微生物培養(yǎng)及試驗基本操作技術

1、微生物培養(yǎng)及實驗基本操作技術一、培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基是指人工配制的、適合于微生物生長繁殖或累積代謝產(chǎn)物所需的各種營養(yǎng)物的混合基質(zhì)。配制培養(yǎng)基是進行微生物檢驗工作的基礎，甚至是任何與微生物有關工作的基礎。注意事-滅菌鍋的使用加水蓋過底部鐵板一放入東西一關門一飄整溫度畤一關緊泄壓閥滅菌束彳矍，等壓力降回零畤才可打號暹入滅菌鍋之物品，蓋子不可太聚或太髭拿滋菌彳矍物品者酢己得帶耐熟手套培養(yǎng)基中的主要成分及其作用：營養(yǎng)物質(zhì)：N源、C源、無機鹽、生長因子、水常用的N源：蛋白月東、牛肉膏、肉浸汁、醉母膏常用的C源：糖、醇類物質(zhì)（單糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖雙糖：蔗糖、麥芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纖維素、菊糖

2、;醇類：甘露醇、衛(wèi)茅醇、甘油）水：用蒸儲水，不能用自來水凝固劑：瓊脂、明膠、血清等抑制劑：1、作用：鑒定細菌、抑制雜菌的生長繁殖，增加待檢菌的檢生率2、種類：鹽類：氯化鈉、氯化鋰、匐化鉀、亞硫酸鉀（鈉）、亞硒酸鈉等染色劑類：煌綠、薔薇酸、結晶紫、孔雀綠、孟加拉紅、玫瑰紅膽鹽類：豬（牛、羊）膽鹽、混合膽鹽、三號膽鹽、去氧膽酸鹽、膽石酸鹽抗菌素：青霉素、鏈霉素、桿菌肽、多粘菌素指示劑1、作用：用于指示鑒別細菌可否利用分解糖醇類物質(zhì)和含氮化合物，產(chǎn)酸產(chǎn)堿的能力。2、常用的指示劑：酚紅、澳甲酚紫、中性紅、中國藍、甲基紅、復紅、伊紅、美藍、孔雀綠等。培養(yǎng)基的類型：根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分：1、液體培養(yǎng)

3、基：主要用于增菌培養(yǎng)、鑒別性培養(yǎng)2、固體培養(yǎng)基：用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數(shù)、保藏、生物測定3、半固體培養(yǎng)基：觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種4、脫水（商品）培養(yǎng)基：脫水培養(yǎng)基也稱為商品培養(yǎng)基、預制干燥培養(yǎng)基。將各種營養(yǎng)成分按比例配制完全，制成脫水的干粉狀，裝瓶由售；使用時只需按比例加人定量的水溶化、滅菌便可。根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分：增殖培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基1、增殖培養(yǎng)基：在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基。能夠給微生物提供較適當?shù)纳L環(huán)境從而使微生物大量繁殖的培養(yǎng)基稱為增菌培養(yǎng)基。增菌

4、、運送用培養(yǎng)基E2CBL,大阪什曲增黃增菌培養(yǎng)基冷門氏菌增菌食1S中冷門氏西喀前四基沙BEGN肉錫培養(yǎng)基志賀氏菌塔菌耳了喊性蛋白師水培養(yǎng)基翟SL邨菌增菌工中分氯化鈉內(nèi)場培養(yǎng)基金黃包箱有砰菌1首菌暖沖南白脖水培養(yǎng)拿沙門氏菌塔菌S1O血液塔圜培養(yǎng)基血承中細曲增曲B11&QDLJE微件基礎珞養(yǎng)筌化枚品中細菌增窗2、選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入抑制劑以殺死或抑制不需要的菌種，分離對象因?qū)υ撘种苿┯锌剐远ＩL繁殖的培養(yǎng)基，稱之為選擇培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)用的培養(yǎng)基名稱用途SJS；涼脂珞養(yǎng)基沙n區(qū)和者費氏菌居分離HE瓊脂培養(yǎng)甚志賀氏量分離鑒別伊紀美童瓊脂培壽基大廝桿菌.產(chǎn)氣桿菌分喜笙別麥康費瓊脂珞養(yǎng)基

5、C旗金©3夠這歿病圖分離甘奉至商鹽原脂培養(yǎng)基徐膿桿菌分離鑒別遼Q瓊脂培養(yǎng)基冷道氏-沙門氏甫分起中國籃球照培養(yǎng)基脂道菌分離鑒別琮腮培養(yǎng)基德SL瓠菌分離高盤蔡氏集脂培養(yǎng)基真菌-醋用的分器3、鑒別培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入指示劑或化學藥品，目的菌經(jīng)培養(yǎng)后其代謝產(chǎn)物與化學試劑發(fā)生顯色反應，因而用肉眼可快速鑒別由目的菌，這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如:伊紅美藍培養(yǎng)基(EMB)就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。伊紅美藍培養(yǎng)基用于食品、乳制品、水源和病源標本中革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑒別鑒別用培養(yǎng)基名俸1r»丁>"尸1pjOY/hif/于壯"/>下tag一八產(chǎn)親

6、白膝水培笄整靛基質(zhì)和番亂紅試驗乳植旭處發(fā)酵培笄基(麥康大房稈南綻醒乳輔試驗O.石%乳神發(fā)薛培養(yǎng)基腸道菌生化刊會<復發(fā)酵)半固體培養(yǎng)基動力試繪刊菌種保存三艷鐵瓊脂培養(yǎng)基<TST>腸桿菌械發(fā)酢及端化氫反應甄化鉀基礎培養(yǎng)基沙門氏菌分離脫陵酶試驗對照培養(yǎng)基細窗脫竣酶試驍4、活體培養(yǎng)基：病毒、立克次氏體等專性寄生微生物不能在一般培養(yǎng)基上生長，常用雞胚、活細胞和動物進行培養(yǎng)。采用雞胚培養(yǎng)時，將微生物接到絨毛尿囊膜、尿囊、羊膜囊和卵黃囊中進行培養(yǎng)，即可得培養(yǎng)物。細胞培養(yǎng)指將病毒接種到體外培養(yǎng)的活細胞上使其增殖。（三）培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項?培養(yǎng)基的制備記錄培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基各成

7、份的混合和溶化?培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正培養(yǎng)基的過濾澄清培養(yǎng)基的分裝?培養(yǎng)基的滅菌培養(yǎng)基的質(zhì)量測試培養(yǎng)基的保存1、培養(yǎng)基的制備記錄?每次制備培養(yǎng)基均應有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，最終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等。?記錄應復制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥椭朴涗涬S制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。2、培養(yǎng)基成分的稱取?培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，最好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?，每稱完一種成分即在配方上面做由記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。3、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化?指示劑應在調(diào)節(jié)好pH值后再加入；煮溶后要補加足水份；?不能把培養(yǎng)基點焦，焦化的不能使用。4、培養(yǎng)基pH的校正滅菌后pH值會下降0.10.2,在