2016年HCV檢驗(yàn)方法驗(yàn)證報(bào)告

1、特異性、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)ELISA-(HCV驗(yàn)方法驗(yàn)證報(bào)告檢測(cè)方法明確診斷陽性陰性總數(shù)陽性ABA+B陰性1CDC+D總數(shù)A+CB+DN=A+B+C+D一、準(zhǔn)確度驗(yàn)證采用與明確診斷的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比獲得準(zhǔn)確度包括敏感度、 測(cè)值等相關(guān)指標(biāo)。檢測(cè)方法與明確診斷比較的2X2列聯(lián)表?靈敏度(sens) =100%A/(A+C)?特異性(spec) =100%D/(B+D)? 陽性預(yù)測(cè)值(PVP尸100%A/(A+B)? 陰性預(yù)測(cè)值(PVN尸100%D/(C+D)?檢驗(yàn)效能=100%(A+D)/N注：預(yù)測(cè)值：測(cè)定為陽(陰)性樣本實(shí)際為陽(陰)性的可能性。檢驗(yàn)效能：估計(jì)檢測(cè)結(jié)果與明確診斷總一致程度的指標(biāo)，為所

2、有檢測(cè)結(jié)果中真正的陽性結(jié)果與真正的陰性結(jié)果所占的比例。靈敏度與特異性95%得分可信區(qū)間的計(jì)算方法如下：100% (Q1-Q2)/Q3,100%(Q1+Q2)/Q3按照下列公式計(jì)算 Q1, Q2, Q3:靈敏度：Q1=2A+1.962=2A+3.84Q2=1.961.962+4AC/(A+C)=1.963.84+4AC/(A+C)Q3=2(A+C+1.9，)=2(A+C)+7.68特異性：Q1=2D+1.962=2D+3.84Q2=1.961.962+4BD/(B+D)=1.963.84+4BD/(B+D)Q3=2(B+D+1.962)=2(B+D)+7.68注：公式中1.96為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)曲線下對(duì)

3、于 95%可信區(qū)間所對(duì)應(yīng)的變量值。檢測(cè)100例新鮮臨床樣本，包含 HCV陽性樣本，數(shù)據(jù)如下表所示:HCV檢測(cè)準(zhǔn)確性驗(yàn)證數(shù)據(jù)試劑批號(hào)：2016075815恒溫箱編號(hào)：01- 口 -F00卜0966洗板機(jī)編號(hào)：01- 口 -F00卜1432酶標(biāo)儀編號(hào)：OB-02-13實(shí)驗(yàn)人：夏詩附實(shí)驗(yàn)日期 20160815OD值健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清健康人血清0102030405060.0040.0070.0070.0080.0080.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清07健康人血清08健康人血清09健康人血清10健康人血清11健康人血清120.0100.0100.0030.00

4、90.0070.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清13健康人血清14健康人血清15健康人血清16健康人血清17健康人血清180.0030.0080.0120.0080.0030.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清19健康人血清20健康人血清21健康人血清22健康人血清23健康人血清240.0040.0080.0070.0080.0080.006陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清25健康人血清26健康人血清27健康人血清28健康人血清29健康人血清300.0030.0070.0050.0060.0060.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清31健康人血清32健康人血清33健康人血

5、清34健康人血清35健康人血清360.0070.0060.0040.0070.0080.005陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清37健康人血清38健康人血清39健康人血清40健康人血清41健康人血清420.0060.0070.0090.0080.0040.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清43健康人血清44健康人血清45健康人血清46健康人血清47健康人血清480.0070.0080.0060.0070.0080.008陰性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清49健康人血清50健康人血清51健康人血清52健康人血清53健康人血清540.0030.0060.0070.0050.0060.006陰

6、性陰性陰性陰性陰性陰性健康人血清55健康人血清56健康人血清57健康人血清58健康人血清59健康人血清600.0060.0070.0040.0060.0040.005陰性陰性陰性陰性陰性陰性HCV P01HCV P02HCV P03HCV P04HCV P05HCV P060.5982.5462.6983.0470.1962.772陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P07HCV P08HCV P09HCV P10HCV P11HCV P122.8942.9480.7583.1823.4152.555陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P13HCV P14HCV P15HCV P16HCV P17HC

7、V P183.5983.3662.9981.9742.8472.897陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P19HCV P20HCV P21HCV P22HCV P23HCV P243.1150.4712.8593.0442.8943.447陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P25HCV P26HCV P27HCV P28HCV P29HCV P302.8472.8543.2413.1543.5412.887陽性陽性陽性陽性陽性陽性HCV P31HCV P32HCV P33HCV P34HCV P35HCV P361.8872.8473.0540.7143.5542.897陽性陽性陽性陽性陽性陽性H

8、CV P37HCV P38HCV P39HCV P402.9542.8323.0590.153陽性陽性陽性陽性HCV-IgM檢測(cè)方法與明確診斷比較的2X2列聯(lián)表檢測(cè)方法明確診斷陽性陰性總數(shù)陽性A (40)B (0)A+B(40)陰性c (0)D (60)C+D (60)總數(shù)A+C (40)B+D(60)N=A+B+C+D (100)靈敏度(sens) =100%A/(A+C)=100%特異性(spec) =100%D/(B+D)=100%陽性預(yù)測(cè)值(PVP尸100%A/(A+B)尸100% 陰性預(yù)測(cè)值(PVN尸100%D/(C+D)尸100% 檢驗(yàn)效能=100%(A+D)/N=100%靈敏度與

9、特異性95%得分可信區(qū)間的計(jì)算：靈敏度：Q1=2A+1.962=2A+3.84=83.84Q2=1.961.962+4AC/(A+C)=1.963.84+4AC/(A+C)=3.84Q3=2(A+C+1.962)=2(A+C)+7.68=87.68100% (Q1-Q2)/Q3=91.24%100%(Q1+Q2)/Q3=100%靈敏度95%得分可信區(qū)間為(91.24%, 100%)特異性：Q1=2D+1.962=2D+3.84=123.84Q2=1.961.962+4BD/(B+D)=1.963.84+4BD/(B+D)=3.84Q3=2(B+D+1.962)=2(B+D)+7.68=127.

10、68100% (Q1-Q2)/Q3=93.98%100%(Q1+Q2)/Q3=100%特異性95%得分可信區(qū)間為(93.98%, 100%)二、重復(fù)性驗(yàn)證1、日內(nèi)重復(fù)性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的檢測(cè)條件下(儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn) 人員)，對(duì)同一批號(hào)試劑進(jìn)行同一天20次測(cè)量，計(jì)算均值，SD及CV。試劑批號(hào)：2016055811恒溫箱編號(hào)：Q1-n-F00-0966洗板機(jī)編號(hào)：01-口 -F00-1432酶標(biāo)儀編號(hào)：OB-02-13實(shí)驗(yàn)人：夏詩附實(shí)驗(yàn)日期：2016.07.06序號(hào)12345678910OD值低值0.5900.6930.6380.6110.7690.6830.5890.5320

11、.6810.619中值1.1881.1541.2171.1741.3391.2381.1311.2401.2481.346高值2.1882.1622.4252.2872.2732.3542.1602.2602.4042.522序號(hào)11121314151617181920OD值低值0.5700.6780.6340.5800.6350.5440.6180.6540.5950.546中值1.2531.3831.3521.2861.2291.2781.3221.2351.1761.251高值2.4312.2752.3332.2232.3582.2182.3612.2672.3892.263低值樣本：均

12、值X1=0.623:SD=0.059,CV=9.5%中值樣本：均值X2=1.276、SD2=0.070,CV2=5.5%高值樣本：均值冷=2.312,SDb=0.097,CV3=4.2%2、日間重復(fù)性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的檢測(cè)條件下(儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn) 人員)，對(duì)同一批號(hào)試劑進(jìn)行 20天，每天1次測(cè)量，計(jì)算均值，SD及CV。試劑批號(hào)：2016055811恒溫箱編號(hào)：01- 口 -F00-0966洗板機(jī)編號(hào)：01-口 -F00-1432酶標(biāo)儀編號(hào)：OB-02-13實(shí)驗(yàn)人：夏詩附日期07.0607.0707.0807.0907.1007.1107.1207.1307.1407.15O

13、D值低值0.6120.5560.5600.6500.6390.6250.6040.6080.5010.597中值1.1681.1671.2451.4521.3431.2701.3781.2681.1731.224高值2.2552.1912.2262.3362.1712.1002.1832.3902.2102.207日期07.1607.1707.1807.1907.2007.2107.2207.2307.2407.25OD值低值0.6820.6460.7180.6630.6140.5870.6500.5890.6110.546中值1.2731.1461.2471.1741.2971.2441.2

14、781.2031.2141.208高值2.1962.0982.2722.1832.2832.1642.3082.2672.1692.387低值樣本：均值Xi=0.631,SD=0.050,CVi=7.9%中值樣本：均值為=1.228,SD2=0.077,CV2=6.3%高值樣本：均值X3=2.233,SD3=0.082,CV3=3.7%3、儀器設(shè)備重復(fù)性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的實(shí)驗(yàn)人員，不同的儀器設(shè) 備中對(duì)同一批號(hào)試劑進(jìn)行同一天20次測(cè)量，計(jì)算均值，SD及CV。試劑批號(hào)：2016055811洗板機(jī) 01: 01-口-F00-1432洗板機(jī) 02: 01-n-F00-1431實(shí)驗(yàn)

15、人員：夏詩兩恒溫箱編號(hào)：01- 口 -F00-0966酶標(biāo)儀編號(hào)：OB-02-13實(shí)驗(yàn)員01010101010101010101OD值低值0.6060.6580.5890.5650.6670.6130.5740.6270.6260.563中值1.1891.2481.1931.2571.2861.2451.2041.2241.1471.203高值2.2462.2932.3002.2572.2462.1952.3152.2752.1682.305實(shí)驗(yàn)員02020202020202020202OD值低值0.6130.5930.5660.6030.6630.6360.5960.5540.5120.57

16、1中值1.2531.1871.2211.2361.3711.2631.2071.2191.1691.280高值2.1842.2512.2362.1682.2712.4152.3292.2932.1842.314低值樣本：均值X1=0.591.SDi=0.040,CV1=6.8%中值樣本：均值X2=1.241、SD2=0.049,CV2=3.9%高值樣本：均值X3=2.264.SD3=0.063,CV3=2.8 %試劑批號(hào)：2016055811恒溫箱 01: 01-口-F00-0966恒溫箱 02: 01-n-F06-6172洗板機(jī)編號(hào)：01-口 -F00-1432實(shí)驗(yàn)人員：夏詩兩酶標(biāo)儀編號(hào)：O

17、B-02-13實(shí)驗(yàn)員01010101010101010101OD值低值0.5580.6590.6290.5470.6740.6380.5570.6270.5640.668中值1.2351.3621.2451.1591.2831.3151.2461.2801.3311.211高值2.3742.4332.2522.1812.2922.3072.2262.2222.1782.317實(shí)驗(yàn)員02020202020202020202OD值低值0.6010.6010.5840.5820.5300.6120.6990.6570.5720.594中值1.3731.2851.2661.2061.1481.1921

18、.2811.2741.3291.248高值2.0872.1882.1862.2262.0912.2972.3832.2722.1662.388低值樣本：均值X1=0.603:SDi=0.047, CV1=7.8%中值樣本：均值X2=1.260:SD2=0.062, CV2=4.9%高值樣本：均值改=2.228, SD3= 0.096, CV3= 4.3 %4、實(shí)驗(yàn)人員操作重復(fù)性：使用低值、中值、高值樣本，分別在相同的儀器設(shè)備中，不同的實(shí)驗(yàn)人員對(duì)同一批號(hào)試劑進(jìn)行 20次隨機(jī)測(cè)量，計(jì)算均值，SD及CV。試劑批號(hào)：2016055811實(shí)驗(yàn)員01:夏詩雨實(shí)驗(yàn)員02:張雪芳洗板機(jī)編號(hào)：01-口 -F00

19、-1432恒溫箱編號(hào)：01- 口 -F00-0966酶標(biāo)儀編號(hào)：OB-02-13實(shí)驗(yàn)員01010101010101010101OD值低值0.6310.6110.6760.6270.5930.5450.6490.5900.5070.620中值1.2621.2441.3631.2761.1991.2421.2931.3461.2401.267高值2.5002.2272.1382.2822.1192.1772.2952.3552.2892.196實(shí)驗(yàn)員02020202020202020202OD值低值0.5790.6840.6380.5960.5290.6280.6720.6140.7060.625

20、中值1.2841.3771.2521.2141.1591.3351.2521.2251.1141.193高值2.2302.2932.4522.3582.2802.4342.2782.2042.2912.183低值樣本：均值X1 =0.627,SDi=0.051,CV1 =8.1 %中值樣本：均值X2=1.240,SD2=0.066,CV2=5.3%高值樣本：均值X3=2.300,SD3=0.102,CV3=4.4 %三、臨界點(diǎn)驗(yàn)證使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，如衛(wèi)生部臨檢中心或者康側(cè)斯坦質(zhì)控品， 使用正常人血清為基質(zhì)稀 釋液，進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)以確定可以獲得近50噂日性及近50%#性結(jié)果的那個(gè)稀釋

21、度，確定臨界點(diǎn)（C50）。試劑批號(hào)：2016095818標(biāo)準(zhǔn)品名稱：康徹斯坦質(zhì)控品標(biāo)準(zhǔn)品批號(hào)：201302001洗板機(jī)編號(hào)：01-口 -F00-1432恒溫箱編號(hào)：01- 口 -F00-0966酶標(biāo)儀編號(hào)： OB-02-13實(shí)驗(yàn)人：夏詩附實(shí)驗(yàn)日期：2016.09.23序號(hào)123456稀釋液量（ul）0200400400500600稀釋比例01:101:201:301:401:50終濃度（NCU/ml）80.80.40.270.20.16檢測(cè)Z果S/C.O.2.7300.8950.5260.2910.1680.119預(yù)測(cè)臨界點(diǎn)曲線方程式：y=1.213x-0.044預(yù)測(cè)臨界點(diǎn)（C50）： 0.15NCU/ml 臨界值：0.140HCV臨界點(diǎn)驗(yàn)證數(shù)據(jù)