實驗一光學(xué)顯微鏡技術(shù)

1、實驗一 普通光學(xué)顯微鏡技術(shù)、 細胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)的觀察?實驗室規(guī)則1.進入實驗室穿白大衣，不遲到、不早退，遲到或者早退者每次扣實驗5分；2.遵守實驗操作規(guī)程和實驗室規(guī)定，認真記錄填寫實驗報告，按時交報告；3.實驗室內(nèi)不要高聲喧嘩，保持肅靜；4.愛護儀器用品，注意節(jié)約，損害物品及時報告登記（班長作為代表領(lǐng)去器材，注意清點數(shù)目和查看有無破損）；5.實驗完畢后，把所有的儀器、標本等擦拭干凈，放回原處，保持桌面整潔，值日生同學(xué)打掃衛(wèi)生（桌面、地面、水池），關(guān)閉門窗、電燈、水等實驗完畢后，同學(xué)及時洗手，養(yǎng)成良好的個人衛(wèi)生習(xí)慣6.實驗室的藥品、器械等不要私自帶走，否則予以一定的罰款7.自覺遵守紀律，養(yǎng)成良好的

2、科研習(xí)慣和態(tài)度考試比例：理論考試70實驗考試20作業(yè)10?實驗室規(guī)則v 光學(xué)顯微鏡技術(shù)（P1）v 細胞臨時玻片標本制備（P26）v 細胞結(jié)構(gòu)觀察（P26）v 細胞生物學(xué)繪圖?內(nèi)容安排一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)人口腔上皮細胞(400)蛙血涂片(400)v 認識顯微鏡的結(jié)構(gòu)v 顯微鏡的正確使用方法v 顯微鏡使用的注意事項?（一）實驗內(nèi)容一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)v熟悉光學(xué)顯微鏡基本結(jié)構(gòu)和用途；v掌握顯微鏡維護的基本知識；v初步掌握低倍鏡、高倍鏡使用方法；v學(xué)會計算顯微鏡放大倍數(shù)的方法。?（二）實驗?zāi)康囊弧⒐鈱W(xué)顯微鏡技術(shù)v材料：生物玻片標本(蛙血細胞)v用品：普通光學(xué)顯微鏡?（三）實驗材料一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)p 機械

3、系統(tǒng)部分：鏡座、鏡筒、鏡壁、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、調(diào)焦裝置p 光學(xué)系統(tǒng)部分：目鏡、物鏡和照明裝置光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)鏡座：支持作用鏡座：支持作用照明光源，反射鏡照明光源，反射鏡鏡臂：支持作用鏡臂：支持作用載物臺：放置標本載物臺：放置標本聚光器、光闌聚光器、光闌標本移標本移動器動器調(diào)焦裝置：粗調(diào)螺旋、調(diào)焦裝置：粗調(diào)螺旋、 細調(diào)螺旋細調(diào)螺旋鏡筒：上接目鏡，下連鏡筒：上接目鏡，下連物鏡轉(zhuǎn)換器（物鏡鏡頭）物鏡轉(zhuǎn)換器（物鏡鏡頭）目鏡：目鏡：1010，目鏡指針；，目鏡指針；物物鏡鏡低倍鏡低倍鏡(4，10)：0.25，160高倍鏡高倍鏡(40):0.65，160/0.17油油 鏡鏡(100):1

4、.25，160/0.17顯微鏡總的放大倍數(shù)顯微鏡總的放大倍數(shù) 目鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù) 取鏡取鏡( (右手握臂、左手托座右手握臂、左手托座) ) 放鏡放鏡( (左側(cè)、左側(cè)、5cm)5cm) 對光對光( (物鏡對位、開光圈物鏡對位、開光圈) ) 放片放片 調(diào)焦調(diào)焦( (先粗調(diào)焦后細調(diào)焦先粗調(diào)焦后細調(diào)焦) ) 觀察觀察光學(xué)顯微鏡的使用光學(xué)顯微鏡的使用低倍鏡的使用低倍鏡的使用一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)一、光學(xué)顯微鏡技術(shù) 低倍鏡下找到目的物低倍鏡下找到目的物 從從側(cè)面觀察物鏡側(cè)面觀察物鏡，轉(zhuǎn)動物，轉(zhuǎn)動物 鏡轉(zhuǎn)換器，高倍鏡對準通光鏡轉(zhuǎn)換器，高倍鏡對準通光孔孔 細調(diào)螺旋細調(diào)螺旋( (前后三

5、圈前后三圈) )，清，清晰圖像觀察晰圖像觀察 取片、収鏡取片、収鏡載物臺下降；取玻片；物鏡成載物臺下降；取玻片；物鏡成“八八”字形；關(guān)閉光圈、電源；電線盤好字形；關(guān)閉光圈、電源；電線盤好光學(xué)顯微鏡的使用光學(xué)顯微鏡的使用高倍鏡的使用高倍鏡的使用一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)顯微鏡持取正確姿勢顯微鏡持取正確姿勢使用前后的使用前后的鏡頭維護鏡頭維護注意標本的放置方向注意標本的放置方向觀察時不可用粗調(diào)螺旋觀察時不可用粗調(diào)螺旋高倍鏡不得使用粗調(diào)高倍鏡不得使用粗調(diào)嚴禁拆卸任何部件嚴禁拆卸任何部件使用后恢復(fù)機器原貌使用后恢復(fù)機器原貌光學(xué)顯微鏡使用注意事項光學(xué)顯微鏡使用注意事項一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)一、光學(xué)

6、顯微鏡技術(shù)二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察p人口腔上皮細胞涂片標本的制備與觀察人口腔上皮細胞涂片標本的制備與觀察 p蛙血細胞涂片標本的制備與觀察蛙血細胞涂片標本的制備與觀察 ?（一）實驗內(nèi)容（一）實驗內(nèi)容p1、掌握臨時制備玻片標本的方法；、掌握臨時制備玻片標本的方法；p2、通過光學(xué)顯微鏡下觀察細胞的形、通過光學(xué)顯微鏡下觀察細胞的形態(tài)，掌握人體及動物等真核細胞的基態(tài)，掌握人體及動物等真核細胞的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)；本形態(tài)結(jié)構(gòu)；p3、初步掌握光鏡下所見細胞、組織、初步掌握光鏡下所見細胞、組織結(jié)構(gòu)的生物學(xué)繪圖方法。結(jié)構(gòu)的生物學(xué)繪圖方法。?（二）實驗?zāi)康模ǘ嶒災(zāi)?/p>

7、的二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察?（三）實驗材料（三）實驗材料p材料：口腔黏膜上皮、材料：口腔黏膜上皮、 牛蛙血牛蛙血p用品：普通光學(xué)顯微鏡、載玻用品：普通光學(xué)顯微鏡、載玻片、片、 蓋玻片等蓋玻片等二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察二、細胞臨時玻片標本制備及細胞結(jié)構(gòu)觀察擦片擦片載玻片、蓋玻片清洗干凈載玻片、蓋玻片清洗干凈漱口漱口去除食物殘渣，影響觀察去除食物殘渣，影響觀察取材取材牙簽牙簽鈍頭輕輕鈍頭輕輕刮取刮取涂片涂片一定方向連續(xù)均勻一定方向連續(xù)均勻涂片涂片染色染色 一滴一滴甲苯胺藍，染色甲苯胺藍，染色1min加蓋玻片加蓋玻片緩慢緩慢加避免氣泡

8、產(chǎn)生加避免氣泡產(chǎn)生鏡檢、繪圖鏡檢、繪圖先低倍后高倍先低倍后高倍觀察，觀察，繪圖繪圖吸多余染液吸多余染液吸水紙從一側(cè)吸取多余染液吸水紙從一側(cè)吸取多余染液( (一一) )人口腔上皮細胞涂片標本的制備人口腔上皮細胞涂片標本的制備細胞生物學(xué)繪圖的要求和方法 1.課前準備（鉛筆、橡皮、作業(yè)本、直尺）； 2.繪圖前應(yīng)對標本進行仔細地觀察，選擇結(jié)構(gòu)清晰，有代表性進行繪圖；不能夸大想象； 3.圖空間分布(紙偏左)及大小要適宜，圖各部分結(jié)構(gòu)使用直線標注(右對齊)并附上名稱，一個圖中標注一個細胞； 4.圖中所有部分都要以點或線來表示，明暗之處用點的疏密表示；勿以鉛筆涂出陰影，紙面力求整潔（細胞核和細胞質(zhì)的繪制）；

9、 5.圖標題寫在圖下方，并標注放大倍數(shù)人口腔上皮細胞（人口腔上皮細胞（400400）擦片擦片載玻片、蓋玻片清洗干凈載玻片、蓋玻片清洗干凈漱口漱口去除食物殘渣，影響觀察去除食物殘渣，影響觀察取材取材牙簽牙簽鈍頭輕輕鈍頭輕輕刮取口腔臉頰內(nèi)側(cè)刮取口腔臉頰內(nèi)側(cè)涂片涂片一定方向連續(xù)均勻一定方向連續(xù)均勻涂片涂片染色染色 一滴一滴甲苯胺藍，染色甲苯胺藍，染色1min加蓋玻片加蓋玻片緩慢緩慢加避免氣泡產(chǎn)生加避免氣泡產(chǎn)生鏡檢、繪圖鏡檢、繪圖先低倍后高倍先低倍后高倍觀察，觀察，繪圖繪圖( (一一) )人口腔上皮細胞涂片標本的制備人口腔上皮細胞涂片標本的制備吸多余染液吸多余染液吸水紙從一側(cè)吸取多余染液吸水紙從一側(cè)吸

10、取多余染液擦片擦片載玻片載玻片（2個）個）清洗干凈清洗干凈處死處死(雙毀髓處死雙毀髓處死)牛蛙枕骨大孔插入，搗毀脊髓和腦牛蛙枕骨大孔插入，搗毀脊髓和腦髓，髓，“倒倒T法法”解剖解剖，露出心臟，露出心臟取心臟血取心臟血注射器抽取心臟血（不要穿透心臟）注射器抽取心臟血（不要穿透心臟）滴片滴片在載玻片在載玻片右端右端1/4滴芝麻粒滴芝麻粒血滴血滴推片推片另一載玻片傾斜，推片另一載玻片傾斜，推片均勻而迅速均勻而迅速晾干晾干空氣中自然晾干空氣中自然晾干鏡檢、繪圖鏡檢、繪圖觀察蛙血涂片和細胞，并繪圖觀察蛙血涂片和細胞，并繪圖( (二二) )蛙血細胞涂片標本的制備與觀蛙血細胞涂片標本的制備與觀察察 牛蛙血涂片牛蛙血涂片(400(400) )1 1、繪、繪2-32-3個人口腔上皮細胞以及牛蛙血個人口腔上皮細胞以及牛蛙血細胞；細胞； 2 2、普通光學(xué)顯微鏡使用有哪些注意事項？、普通光學(xué)顯微鏡使用有哪些注意事項？ （一）人口腔上皮細胞涂片標本的制備（一）