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文檔簡(jiǎn)介

1、1、簡(jiǎn)述細(xì)菌分批培養(yǎng)的規(guī)律及各時(shí)期的應(yīng)用?1、在封閉系統(tǒng)中對(duì)微生物進(jìn)行的培養(yǎng),既不補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也不移去培養(yǎng)物質(zhì),保持整個(gè)培養(yǎng)液體積不變的培養(yǎng)方式稱為分批培養(yǎng)。2、在細(xì)菌的分批培養(yǎng)中,生長(zhǎng)曲線可分為遲緩期,對(duì)數(shù)期,穩(wěn)定生長(zhǎng)期和衰亡期。遲緩期:細(xì)菌接種至培養(yǎng)基后,對(duì)新環(huán)境有一個(gè)短暫適應(yīng)過(guò)程,此期中細(xì)菌體積增大,代謝活躍,為細(xì)菌的分裂增殖合成、儲(chǔ)備充足的酶、能量及中間代謝產(chǎn)物。對(duì)數(shù)期:代謝旺盛,個(gè)體的形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定,常作為生產(chǎn)用的菌種和科研材料。穩(wěn)定生長(zhǎng)期:活菌數(shù)達(dá)到最高峰,種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈,細(xì)胞內(nèi)大量積累代謝產(chǎn)物,特別是次級(jí)代謝產(chǎn)物,芽抱的形成也在此衰亡期:細(xì)胞形態(tài)最多,甚至畸形,有些細(xì)胞開

2、始解體,釋放出代謝產(chǎn)物。3、若存在遲效碳源或者遲效氮源,則表現(xiàn)為二次生長(zhǎng)2、科赫法則:1,這種微生物必須存在于患病動(dòng)物中而不存在于健康體中。2,這一微生物可以離開動(dòng)物體進(jìn)行純培養(yǎng)。3,將這種純培養(yǎng)物接種到敏感健康動(dòng)物體后應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)特有的疾病癥狀。4,這種微生物可以從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體中分離出來(lái)并且可以在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行再培養(yǎng),培養(yǎng)出的細(xì)菌同原有微生物仍然相同。3、子座:某些高等真菌菌絲體形成的一種組織體,是菌絲分化形成地墊狀結(jié)構(gòu),或是菌絲體與寄主組織或基物結(jié)合而成地墊狀結(jié)構(gòu)物4、二元培養(yǎng)物:培養(yǎng)物中只有兩種微生物,而且是有意識(shí)的保持兩者之間的特定關(guān)系的培養(yǎng)物(培養(yǎng)病毒的最有效的方法)6、芽抱:1,某些細(xì)菌在

3、其生長(zhǎng)發(fā)育后期在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形,厚壁,含水量極低,抗逆性極強(qiáng)的休眠體2,抱外壁芽抱衣芽抱的構(gòu)造J皮層芽抱壁、芽抱膜j核心芽胞質(zhì),芽抱核區(qū)3,形成過(guò)程:DnA濃縮形成束裝染色質(zhì)形式細(xì)胞膜內(nèi)陷,細(xì)胞發(fā)生不對(duì)稱分裂,小體積部分即為前芽抱前芽抱的雙層隔膜形成,這時(shí)芽抱的抗輻射性提高上述兩層隔膜間填充芽抱肽聚糖后,合成DPA積累鈣離子,開始形成皮層,再經(jīng)脫水,使折光率增高芽抱衣合成結(jié)束皮層合成完成,芽抱成熟,抗熱性出現(xiàn)芽胞囊(是產(chǎn)芽菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞外殼)裂解,芽抱游離外出4,由休眠狀態(tài)的芽抱變成營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)細(xì)菌的過(guò)程成為芽抱萌發(fā),包括活化,出芽和生長(zhǎng),其中活化可由短期熱處理或低PH、強(qiáng)氧化劑處理促萌

4、發(fā):L-丙氨酸,Mn+,表面活性劑,葡萄糖抑制劑:D-丙氨酸,重碳酸鈉5,肉類一一肉毒梭菌;外科器材一一破傷風(fēng)梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌;工業(yè)發(fā)酵一一嗜熱脂肪芽胞桿菌6,芽抱的耐熱機(jī)制:滲透調(diào)節(jié)皮層學(xué)說(shuō)7,研究芽抱的意義:細(xì)菌分類、鑒定中的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)用高溫處理含菌試樣可提高芽胞產(chǎn)生菌的篩選效率芽抱的代謝活動(dòng)基本停止,休眠期特別長(zhǎng),為產(chǎn)芽抱菌的長(zhǎng)期保藏帶來(lái)極大方便衡量各種消毒滅菌手段的重要指標(biāo)7、革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的比較革蘭氏陽(yáng)性厚度厚薄層次12肽聚糖層厚度厚薄磷壁酸有無(wú)外膜(LPS無(wú)有孔蛋白無(wú)有脂蛋白無(wú)有周質(zhì)空間無(wú)或窄有溶質(zhì)通透性弱8、細(xì)胞膜的生理功能:1、選擇性的控制細(xì)胞內(nèi)外營(yíng)養(yǎng)物

5、質(zhì)和代謝廢物的運(yùn)送2、維持細(xì)胞正常滲透壓的屏障3、合成細(xì)胞壁和糖被的各種組分的重要基地4、膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代謝的酶系,是細(xì)胞的產(chǎn)能場(chǎng)所5、是鞭毛基體的著生部位和鞭毛旋轉(zhuǎn)的功能部位6、膜上某些蛋白受體與趨化性有關(guān)9、真菌的營(yíng)養(yǎng)體:真菌在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段的結(jié)構(gòu)叫營(yíng)養(yǎng)體,主要功能是吸收,輸送和貯存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),為生長(zhǎng)繁殖做準(zhǔn)備,真菌的營(yíng)養(yǎng)體還可以形成菌組織以及菌體的變態(tài)結(jié)構(gòu)。10、菌絲:真菌絲狀營(yíng)養(yǎng)體上的單根細(xì)絲,有分枝或無(wú)分枝,有隔膜或無(wú)隔膜的管狀物一叢菌絲統(tǒng)稱為菌絲體。11、假菌絲:酵母菌芽殖產(chǎn)生的芽胞子相互連接成鏈狀,與菌絲相似故稱假菌絲。12、菌落:分散的微生物群體在固體培養(yǎng)基表

6、面或者內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體,固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片即是菌苔。13、營(yíng)養(yǎng)缺陷性:某些菌株發(fā)生突變后,失去合成某種或某些對(duì)該菌株生長(zhǎng)必不可少的物質(zhì)的能力,必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長(zhǎng)繁殖,這種突變型菌株即為營(yíng)養(yǎng)缺陷性,相應(yīng)的野生型菌株即為原養(yǎng)型(不需要生長(zhǎng)因子而能在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌株)14、物質(zhì)的運(yùn)輸方式:擴(kuò)散,促進(jìn)擴(kuò)散,主動(dòng)運(yùn)輸和膜泡運(yùn)輸(例如變形蟲)(吸附期,膜伸展期,膜泡迅速形成期,附著膜泡形成期和膜泡釋放期)同向運(yùn)輸反向運(yùn)輸廠初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸:質(zhì)子運(yùn)輸次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸:與初級(jí)相偶聯(lián)主動(dòng)運(yùn)輸JATP結(jié)合性盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白系統(tǒng)洋向運(yùn)輸(Na+

7、,K+ATP酶系統(tǒng)基團(tuán)轉(zhuǎn)位鐵載體運(yùn)輸擴(kuò)散:依靠胞內(nèi)外溶液濃度差,順濃度梯度運(yùn)輸;不消耗代謝能,無(wú)特異性;運(yùn)輸氧、二氧化碳、甘油、乙醇、某些氨基酸等小分子;親脂性分子從高濃度到低濃度的擴(kuò)散來(lái)運(yùn)輸,利用細(xì)胞膜的通透性,細(xì)胞膜是一道屏障。促進(jìn)擴(kuò)散:利用膜內(nèi)、膜外被運(yùn)輸物質(zhì)和載體蛋白【載體蛋白(carrierprotein),即透性酶(大多為誘導(dǎo)酶),有底物特異性,每種載體蛋白運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì)。載體蛋白可加快運(yùn)輸速度,但不能逆濃度運(yùn)輸?!康挠H和力的不同。特點(diǎn):需要特異性的載體蛋白順濃度梯度運(yùn)輸不消耗能量運(yùn)輸硫酸根、磷酸根、糖(真核)主動(dòng)運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn):在物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程中需要消耗能量可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸運(yùn)輸物質(zhì)所

8、需能量來(lái)源:好氧型微生物與兼性厭氧微生物直接利用呼吸能;厭氧型微生物利用化學(xué)能(ATP);光合微生物利用光能;嗜鹽細(xì)菌通過(guò)紫膜(purplemembrane)利用光能;基團(tuán)轉(zhuǎn)位特點(diǎn):屬主動(dòng)運(yùn)輸類型溶質(zhì)分子發(fā)生化學(xué)修飾一一定向磷酸化需復(fù)雜的運(yùn)輸酶系參與運(yùn)輸葡萄糖、果糖、甘露糖、喋吟、核昔、脂肪酸等微生物學(xué):是研究微生物在一定條件下的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化、遺傳變異以及微生物的進(jìn)化、分類、生態(tài)等規(guī)律及其應(yīng)用的一門學(xué)科微生物的一般特點(diǎn)體積小,比表面積大吸收和轉(zhuǎn)化快生長(zhǎng)繁殖快易變異,適應(yīng)性強(qiáng)分布廣泛,種類繁多滅菌:指利用某種方法殺死物體中包括芽抱在內(nèi)的所有微生物的一種措施無(wú)菌技術(shù):在分離、轉(zhuǎn)接及培養(yǎng)純培養(yǎng)

9、物時(shí)防止其被其他微生物污染,其自身也不污染操作環(huán)境的技術(shù)5、培養(yǎng)物:在微生物學(xué)中,在一定條件下培養(yǎng)繁殖得到的微生物群體,只有一種微生物的培養(yǎng)物稱為純培養(yǎng)物。6、菌種衰退:菌種在培養(yǎng)或保藏過(guò)程中,由于自發(fā)突變的存在,出現(xiàn)某些原有優(yōu)良生產(chǎn)性狀的劣化、遺傳標(biāo)記的丟失等現(xiàn)象,稱為菌種的衰退。衰退原因:基因突變,分離現(xiàn)象衰退現(xiàn)象:菌落和細(xì)胞形態(tài)的改變;生長(zhǎng)速度緩慢,產(chǎn)抱子越來(lái)越少;抵抗力、抗不良環(huán)境能力減弱等。代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力或其對(duì)宿主寄生能力下降防止衰退的措施:1,減少傳代次數(shù);2,創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件;3,經(jīng)常進(jìn)行純種分離,并對(duì)相應(yīng)的性狀指標(biāo)進(jìn)行檢查;4,采用有效的菌種保藏方法傳代保藏:1)低溫保藏法

10、方法:菌種管置4c冰箱保藏,定時(shí)傳代2)石蠟油低溫保藏法橡皮塞取代棉塞、加石蠟油。3)懸液保藏法冷凍保藏:1)液氮超低溫保藏法2)低溫冰箱保存干燥保藏:1)真空冷凍干燥法2)砂土管法糖被(莢膜)的主要作用:1 .保護(hù)作用2 .貯存養(yǎng)料3 .透性屏障4 .表面附著齦齒5 .細(xì)菌間信息識(shí)別6 .堆積代謝廢物鞭毛的運(yùn)動(dòng)是通過(guò)栓鞭實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的細(xì)胞壁的功能:A.固定和提高機(jī)械強(qiáng)度B.賦予細(xì)菌具有特定的抗原性、致病性以及對(duì)抗生素和噬菌體的敏感性C.參與細(xì)胞的正常生理功能(生長(zhǎng),分裂)D.保護(hù)作用,免受溶菌酶,消化酶和青霉素等物質(zhì)的損傷磷壁酸帶負(fù)電荷,所以使細(xì)胞表面帶負(fù)電古生菌的細(xì)胞壁分類:類型一含有假月t聚

11、糖(N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰塔羅糖胺糖醛酸)和雜多糖類型二假肽聚糖外存在由蛋白質(zhì)亞基排列成的表層類型三只有由蛋白質(zhì)或糖蛋白組成的表層類型四多細(xì)胞團(tuán)外層存在蛋白原纖維鞘缺壁細(xì)菌:指在自然條件或者人為條件下細(xì)胞壁缺失或部分缺失的細(xì)菌與間體有關(guān)的是:青霉素酶分泌、DNA復(fù)制、分配以及細(xì)胞分裂。古生菌細(xì)胞膜的特點(diǎn):1,醒鍵連接而非一般所見的脂鍵,2組成疏水尾的長(zhǎng)鏈煌是異戊二烯的重復(fù)單位,3存在獨(dú)特的單分子層膜或單雙分子層混合膜。內(nèi)含物:是指細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成的較大顆粒狀構(gòu)造。質(zhì)粒的功能作用:R因子:與抗藥性有關(guān)F因子:與有性接合有關(guān)其他質(zhì)粒:與抗生素,色素合成有關(guān)基因工程中作為目的基因載體許多營(yíng)漂浮生活的

12、水生無(wú)鞭毛細(xì)菌中具有氣泡蘇云金芽抱桿菌一一伴抱晶體一一訥毒素真菌分類:目前采用的是安斯沃斯分類系統(tǒng)(G.C.Ainsworth,1973)。首先承認(rèn)菌物界,下分真菌門和粘菌門。(1)粘菌門:粘菌門的真菌一般稱作粘菌。營(yíng)養(yǎng)體是原質(zhì)團(tuán)或變形體。營(yíng)養(yǎng)方式是吞食。繁殖產(chǎn)生游動(dòng)抱子。生活發(fā)生都是腐生,一般不危害植物,與植物病理學(xué)關(guān)系不大。(2)真菌門:營(yíng)養(yǎng)體是菌絲體。營(yíng)養(yǎng)方式是吸收。繁殖產(chǎn)生各種類型抱子。生活方式是腐生和寄生,有很多植物病原菌。目前真菌分為5個(gè)亞門、18個(gè)綱,68目。細(xì)菌真菌鞭毛的異同:?1.相同點(diǎn):都是運(yùn)動(dòng)器官?2.不同點(diǎn):?(1)結(jié)構(gòu)不同:細(xì)菌鞭毛由基體,鉤形鞘和鞭毛絲組成,真菌鞭毛

13、由基體,過(guò)渡區(qū)和鞭桿組成,橫切面為“9+2”結(jié)構(gòu)。?(2)生長(zhǎng)方式不同:細(xì)菌鞭毛為頂端生長(zhǎng),真菌鞭毛為基端生長(zhǎng)。?(3)運(yùn)動(dòng)方式不同:細(xì)菌鞭毛為旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng),真菌鞭毛為揮鞭運(yùn)動(dòng)。?(4)能量來(lái)源:細(xì)菌為質(zhì)子動(dòng)勢(shì),真菌為ATP培養(yǎng)基:人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或者產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)基的用途:培養(yǎng)基幾乎是一切對(duì)微生物進(jìn)行研究和利用工作的基礎(chǔ):促使微生物生長(zhǎng);積累代謝產(chǎn)物;分離微生物菌種;鑒定微生物種類;微生物細(xì)胞計(jì)數(shù);菌種保藏;制備微生物制品培養(yǎng)基的配制原則:1,培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)(目的要明確)2,營(yíng)養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng)(營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào))3,物理化學(xué)條件適宜(條件適宜)4,根據(jù)培

14、養(yǎng)目的選擇原料及其來(lái)源(經(jīng)濟(jì)節(jié)約)物理化學(xué)條件包括:控制PH條件,控制氧化還原電位,滅菌處理細(xì)菌一一牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基,LB培養(yǎng)基酵母菌一-一麥芽汁培養(yǎng)基放線菌一一高氏一號(hào)培養(yǎng)基霉菌查氏合成培養(yǎng)基,PDA高濃度糖類物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長(zhǎng),反而起到抑制或殺菌作用CN比一般是5:1微生物有最佳生長(zhǎng)的PH:細(xì)菌:pH7.08.0放線菌:pH7.08.5酵母菌:pH3.86.0霉菌:pH4.06.0培養(yǎng)基滅菌:高壓蒸氣滅菌一般培養(yǎng)基:1.05Kg/cm2,121.3C,15-30min含糖培養(yǎng)基:0.56Kg/cm2,112.6C,15-30min過(guò)濾滅菌,分別滅菌

15、,間歇滅菌的應(yīng)用器皿及無(wú)菌室的消毒滅菌:1、器皿的滅菌:干熱空氣:160C,2小時(shí)2、無(wú)菌室的消毒:紫外光化學(xué)藥物熏蒸(苯酚;高鎰酸鉀+甲醛)固氮生物的種類(1)自生固氮菌:能獨(dú)立進(jìn)行固氮的微生物(2)共生固氮菌:與它種生物共生時(shí)才能固氮的微生物(3)聯(lián)合固氮菌:必須生活在植物根際、葉面或動(dòng)物腸道等處才能固氮的微生物從固氮生物在分類上高度分散來(lái)推斷,固氮作用應(yīng)是原始生物的基本代謝之固氮的必要條件lATP供應(yīng)、還原力及其載體、固氮酶、還原底物N2鎂離子l嚴(yán)格的厭氧微環(huán)境根瘤的形成過(guò)程:1 .植物和細(xì)菌的正確識(shí)別和細(xì)菌附著的根毛處2 .細(xì)菌形成一條感染線侵染根毛3 .通過(guò)感染線進(jìn)入主根4 .在植物

16、細(xì)胞內(nèi),形成變性的細(xì)菌細(xì)胞一類菌體;同時(shí)開始固氮5 .植物和細(xì)菌形成根瘤連接合成代謝與分解代謝的中間產(chǎn)物有12種什么是初級(jí)代謝和次級(jí)代謝,二者之間有什么關(guān)系?要點(diǎn):(1)初級(jí)代謝:微生物從外界吸收各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過(guò)分解代謝和合成代謝,生成維持生命活動(dòng)的物質(zhì)和能量的過(guò)程。初級(jí)代謝一般在菌體旺盛生長(zhǎng)的指數(shù)期進(jìn)行。(2)次級(jí)代謝:是相對(duì)于初級(jí)代謝而提出的一個(gè)概念。一般認(rèn)為,次級(jí)代謝是指微生物在一定的生長(zhǎng)代謝時(shí)期,以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體,合成一些對(duì)微生物的生命活動(dòng)無(wú)明確功能的物質(zhì)的過(guò)程。次級(jí)代謝一般在菌體指數(shù)生長(zhǎng)后期或穩(wěn)定期進(jìn)行。(3)初級(jí)代謝和次級(jí)代謝的關(guān)系:二者關(guān)系密切,初級(jí)代謝的關(guān)鍵性中間產(chǎn)物往往

17、是次級(jí)代謝的前體,次級(jí)代謝受到初級(jí)代謝的調(diào)節(jié)。氮循環(huán)是由6種氮化合物的轉(zhuǎn)化反應(yīng),固氮,鏤同化,氨化(脫氨),硝化作用,硝酸鹽還原,反硝化作用固氮微生物,游離的:固氮菌,梭菌,克雷伯氏菌和藍(lán)細(xì)菌;共生的:根瘤菌和弗蘭克氏菌種群是指具有相似特性和生活在一定空間內(nèi)的同種個(gè)體群,種群是組成群落的基本組分;種群間的相互作用有:1,互生即中立生活(可分可合,合比分好)2,共生即互惠共生(密不可分,難舍難分,合二為一。如地衣是真菌和藻類的共生,在結(jié)構(gòu)和生理上都有共生)3,寄生(寄生物一般是小型微生物,寄主或稱宿主一般是大型生物)4,拮抗/抗生即偏害(某種生物產(chǎn)生的代謝物抑制其他生物的生長(zhǎng)發(fā)育甚至殺死他們)5

18、,捕食(食線蟲真菌)6,競(jìng)爭(zhēng)7,種間共處(利害關(guān)系不明顯)8,偏利(一個(gè)種群因另一個(gè)種群的存在或生命活動(dòng)而得利,但后者沒(méi)有從前者受利或者受害)生態(tài)位:生物個(gè)體,種群或者群落所占據(jù)的具有時(shí)空特點(diǎn)的位置。微生物的群落結(jié)構(gòu)受到生態(tài)位的生物和非生物環(huán)境的嚴(yán)格選擇,因此群落的組成實(shí)際上是生態(tài)位狀況的真實(shí)反映樣多樣性、垂直結(jié)構(gòu)、水平結(jié)構(gòu)和優(yōu)勢(shì)種群是表征群落結(jié)構(gòu)的重要參數(shù),種多樣性可用多樣性指數(shù)來(lái)表示土壤微生物集中分布在土壤表層和土壤顆粒表面,主要以附著方式存在水的細(xì)菌學(xué)檢查,良好飲用水細(xì)菌含量<100個(gè)/ml,當(dāng)超過(guò)500個(gè)/ml時(shí)不能飲用活性污泥是指一種由活細(xì)菌、原生動(dòng)物和其他微生物群聚集在一起組

19、成的凝絮團(tuán),在污水處理中具有很強(qiáng)的吸附、分解有機(jī)物或毒物的能力生物修復(fù)是微生物催化降解有機(jī)污染物、轉(zhuǎn)化其他污染物從而消除污染的一個(gè)受控或者自發(fā)進(jìn)行的過(guò)程病毒:由一個(gè)或數(shù)個(gè)RNA;DN陽(yáng)子構(gòu)成的感染性因子,通常但并非必須覆蓋有由一種或數(shù)種蛋白質(zhì)構(gòu)成的外殼,有的外殼外還有更為復(fù)雜的膜結(jié)構(gòu)核酸攜帶病毒的全部遺傳信息髓核被稱為衣殼的蛋白質(zhì)外殼包圍髓核和衣殼統(tǒng)稱為核衣殼有些病毒的核衣殼外面包被一層囊膜,由脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和糖組成。病毒主要是核酸和蛋白質(zhì)組成,少數(shù)類型病毒還有其他成分動(dòng)物病毒的侵入方式:1,無(wú)包膜病毒有兩種,一是直接跨膜侵入,一是內(nèi)涵體侵入;2,噬菌體是直接注射。植物病毒的侵入:1,傷口侵入;

20、2,載體侵入。?烈性噬菌體:感染寄主細(xì)胞后,引起細(xì)胞裂解。溫和噬菌體:感染細(xì)菌后既能引起寄主裂解釋放子代噬菌體,也能將其DNA整合或附著到寄主染色體上,并隨寄主一起繁殖的噬菌體。?原噬菌體:整合狀態(tài)旃源性:因溫和噬菌體侵入不引起宿主細(xì)胞裂解現(xiàn)象。旃源菌:含有原噬菌體的宿主旃源化:敏感細(xì)菌被溫和性噬菌體感染而轉(zhuǎn)變成溶源性細(xì)菌的過(guò)程亞病毒因子(凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中,只含其中之一的分子病原體稱為亞病毒):衛(wèi)星病毒(satelliteviruses)衛(wèi)星RNA(satelliteRNA)類病毒(viroid)骯病毒(prion)ActinomycesCorynebacteriumdiphther

21、iae放線菌屬白喉棒桿菌ActinomycesaureusDictyosteliumdiscoideum金色放線菌屬盤基網(wǎng)柄菌AgaricusbisporusEnterococcusfaecalis雙抱蘑菇糞腸球菌AnabaenaazollaeErwincaherbicola鏈魚腥藍(lán)細(xì)菌草生歐文氏菌AspergillusnidulansEscherichiacoli構(gòu)巢曲霉大腸桿菌AzospirillumlipoferumHaemophilusinfluenzae產(chǎn)脂固氮螺菌流感嗜血桿菌AzotobactervinelandiiHelicobacterpylori棕色固氮菌幽門螺桿菌Bacil

22、lusKlebsiellaoxytoca芽胞桿菌屬產(chǎn)酸克雷伯氏菌BacillussubtilisLactobacillusdelbruckii枯草芽抱桿菌德氏乳桿菌BacillusthuringiensisMethanococcusgannaschii蘇云金芽胞桿菌詹氏甲烷球菌CandidalipolyticaMucorroxianus解脂假絲酵母魯氏毛霉ChlamydiatrachomatisMycobacteriumtuberculosis沙眼衣原體結(jié)核分枝桿菌ClostridiumpasteurianumMycoplasmagenitalium巴氏固氮梭菌生殖道支原體Staphyloco

23、ccusaureusNeurosporacrassa金黃色葡萄球菌粗糙脈抱菌StreptococcuspneumoniaePenicilliumchrysogenum肺炎鏈球菌)黃月蜜StreptomycesgriseusPseudomonasfluorescens灰色鏈霉菌熒光假單胞菌XanthomonascampestrisRhizobium野油菜黃單胞菌根瘤菌屬YersiniapestisRhizopuschinensis鼠疫桿菌華根霉YersiniapestisSaccharomycescerevisiae鼠疫耶爾森氏菌釀酒酵母(啤酒酵母)霉菌無(wú)性胞子有:厚垣抱子、節(jié)抱子、分生抱子、抱

24、囊抱子、游動(dòng)抱子、芽抱子、擲抱子。有性抱子有:卵抱子、接合抱子、子囊抱子、擔(dān)抱子。試比較細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌細(xì)胞壁成分的異同,并討論它們?cè)|(zhì)體制備方法。細(xì)胞壁成分的異同G+細(xì)菌分為G神口G-,G+太聚糖含量高,G-含量低;G礴壁酸含量較高,而G-不含磷壁酸;類脂質(zhì)一般無(wú),而G-含量較高;G杯含蛋白質(zhì),G-含量較高。放線菌為G-,其細(xì)胞壁具有G-所具有的特點(diǎn)。酵母菌和霉菌為真菌,酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖;而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。原生質(zhì)體制備方法:G貓?jiān)|(zhì)體獲得:青霉素、溶菌酶G-菌原生質(zhì)體獲得:EDTA鰲合劑處理,溶菌酶放線菌原生質(zhì)體獲得:青霉素、

25、溶菌酶霉菌原生質(zhì)體獲得:纖維素酶酵母菌原生質(zhì)體獲得:蝸牛消化酶噬菌斑:當(dāng)一個(gè)噬菌體感染一個(gè)敏感細(xì)胞后,隔不久即釋放出一群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過(guò)瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周圍的宿主細(xì)胞,并引起它們的裂解,如此經(jīng)過(guò)多次重復(fù),就出現(xiàn)了一個(gè)由無(wú)數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體一噬菌斑,它是透亮不長(zhǎng)菌的小圓斑,每一個(gè)噬菌斑是由一個(gè)噬菌體粒子形成的。毒粒的對(duì)稱機(jī)制:螺旋對(duì)稱型一TMV呈直桿狀,中空二十面體對(duì)稱一腺病毒外形呈典型的二十面體什么叫烈性噬菌體?簡(jiǎn)述其裂解性生活史。烈性噬菌體:凡在短時(shí)間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解這五個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體。吸附噬菌體尾絲散開,固著于特

26、異性受點(diǎn)上。侵入尾鞘收縮,尾管推出并插入到細(xì)胞壁和膜中,頭部的核酸注入到宿主細(xì)胞中,而蛋白質(zhì)衣殼留在細(xì)胞壁外。增殖增殖過(guò)程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細(xì)胞的核酸操縱宿主細(xì)胞代謝機(jī)構(gòu),以寄主個(gè)體及細(xì)胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料,大量復(fù)制噬菌體核酸,并合成蛋白質(zhì)外殼。成熟(裝配)寄主細(xì)胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。裂解(釋放)子代噬菌體成熟后,脂肪酶和溶菌酶促進(jìn)宿主細(xì)胞裂解,從而釋放出大量子代噬菌體。什么是鑒別性培養(yǎng)基?試以EMB§養(yǎng)基為例,分析其鑒別作用的原理。鑒別性培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無(wú)色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而

27、用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。EMB乍用原理其中的伊紅和美藍(lán)兩種苯胺染料可抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和一些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌。在低酸度時(shí),這兩種染料結(jié)合形成沉淀,起著產(chǎn)酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細(xì)菌會(huì)在EMB§養(yǎng)基上產(chǎn)生相互易區(qū)分的特征菌落,因而易于辨認(rèn)。尤其是大腸桿菌,因其強(qiáng)烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+故可染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合,所以菌落染上深紫色,從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光10試述培養(yǎng)基的種類:按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解來(lái)分:(1)天然培養(yǎng)基(2)合成培養(yǎng)基按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來(lái)分(1)固體培養(yǎng)基

28、(2)半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基(4)脫水培養(yǎng)基按培養(yǎng)基的功能來(lái)分(1)加富培養(yǎng)基(2)鑒別培養(yǎng)基(3)基礎(chǔ)培養(yǎng)基(4)選擇培養(yǎng)基試比較呼吸、無(wú)氧呼吸、發(fā)酵的異同點(diǎn)產(chǎn)能呼吸環(huán)境條件有氧無(wú)氧呼吸發(fā)酵無(wú)氧無(wú)氧終電子受體.來(lái)源環(huán)境,外源性環(huán)境,外源性胞內(nèi)、內(nèi)源性性質(zhì)分子氧化合物代謝中間物能進(jìn)行代謝產(chǎn)能方式的微生物專性好氧微生物.兼性好氧微生物、微嗜氧微生物專性厭氧微生物、兼性好氧微生物兼性好氧微生物、耐氧厭氧微生物、專性厭氧微生物什么叫連續(xù)培養(yǎng)?有何優(yōu)點(diǎn)?為何連續(xù)時(shí)間是有限的?連續(xù)培養(yǎng):指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個(gè)生長(zhǎng)期間,微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長(zhǎng)速率常數(shù)進(jìn)行生長(zhǎng),從而導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)過(guò)程能“

29、不斷”地進(jìn)行下去的一種培養(yǎng)方法。優(yōu)點(diǎn):高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。菌種易于退化;容易污染;營(yíng)養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。因此連續(xù)時(shí)間是有限的。什么是生長(zhǎng)曲線?它可分幾期?劃分的依據(jù)是什么?各期特點(diǎn)如何?典型生長(zhǎng)曲線:將少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下,其群體就會(huì)有規(guī)律地生長(zhǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞含量,以細(xì)胞數(shù)目的對(duì)數(shù)值作縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間作橫坐標(biāo),就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長(zhǎng)曲線。劃分的依據(jù):?jiǎn)渭?xì)胞微生物。(1)遲緩期特點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活

30、躍;e.對(duì)外界不良條件的反應(yīng)敏感。(2)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期特點(diǎn):此時(shí)菌體細(xì)胞生長(zhǎng)的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時(shí)短,細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng),菌體內(nèi)酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增加,群體的形態(tài)與生理特征最一致,抗不良環(huán)境的能力強(qiáng)。穩(wěn)定期特點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對(duì)穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始貯存貯藏物;e.芽抱在這個(gè)時(shí)期形成;f.有些微生物在此時(shí)形成次生代謝產(chǎn)物。衰亡期特點(diǎn):a.細(xì)胞形態(tài)多樣;b.出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)象;c.有次生代謝產(chǎn)物的形成;d.芽抱在此時(shí)釋放。3、延滯期有何特點(diǎn)?如何縮短延滯期?特點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RN耽其是rRNA含

31、量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對(duì)外界不良條件的反應(yīng)敏感。消除:a.以對(duì)數(shù)期的菌體作種子菌;b.適當(dāng)增大接種量:一般采用3%8啕接種量,根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定,最高不超過(guò)1/10。c.培養(yǎng)基的成分:種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基。4、指數(shù)期有何特點(diǎn)?處于該期的微生物有何應(yīng)用?特點(diǎn):此時(shí)菌體細(xì)胞生長(zhǎng)的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時(shí)短,細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng),菌體內(nèi)11酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級(jí)數(shù)增加,群體的形態(tài)與生理特征最一致,抗不良環(huán)境的能力強(qiáng)。應(yīng)用:指數(shù)期的微生物是研究生理、代謝等的良好材料;是增殖噬菌體的最適菌齡;是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡,通過(guò)補(bǔ)加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)延長(zhǎng)指數(shù)期。

32、5、穩(wěn)定期為何會(huì)到來(lái)?有何特點(diǎn)?形成原因:a.營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡;b.營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào);c.有害代謝產(chǎn)物的積累;d.物化條件的變化。特點(diǎn):a.生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對(duì)穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始貯存貯藏物;e.芽抱在這個(gè)日期形成;f.有些微生物在此時(shí)形成次生代謝產(chǎn)物試述高溫滅菌的方法。1、干熱滅菌法(1)原理:干熱可使破壞細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥,并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。2)應(yīng)用范圍:1)烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法(150170C,12hr)金屬器械、洗凈的玻璃器皿。2)火焰灼燒法:接種環(huán)、接種針等。2、濕熱滅菌:即以100c以上的加壓蒸氣進(jìn)行滅菌。(1)相同溫度及相同作用時(shí)間下,濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效:濕熱空氣穿透力強(qiáng),能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫鍵,能加速其變性。(2)種類:1)常壓法a.巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無(wú)芽抱病原菌而又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味的消毒方法。a)低溫維持法(LTH):要求62.8C保持3

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