API5000儀器維護簡明手冊

1、LC-MS維護簡明手冊維護簡明手冊 杜杜 明明 維維修服修服務(wù)務(wù)工程工程師師2 2011 AB SCIEX目錄目錄維護計劃維護計劃簡明維護步驟簡明維護步驟詳細維護步驟詳細維護步驟無信號診斷步驟無信號診斷步驟靈敏度低靈敏度低檢查步驟檢查步驟重復性差重復性差檢查步驟檢查步驟處理通信不上的處理通信不上的9個步驟個步驟如何延長分子泵的壽命如何延長分子泵的壽命離子源噴口與離子源噴口與orifice的位置的影的位置的影響響噴霧口與噴霧口與ORIFICE位置的確定方位置的確定方法法一些常用的部件號一些常用的部件號常用試劑列表常用試劑列表常用工具列表常用工具列表儀器主要電路模塊圖儀器主要電路模塊圖3 2011

2、 AB SCIEX維護計劃維護計劃維護項目維護項目每日每日每周每周三個月三個月需要時需要時1.檢查各路氣體壓力或液氮量X2.清洗離子源流路X 3.清洗離子源內(nèi)腔體 X4.清洗Curtain PlateX5.檢查機械泵油量X6.更換機械泵油X7.清洗機械泵濾網(wǎng)X8.儀器除塵每半年9.PPG質(zhì)量校正X每次開關(guān)機時10.更換空氣過濾網(wǎng)過濾網(wǎng)堵塞時11.更換PEEK管發(fā)現(xiàn)堵塞時12.更換噴霧針發(fā)現(xiàn)堵塞時13.清洗interface ,Q0, orifice內(nèi)部與工程師溝通有需要時14.更換或清理機械泵廢氣回油裝置每年4 2011 AB SCIEX簡明維護步驟簡明維護步驟維護項目維護項目操作步驟操作步驟

3、1.檢查各路氣體壓力或液氮量Gas1/2 0.7MPa, Curtain/CAD, Exhaust gas 0.35-0.4MPa2.清洗離子源流路50:50 甲醇水 為流動相 200ul/min 沖洗10-20分鐘3.清洗離子源內(nèi)腔體50:50 甲醇水 無塵紙 擦拭4.清洗Curtain Plate50:50甲醇水 無塵紙 擦拭，再用甲醇擦拭，用氮氣吹干。5.檢查機械泵油量在最高和最低標線之間（兩個箭頭之間）的80%6.更換機械泵油停機,冷卻,放空舊油后用100ML-200ML新油沖洗,后加油至正常位置. 需使用8mm內(nèi)六角工具。（不同型號廠家的油不可混用）7.清洗機械泵濾網(wǎng)拆下機械泵進氣口

4、濾網(wǎng)，清洗吹干，裝上。8.儀器除塵停機,打開前后蓋,用氮氣吹掃電路板,風扇（不要碰觸電路電線）9.PPG質(zhì)量校正參考裝機調(diào)試手冊Q1,Q3,POS,NEG測試步驟10.更換空氣過濾網(wǎng)松開濾網(wǎng)前固定柵板,更換新的濾網(wǎng)11.更換PEEK管長度確定, 使用專用切管器環(huán)形切斷,切平12.更換噴霧針安裝時噴針與兩通接觸后用工具擰緊,防止死體積13.清洗interface ,Q0, orifice內(nèi)部50:50 甲醇水 清洗專用大, 小棉簽 無塵紙 擦拭，氮氣吹干14.更換或清理機械泵廢氣回油裝置需在工程師指導下完成, 需專用內(nèi)六角工具5 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟1.1.檢查各路

5、氣體壓力或液氮量檢查各路氣體壓力或液氮量 Gas1/Gas2 0.7MPa, Curtain/CAD 0.35-0.4MPa,Exhaust gas 0.35-0.4MPa2.2.清洗離子源流路清洗離子源流路a. 每次做完樣后,用甲醇水50:50或流動相(不含鹽)沖洗進樣管直到樣品信號回到基線(信號走平或回到日常水平),亦可與沖色譜柱同時進行。b. 如進樣管堵塞,可把離子源取下，用注射器推甲醇沖洗進樣管，如果進過非極性樣，可用丙酮，氯仿等其他有機溶劑沖洗，最后用甲醇再沖一遍。c. 也可把堵塞的進樣管放到 甲醇水50:50 中用超聲波清洗。3.3.清洗離子源內(nèi)腔體清洗離子源內(nèi)腔體 應(yīng)該定期(或基

6、線不能靠沖洗進樣管路下降時)清洗離子源內(nèi)腔體,用無塵紙和甲醇水50：50擦洗離子源內(nèi)腔體，再用氮氣吹干。這樣可以減低背景信號和噪音. 4.4.清洗清洗Curtain Plate ,orificeCurtain Plate ,orifice外部外部 定期清洗Curtain Plate: 先用無塵紙加甲醇水50：50擦洗，再用甲醇擦洗，氮氣吹干 定期清洗Orifice外部:拆卸Curtain Plate后,先用無塵紙加50水/50甲醇擦洗，再用甲醇擦洗，然后用氮氣吹干，擦洗時注意不要堵塞orifice小孔，不要用砂紙擦和針捅。 6 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟5.5.檢查機械

7、泵油量檢查機械泵油量 在最高和最低標線之間（兩個箭頭之間）的80%，過高或過低都會影響機械泵的工作效率和壽命。6.6.更換機械泵油更換機械泵油注意注意 a. a. 每三個月更換機械泵油每三個月更換機械泵油 b. b. 不同公司的油不可混合使用不同公司的油不可混合使用: :會損壞機械泵會損壞機械泵 c. c. 更換不同公司的油時更換不同公司的油時: :必須用新油先沖洗一次必須用新油先沖洗一次 VarianVarian油的購買油的購買:V209038:V209038 Leybold Leybold油的購買油的購買:WC010998:WC010998更換機械泵油的步驟：a. 關(guān)掉主機電源，最少15分

8、鐘之后，關(guān)掉機械泵電源開關(guān)； b. 提高機械泵，在排油孔下方放一器皿（約1升容量），打開排油孔，見下圖7 2011 AB SCIEX詳細維護步驟8 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟 c. 當無泵油流出時，擰上排油孔螺栓，加入100mL-200mL新油打開機械泵電源開關(guān)（時間不要超過5秒鐘），重新打開排油孔螺栓，排出泵內(nèi)殘余的泵油。d. 擰上排油孔螺栓并上緊。 e. 打開加油孔蓋子，添加干凈的真空泵油，油面位置約到“MAX”80%處，擰上加油孔蓋子，見下圖。 f. 連接相關(guān)部件并開機械泵，20分鐘以后再開主機。 9 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟 7.7.清

9、洗機械泵濾網(wǎng)清洗機械泵濾網(wǎng) 在機械泵抽氣入口處有一個濾網(wǎng)，見下圖，如果有太多灰塵或顆粒吸附在濾網(wǎng)上，會影響到機械泵性能。如果發(fā)現(xiàn)機械泵抽空力量不足，機械泵發(fā)熱甚至燙手，或者機械泵電流過大，應(yīng)考慮清洗該濾網(wǎng)。一般情況下，在更換機械泵油時順便清洗該濾網(wǎng)。 10 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟清洗濾網(wǎng)步驟： a.關(guān)掉主機電源，最少15分鐘之后，關(guān)掉機械泵電源開關(guān)； b.擰開真空管路和機械泵接頭處的夾子，小心取下“O”型圈，不要刮傷，然后拿出該濾網(wǎng)； c.用水清洗該濾網(wǎng)，用干燥氣體吹干，然后重新裝回； d.連接相關(guān)部件并開機。8.8.儀器除塵儀器除塵 停機,打開前后蓋,用氮氣吹掃電

10、路板,風扇（不要碰觸電路電線）。此步驟可以在更換機械泵油的時候同步進行。9.PPG9.PPG質(zhì)量校正質(zhì)量校正儀器只有在質(zhì)量正確的條件下才能保征分析結(jié)果可靠:什么時候要做校正: 1. 每次重新開機； 2. 不關(guān)機時,每三個月 用什么做校正: 1. 負離子 : PPG3000 10ul/min 2. 正離子: PPG 5ul/min (API2000,2000QTrap) 1/10 PPG 5ul/min (API3000，API3200, 3200QTrap) 1/50 PPG 5ul/min (API4000,4000QTrap)校正時: 請注意CEM電壓可能要增高 校正時參考裝機調(diào)試手冊進行

11、Q1,Q3的正負離子的校正各離子的靈敏度，半峰寬，質(zhì)量偏移等。下面是PPG試劑的配制方法，以作參考：11 2011 AB SCIEXPPG Standards Kit P/N 401936 Store at 2 to 8C.PPG 標準試劑準備Caution:PPG 3000 Standard is not PPGs for the API-3000.PPG 3000 Standard is Negative and High Mass PPG. No Dilution necessary.PPG Dilution Solvent / API-4000 HPLC BufferPPG Dilut

12、ion Solvent RecipeNote: It is essential to dissolve the Ammonium Acetate and water first. 1. Dissolve 15.4 milligrams of Ammonium Acetate in 49.9 ml of water. 2. Dissolve 49.9 ml of methanol + 0.1 ml of Formic Acid + 0.1 ml of Acetonitrile. 3. Mix above two together to make final PPG Dilution Solven

13、t.API-4000 HPLC Buffer Recipe 70/30Note: It is essential to dissolve the Ammonium Acetate and water first. 1. Dissolve 154 milligrams of Ammonium Acetate in 300 ml of water. 2. Dissolve 699 ml of Acetonitrile + 1.0 ml of Formic Acid. 3. Mix above two together to make final API-4000 HPLC Buffer 70/30

14、.12 2011 AB SCIEXPPG / Reserpine / Renin DilutionsNo dilutions necessary for API-1XX/3XX, API-2000, Q-Star & non-Q-Trap mode.To Dilute PPG Standard 10:1: API-3000 onlyUse PPG Dilution Solvent from above Recipe.Put 2 mls of the PPG Standard in a clean vial and add 18 mls of the PPG Dilution Solve

15、nt.To Dilute PPG Standard 50:1: API-4000 onlyUse PPG Dilution Solvent from above Recipe.Put 20 mls of PPG Dilution Solvent in a clean vial and remove 0.4 mls to make 19.6 mls.Add 0.4 mls of the PPG Standard to the 19.6 mls of the PPG Dilution Solvent.Reserpine Dilution 6:1: API-3000 / 4000 / Q-Trap

16、(trapping mode only)Use Dilution Solvent included in Kit P/N 401936 for Reserpine Dilutions.Make up Stock Solution first: Add 4.0 mls of Dilution Solvent to the vial, cap and mix gently or sonicate to dissolve material.Reconstitution produces a 1 pmol/ul solution of Reserpine. Put 1 ml of the Reserp

17、ine Stock Solution in a clean vial and add 5 mls of Dilution Solvent.Reserpine Dilution 60:1 (10 pg/ul) : API-4000 IQOQ injections Put 1 ml of the Reserpine Stock Solution in a clean vial and add 59 mls of Dilution Solvent.Note: Use Dilution Solvent included in Kit P/N 401936. Since there is not eno

18、ugh in kit you will need to make it. Dilution Solvent is50/50 ACN/H2O with 0.1% acetic acid.Renin Dilution 2:1: API-3000 / 4000 / Q-Trap (trapping mode only)Use Dilution Solvent included in Kit P/N 401936 for Renin Dilutions.Make up Stock Solution first: Add 3.8 mls of Dilution Solvent to the vial,

19、cap and mix gently or sonicate to dissolve material.Reconstitution produces a 10 pmol/ul solution of Renin. Put 2 mls of Renin stock solution in a clean vial and add 2 mls of Dilution Solvent.13 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟10.10.更換空氣過濾網(wǎng)更換空氣過濾網(wǎng) 空氣過濾網(wǎng)堵塞會導致儀器內(nèi)部電路板散熱不好，嚴重時儀器停止數(shù)據(jù)采集，所以要經(jīng)常清理，每三個月，取出除塵，如有破損，更換

20、新的過濾網(wǎng)。API2000/3200/Qtrap/3200Qtrap空氣過濾網(wǎng)在儀器后部,取下用水清洗,干燥后裝回 API3000的過濾網(wǎng)PN：1003712 API4000/5000/4000Qtrap的過濾網(wǎng)PN：100371211.11.更換更換PEEKPEEK管管 如果日常維護較好，每次做完樣品都沖洗管路，那么PEEK管不易堵塞，一旦堵塞可以先用甲醇水等沖洗，如果沖洗不好那么就要更換了，更換時使用專用切管器環(huán)形切平。12.12.更換噴霧針更換噴霧針 噴霧針的維護也很重要，一旦堵塞并且沖洗不好時就需要更換，安裝時噴針與兩通接觸后用工具擰緊,防止死體積。13.13.清洗清洗interfac

21、e Q0 orifice interface Q0 orifice 內(nèi)部內(nèi)部 清洗interface Q0 orifice orifice 內(nèi)部內(nèi)部 需要卸真空，所以盡量在工程師的指導下進行； a.先關(guān)主機，分子泵停轉(zhuǎn)后(15分鐘以后)關(guān)機械泵。 b.真空卸掉后就可以打開interface了，卸下orifice,skimmer等。 c.用200ul加樣槍頭,用50水/50甲醇沖洗Orifice內(nèi)部，用無塵紙或?qū)Ｓ妹藓炚醇状妓?0:50擦洗skimmer Q0等，再沾甲醇擦洗，清洗完后用氮氣吹干。(如果有放電變藍的現(xiàn)象可以用金屬拋光劑擦，但擦完后一定要用正己烷擦洗干凈，再用甲醇擦洗，氮氣吹干。)

22、 d.將各部分裝好開機械泵抽真空，半小時后再開主機。14 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟 14.14.更換或清理機械泵廢氣回油裝置更換或清理機械泵廢氣回油裝置 機械泵上面有一個油過濾器，其作用是回收機械泵工作過程中揮發(fā)出的油蒸汽，然后由回油管把收集到的油滴回收到機械泵腔體，其中發(fā)揮關(guān)鍵作用的是濾芯，見圖一、二。如果濾芯吸收的油太多，甚至飽和，會導致機械泵向外排氣不暢，所以每次換油時要注意清除濾芯吸收的泵油，最好一年更換一次。 步驟：步驟： a. 把儀器處于Standby狀態(tài)，關(guān)掉Analyst軟件，關(guān)閉主機電源，最少15分鐘以后，關(guān)閉機械泵電源； b. 移出機械泵，用內(nèi)六角

23、扳手擰開過濾器頂部的四個螺絲，見圖三： c. 拿掉濾芯上面的定位彈簧見圖四，取出濾芯，見二； d. 用無塵紙擦拭濾芯表面的泵油，并緊裹濾芯以吸干濾芯海棉中的油，重新放回濾芯，如有必要更換新的濾芯； e. 放回定位彈簧，裝回過濾器頂蓋，上緊四個螺絲，重新開機。 15 2011 AB SCIEX詳細維護步驟詳細維護步驟 16 2011 AB SCIEX無信號診斷步驟無信號診斷步驟在需要工程師到達之前，首先說明出現(xiàn)此現(xiàn)象的時間，是正在工作時突然出現(xiàn)，還是一段時間沒用儀器，再開機后出現(xiàn)的，在此之前，動了儀器哪些部位，是某些掃描方式?jīng)]有信號還是都沒有信號。例如MRM無信號，先看Q1,Q3有無，若Q1,Q

24、3有，則通常是Analyst參數(shù)設(shè)置問題，若無，則繼續(xù)看有無本底信號，電噪聲有無,如有,則可能是離子源或軟件問題。 檢查真空,Q1 SCAN方式,通常應(yīng)該0.7-1.2x10-5 torr之間,過好可能是Orifice堵塞,過差則可能是漏氣或真空泵有問題 。電源電壓是否超限，UPS顯示正常否？更換了離子源以后，高壓線是否插好到位？噴霧電壓設(shè)置正確與否?各路氣體壓力是否正常，閥門是否打開，加熱氣開了嗎？離子源噴霧針重裝后，有無漏氣，漏液？液體是否從針外壁流出？17 2011 AB SCIEX無信號診斷步驟無信號診斷步驟管路有否堵塞，一節(jié)一節(jié)拆開測試，看通否，噴霧是否均勻，泵壓是否過高，通常不接色

25、譜柱，200ul/min流速，壓力應(yīng)不超過數(shù)十PSI。 進樣管及spray tube堵塞： a. 用Syringe推：直線噴出沒有堵塞 b. 若堵，取下用50水/50甲醇超聲清洗 c. 超聲仍無效,更換進樣管及spray tube Orifice堵塞： 現(xiàn)象：靈敏度下降或真空度異常的好 處理方法： a. 50水/50甲醇清洗orifice外部 b. 不能解決問題時再清洗orifice內(nèi)部18 2011 AB SCIEX無信號診斷步驟無信號診斷步驟若為APCI,檢查流速是否過低（要接LC，可用三通共用注射泵,應(yīng)大于200uL/分鐘），放電尖端對正方向沒有，放電電流是否加上(一般3uA)?若為AP

26、PI,有沒有通甲苯？若為NANOSPRAY,針尖碰開了沒有?高壓放電燒壞或樣品堵塞針尖,外涂金屬層被磨掉,加不上高壓,需提高噴霧電壓才有信號，都要更換新的噴霧針。TIS源:有無氣泡，注射針里面，LC流動相管路是否有空氣，流速低時多等一會兒，可手推一下注射針，幫助液體快速到達噴霧針。在工程師指導下用萬用表測量各點電壓值，判斷故障點。19 2011 AB SCIEX靈敏度低檢查步驟靈敏度低檢查步驟首先按照無信號處理方法檢查。Orifice 臟也可引起真空變差，當Curtain Gas很高才好，說明臟了，清洗。機械泵油半年以上沒換，或顏色加深,要換油，低于刻度下限，亦要換油，注意要用同型號的油。管路

27、漏液:樣品沒有完全進到離子源里。管路部分堵塞:噴霧時斷時續(xù),小流量信號好,大流量信號差。先調(diào)出安裝儀器時的PPG等方法，用注射泵SYRINGE PUMP，進PPG看看，質(zhì)量校準點漂移否,若質(zhì)量校準不對，造成質(zhì)量數(shù)無法選準，要重新校準儀器。若注射泵采集PPG強度和質(zhì)量校準正常，則再看標準品樣品，COMPOUND等參數(shù)是否正確，質(zhì)量數(shù)是否準確。然后用Reserpine等標準品，接通LC，如果有手動進樣閥，可從此處進樣，看FIA有無峰，若無或很弱，則可能是LC及源參數(shù)設(shè)置問題。如果正常，則排除MS，再自動進樣，看FIA有無峰，若無，則可能是自動進樣器問題。20 2011 AB SCIEX靈敏度低檢查

28、步驟靈敏度低檢查步驟若FIA正常，則再繼續(xù)接上色譜柱采樣，判斷是色譜柱問題還是流動相問題。離子化方式是否對路，如非極性物質(zhì)用ESI效果很差，有機酸采用正離子方式?jīng)]什么信號。樣品本身的問題，如樣品沒有完全溶解，濃度不夠，所用溶劑與流動相不匹配等。樣品存貯時間過長，保存條件不好，分解或吸附了。放在自動進樣器中的樣品小瓶內(nèi)套管底部有氣泡，沒取到樣品，或針頭位置太高，而樣品液面太低。前處理步驟中，標準品、內(nèi)標樣品是否加進，提取過程中有無遺灑。離子抑制，-改變前處理方法或LC梯度，或換為APCI也可以降低部分離子抑制效應(yīng)。離子對質(zhì)量數(shù)輸入準確否，有無錯誤？21 2011 AB SCIEX重復性差檢查步驟

29、重復性差檢查步驟參考前面各步驟氣簾氣(Curtain Gas)太低，會有周期性降低現(xiàn)象。采樣時間(Dwell Time)太長，每個色譜峰采樣點太少，至少十幾點，采樣時間太短則噪聲太高，信噪比不好。新色譜柱沒有充分平衡，舊色譜柱老化，重新清洗活化，或更換。離子對的選擇有問題,如M+Na做為母離子不穩(wěn)定,子離子若為脫水峰亦不太好。源溫度太高，樣品分解。加樣前與標準液分別平行做處理，觀察有無區(qū)別，若標準品溶液無問題，而樣品重復性差，則問題可能出在基質(zhì)的干擾或前處理方法不當。稀釋配制樣品的移液槍，移液管，容量瓶等有無污染問題。某些樣品正離子改為負離子試試,干擾少，重復性會好些。樣品管中吸附，尤其低濃度

30、,不成線性,如氨基糖甙,可適當加些甲酸或乙酸。溶解樣品一定要用流動相，如果不同，例如甲醇溶液，流動相是乙腈/水，出峰亂，稀釋時殘存甲醇都會有影響。22 2011 AB SCIEX重復性差檢查步驟重復性差檢查步驟梯度洗脫后平衡時間不夠，或臟東西沒洗干凈，累積使得重復性差重復性差，應(yīng)徹底沖洗柱子。手動閥如果沒問題了，再看自動進樣器有無問題?？照{(diào)波動，與儀器在同一供電線路上，啟動/停止會影響儀器真空，進而影響實驗結(jié)果。當液氮剩不多時，及使用鋼瓶時，尤其注意壓力變化。流動相雖有在線脫氣，但裝入瓶后超聲還是必要的。PEEK吸附，F(xiàn)IA時明顯，例：四環(huán)素，甲醇溶液，乙腈/水：（0.1%乙酸）30/70，由

31、開始時一個峰最后變?yōu)閮蓚€峰。另外保留時間也會改變，應(yīng)充分沖洗管路。23 2011 AB SCIEX處理通信不上的處理通信不上的6個步驟個步驟1、Analyst 軟件中Hardware configure重新deactivate,再activate2、用CTRL-ALT-DEL,Windows任務(wù)管理器結(jié)束任務(wù),關(guān)掉Analyst 軟件,然后重新打開Analyst3、關(guān)掉Analyst 軟件，Stop Analyst service后重新打開Analyst軟件4、重新啟動控制儀器的電腦及HPLC,再activate hardware5、(API3000/4000/5000)同時按下電源旁邊的兩個

32、按扭reset 6、重新開關(guān)儀器總電源說明：一步不行，再使用下一步，不一定6步都需要做完24 2011 AB SCIEX如何延長分子泵的壽命如何延長分子泵的壽命1、噴口離orifice位置盡可能遠2、樣品盡可能干凈3、機械泵油經(jīng)常更換4、分子泵的散熱盡量充分25 2011 AB SCIEX離子源噴口與離子源噴口與orifice的位置的影響：的位置的影響：影響分子泵的壽命；引起orifice堵塞、skimmer及Q0臟；并不能增加靈敏度，反而使穩(wěn)定性下降； 太近:26 2011 AB SCIEX噴霧口與ORIFICE位置的確定方法(API3000/2000)離子源位置先調(diào)偏在Analyst中active帶LC的Hardware Configuration在Manual Tuning 中Temp設(shè)為0 ,離子源不