臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)試習(xí)題及答案

1、臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)試題及答案一、名詞解釋 1.臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)(Clinical Biochemistry) 2.組合試驗(yàn)(profile tests) 二、問(wèn)答題 1.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的研究領(lǐng)域。 2.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及應(yīng)用。 3.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)。 第一章 緒論答案 一、 名詞解釋 1. 臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)(Clinical Biochemistry): 臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)是在人體正常生物化學(xué)基礎(chǔ)上，研究病理狀態(tài)下生物化學(xué)改變，尋找這些改變的特征性標(biāo)志并建立可靠實(shí)用檢測(cè)方法，通過(guò)對(duì)這些特征性標(biāo)志物的檢測(cè)，為健康評(píng)估、疾病預(yù)防、診斷、治療、病情和預(yù)后判

2、斷等提供生物化學(xué)信息和決策依據(jù)的一門(mén)學(xué)科。 2. 組合試驗(yàn)(profile tests): 在循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)上，將某些疾病或器官系統(tǒng)功能的有關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng)目，進(jìn)行科學(xué)合理的組合，以便獲取更全面完整的病理生物化學(xué)信息的方法。如了解肝臟功能的組合試驗(yàn)。 二、問(wèn)答題 1. 試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的研究領(lǐng)域。 臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的學(xué)科領(lǐng)域主要包括以下三方面： 1. 揭示有關(guān)疾病的病理生物化學(xué)改變，從本質(zhì)上闡明疾病發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的生物化學(xué)機(jī)制，為疾病的預(yù)防、診斷、療效及預(yù)后評(píng)估，提供理論基礎(chǔ)。 2. 在上述研究基礎(chǔ)上，尋找具有疾病特異性的生物化學(xué)標(biāo)志物，并建立特異度、靈敏度高，簡(jiǎn)便而高性?xún)r(jià)比的檢測(cè)方法，從而在

3、臨床開(kāi)展有關(guān)項(xiàng)目的檢測(cè)，提供反映這些標(biāo)志物改變的客觀數(shù)據(jù)。 3. 將檢測(cè)項(xiàng)目的數(shù)據(jù)，轉(zhuǎn)化為預(yù)防、診斷和療效及預(yù)后評(píng)價(jià)信息。 2. 試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及應(yīng)用。 在醫(yī)學(xué)中，臨床生物化學(xué)是闡明疾病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的分子機(jī)制，從本質(zhì)上認(rèn)識(shí)病變準(zhǔn)確部位及具體環(huán)節(jié)，為尋找有效的預(yù)防和治療靶點(diǎn)，疾病的診斷及病情和預(yù)后判斷，提供理論基礎(chǔ)的一門(mén)重要病理學(xué)學(xué)科。 其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要包括：1. 揭示疾病發(fā)生的分子機(jī)制。2.通過(guò)對(duì)有關(guān)疾病生物化學(xué)改變的特征性生物標(biāo)志檢測(cè)方法的建立和實(shí)施，為判斷有無(wú)及何種疾病提供客觀依據(jù)。而動(dòng)態(tài)觀察這些標(biāo)志物的改變，可對(duì)病情發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、預(yù)后及治療方案的制定和效果判斷，

4、提供依據(jù)。3. 臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)技術(shù)，涵蓋了當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究中常用的主要方法技術(shù)。因此，也是醫(yī)學(xué)特別是臨床醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域研究的一門(mén)共同性工具學(xué)科。 3. 簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)。 分子診斷學(xué)迅速發(fā)展，代表了的發(fā)展方向； 深入尋找高診斷特異性和靈敏性的新生物化學(xué)標(biāo)志，提高診斷性能； 檢測(cè)技術(shù)和方法的更新完善，更加及時(shí)、準(zhǔn)確地提供檢驗(yàn)結(jié)果； 全程質(zhì)量管理； 以循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)為基礎(chǔ)，科學(xué)評(píng)價(jià)有關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的診斷性能，合理有效地開(kāi)展臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)。 一、單項(xiàng)選擇題 (A 型題 ) 1 轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是 A 磷酸吡哆醛 B NADPH C NADH D FAD E FMN 2 SI 制中酶活性單位為

5、 A U/L B Katal C g/L D ml/L E pmol 3酶的活性國(guó)際單位 (U) 是指 A 在 25 及其他最適條件下，每分鐘催化 lmol 底物反應(yīng)所需的酶量 B 在特定的條件下，每分鐘催化 1 mol 底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量 C 在 37 條件下，每分鐘催化 lmmol 底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量 D 在規(guī)定條件下，每秒鐘催化 lmol 底物反應(yīng)所需的酶量 E 在最適條件下，每小時(shí)催化 lmol 底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量 4目前我國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定酶活性濃度推薦溫度為 A (25 ± 0.1) B (37 ± 0.5) C (37 ± 0.3) D (

6、37 ± 0.1) E (37 ± 1) 5下列哪種酶是血漿特異酶 A 淀粉酶 B 凝血酶原 C 堿性磷酸酶 D 酸性磷酸酶 E 脂肪酶 6下列哪一種酶只位于細(xì)胞漿 A 酸性磷酸酶 B 谷氨酸脫氫酶 C 乳酸脫氫酶 D 天冬氨酸脫氫酶 E 異檸檬酸脫氫酶 7在正常妊娠過(guò)程中血清酶增高最明顯的是 A LD B ALP C CK D AMY E LPS 8下列哪一種輔因子的生成可通過(guò)測(cè)定 340nm 處吸光度的降低數(shù)來(lái)表示 A FADH2 B NAD+ C NADH D FMN E NADPH 9血清保存在室溫活性會(huì)升高的酶是 A LD B ALP C ACP D ALT E

7、AST 1 0 ALT 在人體各組織中含量最多的是 A 腎臟 B 心臟 C 骨骼肌 D 紅細(xì)胞 E 肝臟 1 1改變連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)酶活性濃度的常數(shù) K 值大小最方便的途徑為 A 改變酶反應(yīng)溫度 B 改變監(jiān)測(cè)時(shí)間長(zhǎng)短 C 改變底物濃度 D 改變標(biāo)本稀釋度 E 改變酶反應(yīng)的 pH 值 12酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線(xiàn)通常可用于確定 A 酶反應(yīng)線(xiàn)性范圍 B 適宜的 pH C 適宜的酶量范圍 D 反應(yīng)線(xiàn)性期的時(shí)間范圍 E 底物的濃度 13目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定血清 ALT 所選測(cè)定波長(zhǎng)為 A 280nm B 340nm C 405nm D 450nm E 560nm 14進(jìn)行酶活性濃度測(cè)定時(shí)，常推薦加入磷酸吡

8、哆醛的酶是 A ALP B ALT C CK D LD E AMY 15連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定 ALT 所用基質(zhì)通常是 A 丙氨酸 -a 酮戊二酸 B 丙酮酸 - 谷氨酸 C 門(mén)冬氨酸 -a 酮戊二酸 D 草酰乙酸 - 谷氨酸 E 谷胱甘肽 - 氨基酸 16顯示“膽酶分離”前兆的疾病是 A 急性心肌梗死 B 肝癌 C 脂肪肝 D 肝壞死 E 膽石癥 1 7 LD 催化乳酸生成丙酮酸的反應(yīng)較適當(dāng)?shù)?pH 是 A 10.5 B 9.0 C 7.6 D 7.0 E 4.6 1 8 乳酸脫氫酶一般形成的同工酶的種類(lèi)有 A 2 種 B 3 種 C 4 種 D 5 種 E 6 種 19骨折時(shí)血清 LD 同工酶上升

9、最高的是 A LDl B LD2 C LD3 D LD4 E LD5 20 CK 含量最多的人體組織是 A 肝臟 B 肌肉 C 肺 D 腎臟 E 心臟 21急性心肌梗死時(shí)，最先增高的酶是 A ALT B LD C CK D AST E a-HBD 22在測(cè)定肌酸激酶試劑中含有巰基化合物，如 N- 乙酰半胱氨酸，目的是 A 使酶分子有別構(gòu)效應(yīng) B 穩(wěn)定酶活性中心的二硫鍵 C 除去腺苷激酶 (AK) 的影響 D 巰基化合物是肌酸激酶底物之一 E 除去肌酸激酶抑制劑 23對(duì)乙醇中毒最敏感的血清酶是 A GGT B ALP C CK D LD E ALT 24與心臟是否受損關(guān)系不大的血清酶是 A AS

10、T B a-HBD C CK D LD E ALP 25 ACP 含量最多的人體組織是 A 肝臟 B 骨骼 C 紅細(xì)胞 D 血小板 E 前列腺 26為防止紅細(xì)胞對(duì) ACP 測(cè)定的干擾，常加入下列何種抑制劑以提高檢測(cè)的特異性 A 苯丙氨酸 B L- 酒石酸 C 尿酸 D EDTA E L- 半胱氨酸 27在堿性溶液中進(jìn)行醋酸纖維薄膜電泳時(shí)，最接近正極 ( 移動(dòng)最快 ) 的 ALP 同工酶是 A 肝 ALP B 骨 ALP C 腸 ALP D 胎盤(pán) ALP E 腎 ALP 28同時(shí)測(cè)定下列哪種血清酶有助于鑒別 ALP 升高的來(lái)源 A ACP B GGT C LD D CK E AST 29在骨骼和

11、肝臟疾病的診斷中最重要的酶是 A LD B CK C ALP D ACP E AMY 30人血清中的淀粉酶是 A a 淀粉酶 B 淀粉酶 C 淀粉酶 D A+B E A+C 31用于輔助診斷有機(jī)磷中毒的酶是 A AMY B ACP C LPL D ChE E ALP 32臨床上常用來(lái)分析同工酶的方法 A 電泳法 B 層析法 C 沉淀法 D 熱失活分析法 E 蛋白酶水解法 33患者，男， 32 歲，飲酒飽餐后上腹部劇痛 6 小時(shí)，伴大汗，頻吐。查體：面色蒼白，血壓 9.3/6.7kPa(70/50mmHg) ，心率 132 次分，左上腹肌緊張，壓痛及反跳痛，腹部移動(dòng)性濁音陽(yáng)性，血淀粉酶 740U

12、 L( 正常上限為 220U/L) 。該患者首先考慮的診斷為 A 急性膽囊炎 B 肝性黃疸 C 急性胰腺炎 D 溶血性黃疸 E 膽石癥 二、多項(xiàng)選擇題 ( B型題 ) A-HBD BLD CAST DCK EACP 1對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值最大的血漿酶是（ ）。 2急性心肌梗死時(shí)，最先恢復(fù)正常的血漿酶是（ ）。 AAST和ALT BALP和CK CLPS和AMS DAST和AMS ECK和CK-MB 3多用于胰腺炎診斷的酶是（ ）。 4多用于肝臟疾患診斷的酶是（ ）。 5多用于急性心肌梗死診斷的酶是（ ）。 6多用于骨骼疾患診斷的酶是（ ）。 三、多項(xiàng)選擇題 (X 型題 ) 1 影響血清酶變異的生

13、理因素有 A 性別 B 年齡 C 進(jìn)食 D 運(yùn)動(dòng) E 以上都不是 2 下列酶中具有酶原形式的酶有 A 胃蛋白酶 B 胰蛋白酶 C ALT D ALP E 糜蛋白酶 3 下列對(duì)酶活性濃度測(cè)定描述正確的是 A 可測(cè)定產(chǎn)物生成量 B 可測(cè)定底物消耗量 C 與底物濃度無(wú)關(guān) D 需最適溫度 E 需最適酸堿度 4 臨床上應(yīng)用酶檢測(cè)診斷疾病時(shí)，一般考慮下列哪些因素 A 組織與血清酶活性比值在 100 倍以上 B 組織損傷后，酶能較快地釋放到血液中 C 要有合適的生物半壽期 D 同工酶有一定組織分布特異性 E 酶的組織分布廣 5 肌酸激酶存在于 A 心肌 B 骨骼肌 C 腦組織 D 紅細(xì)胞 E 肝 6 標(biāo)本溶

14、血對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的血清酶是 A CK B LD C ALT D AST E GGT 7 CK 的變異體主要是指 A 巨 CK1 B CK-MB C CK-MM D 巨 CK2 E CK-BB 8 ACP 與 ALP 作用類(lèi)似，主要區(qū)別在于 A 最適 pH 不同 B 組織來(lái)源不同 C 所作用的底物種類(lèi)相近 D 緩沖液種類(lèi)不同 E 穩(wěn)定性不同 9 連續(xù)監(jiān)測(cè)法進(jìn)行酶學(xué)測(cè)定中常見(jiàn)的干擾因素有 A 樣本本身含有其他酶和物質(zhì)干擾 B 工具酶中混有其他酶的污染 C 非酶反應(yīng)的干擾 D 分析容器的污染與沉淀形成 E 使用雙試劑 10 下列代謝物與其酶法測(cè)定所用試劑的組合，正確的是 A 尿酸 - 尿酸酶 -

15、過(guò)氧化氫酶 B 葡萄糖 - 葡萄糖氧化酶 - 葡萄糖 -6 磷酸脫氫酶 C 尿素 - 尿素酶 - 谷氨酸脫氫酶 D 甘油三酯 - 脂蛋白脂肪酶 - 甘油激酶 E 膽固醇 - 膽固醇氧化酶 - 過(guò)氧化物酶 11 下列血清酶及其測(cè)定所用試劑的組合，正確的是 A ATP-GGT 、 B alanine-ALT C NAD-LD D p-nitrophenyl phosphate-ALP E ADP-CK 12 堿性磷酸酶活性升高可見(jiàn)于 A 變形性骨炎 B 骨腫瘤 C 惡性貧血 D 甲狀腺功能低下 E 梗阻性黃疸 13 G6PD 可用于測(cè)定 A 葡萄糖 B 淀粉酶 C 脂肪酶 D 乳酸脫氫酶 E 肌酸

16、激酶 四、名詞解釋 1酶 2血漿固有酶 3酶的半壽期 4連續(xù)監(jiān)測(cè)法 5工具酶 6酶活性IU定義 7同工酶 8底物啟動(dòng)模式 五、問(wèn)答題 1.根據(jù)米-曼式方程計(jì)算，當(dāng)s=3Km時(shí)，其反應(yīng)速度V為多大 2.簡(jiǎn)述正常血漿中的酶動(dòng)態(tài)特點(diǎn)及影響酶濃度的因素 3.簡(jiǎn)述病理性血漿中酶濃度異常的機(jī)制 4.簡(jiǎn)述酶濃度的測(cè)定方法。 5.簡(jiǎn)述酶偶聯(lián)反應(yīng)法的原理。 6.簡(jiǎn)述臨床同工酶的分析方法。 7.簡(jiǎn)述體液中酶濃度測(cè)定的主要影響因素及控制 8.臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存有何注意點(diǎn) 9.簡(jiǎn)述自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行臨床酶學(xué)測(cè)定時(shí)系數(shù)K值的計(jì)算與應(yīng)用。 10.簡(jiǎn)述ALT測(cè)定及其臨床意義。 11.簡(jiǎn)述CK及其同工酶

17、測(cè)定的臨床意義。 12.試述血清ACP活性測(cè)定的臨床意義。13.試述血清淀粉酶測(cè)定有何臨床意義 第二章 生物化學(xué)檢驗(yàn)中的診斷酶學(xué)參考答案 一、單項(xiàng)選擇題 (A 型題 ) 1 A 2 B 3 B 4 D 5 B 6 C 7 B 8 C 9 B 1 0 E 1 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A 16 D 1 7 B 1 8 D 19 E 20 B 21C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A 28 B 29 C 30 A 31 D 32 A 33 C 二、多項(xiàng)選擇題 ( B型題 ) 1E 2D 3 C 4A 5E 6B 三、多項(xiàng)選擇題 (X 型題 ) 1 ABC

18、D 2 ABE 3 ABDE 4 ABCD 5 ABC 6 ABCD 7 AD 8 ABDE 9 ABCD 10 ACDE 11 BCDE 12 ABE 13 AE 四、名詞解釋 1酶是一種由活細(xì)胞產(chǎn)生，具有高度專(zhuān)一性、高度催化活性的物質(zhì) ，又稱(chēng)為生物催化劑 ，主要是蛋白質(zhì)。 2血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分，在血漿中發(fā)揮特定催化作用的一類(lèi)酶，也稱(chēng)血漿特異酶。 3酶失活至原來(lái)活性一半時(shí)所需時(shí)間稱(chēng)為酶的半壽期（t 1/2 ）。半壽期可用來(lái)代表酶從血中清除的快慢。 4連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指每隔一定時(shí)間（260s），連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接計(jì)算酶

19、活性濃度的方法。 5在酶學(xué)分析中，作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱(chēng)為工具酶。 6酶活性IU定義為：在特定條件下， 1 min能轉(zhuǎn)化1 m mol底物 的酶量，即 1IU=1 m mol.min -1 。目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室常省略國(guó)際二字，即將IU簡(jiǎn)寫(xiě)為 U。 7同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化體，具有相同的催化作用，但其分子構(gòu)成、空間構(gòu)象、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)以及器官分布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱(chēng)為同工酶。 8底物啟動(dòng)模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑1預(yù)孵育一定時(shí)間后，再加入含這種底物的試劑2，啟動(dòng)樣品中的待測(cè)酶的酶促反應(yīng)。 五、問(wèn)答題 1V=

20、Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V/Vm=0.75。 2 正常血漿中酶的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)：正常血漿酶根據(jù)酶的來(lái)源及其在血漿中發(fā)揮催化功能的情況，可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大類(lèi)，非血漿特異酶可進(jìn)一步分為外分泌酶、細(xì)胞內(nèi)酶和其他酶。一般認(rèn)為，血液中酶的清除方式與其他血漿蛋白質(zhì)類(lèi)似，但是具體清除途徑尚未完全明了。血漿酶主要在血管內(nèi)失活或分解，尿液則是小分子酶排出的途徑。 影響酶濃度的因素包括 影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學(xué)因素，前者主要有細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異、酶的相對(duì)分子量、酶的組織分布、酶在細(xì)胞內(nèi)的定位和存在形式、酶的半壽期等；

21、后者主要是性別、年齡、食與藥物、運(yùn)動(dòng)、妊娠與分娩、體位改變、晝夜變化及家庭因素等。 3血漿酶的病理性變化主要包括酶合成異常、酶釋放增加、酶清除異常等。酶合成異常包括合成減少和合成增多。酶從病變（或損傷）細(xì)胞中釋放增加是疾病時(shí)大多數(shù)血清酶增高的主要機(jī)制。炎癥、缺血、壞死、創(chuàng)傷和腫瘤等是細(xì)胞釋放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代謝紊亂、藥物、遺傳性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。 4酶 濃度 測(cè)定方法分為絕對(duì)定量法和相對(duì)定量法兩大類(lèi)。絕對(duì)定量法是直接測(cè)定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對(duì)定量法是根據(jù)酶的催化活性或酶促反應(yīng)速度來(lái)間接測(cè)定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對(duì)定量法。 5 在酶活

22、性測(cè)定時(shí)，如果底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定，可采用酶偶聯(lián)法測(cè)定，即在反應(yīng)體系中加入一個(gè)或幾個(gè)工具酶，將待測(cè)酶生成的某一產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為新的可直接測(cè)定的產(chǎn)物，當(dāng)加入酶的反應(yīng)速度與待測(cè)酶反應(yīng)速度達(dá)到平衡時(shí)，指示酶的反應(yīng)速度即代表待測(cè)酶的活性 。 6臨床同工酶的分析方法有 電泳法、免疫分析法、 色譜法、動(dòng)力學(xué)分析法、蛋白酶水解法 。 7體液中酶濃度測(cè)定時(shí)，要控制的主要影響因素包括 標(biāo)本及標(biāo)本采集和處理因素、試劑及方法學(xué)因素、儀器及操作因素，以及最適測(cè)定條件選擇與條件的優(yōu)化。 8 測(cè)定酶濃度的樣本來(lái)自不同的組織和器官，但以血清和血漿最為常用，特別是血清，既可避免抗凝劑的影響，又可防止抗凝時(shí)因振搖所致

23、的溶血。 臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存應(yīng)注意：防止 溶血、合理使用抗凝劑、適宜的溫度、減少副反應(yīng)干擾。此外，采集各種體液樣本的器皿質(zhì)地和潔凈度，采血部位，以及血清中過(guò)量的膽紅素、脂質(zhì)，樣品制備過(guò)程中的振搖等，均影響酶活性測(cè)定。 9 用自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定酶活性，通常采用公式進(jìn)行計(jì)算。當(dāng)條件固定時(shí)， 理論 K 值為常數(shù)。 由于儀器等諸多因素的影響， 在臨床實(shí)際工作中，均需用校準(zhǔn)物 定期檢查和校正實(shí)際測(cè)定 K 值。 10 轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種，以往多用比色法如賴(lài)氏法 （Reitman-Frankel） 、金氏法 （King） 和改良穆氏法 （Mohun） ，其中以賴(lài)氏法最常用，由

24、于此法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，一些小型實(shí)驗(yàn)室仍在使用。目前，國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室多采用IFCC推薦的連續(xù)監(jiān)測(cè)方法對(duì) ALT 進(jìn)行測(cè)定。 ALT主要用于肝臟疾病的診斷。 由于肝細(xì)胞中ALT濃度比血液高約7000倍，只要有1/1000肝細(xì)胞中的ALT進(jìn)入血液就足以使血中ALT升高1倍，故此酶是 反映 肝損傷的一個(gè)很靈敏指標(biāo)。 但應(yīng)特別注意的是，重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞死， 血中ALT可僅輕度增高，臨終時(shí)常明顯下降，但 膽紅素卻進(jìn)行性升高，出現(xiàn)所謂“酶膽分離”現(xiàn)象，常是肝壞死的前兆。 11 CK 的測(cè)定方法有比色法、紫外分光光度法和熒光法等。由于以磷酸肌酸為底物的逆向反應(yīng)速度為正向反應(yīng)速度的6倍，所以采用逆向反應(yīng)

25、進(jìn)行測(cè)定較為普及。如肌酸顯色法和酶偶聯(lián)法，其中后者最常用，為國(guó)內(nèi)外測(cè)定 CK 的參考方法。CK 同工酶 多用電泳和免疫抑制法測(cè)定，但兩法均會(huì)受溶血和巨CK的干擾，免疫抑制法還會(huì)受到CK-BB的干擾。因此現(xiàn)在推薦用免疫化學(xué)方法直接測(cè)定 CK-MBmass ，可不受溶血和巨CK的干擾。CK 同工酶亞型 （CK-MM 亞型 和 CK-MB亞型 ）多用瓊脂糖凝膠高壓電泳和等電聚焦電泳等。 CK 及其同工酶和亞型是目前臨床上測(cè)定次數(shù)最多的酶，主要用于心肌、骨骼肌和腦疾患的診斷和鑒別診斷及預(yù)后判斷。 12 ACP 的測(cè)定多是利用磷酸苯二鈉法和磷酸對(duì)硝基酚法等在酸性條件下測(cè)定 ACP 。國(guó)外多推薦使用磷酸百

26、里酚酞為底物的比色法，因?yàn)榍傲邢貯CP對(duì)此底物親合力高，測(cè)定結(jié)果基本能反映ACP含量高低。不同方法參考值也不同。此外還可通過(guò)用 L- 酒石酸這類(lèi)抑制劑鑒別和估量 PAP 活性。由于 ACP 不穩(wěn)定，酶活性測(cè)定困難，目前已發(fā)展一些免疫學(xué)方法特異而靈敏地測(cè)定 ACP 特別是 PAP 。 總ACP升高可作為前列腺癌、骨疾病或網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)疾病的診斷指標(biāo)。 13 臨床上測(cè)定血液AMY主要用于診斷急性胰腺炎，常在腹痛后 23 h 開(kāi)始升高（也有延至12 h 后升高者），多在1224 h 達(dá)峰值，25 d 恢復(fù)正常。 峰 值 一般為4 ULN 6 ULN ，最高可達(dá)40倍。此值愈高，急性胰腺炎的可能性就愈大

27、， 但 高低和疾病預(yù)后關(guān)系不大，但 若持續(xù)性升高達(dá)數(shù)周，常提示胰腺炎有反復(fù)，或有并發(fā)癥發(fā)生。尿 AMY 約于發(fā)病后1224 h 開(kāi)始升高，下降也比血液 AMY 慢，因此在急性胰腺炎后期測(cè)定尿 AMY 更有價(jià)值。 唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高，但臨床 表現(xiàn)迥異 ，且主要為S-AMY升高，有別于胰腺炎以P-AMY升高為主。 第二章 生物化學(xué)檢驗(yàn)中的診斷酶學(xué)參考答案 一、單項(xiàng)選擇題 (A 型題 ) 1 A 2 B 3 B 4 D 5 B 6 C 7 B 8 C 9 B 1 0 E 1 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A 16 D 1 7 B 1 8 D 19 E 20 B 21

28、C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A 28 B 29 C 30 A 31 D 32 A 33 C 二、多項(xiàng)選擇題 ( B型題 ) 1E 2D 3 C 4A 5E 6B 三、多項(xiàng)選擇題 (X 型題 ) 1 ABCD 2 ABE 3 ABDE 4 ABCD 5 ABC 6 ABCD 7 AD 8 ABDE 9 ABCD 10 ACDE 11 BCDE 12 ABE 13 AE 四、名詞解釋 1酶是一種由活細(xì)胞產(chǎn)生，具有高度專(zhuān)一性、高度催化活性的物質(zhì) ，又稱(chēng)為生物催化劑 ，主要是蛋白質(zhì)。 2血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分，在血漿中發(fā)揮特定催化作用的一類(lèi)酶，也稱(chēng)血漿特異酶。

29、 3酶失活至原來(lái)活性一半時(shí)所需時(shí)間稱(chēng)為酶的半壽期（t 1/2 ）。半壽期可用來(lái)代表酶從血中清除的快慢。 4連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指每隔一定時(shí)間（260s），連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接計(jì)算酶活性濃度的方法。 5在酶學(xué)分析中，作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱(chēng)為工具酶。 6酶活性IU定義為：在特定條件下， 1 min能轉(zhuǎn)化1 m mol底物 的酶量，即 1IU=1 m mol.min -1 。目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室常省略國(guó)際二字，即將IU簡(jiǎn)寫(xiě)為 U。 7同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化體，具有相同的催化作用

30、，但其分子構(gòu)成、空間構(gòu)象、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)以及器官分布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱(chēng)為同工酶。 8底物啟動(dòng)模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑1預(yù)孵育一定時(shí)間后，再加入含這種底物的試劑2，啟動(dòng)樣品中的待測(cè)酶的酶促反應(yīng)。 五、問(wèn)答題 1V=Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm，即V/Vm=0.75。 2 正常血漿中酶的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)：正常血漿酶根據(jù)酶的來(lái)源及其在血漿中發(fā)揮催化功能的情況，可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大類(lèi)，非血漿特異酶可進(jìn)一步分為外分泌酶、細(xì)胞內(nèi)酶和其他酶。一般認(rèn)為，血液中酶的清除方式與其他血漿蛋白質(zhì)類(lèi)似，但是具體清除途徑尚未完

31、全明了。血漿酶主要在血管內(nèi)失活或分解，尿液則是小分子酶排出的途徑。 影響酶濃度的因素包括 影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學(xué)因素，前者主要有細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異、酶的相對(duì)分子量、酶的組織分布、酶在細(xì)胞內(nèi)的定位和存在形式、酶的半壽期等；后者主要是性別、年齡、食與藥物、運(yùn)動(dòng)、妊娠與分娩、體位改變、晝夜變化及家庭因素等。 3血漿酶的病理性變化主要包括酶合成異常、酶釋放增加、酶清除異常等。酶合成異常包括合成減少和合成增多。酶從病變（或損傷）細(xì)胞中釋放增加是疾病時(shí)大多數(shù)血清酶增高的主要機(jī)制。炎癥、缺血、壞死、創(chuàng)傷和腫瘤等是細(xì)胞釋放大分子酶蛋白的重要原因。此外，血液含抑制物、代謝紊亂、藥物、遺傳性酶缺陷

32、等原因也可致酶活性下降。 4酶 濃度 測(cè)定方法分為絕對(duì)定量法和相對(duì)定量法兩大類(lèi)。絕對(duì)定量法是直接測(cè)定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對(duì)定量法是根據(jù)酶的催化活性或酶促反應(yīng)速度來(lái)間接測(cè)定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對(duì)定量法。 5 在酶活性測(cè)定時(shí)，如果底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定，可采用酶偶聯(lián)法測(cè)定，即在反應(yīng)體系中加入一個(gè)或幾個(gè)工具酶，將待測(cè)酶生成的某一產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為新的可直接測(cè)定的產(chǎn)物，當(dāng)加入酶的反應(yīng)速度與待測(cè)酶反應(yīng)速度達(dá)到平衡時(shí)，指示酶的反應(yīng)速度即代表待測(cè)酶的活性 。 6臨床同工酶的分析方法有 電泳法、免疫分析法、 色譜法、動(dòng)力學(xué)分析法、蛋白酶水解法 。 7體液中酶濃度測(cè)定時(shí)，要控制的主

33、要影響因素包括 標(biāo)本及標(biāo)本采集和處理因素、試劑及方法學(xué)因素、儀器及操作因素，以及最適測(cè)定條件選擇與條件的優(yōu)化。 8 測(cè)定酶濃度的樣本來(lái)自不同的組織和器官，但以血清和血漿最為常用，特別是血清，既可避免抗凝劑的影響，又可防止抗凝時(shí)因振搖所致的溶血。 臨床酶學(xué)測(cè)定之前，標(biāo)本的采集、處理與貯存應(yīng)注意：防止 溶血、合理使用抗凝劑、適宜的溫度、減少副反應(yīng)干擾。此外，采集各種體液樣本的器皿質(zhì)地和潔凈度，采血部位，以及血清中過(guò)量的膽紅素、脂質(zhì)，樣品制備過(guò)程中的振搖等，均影響酶活性測(cè)定。 9 用自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定酶活性，通常采用公式進(jìn)行計(jì)算。當(dāng)條件固定時(shí)， 理論 K 值為常數(shù)。 由于儀器等諸多因素的影響， 在臨床實(shí)際工作中，均需用校準(zhǔn)物 定期檢查和校正實(shí)際測(cè)定 K 值。 10 轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種，以往多用比色法如賴(lài)氏法 （Reitman-Frankel）