722光柵分光光度計(jì)原理及使用方法

1、722 型光柵分光光度計(jì)使用說明（圖）1 構(gòu)造原理一、原理當(dāng)一束單色光照射待測物質(zhì)的溶液時，當(dāng)某一定頻率（或波長）的可見光所具有的能量（hf）恰好與待測物質(zhì)分子中的價電子的能級差相適應(yīng)（即E=E2-E1=hf ）時，待測物將對該頻率（波長）的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計(jì)可以測量和記錄其吸收程度（吸光度）。由于在一定條件下，吸光度A與待測物質(zhì)的濃度C及吸收地長度l的乘積成正比，即A= KCL所以，在測得吸光度A 后，可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。722 型分光光度計(jì)由光源室、單色器、試樣室、光電管暗盒、電子系統(tǒng)及數(shù)字顯示器等部件組成。光源為鴇鹵素?zé)?，波長范

2、圍為330nm800nm。單色器中的色散元件為光柵，可獲得波長范圍狹窄的接近于一定波長的單色光。其外部結(jié)構(gòu)如附圖所示。 722 型分光光度計(jì)能在可見光譜區(qū)域內(nèi)對樣品物質(zhì)作定性和定量分析，其靈敏度、準(zhǔn)確性和選擇性都較高，因而在教學(xué)、科研和生產(chǎn)上得到廣泛使用。 722 型分光光度計(jì)1.數(shù)字顯示器2.吸光度調(diào)零旋鈕3.選擇開關(guān)4.吸光度調(diào)斜率電位器5.濃度旋鈕 6.光源室7.電源開關(guān)8.波長手輪9.波長刻度窗10.試樣架拉手11.100%T旋鈕12.0%T旋鈕13.靈敏度調(diào)節(jié)旋鈕14.干燥器2 使用方法（1）預(yù)熱儀器將選擇開關(guān)置于“T；打開電源開關(guān)，使儀器預(yù)熱20分鐘。為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光

3、照，預(yù)熱儀器時和不測定時應(yīng)將試樣室蓋打開，使光路切斷。（ 2）選定波長根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動波長手輪，調(diào)至所需要的單色波長。（ 3）固定靈敏度檔在能使空白溶液很好地調(diào)到“ 100%”的情況下，盡可能采用靈敏度較低的擋，使用時，首先調(diào)到“ 1擋，靈敏度不夠時再逐漸升高。但換”擋改變靈敏度后，須重新校正“0%”和 “100%”。選好的靈敏度，實(shí)驗(yàn)過程中不要再變動。（4）調(diào)節(jié)T=0%至輕旋動“0版鈕，使數(shù)字顯示為“00.0'（此時試樣室是打 開的）。（5）調(diào)節(jié)T=100%各盛蒸儲水（或空白溶液，或純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械牡谝桓駜?nèi)，并對準(zhǔn)光路，把試樣室蓋子輕輕蓋上，調(diào)節(jié)透過率“ 100%

4、旋鈕，使數(shù)字顯示正好為”“ 100.0。 ”（6）吸光度的測定將選擇開關(guān)置于“A；蓋上試樣室蓋子，將空白液置于光路中，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)節(jié)旋鈕，使數(shù)字顯示為“ .000。將盛有待測溶液的比色皿”放入比色皿座架中的其它格內(nèi)，蓋上試樣室蓋，輕輕拉動試樣架拉手，使待測溶液進(jìn)入光路，此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數(shù)后，打開試樣室蓋，切斷光路。重復(fù)上述測定操作12次，讀取相應(yīng)的吸光度值，取平均值。（7）濃度的測定選擇開關(guān)由“A旋置”C將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路，此時數(shù)字顯示值即為該待測溶液的濃度值。（ 8）關(guān)機(jī)實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出

5、洗凈，并將比色皿座架用軟紙擦凈。3 注意事項(xiàng)（ 1）為了防止光電管疲勞，不測定時必須將試樣室蓋打開，使光路切斷， 以延長光電管的使用壽命。（ 2）取拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光學(xué)表面。（ 3）比色皿不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗滌，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附著的水或溶液應(yīng)用擦鏡紙或細(xì)而軟的吸水紙吸干，不要擦拭，以 免損傷它的光學(xué)表面。三、使用方法722 型光柵分光光度計(jì)的使用方法（ 1）操作步驟 在接通電源前，應(yīng)對儀器的安全性進(jìn)行檢查，電源線接線應(yīng)牢固，接地 線通地要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再接通電源。 將靈敏度派或調(diào)至“ 1檔（放六倍率

6、最小）。調(diào)彼長調(diào)節(jié)器至所需波長。”開啟電源開關(guān)，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”調(diào)節(jié)透光度“100”旋鈕，使數(shù)字顯示“ 100.0左右，預(yù)熱”20 分鐘。 打開吸收地暗室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)“ 0旋鈕，使數(shù)字顯示為”“ 00.0，蓋上吸收地蓋，將參比溶液置于光路，使光電管受光，調(diào)節(jié)透光度”“100 ”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0。 ” 如果顯示不到 “ 100，則可適當(dāng)增加電流放大器靈敏度檔數(shù)，但應(yīng)盡可能”使用低檔數(shù)，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。當(dāng)改變靈敏度后必須按 重新校正“ 0和” “ 100。”按連續(xù)幾次調(diào)整“00.0W “100S,將選擇開關(guān)置于A,調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使數(shù)字顯示“ .000。然后將待測溶液推入光路，顯示值即為待測樣品的”吸光度值A(chǔ)。濃度C的測量。選擇開關(guān)由“凝至"C將標(biāo)準(zhǔn)溶液推入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕。使得數(shù)字顯示值為已知標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度數(shù)值。將待測樣品溶液推入光路，即可讀出待測樣品的濃度值。 如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“00.0和”“ 100后稍等片刻（因光能”量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“00.0和” “100即可工作?！?）注意事項(xiàng) 使用前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)