第二章 天然藥物化學成分提取分離和鑒定的方法與技術

1、第二章 天然藥物化學成分提取分離和鑒定的方法與技術第1頁，共102頁。本章內容本章內容第一節(jié) 提取的方法與技術第二節(jié) 分離精制和鑒定的方法與技術3 32727第2頁，共102頁。章目錄章目錄第3頁，共102頁。一、溶劑提取法一、溶劑提取法 1. 概念概念 溶劑提取法是指根據(jù)天然藥物中各種化學成分的溶解性能溶劑提取法是指根據(jù)天然藥物中各種化學成分的溶解性能，選擇對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小的溶劑，用，選擇對有效成分溶解度大而對其他成分溶解度小的溶劑，用適當?shù)姆椒▽⑺杌瘜W成分盡可能完全地從藥材組織中溶解提適當?shù)姆椒▽⑺杌瘜W成分盡可能完全地從藥材組織中溶解提出的方法。出的方法。 章目錄

2、章目錄第4頁，共102頁。一、溶劑提取法一、溶劑提取法 2基本原理基本原理 溶劑提取法是在滲透、擴散作用下，溶劑滲入藥材組織細胞溶劑提取法是在滲透、擴散作用下，溶劑滲入藥材組織細胞內部，溶解可溶性物質，造成細胞內外溶質的濃度差，從而帶動內部，溶解可溶性物質，造成細胞內外溶質的濃度差，從而帶動溶質作不斷往返的運動，直至細胞內外溶液中被溶解的化學成分溶質作不斷往返的運動，直至細胞內外溶液中被溶解的化學成分的濃度達到平衡，提出所需化學成分。的濃度達到平衡，提出所需化學成分。章目錄章目錄第5頁，共102頁。 選擇合適的溶劑是溶劑提取法的關鍵。選擇合適的溶劑是溶劑提取法的關鍵。 常用溶劑的極性大小順序排

3、列如下：常用溶劑的極性大小順序排列如下：石油醚石油醚 苯苯 無水乙醚無水乙醚 三氯甲烷三氯甲烷 乙酸乙酯乙酸乙酯 正丁醇正丁醇 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水親脂性有機溶劑親脂性有機溶劑親水性有機溶劑親水性有機溶劑 良好溶劑的選擇應遵循良好溶劑的選擇應遵循“相似相溶相似相溶”的規(guī)律，根據(jù)溶劑的極性，的規(guī)律，根據(jù)溶劑的極性，被提取成分及共存的其他成分的性質來決定，同時兼顧考慮溶劑是否被提取成分及共存的其他成分的性質來決定，同時兼顧考慮溶劑是否使用安全、易得、價廉、濃縮方便等問題。使用安全、易得、價廉、濃縮方便等問題。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第6頁，共102頁。方法與技術方法

4、與技術 （一）浸漬法（一）浸漬法 （二）滲漉法（二）滲漉法（三）煎煮法（三）煎煮法（四）回流提?。ㄋ模┗亓魈崛》ǚǎㄎ澹┻B續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法（六）超聲提取法（六）超聲提取法一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第7頁，共102頁。 （一）浸漬法（一）浸漬法 是將藥材用適當?shù)娜軇┰诔鼗驕責岬臈l件下浸泡一定時是將藥材用適當?shù)娜軇┰诔鼗驕責岬臈l件下浸泡一定時間，浸出有效成分的一種方法。間，浸出有效成分的一種方法。 操作技術：操作技術： 一、溶劑提取法一、溶劑提取法 冷浸法冷浸法溫浸法溫浸法章目錄章目錄第8頁，共102頁。 （二）滲漉法（二）滲漉法 是將藥材粗粉置滲漉裝置中，連續(xù)添

5、加溶劑使?jié)B過藥粉是將藥材粗粉置滲漉裝置中，連續(xù)添加溶劑使?jié)B過藥粉，自上而下流動，浸出有效成分的一種動態(tài)浸提方法。，自上而下流動，浸出有效成分的一種動態(tài)浸提方法。 操作技術：操作技術：粉碎粉碎 浸潤浸潤 裝筒裝筒 排氣排氣 浸漬浸漬 滲漉滲漉 收集滲漉液收集滲漉液一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第9頁，共102頁。 （三）煎煮法（三）煎煮法 是將藥材加水加熱煮沸，濾過去渣后取煎煮液的一種傳是將藥材加水加熱煮沸，濾過去渣后取煎煮液的一種傳統(tǒng)提取方法。統(tǒng)提取方法。 操作技術：操作技術： 取藥材飲片或粗粉，置適當煎器（勿使用鐵器）中，加水浸沒取藥材飲片或粗粉，置適當煎器（勿使用鐵器）中，加水浸

6、沒藥材，加熱煮沸，保持微沸，煎煮一定時間后，分離煎煮液，藥渣藥材，加熱煮沸，保持微沸，煎煮一定時間后，分離煎煮液，藥渣可繼續(xù)依法煎煮數(shù)次，合并各次煎煮液，濃縮即得?？衫^續(xù)依法煎煮數(shù)次，合并各次煎煮液，濃縮即得。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第10頁，共102頁。 （四）回流提取法（四）回流提取法 使用低沸點有機溶劑如乙醇、三氯甲烷等加熱提取天然藥物使用低沸點有機溶劑如乙醇、三氯甲烷等加熱提取天然藥物中有效成分時，為減少溶劑的揮發(fā)損失，保持溶劑與藥材持久中有效成分時，為減少溶劑的揮發(fā)損失，保持溶劑與藥材持久的接觸，通過加熱浸出液，使溶劑受熱蒸發(fā)，經冷凝后變?yōu)橐旱慕佑|，通過加熱浸出液，使

7、溶劑受熱蒸發(fā)，經冷凝后變?yōu)橐后w流回浸出器，如此反復至浸出完全的一種熱提取方法。體流回浸出器，如此反復至浸出完全的一種熱提取方法。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第11頁，共102頁。 （四）回流提取法（四）回流提取法 操作技術：操作技術： 將藥材粗粉裝入圓底燒瓶內將藥材粗粉裝入圓底燒瓶內，添加溶劑至蓋過藥面（一般至，添加溶劑至蓋過藥面（一般至燒瓶容積燒瓶容積1/21/22/32/3處），接上冷凝處），接上冷凝管，通入冷卻水，于水浴中加熱回管，通入冷卻水，于水浴中加熱回流一定時間，濾出提取液，藥渣再流一定時間，濾出提取液，藥渣再添加新溶劑回流添加新溶劑回流2 23 3次，合并濾液次，合并

8、濾液，回收有機溶劑后得濃縮提取液，回收有機溶劑后得濃縮提取液。一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第12頁，共102頁。 （五）連續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法 是在回流提取法的基礎上改進的，能用少量溶劑進行連續(xù)循環(huán)是在回流提取法的基礎上改進的，能用少量溶劑進行連續(xù)循環(huán)回流提取，充分將有效成分浸出完全的方法?；亓魈崛?，充分將有效成分浸出完全的方法。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第13頁，共102頁。 操作技術操作技術 先在圓底燒瓶內放入幾粒沸石，然先在圓底燒瓶內放入幾粒沸石，然后將裝好藥材粉末的濾紙袋或筒放入提后將裝好藥材粉末的濾紙袋或筒放入提取器中，藥粉高度應低于虹吸管頂部

9、，取器中，藥粉高度應低于虹吸管頂部，自冷凝管加溶劑入燒瓶內，水浴加熱。自冷凝管加溶劑入燒瓶內，水浴加熱。至有效成分充分被浸出，提取液回收有至有效成分充分被浸出，提取液回收有機溶劑即得。機溶劑即得。 （五）連續(xù)回流提取法（五）連續(xù)回流提取法 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第14頁，共102頁。 （六）超聲提取法（六）超聲提取法 是一種利用超聲波浸提有效成分的方法。是一種利用超聲波浸提有效成分的方法。 其基本原理是利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材的其基本原理是利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材的細胞，使溶劑易于滲入細胞內，同時超聲波的強烈振動能傳細胞，使溶劑易于滲入細胞內，同時超聲波的

10、強烈振動能傳遞巨大能量給浸提的藥材和溶劑，使它們作高速運動，加強遞巨大能量給浸提的藥材和溶劑，使它們作高速運動，加強了胞內物質的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸出，極了胞內物質的釋放、擴散和溶解，加速有效成分的浸出，極大地提高提取效率。大地提高提取效率。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第15頁，共102頁。 （六）超聲提取法（六）超聲提取法 操作技術：操作技術： 將藥材粉末置適宜容器內，加入定量溶劑，密閉后置超聲提取器將藥材粉末置適宜容器內，加入定量溶劑，密閉后置超聲提取器內，選擇適當超聲頻率提取一段時間（一般只需要數(shù)十分鐘）后即得內，選擇適當超聲頻率提取一段時間（一般只需要數(shù)十分

11、鐘）后即得。 一、溶劑提取法一、溶劑提取法章目錄章目錄第16頁，共102頁。二、其他提取方法二、其他提取方法 （一）水蒸氣蒸餾法（一）水蒸氣蒸餾法 是一種利用某些揮發(fā)性成分與水或水蒸氣共同加熱是一種利用某些揮發(fā)性成分與水或水蒸氣共同加熱，能隨水蒸氣一并蒸餾出，經冷凝后分取獲得的性質，能隨水蒸氣一并蒸餾出，經冷凝后分取獲得的性質，使之從天然藥物中提出的方法。使之從天然藥物中提出的方法。 章目錄章目錄第17頁，共102頁。 （一）水蒸氣蒸餾法（一）水蒸氣蒸餾法 操作技術：操作技術： 將藥材粗粉裝入蒸餾瓶內將藥材粗粉裝入蒸餾瓶內，加入水使藥材充分浸潤，體，加入水使藥材充分浸潤，體積不超過蒸餾瓶容積的

12、積不超過蒸餾瓶容積的1/31/3，然后加熱水蒸氣發(fā)生器使水然后加熱水蒸氣發(fā)生器使水沸騰，產生水蒸氣通入蒸餾沸騰，產生水蒸氣通入蒸餾瓶，藥材中揮發(fā)性成分隨水瓶，藥材中揮發(fā)性成分隨水蒸氣蒸餾被帶出，經冷凝后蒸氣蒸餾被帶出，經冷凝后，收集于接受瓶中，若餾出，收集于接受瓶中，若餾出液由渾濁變澄清透明，表示液由渾濁變澄清透明，表示蒸餾基本完成。蒸餾基本完成。二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第18頁，共102頁。 （二）升華法（二）升華法 是利用某些固體物質具有在低于其熔點的溫度下是利用某些固體物質具有在低于其熔點的溫度下受熱后，不經熔融就直接轉化為蒸氣，遇冷后又凝固受熱后，不經熔融就直接轉化

13、為蒸氣，遇冷后又凝固為原來的固體的性質，使之從天然藥物中提出的方法為原來的固體的性質，使之從天然藥物中提出的方法。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第19頁，共102頁。 （二）升華法（二）升華法 操作技術：操作技術： 預先粉碎待升華的天然預先粉碎待升華的天然藥物，將粉末置于升華器皿藥物，將粉末置于升華器皿中，鋪均勻，上面放一冷凝中，鋪均勻，上面放一冷凝器，加熱升華器皿到一定溫器，加熱升華器皿到一定溫度，使被提取物質升華，升度，使被提取物質升華，升華物質冷凝于冷凝器表面即華物質冷凝于冷凝器表面即得。得。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第20頁，共102頁。 （三）超臨

14、界流體萃取技術（三）超臨界流體萃取技術 超臨界流體萃?。ǔR界流體萃?。╯upercritical fluid extraction，SFE）是一種利用某物質在超臨界區(qū)域形成的流體，對天然）是一種利用某物質在超臨界區(qū)域形成的流體，對天然藥物中有效成分進行萃取分離的新型技術，集提取和分藥物中有效成分進行萃取分離的新型技術，集提取和分離于一體。離于一體。二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第21頁，共102頁。 （三）超臨界流體萃取技術（三）超臨界流體萃取技術 操作技術：操作技術： 超臨界流體萃取工藝程序：將藥材原料投入萃取器超臨界流體萃取工藝程序：將藥材原料投入萃取器6 6中，對萃取器中

15、，對萃取器6 6和分離器和分離器7 7分別進行加熱或冷卻，當達到所選分別進行加熱或冷卻，當達到所選定的溫度時，開啟定的溫度時，開啟COCO2 2氣瓶閥門及閥門氣瓶閥門及閥門1212進氣，啟動高壓閥進氣，啟動高壓閥4 4對系統(tǒng)加壓，當達到預定壓力時，調節(jié)減壓閥對系統(tǒng)加壓，當達到預定壓力時，調節(jié)減壓閥9 9，使分，使分離器離器7 7內壓力達到設定值，打開放空閥內壓力達到設定值，打開放空閥1010調節(jié)流量。通過各閥調節(jié)流量。通過各閥門的調節(jié)，使萃取過程中通過的流量及萃取器內壓力、分離門的調節(jié)，使萃取過程中通過的流量及萃取器內壓力、分離器內壓力都穩(wěn)定在設定的操作條件后，關閉閥門器內壓力都穩(wěn)定在設定的操

16、作條件后，關閉閥門1010，打開閥，打開閥門門1111，開始進行循環(huán)萃取，萃取過程中達到一定時間后，從，開始進行循環(huán)萃取，萃取過程中達到一定時間后，從閥門閥門8 8取出萃取物。取出萃取物。 二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第22頁，共102頁。 （三）超臨界流體萃取技術（三）超臨界流體萃取技術 超臨界流體萃取工藝程序：超臨界流體萃取工藝程序： 1 CO1 CO2 2氣瓶氣瓶 2 2 純化器純化器 3 3 冷凝器冷凝器 4 4 高壓泵高壓泵 5 5 加熱器加熱器 6 6 萃取器萃取器 7 7 分離器分離器 8 8 放油器放油器 9 9 減壓閥減壓閥 10.11.12 10.11.12

17、 閥門閥門二、其他提取方法二、其他提取方法章目錄章目錄第23頁，共102頁。課堂活動課堂活動 如何根據(jù)實際工作的需要選擇適當?shù)奶崛》椒ㄈ绾胃鶕?jù)實際工作的需要選擇適當?shù)奶崛》椒?？試用連線一一對應連接。并敘述各法選用的儀器？試用連線一一對應連接。并敘述各法選用的儀器、操作步驟、注意事項和適用范圍。、操作步驟、注意事項和適用范圍。 章目錄章目錄第24頁，共102頁。浸漬法浸漬法 提取受熱易破壞的成分，能保持良好濃度提取受熱易破壞的成分，能保持良好濃度 差的一種動態(tài)浸提方法差的一種動態(tài)浸提方法滲漉法滲漉法 以水為溶劑加熱提取以水為溶劑加熱提取煎煮法煎煮法 使用索氏提取器進行提取使用索氏提取器進行提取

18、回流提取法回流提取法 提取受熱易破壞的成分及含多糖物質較多提取受熱易破壞的成分及含多糖物質較多 的天然藥物的天然藥物連續(xù)回流提取法連續(xù)回流提取法 用有機溶劑自天然藥物中提取脂溶性成分用有機溶劑自天然藥物中提取脂溶性成分水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法 提取有升華性的成分提取有升華性的成分升華法升華法 提取能隨水蒸氣蒸餾且不溶于水的成分提取能隨水蒸氣蒸餾且不溶于水的成分課堂活動課堂活動章目錄章目錄第25頁，共102頁。點滴積累點滴積累l 1. 天然藥物化學成分的提取方法有溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、天然藥物化學成分的提取方法有溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、升華法、超臨界流體萃取技術等。溶劑提取法是目前提取有效

19、成升華法、超臨界流體萃取技術等。溶劑提取法是目前提取有效成分最常用的方法，具體的操作技術有浸漬法、滲漉法、煎煮法、分最常用的方法，具體的操作技術有浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)回流提取法、超聲提取法等?；亓魈崛》?、連續(xù)回流提取法、超聲提取法等。l 2. 研究天然藥物化學成分需首先從提取工作開始。對各種方法所用的研究天然藥物化學成分需首先從提取工作開始。對各種方法所用的溶劑種類、儀器、特點及適用范圍進行比較區(qū)別，合理設計提取方法和溶劑種類、儀器、特點及適用范圍進行比較區(qū)別，合理設計提取方法和正確的提取操作將為下一步分離工作的順利進行打下堅實的基礎。正確的提取操作將為下一步分離工作的順利

20、進行打下堅實的基礎。章目錄章目錄第26頁，共102頁。章目錄章目錄第27頁，共102頁。一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法 是一種按極性由小到大的順序選用不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)是一種按極性由小到大的順序選用不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)，依次提取分離提取液中各種不同成分，使各溶解度有差異的成，依次提取分離提取液中各種不同成分，使各溶解度有差異的成分得到分離的方法。分得到分離的方法。 此法是早年研究天然產物有效成分的一種最主要的方法，目前仍是研究此法是早年研究天然產物有效成分的一種最主要的方法，目前仍是研究不明成分最為常用的方法。不明成分最為常用的方法。 章目錄章目錄第28頁，共102頁。 操

21、作技術：操作技術： 適當濃縮總提取液，或拌入適量惰性吸附劑如：粗硅膠、纖維適當濃縮總提取液，或拌入適量惰性吸附劑如：粗硅膠、纖維粉及硅藻土等，低溫或自然干燥后粉碎，然后依次用石油醚（或苯粉及硅藻土等，低溫或自然干燥后粉碎，然后依次用石油醚（或苯）、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水分步進行抽提，）、乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水分步進行抽提，使溶解度不同的各種成分得到分段分離。也可以選擇其中三、四種使溶解度不同的各種成分得到分段分離。也可以選擇其中三、四種不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)，如石油醚不同極性的溶劑組成溶劑系統(tǒng)，如石油醚苯苯乙醚乙醚三氯甲烷三氯甲烷乙酸乙酯乙酸乙酯正丁醇或

22、戊醇，由低極性到高極性分步進行抽提，分成正丁醇或戊醇，由低極性到高極性分步進行抽提，分成若干部位。若干部位。 一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法章目錄章目錄第29頁，共102頁。一、系統(tǒng)溶劑分離法一、系統(tǒng)溶劑分離法章目錄章目錄第30頁，共102頁。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法 是指往提取液中加入一種與其互不相溶的溶劑配成兩相溶劑系是指往提取液中加入一種與其互不相溶的溶劑配成兩相溶劑系統(tǒng)，利用混合物中各種成分分配系數(shù)的差異而將所需成分萃取統(tǒng)，利用混合物中各種成分分配系數(shù)的差異而將所需成分萃取出來的分離方法。出來的分離方法。 章目錄章目錄第31頁，共102頁。 基本原理：利用混合物中各種

23、成分在兩相互不相溶的溶劑中基本原理：利用混合物中各種成分在兩相互不相溶的溶劑中分配系數(shù)分配系數(shù)的差異而達到分離的目的?；旌衔镏懈鞣N成分在同一兩相溶的差異而達到分離的目的?；旌衔镏懈鞣N成分在同一兩相溶劑系統(tǒng)中分別有各自不同的分配系數(shù)，若劑系統(tǒng)中分別有各自不同的分配系數(shù)，若各種成分的分配系數(shù)各種成分的分配系數(shù)差異越大，則分離效果越好。差異越大，則分離效果越好。 K=Cu/CLK K 表示分配系數(shù)表示分配系數(shù)；C Cu u 表示溶質在上相溶劑中的濃度；表示溶質在上相溶劑中的濃度；C CL L 表示溶質在下相溶劑中的濃度。表示溶質在下相溶劑中的濃度。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄第3

24、2頁，共102頁。（一）簡單萃取法（一）簡單萃取法 二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法待萃取物和溶劑裝入分液漏斗待萃取物和溶劑裝入分液漏斗振搖，重復數(shù)次振搖，重復數(shù)次靜置，使兩液分層靜置，使兩液分層開啟活塞使下層液放出開啟活塞使下層液放出從分液漏斗的上端倒出上層液從分液漏斗的上端倒出上層液操作技術：操作技術： 這是一種這是一種常用的簡便萃常用的簡便萃取技術，小量取技術，小量萃取一般在分萃取一般在分液漏斗中進行液漏斗中進行。章目錄章目錄第33頁，共102頁。（二）逆流連續(xù)萃取法（二）逆流連續(xù)萃取法 是利用兩相互不相溶的溶劑是利用兩相互不相溶的溶劑相對密度的不同，使相對密度小相對密度的不同，使相

25、對密度小的相液作為移動相（或分散相）的相液作為移動相（或分散相），逆流連續(xù)穿過相對密度大的作，逆流連續(xù)穿過相對密度大的作為固定相（或連續(xù)相）的相液，為固定相（或連續(xù)相）的相液，借以交換溶質而達到分離的一種借以交換溶質而達到分離的一種連續(xù)萃取技術。連續(xù)萃取技術。 二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄第34頁，共102頁。（三）逆流分溶法（三）逆流分溶法 逆流分溶法（逆流分溶法（counter current distribution，CCD）是一種高效）是一種高效、多次、連續(xù)的兩相溶劑萃取分離方法，亦稱為逆流分配法、逆流、多次、連續(xù)的兩相溶劑萃取分離方法，亦稱為逆流分配法、逆流分布法

26、或反流分布法。分布法或反流分布法。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄第35頁，共102頁。（四）液滴逆流分配法（四）液滴逆流分配法 液滴逆流分配法液滴逆流分配法（droplet counter current chromatography，DCCC），），利利用混合物中各成分在兩液相間的分配系數(shù)的差異，使移動相形成液滴，通過作為用混合物中各成分在兩液相間的分配系數(shù)的差異，使移動相形成液滴，通過作為固定相的液柱實現(xiàn)逆流分配，從而達到分離目的。固定相的液柱實現(xiàn)逆流分配，從而達到分離目的。二、兩相溶劑萃取法二、兩相溶劑萃取法章目錄章目錄第36頁，共102頁。三、沉淀法三、沉淀法 是指在

27、天然藥物的提取液中加入某些試劑是指在天然藥物的提取液中加入某些試劑,使產生使產生成沉淀或降低溶解性而從溶液中析出，從而獲得有效成沉淀或降低溶解性而從溶液中析出，從而獲得有效成分或去除雜質的方法。成分或去除雜質的方法。 章目錄章目錄第37頁，共102頁。l（一）酸堿沉淀法（一）酸堿沉淀法 是一種利用某些成分能在酸（或堿）中溶解，繼而又在堿（或是一種利用某些成分能在酸（或堿）中溶解，繼而又在堿（或酸）中生成沉淀的性質達到分離的方法。酸）中生成沉淀的性質達到分離的方法。 操作技術：操作技術： 往提取液中加入適量酸水（或堿水），將欲分離成分處理成鹽往提取液中加入適量酸水（或堿水），將欲分離成分處理成鹽

28、溶解于酸水（或堿水）中，然后再加入適量堿水（或酸水），使溶解于酸水（或堿水）中，然后再加入適量堿水（或酸水），使欲分離成分恢復原來的結構，形成沉淀析出，最后可以離心或利欲分離成分恢復原來的結構，形成沉淀析出，最后可以離心或利用與水不相混溶的有機溶劑把這些化學成分萃取分離獲得。用與水不相混溶的有機溶劑把這些化學成分萃取分離獲得。 三、沉淀法三、沉淀法章目錄章目錄第38頁，共102頁。l（二）試劑沉淀法（二）試劑沉淀法 是一種利用一些成分能與某些試劑產生沉淀的性質，或利用某些是一種利用一些成分能與某些試劑產生沉淀的性質，或利用某些成分在不同溶劑中溶解度的差異，通過加入特定試劑或溶劑，使生成成分在不

29、同溶劑中溶解度的差異，通過加入特定試劑或溶劑，使生成沉淀，與其他成分分離的方法。沉淀，與其他成分分離的方法。 操作技術：操作技術： 向提取液中加入某些特定試劑或溶劑，使欲分離成分與試劑生成沉向提取液中加入某些特定試劑或溶劑，使欲分離成分與試劑生成沉淀或因溶解度降低而沉淀析出，待完全沉淀后，濾過即得。淀或因溶解度降低而沉淀析出，待完全沉淀后，濾過即得。 三、沉淀法三、沉淀法章目錄章目錄第39頁，共102頁。四、結晶與重結晶法四、結晶與重結晶法 是利用混合物中各種成分在溶劑中溶解度的差別是利用混合物中各種成分在溶劑中溶解度的差別，使所需成分以結晶狀態(tài)析出，再進一步純化處，使所需成分以結晶狀態(tài)析出，

30、再進一步純化處理，以達到分離精制目的的分離方法。理，以達到分離精制目的的分離方法。 章目錄章目錄第40頁，共102頁。 選擇合適的溶劑是結晶法的關鍵。選擇合適的溶劑是結晶法的關鍵。 理想的溶劑必須具備以下條件：理想的溶劑必須具備以下條件：u 不與結晶物質發(fā)生化學反應；不與結晶物質發(fā)生化學反應；u 對結晶物質的溶解度隨溫度不同有顯著差異，熱時溶解度大對結晶物質的溶解度隨溫度不同有顯著差異，熱時溶解度大，冷時溶解度?。?，冷時溶解度小；u 對可能存在的雜質溶解度非常大或非常?。蠢錈峋軐赡艽嬖诘碾s質溶解度非常大或非常小（即冷熱均溶或均不溶）；或均不溶）；u沸點適中，不宜過高或過低；沸點適中，不宜

31、過高或過低；u能給出較好的結晶。能給出較好的結晶。 常用的溶劑有水、乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸常用的溶劑有水、乙酸、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等。當不能選擇到一種合適的溶劑時，乙酯、三氯甲烷等。當不能選擇到一種合適的溶劑時，通常選用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑。通常選用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑。 四、結晶與重結晶法四、結晶與重結晶法章目錄章目錄第41頁，共102頁。操作技術：操作技術：四、結晶與重結晶法四、結晶與重結晶法制備結晶溶液制備結晶溶液趁熱濾過，除去不溶性雜質趁熱濾過，除去不溶性雜質將濾液放冷，使析出結晶將濾液放冷，使析出結晶抽氣濾過，將結晶從母液中分出抽氣濾過

32、，將結晶從母液中分出重結晶重結晶晶體的干燥晶體的干燥章目錄章目錄第42頁，共102頁。難點釋疑難點釋疑結晶法如何選擇合適的混合溶劑？結晶法如何選擇合適的混合溶劑？ 選用混合溶劑，最好選擇結晶成分能在低沸點溶劑選用混合溶劑，最好選擇結晶成分能在低沸點溶劑中易溶解，而在高沸點溶劑中難溶解的兩種混合溶劑中易溶解，而在高沸點溶劑中難溶解的兩種混合溶劑，因為低沸點溶劑較易揮發(fā)而逐漸減少在混合溶劑中，因為低沸點溶劑較易揮發(fā)而逐漸減少在混合溶劑中的比例，結晶即可慢慢析出。的比例，結晶即可慢慢析出。章目錄章目錄第43頁，共102頁。五、透析法五、透析法 是利用透析膜具有選擇性透過的特點，使提取液是利用透析膜具

33、有選擇性透過的特點，使提取液中小分子物質可通過透析膜，而大分子物質不能中小分子物質可通過透析膜，而大分子物質不能通過，則分子量差異較大的物質獲得分離的方法通過，則分子量差異較大的物質獲得分離的方法。 章目錄章目錄第44頁，共102頁。 操作技術：操作技術： 如圖所示，將提取液置透析膜中，扎如圖所示，將提取液置透析膜中，扎緊口，外面護以尼龍網袋，放入清水缸中緊口，外面護以尼龍網袋，放入清水缸中。不斷更換缸內的水，使膜內外的濃度差。不斷更換缸內的水，使膜內外的濃度差增加，或稍加攪拌或適當加溫處理；也可增加，或稍加攪拌或適當加溫處理；也可以在近透析膜兩旁處放置兩個電極，稱電以在近透析膜兩旁處放置兩個

34、電極，稱電透析，通電后使帶電荷離子的透析速度增透析，通電后使帶電荷離子的透析速度增加加1010倍以上，以加快透析的速度。透析過倍以上，以加快透析的速度。透析過程中，用定性反應對膜內藥液有效成分程中，用定性反應對膜內藥液有效成分或指標成分進行檢查分析，判斷透析是或指標成分進行檢查分析，判斷透析是否完全。否完全。 五、透析法五、透析法章目錄章目錄第45頁，共102頁。六、分餾法六、分餾法 是利用各沸點不同的化合物組成的混合物，在分餾過是利用各沸點不同的化合物組成的混合物，在分餾過程中產生高低不同的蒸氣壓，從而收集到不同沸點溫程中產生高低不同的蒸氣壓，從而收集到不同沸點溫度的餾分，達到分離目的的方法

35、。度的餾分，達到分離目的的方法。 章目錄章目錄第46頁，共102頁。操作技術：操作技術： 實驗室常用簡單分餾裝置如圖所示，操作時將待實驗室常用簡單分餾裝置如圖所示，操作時將待分餾的試樣放入圓底燒瓶中，加入沸石，安裝好裝置分餾的試樣放入圓底燒瓶中，加入沸石，安裝好裝置后，在分餾柱的外圍盡量用石棉繩包住，選擇合適的后，在分餾柱的外圍盡量用石棉繩包住，選擇合適的熱浴加熱。當瓶內液體一開始沸騰時，就要注意調節(jié)熱浴加熱。當瓶內液體一開始沸騰時，就要注意調節(jié)溫度，使蒸氣緩慢升入分餾柱。當蒸氣進入分流柱時溫度，使蒸氣緩慢升入分餾柱。當蒸氣進入分流柱時，由于柱外空氣的冷卻，部分蒸氣凝成液體，顯然高，由于柱外空

36、氣的冷卻，部分蒸氣凝成液體，顯然高沸點的組分較易被冷凝，隨著分流柱管的升高，愈向沸點的組分較易被冷凝，隨著分流柱管的升高，愈向上混合蒸氣中所含高沸點的組分愈少，到了一定高度上混合蒸氣中所含高沸點的組分愈少，到了一定高度時可獲得某一純的組分。待低沸點組分蒸完后，再逐時可獲得某一純的組分。待低沸點組分蒸完后，再逐漸升溫，如此進行操作，使不同沸點的組分逐一分餾漸升溫，如此進行操作，使不同沸點的組分逐一分餾出來。出來。 六、分餾法六、分餾法章目錄章目錄第47頁，共102頁。課堂活動課堂活動 天然藥物提取液為混合物，根據(jù)成分性質的不同，請用連線選擇天然藥物提取液為混合物，根據(jù)成分性質的不同，請用連線選擇

37、相適應的分離方法。相適應的分離方法。系統(tǒng)溶劑萃取法系統(tǒng)溶劑萃取法 從某天然藥物的水提液中加入戊醇獲取皂苷從某天然藥物的水提液中加入戊醇獲取皂苷兩相溶劑萃取法兩相溶劑萃取法 分離未知成分的天然藥物提取液分離未知成分的天然藥物提取液沉淀法沉淀法 去除鹽酸小檗堿粗制品中的雜質（已知鹽酸小檗堿熱水去除鹽酸小檗堿粗制品中的雜質（已知鹽酸小檗堿熱水 易溶，冷水難溶）易溶，冷水難溶）結晶法結晶法 加入雷氏銨鹽從某天然藥物水提液中獲得季銨鹽加入雷氏銨鹽從某天然藥物水提液中獲得季銨鹽透析法透析法 毒芹總堿中的毒芹堿（沸點毒芹總堿中的毒芹堿（沸點166166167167）和羥基毒芹堿）和羥基毒芹堿 （沸點（沸點2

38、26226）分餾法分餾法 分離某天然藥物蛋白質提取液中的無機鹽和其他小分子分離某天然藥物蛋白質提取液中的無機鹽和其他小分子 雜質雜質章目錄章目錄第48頁，共102頁。七、色譜法七、色譜法 色譜法（色譜法（chromatographychromatography），又稱為色譜分離法、層析法，是一種），又稱為色譜分離法、層析法，是一種分離、純化和鑒定化合物的物理化學分離分析方法。分離、純化和鑒定化合物的物理化學分離分析方法。 基本原理基本原理: : 是利用混合物中各成分在固定相和移動相中吸附、分配及其是利用混合物中各成分在固定相和移動相中吸附、分配及其親和力的差異而達到分離。親和力的差異而達到分離

39、。章目錄章目錄第49頁，共102頁。色譜法的分類色譜法的分類 依據(jù)依據(jù)分類分類按固定相或支持劑種按固定相或支持劑種類不同類不同氧化鋁色譜、硅膠色譜、聚酰胺色譜氧化鋁色譜、硅膠色譜、聚酰胺色譜、凝膠、凝膠 色譜等色譜等按移動相種類不同按移動相種類不同氣相色譜、液相色譜氣相色譜、液相色譜按色譜原理不同按色譜原理不同吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜等、凝膠色譜等按操作方式不同按操作方式不同柱色譜、紙色譜、薄層色譜等柱色譜、紙色譜、薄層色譜等七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第50頁，共102頁。被分離化合物與相應選擇的色譜方法被分離化合物與相應選擇的色譜方法

40、被分離化合物被分離化合物可選用色譜可選用色譜生物堿類生物堿類一般生物堿一般生物堿硅膠、氧化鋁柱色譜硅膠、氧化鋁柱色譜極性較大的生物堿極性較大的生物堿分配色譜分配色譜季銨型水溶性生物堿季銨型水溶性生物堿分配色譜、離子交換色譜分配色譜、離子交換色譜皂苷類、強心苷類皂苷類、強心苷類分配色譜、硅膠吸附色譜分配色譜、硅膠吸附色譜揮發(fā)油、甾體、萜類揮發(fā)油、甾體、萜類硅膠、氧化鋁色譜硅膠、氧化鋁色譜黃酮類、鞣質黃酮類、鞣質聚酰胺吸附色譜聚酰胺吸附色譜有機酸、氨基酸有機酸、氨基酸離子交換色譜、分配色譜、活性炭離子交換色譜、分配色譜、活性炭吸附色譜吸附色譜蛋白質、多肽、多糖類蛋白質、多肽、多糖類凝膠濾過色譜凝膠

41、濾過色譜七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第51頁，共102頁。 （一）柱色譜法（一）柱色譜法 是一種將分離材料裝入柱狀容器中，以適當?shù)南疵搫┻M行洗脫是一種將分離材料裝入柱狀容器中，以適當?shù)南疵搫┻M行洗脫而使不同成分得到分離的色譜分離方法，也是色譜法最早出現(xiàn)的而使不同成分得到分離的色譜分離方法，也是色譜法最早出現(xiàn)的形式，可用于分離天然藥物中各種化學成分。形式，可用于分離天然藥物中各種化學成分。 l 1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 是一種在柱狀容器中操作，利用作為固定相的吸附劑對混合物中各種是一種在柱狀容器中操作，利用作為固定相的吸附劑對混合物中各種成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互分離的方

42、法。成分吸附能力的大小不同，使各成分得到相互分離的方法。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第52頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （1 1）基本原理：）基本原理： 當混合物成分到達作為固定相的吸附劑表面時，由于吸附劑當混合物成分到達作為固定相的吸附劑表面時，由于吸附劑表面與成分分子的吸附作用，產生了成分分子在吸附劑表面濃度表面與成分分子的吸附作用，產生了成分分子在吸附劑表面濃度增大的吸附現(xiàn)象；當移動相連續(xù)通過吸附劑表面時，由于移動相增大的吸附現(xiàn)象；當移動相連續(xù)通過吸附劑表面時，由于移動相與混合物成分爭奪吸附劑活性表面，產生了成分分子溶解于移動與混合物成分爭奪吸附劑活性表面，產生

43、了成分分子溶解于移動相的解吸附現(xiàn)象；隨著移動相的移動，混合物在不斷進行著吸附相的解吸附現(xiàn)象；隨著移動相的移動，混合物在不斷進行著吸附- -解吸附的可逆過程，利用各成分在兩相中遷移速度的不同而解吸附的可逆過程，利用各成分在兩相中遷移速度的不同而達到分離。達到分離。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第53頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （2 2）常用的吸附劑：吸附劑有氧化鋁、硅膠、硅藻土、氧化常用的吸附劑：吸附劑有氧化鋁、硅膠、硅藻土、氧化鎂、碳酸鈣、聚酰胺和活性炭等，常用的有以下幾種：鎂、碳酸鈣、聚酰胺和活性炭等，常用的有以下幾種： 1 1）硅膠）硅膠 2 2）氧化鋁）氧化鋁

44、3 3）聚酰胺）聚酰胺 4 4）活性炭）活性炭 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第54頁，共102頁。1 1）硅膠）硅膠 硅膠是一種微呈酸性的多孔性物質。常用硅膠是一種微呈酸性的多孔性物質。常用SiOSiO2 2xHxH2 2O O表示，表示，為硅氧烷交鏈結構：為硅氧烷交鏈結構： OSiOSiOHOOOO 其骨架表面具有很多硅醇基，使硅膠能與許多化合物形成氫其骨架表面具有很多硅醇基，使硅膠能與許多化合物形成氫鍵而產生吸附作用。游離硅醇基數(shù)目的多少決定了硅膠吸附作用鍵而產生吸附作用。游離硅醇基數(shù)目的多少決定了硅膠吸附作用的強弱。硅醇基也容易通過氫鍵與水結合，隨著含水量的增加，的強弱。硅醇基也容易

45、通過氫鍵與水結合，隨著含水量的增加，硅膠表面的游離硅醇基數(shù)目減少，硅膠吸附其他化合物的能力便硅膠表面的游離硅醇基數(shù)目減少，硅膠吸附其他化合物的能力便隨之減弱。隨之減弱。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第55頁，共102頁。 2 2）氧化鋁）氧化鋁 氧化鋁是一種吸附力很強的親水性吸附劑，有酸性、堿性、中性三氧化鋁是一種吸附力很強的親水性吸附劑，有酸性、堿性、中性三種規(guī)格。其吸附活性也與含水量有關，隨著含水量的增加，吸附能力種規(guī)格。其吸附活性也與含水量有關，隨著含水量的增加，吸附能力減弱。減弱。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第56頁，共102頁。硅膠、氧化鋁活度與含水量關系硅膠、氧化鋁活度與

46、含水量關系 活度等級含水量%硅膠氧化鋁005315625103815七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第57頁，共102頁。 3 3）聚酰胺）聚酰胺 聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高分子化合物。商品名又稱聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高分子化合物。商品名又稱為綿綸、尼龍。色譜分離常用聚己內酰胺（綿綸為綿綸、尼龍。色譜分離常用聚己內酰胺（綿綸6 6）和聚己二酰己）和聚己二酰己二胺（綿綸二胺（綿綸6666），其中聚己內酰胺可用結構式表示為：），其中聚己內酰胺可用結構式表示為： CH3NCCH2H2CCH2H2CCH2H3COHn七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第58頁，共102頁。3 3）聚酰胺）聚酰胺

47、 移動相移動相聚酰胺吸附色譜的原理聚酰胺吸附色譜的原理固定相固定相七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第59頁，共102頁。 3 3）聚酰胺）聚酰胺 聚酰胺對化合物吸附力的強弱取決于形成氫鍵的能力，形聚酰胺對化合物吸附力的強弱取決于形成氫鍵的能力，形成氫鍵的能力受以下因素影響：成氫鍵的能力受以下因素影響： 溶劑的種類：聚酰胺形成氫鍵的能力在水中最強，在有溶劑的種類：聚酰胺形成氫鍵的能力在水中最強，在有機溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。若應用各種溶劑在聚酰胺機溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。若應用各種溶劑在聚酰胺柱色譜中作為洗脫劑，則洗脫能力的順序如下：水甲醇或乙柱色譜中作為洗脫劑，則洗脫能力的順序如下

48、：水甲醇或乙醇丙酮稀氫氧化鈉液或稀氨溶液甲酰胺或二甲基甲酰胺醇丙酮稀氫氧化鈉液或稀氨溶液甲酰胺或二甲基甲酰胺尿素水溶液。尿素水溶液。 化合物分子結構：在含水溶劑中，化合物分子結構對氫化合物分子結構：在含水溶劑中，化合物分子結構對氫鍵締合的影響有以下幾點規(guī)律：鍵締合的影響有以下幾點規(guī)律：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第60頁，共102頁。 3 3）聚酰胺）聚酰胺 A.A.化合物分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多，被聚酰胺吸附化合物分子中能形成氫鍵的基團數(shù)目越多，被聚酰胺吸附越強。如：越強。如： 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第61頁，共102頁。 3 3）聚酰胺）聚酰胺 B.B.形成氫鍵的基團所

49、處位置不同，被吸附的強度也不同。如：形成氫鍵的基團所處位置不同，被吸附的強度也不同。如： C.C.分子中芳香核、共軛雙鍵多者被吸附強度大，少者則被吸附強度分子中芳香核、共軛雙鍵多者被吸附強度大，少者則被吸附強度小。小。 如：如：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第62頁，共102頁。 3 3）聚酰胺）聚酰胺 D.D.能形成分子內氫鍵者被吸附強度減小。能形成分子內氫鍵者被吸附強度減小。 如：如：七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第63頁，共102頁。 4 4）活性炭）活性炭 活性炭是一種非極性吸附劑，具有較強的吸附能力，活性炭是一種非極性吸附劑，具有較強的吸附能力， 其吸其吸附能力受溶劑的影響，在水

50、溶液中的吸附力最強，在有機溶劑中附能力受溶劑的影響，在水溶液中的吸附力最強，在有機溶劑中吸附力較弱。在一定條件下，對不同物質的吸附力也有差別。一吸附力較弱。在一定條件下，對不同物質的吸附力也有差別。一般對極性基團多的化合物的吸附力大于極性基團少的化合物；對般對極性基團多的化合物的吸附力大于極性基團少的化合物；對芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；對分子量大的化合物芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；對分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物。的吸附力大于分子量小的化合物。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第64頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （3 3）移動相：用吸附柱色

51、譜法分離混合物，選擇何種溶劑為移移動相：用吸附柱色譜法分離混合物，選擇何種溶劑為移動相對分離效果有極大的影響。所選移動相溶劑應具備純度高，動相對分離效果有極大的影響。所選移動相溶劑應具備純度高，不含水分；與試樣、吸附劑不起化學反應；對被分離成分有適當不含水分；與試樣、吸附劑不起化學反應；對被分離成分有適當?shù)娜芙舛?；黏度?。灰讚]散等條件。對于極性吸附劑，若選擇的的溶解度；黏度小；易揮散等條件。對于極性吸附劑，若選擇的移動相溶劑極性越大，則其展開或洗脫能力就越強；對于非極性移動相溶劑極性越大，則其展開或洗脫能力就越強；對于非極性吸附劑，則剛好相反，選擇的移動相溶劑極性越小，其展開或洗吸附劑，則剛好

52、相反，選擇的移動相溶劑極性越小，其展開或洗脫能力就越強。具體選擇時，尚需結合被分離物質的極性來綜合脫能力就越強。具體選擇時，尚需結合被分離物質的極性來綜合考慮?？紤]。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第65頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （4 4）被分離物質：被分離成分、吸附劑、移動相三者為組成吸附柱色被分離物質：被分離成分、吸附劑、移動相三者為組成吸附柱色譜必不可少的要素，被分離成分的結構和極性大小決定了其與吸附劑譜必不可少的要素，被分離成分的結構和極性大小決定了其與吸附劑、移動相之間的相互作用。對于極性吸附劑，被分離物質的極性越大、移動相之間的相互作用。對于極性吸附劑，被

53、分離物質的極性越大，被吸附越強，移動相進行洗脫就越困難?；衔锏臉O性與其官能團，被吸附越強，移動相進行洗脫就越困難?；衔锏臉O性與其官能團的種類、數(shù)目及位置有關，同時也應注意考慮分子中電效應、立體效的種類、數(shù)目及位置有關，同時也應注意考慮分子中電效應、立體效應等因素的影響。應等因素的影響。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第66頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （4 4）被分離物質：被分離物質：常見一些化合物官能團的極性大小順序如下：常見一些化合物官能團的極性大小順序如下： （烷烴烯烴芳烴）（鹵烴）RHRXOCH3COORCHOSHNH2OHArOHCOOH C O 七、色譜法七

54、、色譜法章目錄章目錄第67頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 被分離成分、吸附劑、移動相三者關系密不可分，一般而被分離成分、吸附劑、移動相三者關系密不可分，一般而言，極性吸附劑如硅膠、氧化鋁等適用于分離親脂性成分，言，極性吸附劑如硅膠、氧化鋁等適用于分離親脂性成分，非極性吸附劑如活性炭適用于分離親水性成分。若被分離物非極性吸附劑如活性炭適用于分離親水性成分。若被分離物質的極性較大，可選用活度較低的吸附劑，而移動相的極性質的極性較大，可選用活度較低的吸附劑，而移動相的極性較大；若被分離物質的極性較小，可選用活度較高的吸附劑較大；若被分離物質的極性較小，可選用活度較高的吸附劑，而移動

55、相的極性較小。具體應用時，需全面考慮吸附劑、，而移動相的極性較小。具體應用時，需全面考慮吸附劑、移動相及被分離成分三者間相互聯(lián)系又相互制約的關系，選移動相及被分離成分三者間相互聯(lián)系又相互制約的關系，選擇合適的條件，使達到分離的目的。擇合適的條件，使達到分離的目的。 七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第68頁，共102頁。l1 1吸附柱色譜法吸附柱色譜法 （5）操作技術）操作技術： 選擇色譜柱選擇色譜柱 裝柱裝柱 上樣上樣 洗脫洗脫 收集洗脫液收集洗脫液七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第69頁，共102頁。課堂活動課堂活動 模擬實驗室硅膠柱色譜操作，取一色譜柱和適模擬實驗室硅膠柱色譜操作，取一色譜

56、柱和適量硅膠，學生練習濕法裝柱，敘述操作步驟及操作量硅膠，學生練習濕法裝柱，敘述操作步驟及操作過程中的注意事項；教師針對崗位工作，講解實際過程中的注意事項；教師針對崗位工作，講解實際應用。應用。章目錄章目錄第70頁，共102頁。l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 是一種在柱狀容器中操作，利用混合物中各成分在互不是一種在柱狀容器中操作，利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)的不同，來達到分離的色譜分離相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)的不同，來達到分離的色譜分離方法。方法。（1）基本原理：分配柱色譜的基本原理與兩相逆流萃取法相同。兩相）基本原理：分配柱色譜的基本原理與兩相逆流萃取法相同。兩相溶劑中

57、的一相需作為固定相，常以某種惰性固體吸住該相溶劑，使之溶劑中的一相需作為固定相，常以某種惰性固體吸住該相溶劑，使之固定，這種吸著了固定相溶劑的固體物質稱為支持劑（也稱載體或擔固定，這種吸著了固定相溶劑的固體物質稱為支持劑（也稱載體或擔體）；另一相溶劑則作為移動相。進行分離時，將被分離的混合物配體）；另一相溶劑則作為移動相。進行分離時，將被分離的混合物配成試樣溶液加到固定相上，通過移動相的流動，使試樣中各成分在兩成試樣溶液加到固定相上，通過移動相的流動，使試樣中各成分在兩相之間的分配不同而獲得分離。相之間的分配不同而獲得分離。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第71頁，共102頁。l2 2分配柱色

58、譜法分配柱色譜法 分配柱色譜根據(jù)固定相與移動相的極性不同又可分為正相分配色譜分配柱色譜根據(jù)固定相與移動相的極性不同又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。以極性大的溶劑（如水或親水性溶劑）為固定相和反相分配色譜。以極性大的溶劑（如水或親水性溶劑）為固定相，極性小的溶劑為移動相的分配色譜稱為正相分配色譜，固定相常，極性小的溶劑為移動相的分配色譜稱為正相分配色譜，固定相常用水或緩沖液，移動相則采用三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性用水或緩沖液，移動相則采用三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇等弱極性有機溶劑。而以極性小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親脂性有機有機溶劑。而以極性小的溶劑（如三氯甲烷、石油醚等親脂性有機溶

59、劑）為固定相，移動相溶劑卻極性較大的分配色譜則稱為反相分溶劑）為固定相，移動相溶劑卻極性較大的分配色譜則稱為反相分配色譜，固定相可選用石蠟油，移動相可選擇水或甲醇。配色譜，固定相可選用石蠟油，移動相可選擇水或甲醇。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第72頁，共102頁。l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 （2 2）支持劑：在分配柱色譜中，作為支持劑的固體物質）支持劑：在分配柱色譜中，作為支持劑的固體物質要求其本身無吸附作用，不溶于兩相溶劑中，不與被分要求其本身無吸附作用，不溶于兩相溶劑中，不與被分離物質發(fā)生化學反應，但能吸著一定量的固定相，且移離物質發(fā)生化學反應，但能吸著一定量的固定相，且移動相能

60、自由通過卻不改變其組成。常用的有吸水硅膠、動相能自由通過卻不改變其組成。常用的有吸水硅膠、硅藻土、纖維素粉和濾紙等。硅藻土、纖維素粉和濾紙等。七、色譜法七、色譜法章目錄章目錄第73頁，共102頁。l2 2分配柱色譜法分配柱色譜法 （3 3）溶劑系統(tǒng)：分配色譜中的固定相和移動相是由二元或三元）溶劑系統(tǒng)：分配色譜中的固定相和移動相是由二元或三元甚至三元以上溶劑按一定比例組成的復合兩相溶劑系統(tǒng)。選擇適甚至三元以上溶劑按一定比例組成的復合兩相溶劑系統(tǒng)。選擇適當?shù)娜軇┫到y(tǒng)，可提高分離的效率。常用紙色譜摸索具體的分離當?shù)娜軇┫到y(tǒng)，可提高分離的效率。常用紙色譜摸索具體的分離條件，尋找合適的溶劑系統(tǒng)。條件，尋