華東理工大學(xué)微生物學(xué)考研復(fù)習(xí)資料 微生物學(xué)問答題

1、問答題緒論：1. 什么是微生物?它包括哪些類群?答:微生物是一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱.包括原核類的細菌放線菌藍細菌支原體立克次氏體和衣原體;真核類的真菌原生動物和顯微藻類，以及屬于非細胞類的病毒和亞病毒.2. 微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一個？為什么？答：體積小，面積大；吸收多，轉(zhuǎn)化快；生長旺，繁殖快；適應(yīng)強,易變異；分布廣，種類多。其中，體積小面積大最基本，因為一個小體積大面積系統(tǒng)，必然有一個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面，并由此而產(chǎn)生其余4個共性。第一章：1、簡單說明革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌在細胞壁的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)方面的主要不同點。答：

2、化學(xué)組成：革蘭氏陽性菌細胞壁肽聚糖含量高，含有垣酸，不含脂質(zhì)；革蘭氏陰性菌細胞壁肽聚糖含量很低，不含垣酸，脂質(zhì)和蛋白質(zhì)含量較高。結(jié)構(gòu)方面：G+菌細胞壁厚度大（20-80nm）均勻，化學(xué)組分簡單，革蘭氏陰性菌細胞壁薄，層次較多，分為外膜和內(nèi)膜，成分較復(fù)雜，肽聚糖層很薄2-3nm）,故機械強度較革蘭氏陽性菌弱。2、比較青霉素和溶菌酶在制備細菌原生質(zhì)體中的作用機理。（對細胞壁的作用機理）答：溶酶菌廣泛存在于卵清、人的眼淚和鼻涕、部分細菌和噬菌體中，它能有效的水解細菌的肽聚糖，其作用部位是N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之間的B-1,4-糖苷鍵，從而導(dǎo)致細菌細胞壁肽聚糖散架，它對生長期和休止期的細胞均有

3、作用。青霉素是肽聚糖單體末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的結(jié)構(gòu)類似物，它們相互競爭轉(zhuǎn)肽酶的活性中心。當(dāng)轉(zhuǎn)肽酶與青霉素結(jié)合后，因前后兩個肽聚糖單體間的肽橋無法交聯(lián)，因而只能合成缺乏正常機械強度的缺損肽聚糖，從而形成細胞壁缺損的細胞。因為它是抑制肽聚糖的合成，因此對生長旺盛的微生物具有明顯的抑制作用，而對生長休止狀態(tài)的細胞，則無作用。3、什么是伴胞晶體？它在何種細菌中產(chǎn)生？有何實踐意義？答：伴孢晶體意義：。何種細菌中產(chǎn)生：主要存在于芽孢桿菌中。實踐意義：伴孢晶體對鱗翅目、雙翅目和鞘翅目等200多種昆蟲和動植物線蟲具有毒殺作用，因此可將這類細菌制成對人畜安全、對害蟲的天敵和植物無害，有利于環(huán)境保護的生物

4、農(nóng)藥。4、何為“拴菌試驗”？它何以能說明鞭毛的運動機制？答：“拴菌”試驗的做法是：設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢牢“拴”在載玻片上，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察細胞的行為。因?qū)嶒灲Y(jié)果發(fā)現(xiàn)，該菌是在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)（而非伸縮揮動），故肯定了“旋轉(zhuǎn)論”是正確的。6試述染色法的機制并說明此法的重要性。答：革蘭氏染色的機制為：通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細菌的細胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+由于其細胞壁較厚、肽聚糖層次多和交聯(lián)致密，故遇脫色劑乙醇處理時，因失水而使網(wǎng)孔縮小，在加上它不含類脂，故乙醇的處理不會溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色。反之，G-細菌

5、因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外膜迅速溶解，這時薄而松散的肽聚糖不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此細胞退成無色。這時，在經(jīng)品紅等紅色染料復(fù)染，就使G-細菌呈紅色，而G+細菌則仍保留最初的紫色。此法證明了G+和G-主要由于起細胞壁化學(xué)成分的差異而引起了物理特性的不同而使染色反應(yīng)不同，是一種積極重要的鑒別染色法，不僅可以用與鑒別真細菌，也可鑒別古生菌。7、芽孢在微生物學(xué)的研究上有何意義？滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢耐熱機制的？答：芽抱的有無、形態(tài)、大小和著生位置是細菌分類和鑒定的重要形態(tài)學(xué)指標。芽抱有利于提高菌種的篩選效率，有利于菌種的長

6、期保藏,有利于對各種消毒、殺菌措施的優(yōu)劣的判斷。滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說認為：芽抱的耐熱性在于芽抱衣對多價陽離子和水分的透性很差皮層的離子強度很高，從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽抱核心的水分，結(jié)果造成皮層的充分膨脹。而核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水，因此，具極強的耐熱性。第二章：1、什么是單細胞蛋白？為什么酵母菌是一種優(yōu)良的單細胞蛋白？答：主要指富含蛋白質(zhì)的藻類、酵母、細菌、真菌等微生物進行大規(guī)模培養(yǎng),并從中提煉出蛋白質(zhì)資源。因為酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高，個體一般以單細胞狀態(tài)存在能發(fā)酵糖產(chǎn)生能量常生活在含糖較高，酸度較大的水生環(huán)境中。2、霉菌的營養(yǎng)菌絲體和氣生菌絲體各有何特點？它們分別可分化

7、出哪些特化構(gòu)造。答：營養(yǎng)菌絲體：生長在固體培養(yǎng)基內(nèi)，顏色較淺，較細，分枝絲狀具有吸收營養(yǎng)和排泄代謝廢物功能。氣生菌絲體：顏色較深，直徑較粗，可產(chǎn)生孢子絲。索、附著胞、附著枝。氣生菌絲體特化構(gòu)造：營養(yǎng)菌絲體特化構(gòu)造：吸器、匍匐枝、假根、菌環(huán)、菌網(wǎng)、菌核、菌孢子囊無性：分生抱子頭、簡單：（有性：擔(dān)子無性：分生抱子座、分生抱子器復(fù)雜:子囊殼子囊盤閉囊殼3、試比較細菌，放線菌，酵母菌和霉菌細胞壁成分的異同，并討論它們的原生質(zhì)體制備方法。答：細菌：分為G+、G-具體講。原生質(zhì)體的制備：G+溶菌酶、青霉素；G-溶菌酶、脫色劑酵母菌：細胞壁主要成分甘露聚糖（外層）；葡聚糖（內(nèi)層）；蛋白質(zhì)；原生質(zhì)體的制備：蝸

8、牛消化酶水解。放線菌：即G+菌。霉菌：細胞壁主要成分纖維素、幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)。原生質(zhì)體的制備：纖維素酶。4、什么叫鎖狀聯(lián)合？其生理意義如何？答：鎖狀聯(lián)合即形成狀突起而連合兩個細胞的方式不斷使雙核細胞分裂，從而使菌絲尖端向前延伸。生理意義：保證了雙核菌絲在進行細胞分裂時，每個細胞都能含有兩個遺傳型不同的核，為形成擔(dān)子打下基礎(chǔ)。 鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標準，凡是產(chǎn)生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。 鎖狀聯(lián)合也是擔(dān)子菌亞門的明顯特征之一。第三章：1、什么是一步生長曲線？它分幾期？各期有何特點？答：定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線，稱為一步生長曲線。它包括 潛伏期：細胞內(nèi)已經(jīng)開始裝配噬菌體粒子并可用

9、電鏡觀察到。 裂解期：宿主細胞迅速裂解，溶液中噬菌體粒子急劇增多。 平穩(wěn)期：感染后的宿主細胞已全部裂解，溶液中的噬菌體效價達到最高點。2、什么是效價？測定方法有幾？試簡述噬菌體效價的雙層平板法。答:效價表示每毫升試樣中所含有的具有侵染性的噬菌體粒子數(shù)。測定方法：雙層平板法、單層平板法、液體稀釋法、玻片快速測定法雙層平板法主要步驟：分別配制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿上澆一層平板，待凝固后，再把預(yù)先融化并冷卻到45C以下，加有宿主菌懸液和噬菌體試樣上層培養(yǎng)基，在試管中搖勻后，立即倒在底層培養(yǎng)基上鋪平待凝，然后在37C下保溫。一般經(jīng)10余h后即可對噬菌斑計數(shù)。3

10、、什么的病毒多角體？它有何實際應(yīng)用？答：昆蟲病毒可在宿主細胞內(nèi)形成光鏡下成多角形的包含體，稱為多角體?？梢灾谱魃餁⑾x劑第四章：1、什么是選擇培養(yǎng)基？試舉一例并分析其原理。答：選擇培養(yǎng)基是一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。如酵母富集培養(yǎng)基中的孟加拉紅抑制細菌的生長而對酵母菌無影響。2、什么是鑒別培養(yǎng)基？試以EMB為例，分析其鑒別作用原理。答：鑒別培養(yǎng)基是一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼可鑒別近似菌落中的目的菌菌落的培養(yǎng)基。EMB培養(yǎng)基中的伊紅和美藍可

11、抑制革蘭氏陽性菌和一些難養(yǎng)的革蘭氏陰性菌。產(chǎn)酸菌由于產(chǎn)酸能力不同，菌體表面帶質(zhì)子，與伊紅美藍結(jié)合從而有不同的顏色反應(yīng)，可用肉眼直接判斷。3、什么叫基團位移？試述其分子機制。答：指一類既需特異性載體蛋白的參與，又需耗能的一種物質(zhì)運送方式，特點是溶質(zhì)在運輸前后發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化。其機制分兩步：(1) HPr被PEP激活，(2)糖經(jīng)磷酸化而進入細胞內(nèi)。4、什么叫水活度？它對微生物生命活動有何影響？對人類的生產(chǎn)實踐的日常生活有何意義？答：水活度表示在天然或人為環(huán)境中，微生物可實際利用的自由水或游離水的含量。其定量含義為：某溶液的蒸氣壓與純水蒸氣壓之比。生長繁殖在水活度高的微生物代謝旺盛，在水活度低的范

12、圍內(nèi)生長的微生物抗逆性強。了解各類微生物生長的水活度，有利于設(shè)計培養(yǎng)基，有利于防止食物的霉腐。5、微生物與生長因子有哪幾類關(guān)系？舉例并加以說明。(1)生長因子自養(yǎng)型微生物，它們不需要從外界吸收任何生長因子，多數(shù)真菌、放線菌和不少細菌，如E.coli等。(2) 生長因子異養(yǎng)型微生物，它們需要從外界吸收多種生長因子才能維持正常生長，如各種乳酸菌、動物致病菌、支原體和原生動物等。(3)生長因子過量合成型微生物，能大量合成并分泌某些維生素等生長因子的微生物，如各種生產(chǎn)維生素的菌種。第五章：1、什么是生物固氮？能固氮的微生物有哪幾類？答：生物固氮指大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化而還原成氨的過程?？?/p>

13、分成：自生固氮酶、共生固氮酶、聯(lián)合固氮酶。2、固氮過程需要滿足哪些條件？好氧自身固氮菌如何克服氧氣對固氮酶的抑制的？（即固氮生化機制/抗氧保護機制）答：條件：ATP的供應(yīng)；還原力H及其傳遞載體（鐵氧還蛋白、黃素氧還蛋白）；固氮酶；還原底物；鎂離子；嚴格的厭氧微環(huán)境?？寡醣Ｗo機制：呼吸保護：固氮菌科的菌種以極強的呼吸作用迅速將周圍環(huán)境中的氧氣消耗掉，使細胞周圍微環(huán)境處于低氧狀態(tài)，借此保護固氮酶。構(gòu)象保護：在高氧分壓條件下，維涅蘭德固氮菌和褐球固氮菌等的固氮酶形成一種無固氮活性但能防止氧害特殊構(gòu)象。3、什么是固氮酶？它含有哪兩種化學(xué)組分？各組分的功能如何？答：固氮酶是一種復(fù)合蛋白，由固二氮酶和固二

14、氨酶還原酶兩種相互分離的蛋白構(gòu)成。功能：固二氮酶是一種含鐵和鉬的蛋白，鐵和鉬組成一個稱為Femoco的輔助因子，它是還原N2的活性中心。而固二氮酶還原酶則是一種含鐵的蛋白，具有適應(yīng)在極度缺鉬環(huán)境下還能正常進行生物固氮的功能。4、什么叫乙醛酸循環(huán)？（即試述它在微生物生命活動中的重要功能）由哪些酶組成？答：乙醛酸循環(huán)：是TCA循環(huán)的一條回補途徑，可使TCA循環(huán)不僅僅具有高效產(chǎn)能功能，而且還兼有可為許多重要生物合成反應(yīng)提供有關(guān)中間代謝物的功能。乙醛酸循環(huán)利用TCA循環(huán)八個酶中的5個，再加上兩個新出現(xiàn)的酶一一蘋果酸合酶和異檸檬酸裂解酶。5、青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細菌？其抑制機制如何？答：青霉素抑

15、制肽聚糖的合成過程，形成破裂的細胞壁，代謝旺盛的細菌才存在肽聚糖的合成，因此此時有青霉素作用時細胞易死亡。作用機制：青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與胎橋間的轉(zhuǎn)肽作用。6、試述EMP途經(jīng)在微生物生命活動中的重要性。答：EMP途經(jīng)又稱糖酵解途徑，是多種微生物所具有的代謝途徑。(1) 供應(yīng)ATP形式的能量和NADH2形式的還原力。(2) 是連接其他幾個重要代謝途徑的橋梁，包括TCA循環(huán)、HMP途徑和ED途徑等。(3) 微生物合成提供多種中間代謝物。(4) 通過逆向反應(yīng)可進行多糖合成。7、試述HMP途經(jīng)在微生物生命活動中的重要性。答：(1)供應(yīng)合成原料：為核酸、核苷酸等生物合成提供戊糖-磷酸；途徑中的

16、赤蘚糖-4-磷酸是合成芳香族的原料。(2) 產(chǎn)還原力：產(chǎn)生大量NADPH2形式的還原力，不僅可供脂肪酸、固醇等生物合成之需，還可供通過呼吸鏈產(chǎn)生大量能量。(3) 作為固定CO2的中介：HMP途徑中的核酮糖-5-磷酸在羧化酶的催化下可固定CO2并形成核酮糖-1,5-二磷酸。(4) 擴大碳源利用范圍：為微生物利用C3C7多種碳源提供了必要的代謝途徑。(5) 連接EMP途徑，可為生物合成提供更多的戊糖。8、試述TCA循環(huán)在微生物產(chǎn)能和發(fā)酵生產(chǎn)中的重要性。答：TCA循環(huán)位于一切分解代謝和合成代謝中的樞紐地位，產(chǎn)能效率極高，不僅可為微生物的生物合成提供各種碳架原料，而且還與人類的發(fā)酵生產(chǎn)密切相關(guān)。9、什

17、么叫呼吸？什么是呼吸鏈(電子傳遞鏈)？呼吸鏈有哪些組分？答：呼吸：。呼吸鏈：。呼吸鏈組分：醌類、鐵硫蛋白和一些含有輔酶或輔基的酶。10、什么是氧化磷酸化作用？什么是P/0比？答：氧化磷酸化：指呼吸鏈的遞氫和受氫過程與磷酸化反應(yīng)相偶聯(lián)并產(chǎn)生ATP的作用。P/O比：每消耗1mol氧原子所產(chǎn)生的ATPmol數(shù)，表示呼吸鏈氧化磷酸化效率的高低。11、細菌酒精發(fā)酵與酵母菌的酒精發(fā)酵有何異同？細菌的酒精發(fā)酵有何優(yōu)缺點？答：共同點：葡萄糖降解為丙酮酸，丙酮酸脫羧為乙醛，乙醛再還原成乙醇。不同點：產(chǎn)生丙酮酸的途徑不同：酵母型酒精發(fā)酵是通過EMP途徑，而細菌酒精發(fā)酵是通過ED途徑。 凈產(chǎn)ATP不同。 菌種不同：

18、參與酵母型酒精發(fā)酵的是釀酒酵母，細菌酒精發(fā)酵是運動發(fā)酵單胞菌等微好氧菌。優(yōu)點：代謝速率高；產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高；菌體副產(chǎn)物少；細菌為原核生物易于用基因工程改造菌種；厭氧發(fā)酵，設(shè)備簡單。缺點：生長pH為5，較易染菌；細菌耐乙醇力較酵母菌低；底物范圍窄（葡萄糖，果糖）第六章：1、什么叫典型生長曲線？它可分幾期？劃分的依據(jù)是什么？答：定量描述液體培養(yǎng)基中，微生物群體生長規(guī)律的實驗曲線，稱為典型生長曲線。分為延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。根據(jù)它們每小時分裂次數(shù)的不同劃分。2、延滯期有何特點？如何縮短延滯期？答：生長速率常數(shù)R為0； 細胞形態(tài)變大或增長，部分桿菌長成絲狀； 細胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高

19、，原生質(zhì)呈嗜堿性； 合成代謝旺盛； 對外界不良條件反應(yīng)敏感。用對數(shù)期的菌種接種；增大接種量；發(fā)酵培養(yǎng)基成分和種子培養(yǎng)基的成分盡量接近且豐富些3、指數(shù)期有何特點？處于此期的微生物有何應(yīng)用？答：生長速率常數(shù)R最大； 細胞進行平衡成長，菌體各部分成分均勻； 酶系活躍，代謝旺盛。應(yīng)用：是用作代謝、生理等研究的良好材料，是增殖噬菌體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。4、穩(wěn)定期為何會到來？有何特點？答：因為1營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡；2營養(yǎng)物的比例失調(diào)，如C/N比不適宜；3酸、醇或H0等有害代謝產(chǎn)物的積累；224pH、氧化還原電勢等物理化學(xué)條件越來越不適宜。特點是生長速率常數(shù)等于0，這時

20、菌體產(chǎn)量達到最高點，而且菌體產(chǎn)量與營養(yǎng)物的消耗間呈現(xiàn)出有規(guī)律的比例關(guān)系。5、衰亡期特點？答：細菌代謝活性降低，死亡速率超過新生速率，群體呈負增長； 菌體衰老并產(chǎn)生自溶，釋放出抗生素等產(chǎn)物；（負增長、菌體自溶、芽孢釋放、進一步合成、釋放次生代謝產(chǎn)物）6、測定微生物的生長有哪些方法？有何優(yōu)缺點？答：測生長量：測體積法、稱干重法、比濁法、測含氮量法計繁殖數(shù)：液體稀釋法、血球計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法稱干重法：優(yōu)點：適用于一切微生物缺點：無法區(qū)別死菌和活菌比濁法：優(yōu)點：比較準確血球計數(shù)法：優(yōu)點：簡便、直觀缺點：無法區(qū)別死菌和活菌液體稀釋法：優(yōu)點：可計算活菌數(shù)缺點：比較繁瑣平板菌落計數(shù)法：優(yōu)點：可計算活菌數(shù)

21、缺點：操作繁瑣，需要培養(yǎng)一定時間才能獲得，測定結(jié)果受多種因素影響。7、微生物培養(yǎng)過程中PH變化的原因，怎么使微生物處于較穩(wěn)定的PH環(huán)境中？答：微生物的生命活動會引起環(huán)境PH改變。變酸：糖類發(fā)酵、氧化形成有機酸；脂肪水解形成有機酸；銨根離子的選擇性吸收作用。變堿：蛋白質(zhì)脫羧形成胺類；硝酸根離子的選擇性吸收作用。方法：“治標”：過酸時，加NaOH、NaC0等堿液中和23過堿時，力口HSO、HCl等酸液中和24“治本”：過酸時：加適當(dāng)?shù)矗ǖ鞍踪|(zhì)、硝酸鹽、銨鹽），提高通氣量過堿時：加適量碳源（糖、乳酸），降低通氣量。8、生物體內(nèi)有毒的氧的形式有幾種？好氧微生物通過什么機制避免氧害？答：氧氣受到輻射可

22、被還原為超氧化物自由基、過氧化氫、羥基自由基等，它們是強氧化劑，能迅速破壞細胞組分。專性好氧和兼性厭氧微生物的細胞中含有超氧化物歧化酶和過氧化氫酶，能破壞超氧化物自由基和過氧化氫。另外，細胞中的過氧化物酶也能降解過氧化氫。9、什么是抗代謝物？簡述磺胺藥的作用機制和TMP（磺胺增效劑）的作用機理。答：抗代謝物：是指一類在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與細胞內(nèi)必要代謝物結(jié)構(gòu)相似，并可干擾正常代謝活動的化學(xué)物質(zhì)?；前返慕Y(jié)構(gòu)與細菌的一種生長因子對氨基苯甲酸（PABA）高度相似，兩者會發(fā)生競爭性拮抗作用。二氫蝶酸合成酶會錯把磺胺作底物，結(jié)果合成了無功能的“假二氫葉酸”，無法合成葉酸，于是生長受到抑制?；前吩鲂═MP）：

23、TMP能抑制二氫葉酸還原酶，使二氫葉酸無法還原成四氫葉酸，從而增強了磺胺的抑制作用。10、什么叫微生物的耐藥性（抗藥性）？產(chǎn)生途徑有哪些？試述細菌對青霉素的耐藥性機制及如何克服青霉素的耐藥性？答：微生物通過遺傳途徑等的改變產(chǎn)生對藥物的抗性。即微生物由于與藥物長期接觸，而變得對它們不敏感，作用效果越來越差。途徑：基因突變，遺傳重組，質(zhì)粒轉(zhuǎn)移機制：細菌能產(chǎn)生使青霉素失去活性的B內(nèi)酰胺酶，從而使青霉素的核心結(jié)構(gòu)中的內(nèi)酰胺鍵斷裂而喪失活性。 青霉素結(jié)合蛋白發(fā)生改變 細胞壁對青霉素類的滲透性減低方法：第一次使用的青霉素劑量要足，避免在一個時期或長期多次使用青霉素，不同的抗生素混合使用，對青霉素進行改造，

24、并合成半合成抗生素以及開發(fā)生物藥物素。11、微生物產(chǎn)生耐藥性的方式？答：微生物通過遺傳途徑等的改變產(chǎn)生對藥物的抗性。即微生物由于與藥物長期接觸，而變得對它們不敏感，作用效果越來越差。途徑：基因突變，遺傳重組，質(zhì)粒轉(zhuǎn)移方式：產(chǎn)生能使藥物失活的酶或合成了修飾抗生素的酶； 修飾和改變藥物作用的靶位點； 形成“救護途徑”； 使藥物不能透過細胞膜； 抗性菌株發(fā)生遺傳變異； 通過主動外排系統(tǒng)把藥物排出體外。12、控制有害微生物生長繁殖的措施及原理。答：滅菌；消毒；防腐；化療防腐措施：低溫、干燥、缺氧、高滲、高酸度、加防腐劑。13、什么是高密度培養(yǎng)，如何保證好氧菌的高密度培養(yǎng)？是指微生物在液體培養(yǎng)中細胞群體

25、密度超過常規(guī)培養(yǎng)10倍以上的生長狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。方法主要有：1選取最佳培養(yǎng)基成分和各成分含量2補料3提高溶解氧的濃度4防止有害代謝產(chǎn)物的生成14、影響濕熱滅菌效果的主要因素有哪些？在實踐中應(yīng)如何正確對待？1. 滅菌物體含菌量越高需要滅菌的時間越2各類空氣排出程度，空氣要全部排盡3滅菌對象PH,PHv6.0微生物已死亡PH在6.0-8.0之間微生物不會死亡4 滅菌對象的體積,大容積培養(yǎng)基滅菌時必須延長滅菌時間5 加熱與散熱速度,會影響培養(yǎng)基成分的破壞程度,應(yīng)適當(dāng)控制。15、設(shè)計一個實驗,從自然界中分離到以苯為碳源的微生物。答：從苯含量較高環(huán)境中采集土樣或水樣； 配制培養(yǎng)基，制備平板，一種僅以苯作

26、為唯一碳源（A），另一種不含任何碳源作為對照（B）； 將樣品適當(dāng)稀釋，涂布A平板； 將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生； 將A平板上的菌落編號并分別轉(zhuǎn)接至B平板，置于相同溫度條件下培養(yǎng)； 挑取在A平板上生長而不在B平板上生長的菌落，在一個新的A平板上劃線、培養(yǎng)，獲得單菌落，初步確定可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物； 將初步確定的菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進行藥瓶發(fā)酵實驗，利用相應(yīng)化學(xué)分析方法定量分析該菌株分解利用苯的情況。16、在大腸桿菌高密度培養(yǎng)過程中，如何克服其代謝過程中產(chǎn)生的乙酸對生長的抑制？答：乙酸是大腸桿菌產(chǎn)生的對自身的生長代謝有抑制作用的產(chǎn)物。為防

27、止它的生成可采用以下方法： 選擇天然培養(yǎng)基 降低培養(yǎng)基的pH 以甘油代替葡萄糖作碳源 加入甘氨酸，甲硫氨酸 降低培養(yǎng)溫度(從37度降至26-30度) 采用透析培養(yǎng)法。17、現(xiàn)牛奶中含有的大腸桿菌的濃度為l/100ml,其繁殖一代所需時間為15min，規(guī)定牛奶中大腸桿菌數(shù)不得超過30000個/ml,問此牛奶最多可保持多久？(lg2=0.3010；lg3=0.4771)18、說明溫度對微生物生長的影響。答：微生物的生長具有相當(dāng)高的溫度依賴性，有最低、最高、最適生長溫度。溫度對微生物升長的影響具體表現(xiàn)為： 影響酶活性，溫度變化會影響酶促反應(yīng)速率，最終影響物質(zhì)合成。 影響細胞質(zhì)膜的流動性，溫度高則流動

28、性高，有利于物質(zhì)的傳輸；溫度低則流動性低，不利于物質(zhì)的傳輸。 影響物質(zhì)的溶解度，溫度上升，物質(zhì)的溶解度上升，溫度降低，溶解度下降，影響對物質(zhì)的吸收和分泌作用。 溫度過高，酶和蛋白質(zhì)變性，細胞受損；溫度過低，細胞質(zhì)膜凍結(jié)，酶也不能迅速工作。所以，溫度高于或低于最適生長溫度時生長速度會降低。第七章：1、什么叫Ames實驗法，其主要原理是什么？請簡單敘述其實驗步驟。答：艾姆斯試驗是一種利用細菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡便有效方法。原理：鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型（his-）菌株在基本培養(yǎng)基-的平板上不能生長，如發(fā)生回復(fù)突變變成原養(yǎng)型（his+）后則能生長。方法

29、：在含待可疑“三致”（如黃曲霉毒素）的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時間保溫后，吸入濾紙片中，然后將濾紙片放置于上述平板中央，經(jīng)培養(yǎng)后，出現(xiàn)3種情況;在平板上無大量菌落產(chǎn)生，說明試樣中不含誘變劑；在紙片周圍有一抑制圈，其外周出現(xiàn)大量菌落，說明試樣中有某種高濃度誘變劑存在；在紙片周圍長有大量菌落，說明試樣中有濃度適當(dāng)?shù)恼T變劑存在。2、產(chǎn)生營養(yǎng)缺陷型突變株的原理是什么？簡述篩選營養(yǎng)缺陷型突變株的方法。并各舉一例說明在生產(chǎn)實踐上和理論研究中的應(yīng)用情況。答：營養(yǎng)缺陷型：。原理是基因突變。方法：誘變處理：選擇簡單有效的誘變劑，處理單細胞或抱子懸液。 淘汰野生型：由于在誘變處理后存活的個體中，營養(yǎng)缺陷型的

30、比例較低，因此可通過抗生素法和菌絲過濾法淘汰野生型菌株，“濃縮”營養(yǎng)缺陷型。 檢出缺陷型：用一個培養(yǎng)皿即可檢出的，有夾層培養(yǎng)法、限量補充培養(yǎng)法、逐個檢出法、影印平板法。 鑒定缺陷型：可借生長譜法進行。即在混有供試菌的平板表面點加微量營養(yǎng)物，觀察營養(yǎng)物周圍是否長菌來確定該供試菌的營養(yǎng)要求的一種快速、直觀的方法。在生產(chǎn)實踐上的應(yīng)用：谷氨酸棒狀桿菌的高絲氨酸缺陷型菌株作為賴氨酸的發(fā)酵菌種。在理論研究中的應(yīng)用：利用鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑。3、菌種退化的原因？常用菌種保藏方法有哪幾種？答：主要原因：基因突變加速退化的原因：連續(xù)傳代、不適宜的培養(yǎng)和保

31、藏條件。常用菌種保藏方法：斜面?zhèn)鞔?、冷凍干燥保藏法、液氮保藏法、砂土保藏法、冰箱保存法（斜面）、冰箱保存法（半固體）、石蠟油封藏法、甘油懸液保藏法。4、要使發(fā)酵工廠保持產(chǎn)量穩(wěn)定和不斷獲得高產(chǎn)菌株，從微生物的遺傳變異角度考慮，你覺得應(yīng)采取什么措施？答：要防止菌株因自發(fā)突變而衰退，并要定期復(fù)壯。防止菌種衰退的措施：控制傳代次數(shù)；利用不易衰退的細胞傳代；創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件；采用有效的菌種保藏方法。菌種復(fù)壯的方法：純種分離法；淘汰已衰退的個體；通過宿主體復(fù)壯；理化因素誘變。5、試述自發(fā)突變的機制。答：自發(fā)突變指生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。自發(fā)突變的原因有很多： 由背景輻射和環(huán)境因素引起

32、，如天然的宇宙射線等； 由微生物自身有害代謝產(chǎn)物引起，如過氧化氫等； 由DNA復(fù)制過程中堿基配對錯誤引起。6、某菌株在基本培養(yǎng)基上無法生長，如在基本培養(yǎng)基中添加0.1%堿水解酵母核酸，則該菌株能生長，那么該菌株為何種突變型的菌株？請設(shè)計一實驗方案以進一步確定該菌株的生長必須物。答：該菌株在基本培養(yǎng)基上不能生長，添加核酸水解物后能夠生長，說明突變株為堿基類似物的營養(yǎng)缺陷型，可通過以下方案進一步確定其營養(yǎng)需求：1）將該菌接種于完全培養(yǎng)基中，適溫培養(yǎng)至對數(shù)期，收集細胞，以無菌生理鹽水洗滌3次，制成懸液。2）將洗滌后的細胞分別涂布于基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板、完全培養(yǎng)基平板，然后在基本培養(yǎng)基平板分別加腺嘌呤、鳥嘌

33、呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶的藥物顆粒，培養(yǎng)。3）觀察每種藥物周圍是否有生長。實驗結(jié)果：在基本培養(yǎng)基上不生長，完全培養(yǎng)基上生長良好，在基本培養(yǎng)基平板上哪一種藥物周圍有菌生長，就表明該藥物是突變株的營養(yǎng)需求。7、根據(jù)突變的光復(fù)活修復(fù)作用、原理，你認為在進行紫外線誘變處理時，應(yīng)注意什么？為了均勻照射到紫外線，將如何做？答：紫外線處理時要注意避光，以防止光復(fù)活作用。一般在紅光下操作，在黑暗中培養(yǎng)。在紫外線照射時，盛菌液的培養(yǎng)皿應(yīng)置于磁力攪拌器上，邊照射邊攪拌使細胞能均勻受到紫外線均勻照射。8、什么是基因重組？在原核微生物中哪些方式可引起基因重組？答：基因重組：兩個獨立基因組內(nèi)的遺傳基因，通過一定途徑轉(zhuǎn)移到一

34、起，形成新的穩(wěn)定基因組的過程，稱為基因重組。在原核微生物中，可通過轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合和原生質(zhì)體融合。在真核微生物中，可通過轉(zhuǎn)化、準性生殖、有性雜交、原生質(zhì)體融合。9、發(fā)酵工業(yè)常遭噬菌體的危害，如何檢驗和預(yù)防？答：檢驗：雙層平板法：。預(yù)防措施： 絕不使用污染或由污染嫌疑的菌株，并經(jīng)常輪換生產(chǎn)菌株; 嚴格保持環(huán)境衛(wèi)生； 不任意丟棄和排放有生產(chǎn)菌種的菌液，非生產(chǎn)菌液要及時滅菌; 生產(chǎn)設(shè)備定期清洗、加強發(fā)酵罐和管道的滅菌。10、簡述F+菌株、F菌株與Hfr菌株的異同。答：從表型來看，F(xiàn)+菌株、F菌株與Hfr菌株都是雄性菌株。 從F因子存在狀態(tài)來看：F+菌株中的F因子是游離態(tài)的；F菌株中的F因子也是游離態(tài)

35、的，但是F因子上還帶了一部分染色體DNA；Hfr菌株中的F因子是整合態(tài)的。 從雜交結(jié)果來看：F+XF-使F-菌株變?yōu)樾坌跃?；FXF-使F-菌株變?yōu)樾坌跃?；而HfrXF-不能使F-菌株變?yōu)樾坌跃辍?從基因重組頻率來看：F+XF-基因重組頻率為0；FXF-基因重組頻率較高；而HfrXF-基因重組頻率最高。11、何為微生物的同步生長？如何獲得同步生長的微生物細胞（各舉一例）。答：同步生長：使群體中的所有個體細胞盡可能地處于同樣細胞生長和分裂期中，然后通過分析此群體在各階段的生物化學(xué)特性變化，來間接了解單個細胞的相應(yīng)變化規(guī)律，這種通過同步培養(yǎng)的手段而使細胞群體中各個體處于分裂步調(diào)一致的生長狀態(tài)，

36、稱為同步生長。方法： 環(huán)境條件誘導(dǎo)法：主要是通過控制環(huán)境條件如光照、溫度、營養(yǎng)物（培養(yǎng)基成分）等誘導(dǎo)細胞同步生長。舉例：藻類的光照、黑暗控制；（光照）用氯霉素抑制細菌蛋白質(zhì)合成；（營養(yǎng)物）短期熱休克法（40C）。（溫度） 機械篩選法:利用處于同一生長階段的細胞的體積、大小的相同性，用過濾法、離心法或膜洗脫法收集同步生長的細胞。舉例：1. 過濾分離法：選用適當(dāng)孔徑的微孔濾膜只允許個體較小的剛分裂的細胞通過濾膜，收集后培養(yǎng)即可獲得同步培養(yǎng)物。2. 離心分離法：將不同步的細胞懸浮在不被該菌利用的蔗糖溶液或葡聚糖溶液中，通過離心將大小不同的細胞分成不同的區(qū)帶，分別取出培養(yǎng)，即可獲得同步培養(yǎng)物。3. 膜

37、洗脫法：根據(jù)某些濾膜可吸附與該濾膜相反電荷細胞的原理，讓非同步細胞的懸液流經(jīng)此膜，一大群細胞被牢牢吸附，不久吸附的細胞開始分裂，分裂后一個子細胞仍吸附在膜上，另一個則被培養(yǎng)液洗脫。12、如何從野生型和營養(yǎng)缺陷型混合菌液中檢出缺陷型菌株（至少兩種方法）？并說明其原理。答：用一個培養(yǎng)皿能檢出的方法：夾層培養(yǎng)法、限量補充培養(yǎng)法。用兩個培養(yǎng)皿才能檢出的（對照）：逐個檢出法、影印平板法。 夾層培養(yǎng)法：先在平板中倒一層不含菌的基本培養(yǎng)基，凝固后再加一層混有誘變處理細胞的基本培養(yǎng)基，凝固后再加一層不含菌的基本培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后長出野生型菌落，做標記。再加一層完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)后長出的是缺陷型。 限量補充培養(yǎng)

38、法：將誘變處理的細胞接種到含有微量補充養(yǎng)料的基本培養(yǎng)基上，野生型能迅速長成大菌落，缺陷型由于營養(yǎng)局限只能長成小菌落。 逐個檢出法：營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基上生長受限而在完全培養(yǎng)基上則可生長。 影印平板法：將經(jīng)處理的細胞適當(dāng)稀釋后涂于完全培養(yǎng)基上，在完全培養(yǎng)基上能生長而在基本培養(yǎng)基上不能長就可能是缺陷型。原理：營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基上生長受限而在完全培養(yǎng)基或相應(yīng)的補充培養(yǎng)基上則可生長。13、給你下列菌株：菌株A.F+，基因型A+B+C+,菌株B.F-,基因型A-B-C-，問題：1) 接合作用形成的重組型，簡述原因；2) F+變成Hfr后，與F接合可能形成的重組型。答：1)A與B接合后，供體

39、細胞的基因型仍為A+B+C+,仍是F+，受體細胞轉(zhuǎn)變?yōu)镕+，基因型仍為A-B-C-o解釋：A與B接合只是將菌株A的F質(zhì)粒轉(zhuǎn)移給菌株B,使A、B都變成F+菌株，但他們的基因型并沒有改變，所以菌株A的基因型仍是A+B+C+，菌株B的基因型為A-B-C-o2)可能形成的重組型：A+B-C-、A-B+C-、A-B-C+等等。解釋：當(dāng)A變成Hfr菌株時，B可以接受來自Hfr菌株的一部分或一整套核基因組DNA，由于F質(zhì)粒上決定性別的基因位于線狀DNA的末端，能進入F-細胞的機會極少，所以在Hfr和F-接合中，F(xiàn)-變?yōu)镕+的頻率極低,但其他遺傳性狀的重組頻率卻很高，所以菌株A的基因型為A+B+C+,而菌株B

40、的基因型種類較多可以是A+B-C-，A-B+C-，A-B-C+等。14、基因工程技術(shù)中常用的宿主細胞有哪些？簡述各自的優(yōu)缺點。答：大腸桿菌、釀酒酵母、動物細胞、枯草芽孢桿菌。 大腸桿菌：優(yōu)點：遺傳背景十分清楚，菌株突變株和質(zhì)粒多，目標基因表達水平高，培養(yǎng)周期短，抗污染能力強。缺點：大腸桿菌含有內(nèi)毒素，有溶源性病毒，存在一定的致病性，產(chǎn)生的蛋白質(zhì)藥物因缺乏糖基化而在體內(nèi)易被降解，藥性降低。 釀酒酵母：優(yōu)點：酵母是真核生物，可使某些蛋白的糖基化更加穩(wěn)定；遺傳背景清楚，具有單細胞生物結(jié)構(gòu)，具有快速生長和易于基因工程操作等優(yōu)點，能用于大規(guī)模培養(yǎng)。缺點：酵母蛋白很少分泌，但大多數(shù)翻譯后加工發(fā)生在分泌途徑

41、中，不能提供哺乳動物蛋白表達能力功能所需要的所有翻譯正確后加工。 枯草芽孢桿菌優(yōu)點：不存在潛在致病性，不產(chǎn)生內(nèi)毒素，可將蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中。缺點：質(zhì)粒往往不穩(wěn)定。 動物細胞優(yōu)點：有關(guān)遺傳學(xué)、生理學(xué)的許多研究均需在動物細胞中進行。缺點：費用昂貴、難以操作；克隆基因的表達水平極低。15、試述誘變育種的方法步驟和注意事項。答：出發(fā)菌株f誘變劑處理f初篩f復(fù)篩f變異菌株、，、-、尸Ifr丫:注意事項： 挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株； 處理單細胞或孢子懸液； 選擇簡便有效的誘變劑； 選用最適誘變劑量； 選用高效篩選方法。 充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)。16、什么是質(zhì)粒？它有哪些特點？主要質(zhì)粒有幾類？答：質(zhì)粒：凡游

42、離于原核細胞核基因組外的、具有獨立復(fù)制能力的小型共價閉合環(huán)裝dsDNA分子，稱為質(zhì)粒。特點：1) 質(zhì)粒的復(fù)制主要依賴于宿主細胞的復(fù)制酶體系。2) 不相容性3) 穩(wěn)定性4) 質(zhì)?？煞譃檗D(zhuǎn)移性和非轉(zhuǎn)移性兩大類型。質(zhì)粒轉(zhuǎn)移均通過接合作用進行。當(dāng)供體、受體菌之間的親緣關(guān)系愈近，質(zhì)粒接合轉(zhuǎn)移的頻率就愈高。質(zhì)粒種類：接合型質(zhì)粒；抗藥性質(zhì)粒；產(chǎn)細菌素和抗生素質(zhì)粒；產(chǎn)毒質(zhì)粒；具生理功能的質(zhì)粒。18、什么是原生質(zhì)體融合？其基本操作程序如何？它在育種工作中有何優(yōu)點？答：原生質(zhì)體融合：通過人為方法，使不同遺傳性狀的兩個細胞的原生質(zhì)體進行融合，借以獲得具有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。操作過程：親本選擇、去壁、促融

43、、篩選、檢測。在育種工作中的優(yōu)點： 可使遺傳物質(zhì)傳遞更為完整、獲得更多基因重組的機會。 可與其他育種方法相結(jié)合，如把常規(guī)誘變和原生質(zhì)體誘變所獲得的優(yōu)良性狀，組合到一個單株中。19、試比較轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)導(dǎo)與溶源轉(zhuǎn)換間的異同。答：即名詞解釋，并展開說，如轉(zhuǎn)導(dǎo)包括局限轉(zhuǎn)導(dǎo)、普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶源轉(zhuǎn)變。20、如何區(qū)分衰退、飾變和雜菌污染？答：衰退：是指某純種微生物群體中的個別個體由于發(fā)生自發(fā)突變的結(jié)果，使該物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生衰退性的量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。飾變：即外表的修飾性改變，是一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)變化而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平上的表型變化。雜菌污染則是指混入了其他菌。21、試述自發(fā)突變的機制。答：自

44、發(fā)突變指生物體在無人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。自發(fā)突變的機制： 背景輻射和環(huán)境因素的誘變，不少自發(fā)突變實質(zhì)上是由一些低劑量誘變因素長期的綜合效應(yīng)導(dǎo)致，如天然的宇宙射線等； 微生物自身有害代謝產(chǎn)物的誘變，如過氧化氫等； 由DNA復(fù)制過程中堿基配對錯誤引起，據(jù)統(tǒng)計，DNA鏈每次復(fù)制中，每個堿基對錯配頻率是10-710-n，而一個基因平均約含1000bp，故自發(fā)突變頻率約為10-6。因此，一般培養(yǎng)時細胞濃度可達108個/ml,故經(jīng)常會有自發(fā)突變株產(chǎn)生。22、某制藥廠生產(chǎn)林可霉素，該廠為了提高產(chǎn)量，請你從微生物遺傳變異的原理為該廠設(shè)計獲得高產(chǎn)菌株的試驗方案。答：林可霉素是林可霉素鏈霉菌產(chǎn)生的一種抗

45、生素，可用誘變育種的方法獲得其高產(chǎn)菌主要步驟如下。1、挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株這里挑選優(yōu)良的林可霉素鏈霉菌2、處理單細胞或單孢子懸液選用林可霉素鏈霉菌單孢子懸液3、選擇簡便有效的誘變劑紫外UV或甲基磺酸乙酯EMS4、選用最適的誘變劑量選擇合適的UV或EMS劑量5、充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)UV與EMS復(fù)合誘變處理7、設(shè)計高效篩選方案。23、試闡述抗生素法和菌絲過濾法在“濃縮”營養(yǎng)缺陷型菌株中的基本原理。答：抗生素法：將誘變處理后的微生物放在含抗生素的基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在基本培養(yǎng)基中，只有野生型能生長，營養(yǎng)缺陷型突變株不能生長。而青霉素能抑制細菌細胞壁的合成，因而能殺死正常生長繁殖的野生型菌株，但無法

46、殺死處于休止期的營養(yǎng)缺陷型細菌，從而達到“濃縮”后者的目的。菌絲過濾法：適用于絲狀生長的真菌和放線菌。原理是：在基本培養(yǎng)基中，野生型菌株的孢子能發(fā)芽成菌絲，而營養(yǎng)缺陷型的孢子不能。因此，將經(jīng)過誘變處理后的孢子放在基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，再用濾孔較大的擦鏡紙過濾。重復(fù)數(shù)遍，就可去除大部分野生型菌株，從而達到“濃縮”營養(yǎng)缺陷型菌株的目的。24、某人將一細菌培養(yǎng)物用紫外線照射后立即涂在加有鏈霉素(Str)的培養(yǎng)基上，放在有光條件下培養(yǎng)，從中選擇Str抗性菌株，結(jié)果沒有選出Str抗性菌株，其失敗原因？答：1)紫外線誘變后見光培養(yǎng)，發(fā)生光修復(fù)，突變率大大下降，以至選不出Str抗性菌株。2) 紫外線照

47、射后可能根本沒有產(chǎn)抗Str的突變。25、什么是菌種復(fù)壯？答：狹義的復(fù)壯:是在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和測定生產(chǎn)性能等方法，從衰退的群體中找出尚未衰退的個體，以達到恢復(fù)該菌原有性狀的一種措施；廣義的復(fù)壯:指在菌種的生產(chǎn)性能尚未衰退前，有意識地進行純種分離和生產(chǎn)性能的測定工作，以期菌種的生產(chǎn)性能逐步有所提高。26、什么叫連續(xù)培養(yǎng)？有何優(yōu)點？為何連續(xù)時間是有限的？連續(xù)培養(yǎng)：指向培養(yǎng)器中連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液，使微生物的液體培養(yǎng)物長期維持穩(wěn)定、高速生長狀態(tài)的一種溢流培養(yǎng)技術(shù)。優(yōu)點：高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。菌種易于退化；容易污染；營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。因此連續(xù)時間是有限的。第八

48、章：1、為什么說土壤是人類最豐富的“菌種資源庫”？答：微生物的生長發(fā)育主要受到營養(yǎng)物、含水量、氧、溫度、pH等因子的影響，而土壤能滿足微生物生長發(fā)育的需要。因為土壤中含有大量的動植物和微生物殘體，可供微生物作為碳源、氮源和能源，土壤顆粒間的空隙可滿足好氧微生物的生長，而通氣條件差，處于厭氧狀態(tài)時，可滿足厭氧微生物的生長，土壤的dH范圍在3.5-10.0之間，多數(shù)在5.5-8.5之間，是大多數(shù)微生物的適宜生長的pH范圍，土壤溫度變化幅度小而緩慢，有利于微生物的生長，所以說土壤是人類最豐富的“菌種資源庫”。2、如何檢測自來水中大腸桿菌數(shù)和細菌總菌數(shù)是否超標？答：制備EMB培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

49、，分別倒平板；將濾膜制成圓片，取1000ml自來水，無菌條件下過濾；將濾膜取下，貼在EMB平板，37C下培養(yǎng)48h后，觀察并計菌落數(shù)。如果發(fā)現(xiàn)呈紫色，有綠色金屬閃光的菌落有3個或3個以上，則大腸桿菌數(shù)超標。另用無菌移液管吸取1ml自來水，涂布于牛肉膏蛋白胨平板上，37C下培養(yǎng)4h后，觀察并計菌落數(shù)。如果菌落數(shù)超過100個，則細菌總數(shù)超標。3、檢驗飲用水的質(zhì)量時，為什么要選用大腸菌群數(shù)作為主要指標？我國衛(wèi)生部門對此有何規(guī)定？1）由水傳播的最重要的傳染病是痢疾、霍亂和傷寒，它們都是腸道傳染病。2）水中存在病原菌可能性很小，直接檢測困難；大腸桿菌生理習(xí)性與腸道病原菌類似，在外界的生存時間基本一致。（代表性）3）大腸桿菌的檢驗技術(shù)較簡單；