紙張中五氯苯酚測定.

1、紙張中紙張中 五氯苯酚的測定五氯苯酚的測定 液相色譜液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法串聯(lián)質(zhì)譜法1一、一、液液 質(zhì)質(zhì) 聯(lián)聯(lián) 用用 介介 紹紹2液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀的定義及用途質(zhì)譜聯(lián)用儀的定義及用途利用液相色譜對(duì)混合物的高效分離能力和質(zhì)譜對(duì)純化合物的利用液相色譜對(duì)混合物的高效分離能力和質(zhì)譜對(duì)純化合物的準(zhǔn)確鑒定能力而開發(fā)的分析儀器，簡稱準(zhǔn)確鑒定能力而開發(fā)的分析儀器，簡稱LC-MSLC-MS。適用對(duì)象適用對(duì)象高極性、熱不穩(wěn)定性、高分子量、低揮發(fā)度有高極性、熱不穩(wěn)定性、高分子量、低揮發(fā)度有機(jī)物（占機(jī)物（占90%90%以上）以上）35氣質(zhì)聯(lián)用儀氣質(zhì)聯(lián)用儀(GC-MS)液質(zhì)聯(lián)化合用液質(zhì)聯(lián)化合用(LC-MS)：四極

2、桿用于傳輸離子或選擇母離子和子離子四極桿用于傳輸離子或選擇母離子和子離子,.,.離子通離子通過聚焦和傳輸進(jìn)入下一組四極桿過聚焦和傳輸進(jìn)入下一組四極桿3. 質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器四極桿四極桿用液相或注射泵將樣品注用液相或注射泵將樣品注 入質(zhì)譜入質(zhì)譜. .1. 1. 樣品注入樣品注入樣品在離子源內(nèi)電離樣品在離子源內(nèi)電離, ,帶電離帶電離子在接口內(nèi)進(jìn)行去溶劑子在接口內(nèi)進(jìn)行去溶劑, ,聚集聚集, ,冷卻進(jìn)入質(zhì)量分析器冷卻進(jìn)入質(zhì)量分析器2. 2. 離子化離子化檢測器記錄離子的信號(hào)檢測器記錄離子的信號(hào). . 然后將然后將信號(hào)傳輸?shù)诫娔X繪制成色譜圖信號(hào)傳輸?shù)诫娔X繪制成色譜圖. . 4. 4. 離子檢測和數(shù)據(jù)分

3、析離子檢測和數(shù)據(jù)分析Q0Q1Q3DFCEMORSKEXIT Q2 (LINAC)5.5.真空系統(tǒng)真空系統(tǒng)系系 統(tǒng)統(tǒng) 組組 成成LC-MS接口 大氣壓電噴霧電離原理原理：原理：包括電噴霧、離子形成、離子輸送三個(gè)過程。包括電噴霧、離子形成、離子輸送三個(gè)過程。電噴霧電噴霧：流速為流速為0.5-1000ul/min的的LC流出物經(jīng)過一內(nèi)徑為流出物經(jīng)過一內(nèi)徑為0.1mm施加施加3-8kV電壓的金屬毛細(xì)管，毛細(xì)管尖端很窄，電場可電壓的金屬毛細(xì)管，毛細(xì)管尖端很窄，電場可高達(dá)高達(dá)106V/m，使流出物成扇狀噴霧，成為細(xì)小液珠和溶劑蒸汽，使流出物成扇狀噴霧，成為細(xì)小液珠和溶劑蒸汽的混合體。由于高電場作用，溶液中

4、帶電荷的溶質(zhì)會(huì)向液體表面的混合體。由于高電場作用，溶液中帶電荷的溶質(zhì)會(huì)向液體表面移動(dòng)，使液珠表面電荷過剩，其電荷正負(fù)由所加毛細(xì)管電壓正負(fù)移動(dòng)，使液珠表面電荷過剩，其電荷正負(fù)由所加毛細(xì)管電壓正負(fù)而定。而定。離子形成：表面有大量電荷的細(xì)小液珠向下游移動(dòng)時(shí)，溶表面有大量電荷的細(xì)小液珠向下游移動(dòng)時(shí)，溶劑迅速蒸發(fā)，液珠表面積縮小，電荷密度增高。當(dāng)電荷與液珠表劑迅速蒸發(fā)，液珠表面積縮小，電荷密度增高。當(dāng)電荷與液珠表面積之比達(dá)到一個(gè)臨界值（面積之比達(dá)到一個(gè)臨界值（Rayleigh Limit）時(shí)，液珠會(huì)分裂成）時(shí)，液珠會(huì)分裂成更小的液珠。更小的液珠再重復(fù)蒸發(fā)、電荷過剩、進(jìn)一步分裂。更小的液珠。更小的液珠再重

5、復(fù)蒸發(fā)、電荷過剩、進(jìn)一步分裂。分析物可能以單電荷或多電荷離子進(jìn)入氣相。分析物可能以單電荷或多電荷離子進(jìn)入氣相。LC-MS接口 大氣壓電噴霧電離原理離子輸送：在大氣壓條件下形成的離子，在電位差和壓力在大氣壓條件下形成的離子，在電位差和壓力差的作用下，離子流通過一個(gè)加熱的金屬毛細(xì)管進(jìn)入第一個(gè)降壓差的作用下，離子流通過一個(gè)加熱的金屬毛細(xì)管進(jìn)入第一個(gè)降壓區(qū)，在毛細(xì)管出口處形成超音速噴射流，再經(jīng)過下游處于低電位區(qū)，在毛細(xì)管出口處形成超音速噴射流，再經(jīng)過下游處于低電位的錐形分離器小孔進(jìn)入第二降壓區(qū)，經(jīng)聚焦后進(jìn)入質(zhì)譜真空區(qū)，的錐形分離器小孔進(jìn)入第二降壓區(qū)，經(jīng)聚焦后進(jìn)入質(zhì)譜真空區(qū)，進(jìn)入質(zhì)量分析器、檢測器。進(jìn)入

6、質(zhì)量分析器、檢測器。LC-MS接口 大氣壓電噴霧電離原理LC-ES-MSLC-ES-MS操作要點(diǎn)操作要點(diǎn) LC液體流速：液體流速：0.5-1000uL/min或更高，視不同廠家接口特點(diǎn)而定或更高，視不同廠家接口特點(diǎn)而定。 溶劑范圍很寬：溶劑范圍很寬：100%有機(jī)溶劑到有機(jī)溶劑到100%水相。水相。 接口操作參數(shù)：接口操作參數(shù)：電噴霧電壓、噴射液體流速、助氣和氣簾的流速、接口溫電噴霧電壓、噴射液體流速、助氣和氣簾的流速、接口溫度等。度等。靈敏度靈敏度: 差異很大，對(duì)多肽、蛋白質(zhì)類檢出量可達(dá)差異很大，對(duì)多肽、蛋白質(zhì)類檢出量可達(dá)10-18 mol水平；對(duì)小分子水平；對(duì)小分子量的極性化合物，在量的極性

7、化合物，在ng-pg/uL水平。水平。LC-MS接口 大氣壓化學(xué)電離接口大氣壓化學(xué)電離接口大氣壓化學(xué)電離接口：Atmospheric Pressure Chemical Ionization，簡稱，簡稱APCI。原理原理：是將化學(xué)電離延伸到大氣壓下進(jìn)行。與大氣壓電噴霧電離是將化學(xué)電離延伸到大氣壓下進(jìn)行。與大氣壓電噴霧電離方式（方式（API-ES）相似，包括）相似，包括LC液體噴射、離子形成、離子輸送三液體噴射、離子形成、離子輸送三個(gè)過程。個(gè)過程。ESI與APCI離子源的選擇ESI： 1. 適合范圍廣，分析離子型、極性化合物、難揮發(fā)或熱不穩(wěn)定性化合物；適合范圍廣，分析離子型、極性化合物、難揮發(fā)或

8、熱不穩(wěn)定性化合物；2.易形成多電荷離子，可以分析高分子量化合物；易形成多電荷離子，可以分析高分子量化合物；3. 靈敏度高；靈敏度高；4. 離子化受溶劑和流速的影響；離子化受溶劑和流速的影響；APCI： 有一定揮發(fā)性的中等極性或低極性的小分子化合物，對(duì)溶劑選擇、有一定揮發(fā)性的中等極性或低極性的小分子化合物，對(duì)溶劑選擇、流速和添加物的依賴性較小流速和添加物的依賴性較小煙用紙張中煙用紙張中 五氯苯酚的測定五氯苯酚的測定 液相色譜液相色譜串聯(lián)串聯(lián)質(zhì)譜法質(zhì)譜法用紙張中可釋放特定芳香胺的偶氮染料的測定 765335923532Q1 Q2 Q3Precursor selectedin Q1 Precurso

9、r Fragmented in Q2Product Ion Focused in Q3 923/765532/335MS/MS MRM1314v 常用的流動(dòng)相：常用的流動(dòng)相：151617目的目的：防止固體小顆粒堵塞進(jìn)樣管道和噴嘴，防止污染儀器，降低防止固體小顆粒堵塞進(jìn)樣管道和噴嘴，防止污染儀器，降低分析背景，排除對(duì)分析結(jié)果的干擾。分析背景，排除對(duì)分析結(jié)果的干擾。要求獲得最佳的分析結(jié)果，從要求獲得最佳的分析結(jié)果，從ESI電離的過程分析：電離的過程分析：ESI電荷是在液電荷是在液滴的表面，樣品與雜質(zhì)在液滴表面存在競爭，不揮發(fā)物（如磷酸鹽滴的表面，樣品與雜質(zhì)在液滴表面存在競爭，不揮發(fā)物（如磷酸鹽等）

10、防礙帶電液滴表面揮發(fā)，大量雜質(zhì)防礙帶電樣品離子進(jìn)入氣相等）防礙帶電液滴表面揮發(fā)，大量雜質(zhì)防礙帶電樣品離子進(jìn)入氣相狀態(tài)，增加電荷中和的狀態(tài)，增加電荷中和的可能可能1819煙用紙張中煙用紙張中 五氯苯酚的測定五氯苯酚的測定 液相色譜液相色譜串聯(lián)串聯(lián)質(zhì)譜法質(zhì)譜法用紙張中可2021m/z 50-150, 溶劑離子，溶劑離子，(H2O)nH+ ，n= 3-112 m/z 102, H+乙腈乙腈 +乙酸乙酸, C4H7NO2H+,102.0549m/z149, 管路中鄰苯二甲酸酯的酸酐管路中鄰苯二甲酸酯的酸酐, C8H4O3H+,149.0233m/z 288, 2mm 離心管的產(chǎn)生的特征離子離心管的產(chǎn)生

11、的特征離子m/z 279, 管路中鄰苯二甲酸二丁酯管路中鄰苯二甲酸二丁酯 C16H22O4H+, 279.1591m/z391, 管路中鄰苯二甲酸二辛酯管路中鄰苯二甲酸二辛酯, C24H38O4H+, 391.2843m/z413, 鄰苯二甲酸二辛酯鄰苯二甲酸二辛酯+鈉鈉, C24H38O4Na+, 413.2668m/z 538, 乙酸乙酸+氧氧 +鐵（噴霧管）鐵（噴霧管）, Fe3O(O2CCH3)6, 537.879322p 五氯苯酚主要用作五氯苯酚主要用作紡織品、皮革、紙張和木材的防腐劑和防霉紡織品、皮革、紙張和木材的防腐劑和防霉劑劑。p具有生物累積性，對(duì)人體具有致畸具有生物累積性，對(duì)

12、人體具有致畸、致癌和致癌和致突變致突變性，通過皮膚性，通過皮膚進(jìn)入人體，可導(dǎo)致肺、肝、腎臟的損傷。進(jìn)入人體，可導(dǎo)致肺、肝、腎臟的損傷。p美國環(huán)境保護(hù)署和歐盟已規(guī)定其為優(yōu)先監(jiān)測的有機(jī)污染物之一。美國環(huán)境保護(hù)署和歐盟已規(guī)定其為優(yōu)先監(jiān)測的有機(jī)污染物之一。 五氯苯酚的性質(zhì)五氯苯酚的性質(zhì)23法規(guī)法規(guī)限制要求限制要求歐洲委員會(huì)歐洲委員會(huì)與食品接觸的紙和紙板材與食品接觸的紙和紙板材料料/物品物品0.15mg/kg歐盟歐盟2003021EC指令指令出口木材：出口木材：5mg/kgGB/T 18885生態(tài)紡織品技術(shù)要求生態(tài)紡織品技術(shù)要求嬰兒類：嬰兒類：0.05mg/k其他類：其他類：0.5mg/kg相關(guān)法律法規(guī)

13、相關(guān)法律法規(guī)24標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)研究對(duì)象研究對(duì)象提取提取檢測檢測檢測限檢測限(mg/kg)GB/T18414.1-2006紡織品紡織品碳酸鉀超聲提取，乙?；?，加正己烷萃取碳酸鉀超聲提取，乙?；?，加正己烷萃取GC-MS0.05SN/T2276-2009紙和紙板紙和紙板、紙漿、紙漿碳酸鉀超聲提取，乙?；?，加正己烷萃取碳酸鉀超聲提取，乙?；?，加正己烷萃取GC-MS0.02SN/T2278-2009軟木軟木碳酸鉀超聲提取，直接碳酸鉀超聲提取，直接乙?；阴；?，加正己烷萃取，加正己烷萃取GC-MS0.1GB/T18414.2-2006紡織品紡織品丙酮提取，濃縮近干，用碳酸鉀復(fù)溶，乙?；?，丙酮提取，濃縮近干，用碳

14、酸鉀復(fù)溶，乙?；?，加正己烷萃取加正己烷萃取GC-ECD0.02橡膠及橡橡膠及橡膠制品膠制品甲醇超聲提取，離心，過濾進(jìn)樣甲醇超聲提取，離心，過濾進(jìn)樣HPLC-DAD0.05木材及其木材及其制品制品乙醇超聲提取，旋轉(zhuǎn)蒸干，甲醇復(fù)溶，過濾進(jìn)樣乙醇超聲提取，旋轉(zhuǎn)蒸干，甲醇復(fù)溶，過濾進(jìn)樣HPLC-DAD0.1食品包裝食品包裝紙中紙中丙酮提取，旋轉(zhuǎn)蒸干，甲醇復(fù)溶，固相萃取，甲丙酮提取，旋轉(zhuǎn)蒸干，甲醇復(fù)溶，固相萃取，甲醇醇-二氯甲烷洗脫，氮吹，甲醇復(fù)溶二氯甲烷洗脫，氮吹，甲醇復(fù)溶HPLC-MS/MS0.001紡織品紡織品甲醇甲醇-水溶液超聲提取，離心過濾進(jìn)樣水溶液超聲提取，離心過濾進(jìn)樣HPLC-MS/MS0

15、.0052526 水，水，GB/T 6682，一級(jí)。，一級(jí)。甲醇。甲醇。甲酸。甲酸。五氯苯酚，純度五氯苯酚，純度99%。內(nèi)標(biāo)：內(nèi)標(biāo)：2,4,5-涕涕 (CAS：93-76-5)，純度，純度99%。試劑試劑內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液：內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備溶液：濃度為濃度為100 mg/mL。在。在04條件下密封避光貯存，條件下密封避光貯存，有效期有效期6個(gè)月。個(gè)月。內(nèi)標(biāo)工作溶液：內(nèi)標(biāo)工作溶液：濃度為濃度為1.0 mg/mL。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：濃度為濃度為100 mg/mL。在。在04條件下密封避光貯條件下密封避光貯存，有效期存，有效期6個(gè)月。個(gè)月。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：1.0 mg/mL。

16、在。在04條件下密封避光貯存，有效條件下密封避光貯存，有效期期3個(gè)月。個(gè)月。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：根據(jù)樣品實(shí)際含量配制合適濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，根據(jù)樣品實(shí)際含量配制合適濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，推薦如下配制方法：分別準(zhǔn)確移取推薦如下配制方法：分別準(zhǔn)確移取50 mL、100 mL、200 mL、300 mL、500 mL、1000 mL二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于50 mL容量瓶中，加入容量瓶中，加入50 mL內(nèi)標(biāo)內(nèi)標(biāo)工作溶液用甲醇定容，即得系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。系列標(biāo)準(zhǔn)工工作溶液用甲醇定容，即得系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中五氯苯酚的含量分別為作溶液中五氯苯

17、酚的含量分別為0.05 g、0.1 g、0.2 g、0.3 g、0.5 g、1 g。標(biāo)準(zhǔn)溶液制備標(biāo)準(zhǔn)溶液制備2728液相色譜液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS），配備電噴霧離子源（），配備電噴霧離子源（ESI）。）。 分析天平，感量為分析天平，感量為0.1 mg。 超聲波清洗器，工作頻率為超聲波清洗器，工作頻率為40 kHz。 離心機(jī)，使用轉(zhuǎn)速離心機(jī)，使用轉(zhuǎn)速 5000 r/min。各種規(guī)格移液管、移液槍、容量瓶、具塞三角瓶和離心管。各種規(guī)格移液管、移液槍、容量瓶、具塞三角瓶和離心管。儀儀 器器液相色譜條件液相色譜條件色譜柱，色譜柱，Atiantis dC18 150 mm（長度）（長度） 2.1 mm（內(nèi)徑），（內(nèi)徑），3 mm（粒徑）（粒徑）。 流動(dòng)相，甲醇（流動(dòng)相，甲醇（A）: 0.1 %甲酸水溶液（甲酸水溶液（B）=95:5（體積分?jǐn)?shù)）。（體積分?jǐn)?shù)）。流速，流速，200 mL/min。柱溫，柱溫，30。進(jìn)樣量，進(jìn)樣量，5 m mL。質(zhì)譜條件質(zhì)譜條件掃描方式，負(fù)離子掃描。掃描方式，負(fù)離子掃描。離子源離子源,電噴霧電離源（電噴霧電離源（ESI）。）。檢測方式，多反應(yīng)監(jiān)測（檢測方式，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。）。霧化氣壓力，霧化氣壓力，60 psi。氣簾氣壓力，氣簾氣壓力，18 psi。輔助加熱氣壓力，輔助加熱氣壓