生物大分子的電子顯微鏡技術

1、會計學1生物大分子的電子顯微鏡技術生物大分子的電子顯微鏡技術DNA 雙鏈dsDNA、線性的， 超螺旋的，單鏈 ssDNARNA 單鏈 ssRNA 、線性的，三葉草形的 雙鏈dsRNA下相液下相液:0.050.25M醋酸銨水溶液或雙蒸水醋酸銨水溶液或雙蒸水甲酰銨法甲酰銨法:上相液組成上相液組成:Tris-Na3EDTA(PH8.5) 0.10.01M 核酸樣品核酸樣品 0.51ugml 細胞色素細胞色素C 0.050.1mgml 甲酰銨甲酰銨 4050%下相液下相液:0.1MTris0.01MNa3EDTA(PH8.5),20%甲酰銨甲酰銨.展層展層1.樣品溶液樣品溶液(上相溶上相溶液液)2.展

2、層液展層液(下相溶液下相溶液) 3.滑石粉滑石粉 4.載玻片載玻片 5.加樣器加樣器12345.沾網(wǎng)沾網(wǎng):將銅網(wǎng)的膜面朝下將銅網(wǎng)的膜面朝下,沾取液面上的樣品沾取液面上的樣品脫水與染色脫水與染色銅網(wǎng)以銅網(wǎng)以45角插入角插入無水乙醇片刻無水乙醇片刻,進行進行脫水脫水,以同樣方法在以同樣方法在2%PTA中染色中染色金屬投影金屬投影:在真空噴鍍儀中在真空噴鍍儀中對樣品進行重金對樣品進行重金屬旋轉(zhuǎn)投影屬旋轉(zhuǎn)投影.適合微量樣品的操作適合微量樣品的操作,單滴展單滴展開法的展層樣品液只需開法的展層樣品液只需510ul,操作方法與展層方法相同操作方法與展層方法相同,可可用用16孔酶標板代用展層容器孔酶標板代用展

3、層容器 病毒，噬菌體等含核酸的細胞器，不進行提取核酸，病毒，噬菌體等含核酸的細胞器，不進行提取核酸，利用展層上相利用展層上相液液（2M2M醋酸銨），下醋酸銨），下相相液液（0.2M醋酸銨醋酸銨或水溶液）或水溶液）鹽濃度的巨大差異，高鹽中的病毒遇到低滲鹽濃度的巨大差異，高鹽中的病毒遇到低滲溶液而破裂，核酸分子溶液而破裂，核酸分子釋放，并與細胞色素釋放，并與細胞色素CC結合，隨結合，隨著單分子層展開，因此，釋放與展層在一步完成著單分子層展開，因此，釋放與展層在一步完成從一種非洲蛙的卵母細胞核中提取的DNA的8個基因片段。雜交重復分子X174的DNA,長度約1.8 m的環(huán)狀DNA(雙鏈DNA)病毒病

4、毒DNADNA在細菌中復制時，蛋白質(zhì)結在細菌中復制時，蛋白質(zhì)結合在病毒合在病毒DNADNA的特別部分，也就是的特別部分，也就是DNADNA復制的開始點。復制的開始點。能夠看到大腸桿菌染色體能夠看到大腸桿菌染色體的二個片段，下邊一個是的二個片段，下邊一個是活動中的?？梢钥吹交顒又械??？梢钥吹絤RNAmRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的翻譯過的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的翻譯過程。程?；蛏系腞NA聚合酶雜交的雜交的DNADNA分子分子 二條二條DNADNA分子分子 經(jīng)過變性、退火處理形成缺失環(huán)和經(jīng)過變性、退火處理形成缺失環(huán)和 置換泡置換泡適合微量樣品的操作適合微量樣品的操作,單滴展單滴展開法的展層樣品液只需開法的展層樣品液只需510ul,操作方法與展層方法相同操作方法與展層方法相同,可可用用16孔酶標板代用展層容器孔酶標板代用展層容器X174的DNA,長度約1.8 m的環(huán)狀DNA(雙鏈DNA)病毒病毒DNADNA在細菌中復制時，