次驗證后，為了評估無菌工藝的受控情況，每條生產(chǎn)線的培養(yǎng)基灌裝每半年 應(yīng)進行一次，因本次為再驗證故只進行一批次驗證。3.3 規(guī)格選擇*生產(chǎn)線可進行10ml、20ml規(guī)格的

15、生產(chǎn)，初次驗證時進行兩次最大規(guī)格容器（20ml）和一次最小規(guī) 格容器（10ml）的灌裝挑戰(zhàn)。在以后的周期性半年度灌裝可以輪換，每次挑戰(zhàn)一種規(guī)格，本次驗證10ml 規(guī)格。3.4 運行持續(xù)時間根據(jù)藥品GMP指南（無菌藥品）要求，培養(yǎng)基灌裝操作的持續(xù)時間是方案設(shè)計時必須考慮的重要 問題。盡管最準(zhǔn)確方法是模擬全批量及全批量的操作時間，因為它最能反映實際生產(chǎn)運行，但也可有其它合理并適當(dāng)?shù)哪Ｊ健３掷m(xù)時間并不一定與一個完整批的實際生產(chǎn)操作時間相同。根據(jù)我公司情況一批次灌封生產(chǎn)的最長時間為不超過*小時，綜合考慮生產(chǎn)操作、各種干擾模式、 實際無菌操作情況，決定本次培養(yǎng)基灌裝操作的持續(xù)時間為*小時/批。3.5 干

16、擾設(shè)計/最差條件設(shè)計培養(yǎng)基灌裝必須模擬所有正常生產(chǎn)中的活動，體現(xiàn)最差條件的原則，如下表:序號崗位最差條件備注1配制崗位容器具、配制設(shè)備按相關(guān)SOP要求進行清潔消毒及儲存， 儲存時限接近有效期，具體時間為*小時。2除菌過濾崗位容器具、除菌過濾系統(tǒng)按相關(guān)SOP要求進行清潔火菌及儲 存，儲存時間*小時。儲存有效為*小時，通常 清潔火菌后至使用前時間 小于12小時。3洗瓶崗位設(shè)備運行速度設(shè)定為接近經(jīng)確認(rèn)的最高速度，包括洗瓶及 干燥火菌,與灌封匹配。4灌封崗位灌注系統(tǒng)按相關(guān)SOP要求進行清潔滅菌及儲存，儲存時間*小時。根據(jù)生產(chǎn)的實際情況我公司灌封間人員數(shù)量通常為1人，本次驗證時增加至4人。參照上一年度故

17、障統(tǒng)計，增加異常狀況處理、維修等干預(yù) （因灌封機為“L型”取樣操作在洗瓶間進行故不考慮取樣的影響。）。儲存有效為*小時，通常 清潔火菌后至使用前時間 小于*小時。干預(yù)條件見表01表01 干預(yù)溥件設(shè)計序號干預(yù)事件產(chǎn)生原因可能出現(xiàn) 的頻次驗證頻次備注1灌裝間操作人 員數(shù)量達(dá)上限允許灌裝間最大人數(shù)為4人。整個灌 裝過程整個灌裝 過程保持 4人在灌裝 間實際灌裝操作只需1人因設(shè)備維修原因，必須2人同時 配合完成某項操作。不確定2人/次維修時人員進入前，多余 的2人退出灌封間。2灌裝過程中人 員開啟隔離門因卡瓶等原因，灌裝機出現(xiàn)報警提 示而自動停機，開啟隔離器門處 理。頻次不確 定。10次/批因灌針、管

18、道等原因，出現(xiàn)漏液、 裝量差異人工停機，開啟隔離器門 處理。頻次不確 定。3次/批熄火重點.頻次不確2次/批開啟隔離器門，更換沉降菌、浮游 菌監(jiān)測平皿（含表面擦拭取樣）。定。5次5次/批系統(tǒng)組裝約1小時，一批 藥液灌裝時長16h, 沉降菌監(jiān)測每4h更換一 次平皿。灌裝機故障，需開啟隔離器門處 理。頻次不確定2次/批灌裝過程中可能會出現(xiàn)的 灌裝機故障。灌裝機故障，不需開啟隔離器門處 理。頻次不確定2次/批灌裝過程中可能會出 現(xiàn) 的灌裝機故障。備注：如遇設(shè)備突發(fā)故障或其它偏差導(dǎo)致干擾不在設(shè)計范圍內(nèi)的應(yīng)如實記錄偏差處理情況。表02 干預(yù)時間設(shè)計及計算類型自動停機 （倒瓶）人工停機（更換配 件）熄火重

19、點更換平皿灌裝機故障空機運行需開啟隔 離器門不需開啟 隔離器門次數(shù)10次/批3次/批2次/批5次/批2次/批2次/批4次/批十預(yù) 時間13分鐘/次36分鐘/次36分鐘/ 次16分鐘/次70分鐘/次40分鐘/次50分鐘/次樣品 處理處理后灌 封的前約 200支培養(yǎng) 基單獨取 走，單獨培 養(yǎng)。處理后灌 封的前約 200支培養(yǎng) 基單獨取 走，單獨培 養(yǎng)。處理后灌 封的前約 200支培 養(yǎng)基單獨 取走，單獨 母親 培養(yǎng)。處理后灌封 的前約200 支培養(yǎng)基單 獨取走，單 獨培養(yǎng)。處理后灌 封的前約 200支培養(yǎng) 基單獨取 走，單獨培 養(yǎng)。 耗時 （兩班）130分鐘108分鐘72分鐘80分鐘140分鐘80

20、分鐘200分鐘總耗時(130+180+65+140+80+200) /60弋 13 小時3.6灌裝體積根據(jù)經(jīng)驗每只容器的灌裝體積不少于總?cè)莘e的1/3,同樣，灌裝體積也不宜過大既要考慮到瓶倒轉(zhuǎn)或 旋轉(zhuǎn)時，培養(yǎng)基能充分接觸到容器和密封件的內(nèi)表面，又要保證容器內(nèi)有足夠的氧氣支持微生物生長。本 次培養(yǎng)基每支灌裝體積按10.5ml灌裝。3.7運行速度小容量生產(chǎn)線（三）可進行10ml、20ml規(guī)格的生產(chǎn)，各規(guī)格灌封速度為20ml規(guī)格10ml規(guī)格。各規(guī)格灌封速度均固定，故本次培養(yǎng)基灌裝速度，按規(guī)格對應(yīng)速度執(zhí)行。規(guī)格10ml灌封速度250支/分鐘3.8批量1.1.1 我公司參附注射液批量品名*注射液規(guī)格10m

21、l批量*萬 ml折合為灌裝支數(shù)*支3.8.2本次培養(yǎng)基灌裝批量選擇模擬的批次量應(yīng)足夠大，以模擬正常生產(chǎn)的條件并正確評估常規(guī)生產(chǎn)的污染風(fēng)險。模擬灌裝的瓶數(shù)基 于具體工藝的污染風(fēng)險，并應(yīng)足以模擬正常生產(chǎn)那些有代表性的操作。我公司小容量（三）采用進口洗、 烘、灌設(shè)備（博世）自動化程度較高，灌封區(qū)與操作區(qū)隔離，沒有人員直接干擾，其工藝設(shè)計所致的污染 概率比較低，我公司注射劑為雙班生產(chǎn)，為更好的反應(yīng)兩個班次灌封過程污染狀況，結(jié)合人為干擾時間、 灌封速度計算批量如下：規(guī)格10ml批量計算(16-13) *10*2*250*60=900000ml公式：批量二（總時間-干擾時間）*每支裝量*灌封機數(shù)量*灌封速

22、度*60分鐘根據(jù)上述計算，本次培養(yǎng)基批量定為90萬ml/批、10ml規(guī)格為約90000支/批。3.9 環(huán)境條件及監(jiān)測培養(yǎng)基灌裝試驗的環(huán)境條件應(yīng)充分體現(xiàn)生產(chǎn)操作的實際情況，對于環(huán)境最差條件的挑戰(zhàn)需在工藝允許 的苛刻條件范圍內(nèi)對環(huán)境受干擾程度，如生產(chǎn)現(xiàn)場人員最多、生產(chǎn)活動頻率（人員走動）最高的挑戰(zhàn)。在培養(yǎng)基灌裝過程中也應(yīng)進行環(huán)境監(jiān)測，灌封A級區(qū)、B級區(qū)采取在線監(jiān)測包括塵埃粒子、沉降菌、 浮游菌、表面微生物（在進行干預(yù)時監(jiān)測結(jié)果應(yīng)做明確說明，以區(qū)別于正常生產(chǎn)情況。），同時對人員衛(wèi)生 進行監(jiān)測，包括手指、袖口微生物監(jiān)測（采用接觸碟取樣）。3.10 參與人員根據(jù)藥品GMP指南（無菌藥品）要求，所有被授權(quán)

23、在生產(chǎn)時進入無菌灌裝間的人員，包括觀察人 員和維修人員，每年至少應(yīng)參加一次培養(yǎng)基灌裝試驗。所有實際生產(chǎn)中將在關(guān)鍵區(qū)域進行操作的人員都應(yīng) 參加每次的培養(yǎng)基灌裝。參與人員應(yīng)按常規(guī)生產(chǎn)的職責(zé)模擬與其相關(guān)的活動。參與培養(yǎng)基灌裝試驗人員包括操作人員、QA人員、計量人員、維修人員，所有參與培養(yǎng)基灌裝的人員 應(yīng)當(dāng)經(jīng)過適當(dāng)培訓(xùn)以保證他們對方案和實際實施有足夠的了解，生產(chǎn)操作人員及現(xiàn)場QA人員每次培養(yǎng)灌 裝均需參加，驗證QA、計量人員及設(shè)備維修人員每年至少參加一次。3.11 容器的完整性測試我公司安甑采用高溫熔封，采取滅菌后抽真空檢漏，公司正調(diào)研高壓放電檢漏設(shè)備，本次不進行容器 的完整性測試，如果培養(yǎng)后出現(xiàn)長菌

24、，經(jīng)外觀檢查無法判定為破損原因引起時需采用抽真空檢漏的方式予 以排除。3.12 培養(yǎng)基灌封后系統(tǒng)、容器具的處理在完成1批次培養(yǎng)基灌封后，接觸過培養(yǎng)基的系統(tǒng)、容器均應(yīng)經(jīng)過清潔，并經(jīng)確認(rèn)合格后方可用于生 產(chǎn)產(chǎn)品。3.13 培養(yǎng)與檢查培養(yǎng)溫度先在20-25最少培養(yǎng)7天，然后在30-35的范圍繼續(xù)培養(yǎng)7天。每天觀察溫度，并且 第3天時人工翻動培養(yǎng)基以保證培養(yǎng)基液體與整個安甑內(nèi)壁充分接觸，更充分的反應(yīng)污染狀況。每個培養(yǎng)周期到期后由燈檢人員對樣品進行逐個目視檢查。檢查過程由QA人員負(fù)責(zé)觀察、監(jiān)督。在 檢查中，所有被懷疑受到污染的樣品，應(yīng)立即交給微生物專業(yè)人員進行鑒定處理。在培養(yǎng)過程中，任何發(fā)現(xiàn)損壞的樣品也

25、應(yīng)列入培養(yǎng)基灌裝的批記錄數(shù)據(jù)中。如果要將這類已培養(yǎng)的樣 品從最后的結(jié)果判定計算中剔除，則必需充分說明理由，并在培養(yǎng)基灌裝報告中對偏差做出解釋。假如難 以判斷微生物污染是由損壞引起還是本身就存在，則應(yīng)進行調(diào)查以確定原因。3.14 培養(yǎng)周期結(jié)束后培養(yǎng)基處理培養(yǎng)周期結(jié)束后培養(yǎng)基應(yīng)按培養(yǎng)基管理規(guī)程（P.ZL.103-010）進行銷毀。五、驗證范圍本驗證方案適用于小容量注射劑生產(chǎn)線（三）注射劑無菌生產(chǎn)工藝培養(yǎng)基模擬灌裝驗證活動。驗證涉及設(shè)備、儀器、培養(yǎng)基統(tǒng)計見附件1；驗證取樣計劃見附件2。六、驗證計劃項 目實施日期方案培訓(xùn)*年*月培養(yǎng)基配制*年*月培養(yǎng)基灌裝*年*月培養(yǎng)基灌裝后培養(yǎng)*年*月培養(yǎng)基促生產(chǎn)試

26、驗*年*月驗證報告*年*月七、方案培訓(xùn)實施本方案的所有人員均應(yīng)接受本文件的培訓(xùn)，培訓(xùn)采取分級培訓(xùn)，由確認(rèn)組負(fù)責(zé)培訓(xùn)至小組成員級， 各小組成員負(fù)責(zé)培訓(xùn)至相應(yīng)班組級（操作人員、QA人員、QC人員、設(shè)備人員）培訓(xùn)記錄見附件3。八、驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)按照藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010版附錄無菌藥品第47條相關(guān)規(guī)定：培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng) 足以保證評價的有效性。培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌 裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：有1

27、支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：有1支污染，需調(diào)查；有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進行調(diào)查。綜合上述標(biāo)準(zhǔn)，本次驗證數(shù)量定為每批約90000支（10ml規(guī)格），其污染數(shù)不得超過1支。九、驗證內(nèi)容本次驗證模擬*生產(chǎn)線在工藝允許最差條件下進行1批10ml規(guī)格培養(yǎng)基的灌裝（90萬ml/批）。1 .配制工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及結(jié)果培養(yǎng)基有檢測報告、合格證號，數(shù)量。有檢測報告、合格證號，數(shù)量符合要求。附件4記錄01配制處方：胰蛋白胨大豆肉湯 27000g注射用水適量配制過程符合要求。配制成90萬ml工藝

28、過程：1、向配料罐內(nèi)加入80萬ml的注射用水 （根據(jù)產(chǎn)品要求，35以下。），稱取27000g 的培養(yǎng)基加入配料罐內(nèi)，攪拌加熱煮沸使之完 全溶解，冷至室溫補至體積，用0.45r m聚丙 烯濾芯、0.2p m聚砜濾芯串聯(lián)過濾，冷藏于 冷藏罐，備用。培養(yǎng)基稱取數(shù)量符合要求。配制產(chǎn)量符合要求。促生長試驗（按藥典附錄xniB無菌檢查 法），接種菌的樣品中明顯生長，空附應(yīng) 不得有菌生長。最差條件模擬：容器具、配制設(shè)備按相關(guān)SOP要求進行清 潔消毒及儲存，儲存時限接近有效期。容器具、配制設(shè)備清潔消毒后至使用前儲 存時限接近*小時。評價與小結(jié):日期:評價人:復(fù)核人：日期:2 .冷藏、除菌過濾工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記

29、錄及結(jié)果工藝過程：將胰蛋白胨大豆肉湯液體培養(yǎng)基用0.45p m聚 丙烯、0.2p m聚砜、0.2p m聚砜先后串聯(lián)除菌過 濾，待灌封。最差條件模擬：容器具、除菌過濾系統(tǒng)按相關(guān)SOP要求進行 清潔消毒及儲存，儲存時限超過日常生產(chǎn)狀態(tài)。濾芯完整性檢測合格。附件4記錄02精濾過程符合要求。容器具、除菌過濾系統(tǒng)清潔火菌后儲 存時間*小時。評價與小結(jié):評價人:日期:復(fù)核人:日期:3.洗瓶工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及 結(jié)果檢查安甑批號、合格證號、數(shù)量安瓿有批號、合格證號，數(shù)量符合要求工藝過程：1 .外觀質(zhì)量檢查：外觀清潔度、瓶身均勻度、瓶口均勻度、 瓶底均勻度。2 .挑選出肉眼可見的外觀不合格和清潔度異常的安甑

30、。3 .洗瓶機參數(shù)：循環(huán)注射用水、新鮮注射用水、壓縮空氣 壓力1.2-3bar；循環(huán)注射用水溫度555；新鮮注射用 水30-60；主機正常速度100%，生產(chǎn)速度250瓶/分鐘.4 .隧道式滅菌干燥機參數(shù)：溫度設(shè)定值300，進瓶區(qū)、 加熱區(qū)、冷卻區(qū)高效前壓力0.1-0.5KPa。最差條件模擬：設(shè)備運行速度設(shè)定為經(jīng)確認(rèn)的最高速度，包括洗瓶及干燥 火菌。洗瓶質(zhì)量檢查：應(yīng)符合規(guī)定。 設(shè)備運行參數(shù)設(shè)置合格，設(shè) 備運行正常。見附件4記錄03評價與小結(jié)：評價人：日期:復(fù)核人：日期:4.灌封工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及結(jié)果工藝過程：按小容量注射劑生產(chǎn)線（三）灌封崗位SOP將胰蛋白 胨大豆肉湯液體培養(yǎng)基輸送至灌封機進

31、行拉絲灌封。灌封后分 機臺裝盤標(biāo)號。裝量控制：10.5ml/支。灌封培養(yǎng)基計數(shù)后做無菌培養(yǎng)檢查。灌裝過程符合要求。附件4 記錄04最差條件模擬：灌注系統(tǒng)按相關(guān)SOP要求進行清潔滅菌及儲存，儲存時限 超過日常生產(chǎn)狀態(tài)。灌注系統(tǒng)清潔火菌后 后儲存時間*小時。干預(yù)條件模擬：1 .灌封室人員4人（生產(chǎn)時可能的最多人數(shù)，包括：操作人員、 驗證人員或計量人員、QA人員、設(shè)備人員）。2 .灌封過程中每班進行4次空機運行（50分鐘/次），人員走動 10分鐘。3 .模擬倒瓶10次/批（13分鐘/次）；更換配件（灌針、管道）3次/批（36分鐘/次），熄火重點2次/批（36分鐘/次）；更換 平皿5次/批（16分鐘/

32、次）。4 .模擬維修：需開啟隔離門2次/批（70分鐘/次）；不需開啟 隔離門2次/批（40分鐘/次）。5 .開啟隔離門后需待A級層流自凈2分鐘，觀察塵埃粒子顯示 器顯示合格，可進行后續(xù)動作。維修部位應(yīng)按要求消毒處理， 開啟隔離門后恢復(fù)生產(chǎn)前200支培養(yǎng)基單獨盛裝培養(yǎng)。6 .兩灌封機同時生產(chǎn)，生產(chǎn)總時間達(dá)約16小時。設(shè)置條件與過程符合 要求，并記錄。評價與小結(jié):評價人：日期:復(fù)核人：日期:5.環(huán)境及人員衛(wèi)生監(jiān)測（動態(tài)）監(jiān)測條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及結(jié)果監(jiān)測過程：（A級）塵埃粒子：粒徑0.5 m的W3520附件41 .塵埃粒子測定：在灌裝過程在線監(jiān)測灌 封A級區(qū)（層流）、B級灌封間塵埃粒子。2 .浮游菌測

33、定：在灌裝過程分別測定灌封 A級區(qū)（層流）、B級灌封間浮游菌。3 .表面微生物測定：在灌裝結(jié)束時對關(guān)鍵 操作點（離灌裝針頭30cm以內(nèi)的區(qū)域）、B級 區(qū)墻面采用接觸碟取樣，培養(yǎng)檢測；對進入、 退出B級區(qū)人員的無菌服袖口和及手套采用接 觸碟取樣，培養(yǎng)檢測。4 .沉降菌測定：在灌裝過程分別測定灌封 A級區(qū)（層流）、B級灌封間沉降菌，采樣時間 為4小時，采樣頻率5次/批。5 .對進入潔凈區(qū)人員進行方案的培訓(xùn)，具 備培訓(xùn)記錄。6 .進入潔凈區(qū)人員著裝檢查確認(rèn)應(yīng)符和 SOP規(guī)定，具備記錄。個/m3；粒徑5p m的W20個/m3。（B級）塵埃粒子：粒徑0.5r m的W 352000 個/m3；粒徑5p m

34、的W2900個/m3。（A級）設(shè)備表面菌落：1（皿。（B級）墻面表面菌落：5（皿。（B級）人員衛(wèi)生：手指1 CFU/皿、無菌服W5 CFU/皿。（A級）浮游菌：平均1 CFU/ m3。（B級）浮游菌：平均W10 CFU/ m3。（A級）沉降菌：平均1 CFU/皿。（B級）沉降菌：平均W5 CFU/皿。記錄05監(jiān)測條件：手消毒劑使用不能超出正常生產(chǎn)時每20 分鐘1次的頻率；班次輪換時不進行消毒清 場。環(huán)境監(jiān)測在生產(chǎn)后期進行，人員衛(wèi)生監(jiān)測 在生產(chǎn)結(jié)束時進行。評價與小結(jié):日期:日期:評價人:復(fù)核人:6.培養(yǎng)工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及結(jié)果培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間。2025,至少7天；3035,至少7天。每日觀察

35、溫度二次，并記錄。附件4記錄06工藝過程：將灌封后的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基計 數(shù)后，翻轉(zhuǎn)一次確保培養(yǎng)基與包材內(nèi)壁充分 接觸，先放置在2025環(huán)境內(nèi)培養(yǎng)至少7天，無菌性檢查，其染菌率不超過1支。期間在第3天將所有產(chǎn)品翻轉(zhuǎn)一次，其后轉(zhuǎn) 入3035環(huán)境內(nèi)培養(yǎng)7天，期間在第3天將 所有產(chǎn)品翻轉(zhuǎn)一次，在第七天培養(yǎng)結(jié)束后統(tǒng) 計污染數(shù)。灌封后培養(yǎng)基進行無菌培養(yǎng)檢查。灌封后培養(yǎng)基無菌培養(yǎng)檢查合格部分，取 40支進行微生物促生長試驗。若有長菌，需判斷是否為容器破損，若 不能判定需進行抽真空檢漏，排除是否容封 口存在問題，否則不能判定為長菌（密閉狀 態(tài)）。促生長試驗（按藥典附錄xniB無菌檢 查法），接種菌的樣品

36、中明顯生長，空白樣 應(yīng)不得有菌生長。評價與小結(jié):評價人：日期:復(fù)核人：日期:7.培養(yǎng)基灌裝后清潔確認(rèn)工藝條件接受標(biāo)準(zhǔn)記錄及結(jié)果配制系統(tǒng)清潔：按更換品種SOP進行清潔，清潔結(jié) 束目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁及取最終水樣 檢測TOC、可見異物。（檢查包括：配 液罐、過濾器、容器具）目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁無殘留污物。附件4記錄07pH試紙檢查呈中性。TOC 不超過 0.50mg/L?？梢姰愇餀z查：不得有大白塊、纖維、色點； 小白點不超過5個。冷藏、除菌過濾系統(tǒng)清潔：按更換品種SOP進行清潔（增加拆 洗），清潔結(jié)束目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁及 取最終水樣檢測TOC、可見異物。（檢 查包括：冷藏罐、除菌過濾系統(tǒng)及管道、 容器

37、具）目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁無殘留污物。附件4記錄08pH試紙檢查呈中性。TOC 不超過 0.50mg/L?？梢姰愇餀z查：不得有大白塊、纖維、色點；小 白點不超過5個。灌封系統(tǒng)清潔：目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁無殘留污物。附件4按更換品種SOP進行清潔，清潔結(jié) 束目視檢查設(shè)備內(nèi)外壁及取最終水樣 檢測TOC、可見異物。（檢查包括：灌 封機及附屬器件）pH試紙檢查呈中性。記錄09TOC 不超過 0.50mg/L?？梢姰愇餀z查：不得有大白塊、纖維、色點；小 白點不超過5個。評價與小結(jié):評價人：日期：復(fù)核人：日期：十、漏項與偏差處理按照以上方法進行的確認(rèn)所規(guī)定的要求和實際結(jié)果進行對比，在確認(rèn)過程中出現(xiàn)的不符合要求的情

38、 況，應(yīng)及時報告驗證小組長，驗證小組長組織進行分析，找出原因經(jīng)驗證小組討論，并形成處理方案。驗 證過程中發(fā)生漏項按P.YQ.101-002確認(rèn)與驗證管理規(guī)程“驗證方案修訂”項下執(zhí)行；發(fā)生偏差按“驗 證偏差的管理”項下執(zhí)行。評價與小結(jié)：評價人：日期：復(fù)核人：日期：十一、再驗證周期1 .當(dāng)空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。2 .培養(yǎng)基模擬灌裝試驗通常情況下應(yīng)當(dāng)按照生產(chǎn)工藝每半年進行一次，每次至少1批。 評價與小結(jié):評價人：日期：復(fù)核人：日期：十二、確立文件根據(jù)本次驗證結(jié)果修訂或確立相關(guān)文件。評價與小結(jié):日期:日期:評價人：復(fù)核人：十三、附件附件1:驗證涉及主要設(shè)備、儀器、培養(yǎng)基表01驗證用主要生產(chǎn)設(shè)備序號工藝點設(shè)備名稱規(guī)格型號設(shè)備編號01配制配料罐02冷藏冷藏罐03除菌過濾除菌過濾系統(tǒng)04洗瓶立式超聲波洗瓶機05隧道式滅菌干燥機06灌封安甑灌封機表02驗證用培養(yǎng)基序號培養(yǎng)基名稱規(guī)格用途廠家01胰蛋白胨大