植物細(xì)胞工程復(fù)習(xí)匯總

1、植物細(xì)胞工程復(fù)習(xí)資料名詞解釋1、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)：是指運(yùn)用基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程以及分子標(biāo)記輔助選擇等生物技術(shù)，改良動植物、微生物品種生產(chǎn)性狀、培育動植物及微生物新品種、生產(chǎn)生物農(nóng)藥、獸藥與疫苗等產(chǎn)品的新技術(shù)。2、植物細(xì)胞工程：是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法，通過類似于工程學(xué)的步驟，在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿來改變植物細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)以獲得特定的細(xì)胞、新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。3、細(xì)胞工程：在細(xì)胞水平上研究改造生物遺傳特性和生物學(xué)特性，以獲得特定的細(xì)胞、細(xì)胞產(chǎn)品或新生物體的相關(guān)理論和技術(shù)方法的學(xué)科。4、滅菌：是指用物理或化學(xué)的方法，殺死或者去

2、除物品上所有生活的微生物的方法。5、消毒：是指用消毒劑對活的植物材料進(jìn)行處理，以殺死其上所有生活的微生物的方法。6、植物細(xì)胞的全能性：即是每個植物的體細(xì)胞或性細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳基因，因此在一定培養(yǎng)條件下每個細(xì)胞都可發(fā)育成一個與母體一樣的植株。7、細(xì)胞脫分化：培養(yǎng)條件下使一個已分化的細(xì)胞回復(fù)到原始無分化狀態(tài)或分生細(xì)胞狀態(tài)的過程。8、細(xì)胞分化：是指導(dǎo)致細(xì)胞形成不同結(jié)構(gòu)，引起功能改變或潛在發(fā)育方式改變的過程。9、極性：是指植物的器官、組織，甚至單個的細(xì)胞在不同軸向上存在的某種形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理生化上的梯度差異。10、中間繁殖體：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的中間繁殖材料。11、愈傷組織

3、:在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。12、再分化：脫分化后具有分生能力的細(xì)胞再經(jīng)過與原來相同的分化過程，重新形成各類組織和器官的過程。13、植物的器官發(fā)生：是指在離體培養(yǎng)下的組織或細(xì)胞團(tuán)分化形成不定根、不定芽等器官的過程。14、體細(xì)胞胚胎發(fā)生：是指體細(xì)胞在未經(jīng)性細(xì)胞融合的情況下，模擬有性胚胎發(fā)生的各個階段而形成胚的類似物的形態(tài)發(fā)生過程。15、懸浮培養(yǎng)：是指將離體的細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。16、固體培養(yǎng)：在培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑（如瓊脂、明膠等）形成固體培養(yǎng)基，將植物的植物器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體接種于培養(yǎng)基上（中）的組織培養(yǎng)

4、方法。17、靜止液體培養(yǎng)：是指在培養(yǎng)基中不加入凝固劑，而直接將培養(yǎng)物接種到液體中或其他支持物上進(jìn)行培養(yǎng)的方法。18、成批培養(yǎng)：是指在一個培養(yǎng)體積中接種細(xì)胞和添加培養(yǎng)基后，中途不再添加培養(yǎng)基也不更換培養(yǎng)基的方式。19、連續(xù)培養(yǎng)：是在培養(yǎng)過程中不斷加入培養(yǎng)基，使培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)能夠連續(xù)得到補(bǔ)充的培養(yǎng)方法。20、半連續(xù)培養(yǎng)：是介于成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)之間的一種培養(yǎng)方法。是在完成成批培養(yǎng)一個周期后，只從反應(yīng)器中取出大部分的細(xì)胞懸浮液，保留小部分細(xì)胞懸浮液作為下一次培養(yǎng)的種子細(xì)胞，然后加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的方法。21、光自養(yǎng)培養(yǎng)：光自養(yǎng)微繁殖技術(shù)又稱無糖培養(yǎng)微繁殖技術(shù)，是指培養(yǎng)容器中的植物在人工光照條

5、件下，吸收CO2進(jìn)行光合作用，通過完全自養(yǎng)的方法進(jìn)行生長和繁殖的方法。22、外植體：是指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料，它是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料。23、快速繁殖：就是應(yīng)用組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物新品種或新品系，使其在一定時間內(nèi)繁衍出一定數(shù)量與母本相同的植株。24、污染：污染是指在組織培養(yǎng)過程中，微生物進(jìn)入培養(yǎng)體系，在培養(yǎng)的材料上或培養(yǎng)容器內(nèi)的其他部位繁殖和生長的現(xiàn)象。25、植物脫毒：就是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，脫除植物細(xì)胞中侵染的病毒，生產(chǎn)健康的繁殖材料。26、褐變：外植體在脫分化和再分化過程中，分泌褐色物質(zhì)使培養(yǎng)基和外植體本身變褐的現(xiàn)象。27、玻璃化：植物組織培養(yǎng)中分化出半透明

6、的畸形試管植株（玻璃化苗）的現(xiàn)象。28、29、指示植物鑒定：將待測植物的汁液接種到指示植物上，如果被測植物帶有病毒，指示植物就會出現(xiàn)特定癥狀30、指示植物：是指具有能夠辨別某種病毒的?；园Y狀的寄主植物。31、花藥培養(yǎng)：是指把發(fā)育到一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上，使其發(fā)育和分化成植株的過程。32、花粉培養(yǎng)：又叫小孢子培養(yǎng)，是從花藥中分離出花粉粒，使之成為分散的或游離的狀態(tài)，通過培養(yǎng)使花粉粒脫分化，進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過程。33、雄核發(fā)育：在離體條件下由花粉產(chǎn)生單倍體胚和植株的過程。34、花粉二型性：在天然花粉群體中，除正?；ǚ弁?，還存在一部分發(fā)育遲緩、體積小、染色淺的異?；ǚ鄣默F(xiàn)象。35、E

7、花粉：具有雄核發(fā)育的潛力（胚胎發(fā)生能力）的異常花粉。36、胚性發(fā)育：幼胚接種到培養(yǎng)基上以后，仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育，最后形成成熟胚(有時甚至可能類似種子)，然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株。37、成熟胚培養(yǎng)：是指成熟的胚培養(yǎng)，實質(zhì)是胚的離體萌發(fā)生長38、幼胚培養(yǎng)：是指未發(fā)育成熟的胚培養(yǎng)39、早熟萌發(fā)：幼胚接種后，離體胚不繼續(xù)胚性生長，而是在培養(yǎng)基上迅速萌發(fā)成幼苗40、植物胚乳培養(yǎng)：采用人工的方法將胚乳從種子中分離出來，在人工培養(yǎng)的條件下，使其發(fā)育成正常植株。41、離體授粉：在離體培養(yǎng)的胚珠、胎座或柱頭上授粉，然后通過胚珠或子房培養(yǎng)形成有萌發(fā)能力的種子的過程。42、離體受精：應(yīng)用人工

8、培養(yǎng)的方法在人工控制的條件下分離精卵細(xì)胞，并使其融合形成合子的過程。43、雌核發(fā)育：在離體條件下由未授粉胚囊產(chǎn)生單倍體胚和植株的過程44、薄層細(xì)胞培養(yǎng)：是從外植體的表皮撕下數(shù)層細(xì)胞（表皮細(xì)胞和薄壁組織）于合適的培養(yǎng)基上進(jìn)行的離體培養(yǎng)?，F(xiàn)在也將外植體橫切成1mm厚的薄片進(jìn)行的培養(yǎng)統(tǒng)稱為薄層培養(yǎng)。45、單細(xì)胞培養(yǎng)：分離植物的單個細(xì)胞接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的方法.46、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)：是指將單個的游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。47、平板培養(yǎng)法：將一定量的細(xì)胞接種或混合到裝有一薄層固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)的方法。特點(diǎn)：篩選效率高、篩選量大、操作簡單。48、看護(hù)培養(yǎng)：在固體培養(yǎng)基

9、上置入一塊活躍生長的愈傷組織，再在愈傷組織放一小片濾紙，待濾紙濕潤后將細(xì)胞接種于濾紙上培養(yǎng)的方法。特點(diǎn)：簡單方便，不能在顯微鏡下追蹤細(xì)胞的分裂。49、初生代謝物：維持細(xì)胞生命活動所必須的化合物。次生代謝物：利用初級代謝產(chǎn)物經(jīng)不同的生物代謝途徑生產(chǎn)的不同代謝中間產(chǎn)物和終產(chǎn)物的過程。50、激發(fā)子：是指能夠誘導(dǎo)植物細(xì)胞的一個反應(yīng)并形成細(xì)胞特征性自身防御反應(yīng)的分子。51、生長偶聯(lián)型：產(chǎn)物生產(chǎn)和細(xì)胞生長呈正比的類型。52、非生長偶聯(lián)型：產(chǎn)物只在細(xì)胞停止生長后合成。53、植物原生質(zhì)體：是指除去細(xì)胞壁后，被質(zhì)膜包圍的“裸露細(xì)胞”。54、原生質(zhì)體培養(yǎng)：是指將原生質(zhì)體放在人工配制的培養(yǎng)基上和人工控制的條件下培養(yǎng)

10、成再生植株的過程。55、出芽：在原生質(zhì)體培養(yǎng)初期新細(xì)胞壁形成，由于細(xì)胞壁的一部分變?nèi)趸蛘卟煌暾?，使原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)的局部膨脹，由于細(xì)胞的內(nèi)壓而使細(xì)胞質(zhì)突出呈芽狀。56、植物細(xì)胞融合（體細(xì)胞雜交）：指把兩種不同基因型個體或不同種、屬、科生物細(xì)胞的原生質(zhì)體分別分離出來，再用一定的技術(shù)融合成一個新的雜種細(xì)胞，乃至發(fā)育成雜種植株的過程。 57、細(xì)胞質(zhì)雜種：只含有親本一方的核基因組而含有親本雙方的細(xì)胞質(zhì)基因（葉綠體和線粒體基因）的細(xì)胞雜種58、無性系變異：植物的組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體在離體培養(yǎng)的條件下所得的培養(yǎng)物及再生植株中出現(xiàn)的變異59、變異體：不加任何選擇壓力而篩選出的變異個體稱為變異體。 60、突

11、變體：經(jīng)過施加選擇壓力所選出的無性系變異，稱為突變體。61、突變體篩選：從離體培養(yǎng)的植物材料中，篩選擬定目標(biāo)突變體的方法，稱為突變體篩選。62、正選擇：是指在培養(yǎng)物中加入對正常細(xì)胞有毒的化學(xué)物質(zhì)，使正常細(xì)胞不能生長，而突、變體可以生長，從而選出突變體的方法。63、負(fù)選擇：在特定的培養(yǎng)基上或培養(yǎng)條件下使突變的細(xì)胞死亡，而正常細(xì)胞可以生長，從而選出突變體的方法。64、超低溫保存：在冰凍保護(hù)劑的保護(hù)下，將生物材料在超低溫 （-80以下）下保存，最大限度地抑制生理代謝活動，降低劣變頻率，達(dá)到長期保存種質(zhì)資源的目的方法。65、植物遺傳轉(zhuǎn)化：是指利用重組DNA技術(shù)，將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞，外源基因與受體植

12、物染色體整合并穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的過程或技術(shù)。66、組織器官受體系統(tǒng)：是指以植物的組織器官為轉(zhuǎn)基因的受體，然后通過脫分化和再分化獲得再生植株的受體系統(tǒng)。簡答題1、 植物細(xì)胞工程在植物育種上的應(yīng)用 答：（1）種質(zhì)資源的保存和創(chuàng)新（2） 植物新品種的培育（3） 植物新品種的快繁和種性的保持2、接種時防止污染的方法：答：（1）環(huán)境無菌控制（2） 呼吸控制（3） 交叉污染控制（4） 接種動作快3、 植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)的基本程序答：（1）選擇實驗材料（2） 對實驗材料進(jìn)行消毒（3） 中間繁殖體誘導(dǎo)（4） 中間繁殖體繁殖（5） 中間繁殖體分化（6） 試管苗移栽4、 污染的類型答：真菌污染、細(xì)菌污染、酵母、螨蟲

13、、混合污染 5、器官發(fā)生形成再生植株的方式。答：（1）先芽后根：多數(shù)植物（2） 先根后芽：顛茄（3） 在愈傷組織的不同部位形成根和芽，再通過維管組織的聯(lián)系形成完整的植株。6、影響器官形成的因素?答：（1）外植體類型、基因型（2） 激素種類與比例，生長素/細(xì)胞分裂素比值高，誘導(dǎo)生根；比值低，誘導(dǎo)生芽；比值合適，有利于誘導(dǎo)愈傷組織繁殖。（3） 培養(yǎng)基種類：固態(tài)、液態(tài)（4） 環(huán)境條件：光照、溫度（5） 培養(yǎng)方法7、 植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)的主要方法答：（1）固體培養(yǎng)：瓊脂培養(yǎng)、固體平板培養(yǎng)、看護(hù)培養(yǎng)。（2） 液體培養(yǎng)：靜止液體培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)-分批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)。8、 細(xì)胞脫

14、分化過程中生理活動與細(xì)胞結(jié)構(gòu)的變化。答：分化細(xì)胞：細(xì)胞核較小，核位于細(xì)胞邊緣，細(xì)胞中央有大液泡，細(xì)胞體內(nèi)核糖體密度較低，多聚核糖體數(shù)目較少。脫分化后：細(xì)胞質(zhì)顯著變濃，大液泡消失，核體積增加并逐漸位移至細(xì)胞中央。9、 固體培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）適合于各種外植體和組織培養(yǎng)的各個階段（2） 有利于氣體交換（3） 防止或減少玻璃化（4） 不利于代謝物的擴(kuò)散10、靜止液體培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）可用于組織培養(yǎng)的各個階段（2） 減少成本（淺層液體培養(yǎng)）（3） 利于代謝物的擴(kuò)散,減小自體抑制效應(yīng)（4） 擴(kuò)大營養(yǎng)接觸面（5） 不利于氣體交換（6） 易誘導(dǎo)玻璃化11、 懸浮培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）可用于

15、組織培養(yǎng)的誘導(dǎo)、繁殖和分化階段（2） 增加培養(yǎng)物與液體接觸面，促進(jìn)營養(yǎng)吸收（3） 利于代謝物的擴(kuò)散（4） 有利于氣體交換（5） 需要一定的設(shè)備12、 成批培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）是一個放大的懸浮培養(yǎng)（2） 培養(yǎng)裝置和操作簡單（3） 培養(yǎng)周期短（4） 檢測困難（5） 成本高13、 連續(xù)培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）延長細(xì)胞生長周期，增加目的產(chǎn)物產(chǎn)量（2） 便于對系統(tǒng)的檢測（3） 裝置復(fù)雜，對反應(yīng)器設(shè)計要求高14、 半連續(xù)培養(yǎng)有什么特點(diǎn)？答：（1）節(jié)約種子細(xì)胞生產(chǎn)產(chǎn)成本（2） 保留的培養(yǎng)液有利于細(xì)胞啟動（3） 下一輪培養(yǎng)細(xì)胞的同步性差15、 光自養(yǎng)培養(yǎng)的特點(diǎn)答：1）生長速度快，生長發(fā)育均勻。（2）減

16、少了因高濕,弱光等引起的生理及形態(tài)的異常。（3）可以簡化或省略馴化過程，移栽成活率高。（4）不需糖，減少了因污染引起的植物損失。（5）光合成和發(fā)根得以促進(jìn)，可減少生根植物生長調(diào)節(jié)劑的使用。（6）需要特殊的設(shè)備16、 影響體細(xì)胞遺傳與變異的因素答：（1）供體植物（2） 培養(yǎng)基及培養(yǎng)方式（3） 繼代培養(yǎng)次數(shù)17、 什么叫快速繁殖？組織培養(yǎng)快速繁殖有何特點(diǎn)？答：快速繁殖就是應(yīng)用組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物新品種或新品系，使其在一定時間內(nèi)繁衍出一定數(shù)量與母本相同的植株。優(yōu)點(diǎn)：（1）快速（2） 周年生產(chǎn)（3） 省地、省勞力（4） 提高種苗質(zhì)量（5） 固定雜種優(yōu)勢（6） 適合于各種類型的作物18、 怎樣

17、進(jìn)行外植體選擇？中間繁殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)、芽分化培養(yǎng)、根分化培養(yǎng)、試管苗移栽？答：（一）培養(yǎng)材料的選擇（1）健壯無病蟲害、具有該品種的典型性狀、生命力旺盛（2）植物在自然條件下繁殖特點(diǎn)（3）外植體的取材部位、大小和生理狀態(tài)（4）易培養(yǎng)、易消毒（二）中間繁殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)（1）外植體消毒（誘導(dǎo)階段）（2）接種培養(yǎng)（3）觀察記錄和污染材料的處理（4）選擇無污染的材料（繼代培養(yǎng)階段）（5）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制培養(yǎng)基（6）切割接種（7）培養(yǎng)和繼代（三）芽（根）分化培養(yǎng)（1）選擇無污染的繼代培養(yǎng)材料（芽分化材料）（2）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制芽（根）分化培養(yǎng)基（3）接種與培養(yǎng)，誘導(dǎo)芽（根）分化（四）試管苗移栽（1

18、）移栽基質(zhì)的選擇、消毒（2）試管苗出瓶（3）試管苗移栽（4）移栽后的管理19、 影響植物快繁的因素？怎樣進(jìn)行香蕉苗的快速繁殖？答：（1）基因型（2）外植體的種類（3）激素種類和配比香蕉苗快速繁殖的步驟：（1） 選擇健壯無病蟲害、具有該品種的典型性狀、生命力旺盛的植株（2） 取幼嫩的莖尖作為外植體（3） 確定繁殖培養(yǎng)方法、配制繼代培養(yǎng)培養(yǎng)基（4） 切割接種（5） 繼代培養(yǎng)，生產(chǎn)脫毒材料（6） 選擇無污染的長勢良好的中間繁殖體（7） 配制芽分化培養(yǎng)基（8） 接種，誘導(dǎo)芽分化（9） 選取無污染、芽分化良好的材料（10） 配制根分化培養(yǎng)基（11） 接種，誘導(dǎo)根分化，形成完整的香蕉苗20、植物快速繁殖過

19、程中存在的問題及其解決方案是什么？答：問題：污染、褐化、玻璃化、變異污染的控制：（1）材料帶菌選擇帶菌少或不帶菌材料材料的預(yù)處理建立可靠高效消毒技術(shù)體系培養(yǎng)基中加入抗生素（2）接種污染防止呼吸污染維護(hù)超凈工作臺的功能防止交叉污染減少接種室的菌源（3）環(huán)境污染及時清理污染物經(jīng)常對環(huán)境進(jìn)行滅菌處理環(huán)境溫濕度控制用塑料袋代替培養(yǎng)瓶(4)培養(yǎng)基帶菌按滅菌要求進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基放置三天后選用無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入足量的抑菌物質(zhì)防止玻璃化的措施：（1）加強(qiáng)氣體交換（2）提高光強(qiáng)（3）采用適宜的培養(yǎng)基（4）采用適宜的激素、糖和固化劑（5）采用其他化學(xué)物質(zhì)如青霉素、氯化膽堿，激素合成前體等。減少試管苗變異的

20、措施：（1）選擇合適的基因型（2） 選擇合適的外植體（3） 采用適宜的植物生長調(diào)節(jié)劑（4） 采用適宜的培養(yǎng)條件（5） 控制繼代次數(shù)防止外植體褐變的措施：（1） 選擇適當(dāng)?shù)耐庵搀w（2） 對外植體進(jìn)行預(yù)處理（3） 選用適當(dāng)培養(yǎng)基配方（4） 控制培養(yǎng)條件（5） 抗褐變劑和吸附劑21、植物脫毒和快速繁殖的意義？（植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)脫毒苗木上有何意義？）答：（1）能夠有效保持優(yōu)良品種特性。（2） 生產(chǎn)無病毒種苗，防止品種退化（3） 快速繁殖新品種，加速優(yōu)良品種推廣（4） 節(jié)約耕地，提高農(nóng)產(chǎn)品商品產(chǎn)出率（5） 便于運(yùn)輸22、植物脫毒的主要方法有哪些？各有何優(yōu)缺點(diǎn)？應(yīng)如何選擇應(yīng)用?答：（1）芽增殖（2） 不

21、定芽增殖（3） 體細(xì)胞胚增殖（4） 愈傷組織增殖24、論述莖尖培養(yǎng)脫毒的原理，方法及影響其脫毒效果的因素。 答：原理：病毒在植物體內(nèi)的分布是不均一的，越靠近生長點(diǎn)，病毒濃度越稀，因此，采用小的莖尖進(jìn)行離體培養(yǎng)有可能消除植物病毒。方法：（1） 被脫毒植物攜帶病毒的診斷（2） 脫毒母體材料的選擇（3） 材料預(yù)處理以鈍化病毒（4） 莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株（5） 莖尖分生組織苗病毒檢驗（6） 脫毒苗保存及脫毒苗組織快繁因素：（1）病毒種類（2）莖尖大小（3）快繁途徑（4）脫毒方法（5）其他病毒干擾25、什么叫脫毒苗? 怎樣生產(chǎn)脫毒苗？答：脫毒苗是指利用脫毒技術(shù)生產(chǎn)的不含目標(biāo)病毒的種苗。利用植物組織和

22、細(xì)胞培養(yǎng)的保守性來生產(chǎn)大量優(yōu)質(zhì)種苗。26、如何鑒定莖尖培養(yǎng)而成的苗確實是無毒的？答、主要運(yùn)用指示植物鑒定和血清鑒定兩種方法27、怎樣保存和利用無毒苗？答：保存在試管中不斷繼代培養(yǎng)脫毒苗，利用：建立脫毒脫毒種苗生產(chǎn)繁殖網(wǎng)絡(luò)體系；木本植物建立隔離的脫毒苗母本園28、 為什么要進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)？答： 進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)的目的是為了獲得單倍體。29、簡述單倍體的特點(diǎn)和應(yīng)用.答：特點(diǎn)：、（1）體細(xì)胞染色體數(shù)減半；（2） 生長發(fā)育弱，體形小、各器官明顯減?。唬?） 雌雄配子嚴(yán)重敗育，有的甚至不能進(jìn)入 有性世代。應(yīng)用：（1） 迅速獲得純合型材料，縮短育種年限（2） 獲得育種中間材料;（3） 與誘變育種相結(jié)

23、合可以提高誘變頻率;（4） 與細(xì)胞融合相結(jié)合，使這一育種途徑更具有實際應(yīng)用意義;（5） 作為遺傳工程受體更為有效;（6） 用作基礎(chǔ)遺傳研究的各個領(lǐng)域.30、怎樣進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)？31、影響花藥和花粉培養(yǎng)的因素？答：(1)供試材料的基因型(2) 供試材料的生理狀態(tài)(3) 花粉發(fā)育時期,最適宜的時期為：單核中晚期到雙核早期(4) 花藥預(yù)處理(5) 培養(yǎng)基成分、激素配比(6) 培養(yǎng)條件(7) 有機(jī)附加物、活性炭(8) 接種密度32、怎樣進(jìn)行植株的倍性鑒定和染色體加倍？答：形態(tài)分析和染色體分析浸泡法、涂抹法：用一定濃度的秋水仙素處理植株愈傷組織加倍法：取合適外植體進(jìn)行誘導(dǎo)愈傷組織，經(jīng)過繼代培養(yǎng)和分化

24、培養(yǎng)后得到的再生植株中有可能有染色體加倍植株。33、花藥培養(yǎng)中存在的問題和解決方法答：1）愈傷組織誘導(dǎo)率和植株再生率不高（2） 白化苗2、 何謂胚培養(yǎng)？簡述胚培養(yǎng)的意義。答：胚培養(yǎng)就是采用人工的方法將胚從種子中分離出來，在人工培養(yǎng)的條件下，使其他發(fā)育成正常植株。（1）克服雜交育種中雜種胚的早期夭折（2）打破種子休眠，克服核果類胚的后熟作用（3）克服珠心胚干擾，提高育種效率（4）種子生活力測定（5）獲得單倍體（5）理論研究3、 離體幼胚培養(yǎng)胚發(fā)育有幾種類型？各有何特點(diǎn)？答：胚性發(fā)育：一個幼胚將來就是一個植株。早熟萌發(fā)：可獲得大量植株愈傷組織：可獲得大量胚性細(xì)胞，良好的遺傳受體，分離原生質(zhì)體的來源

25、4、怎樣進(jìn)行幼胚培養(yǎng)？影響離體幼胚培養(yǎng)的主要因素有哪些？答：（1）培養(yǎng)基設(shè)計與配制（2）幼胚剝離： 取材時期：球形胚-魚雷形胚 （3）接種培養(yǎng)，培養(yǎng)條件的控制（是否需要特殊處理）（4）試管苗移栽影響因素：（1） 基因型（2） 胚齡和放置方式（3） 培養(yǎng)基：滲透壓、激素水平、附加成分、蔗糖濃度（4） 培養(yǎng)條件：光照、溫度5、 簡述胚乳培養(yǎng)的意義。答：研究胚乳細(xì)胞的全能性。在離體培養(yǎng)條件下，胚乳細(xì)胞是否與其它體細(xì)胞和花粉一樣，具有全能性而再生植株。6、 怎樣進(jìn)行胚乳培養(yǎng)？答：種子消毒、胚乳的分離、接種培養(yǎng)、試管苗移栽7、 簡述影響胚乳培養(yǎng)的因素。答：（1）胚乳的發(fā)育時期（2） 基因型（3） 預(yù)處理

26、（4） 培養(yǎng)條件：高濃度的生長素、較高的pH（5） 胚因子2、 為什么要進(jìn)行子房或胚珠培養(yǎng)？答：（1）可以獲得單倍體（2） 獲得種子（3） 建立離體受精系統(tǒng)3、 怎樣進(jìn)行子房或胚珠培養(yǎng)答：（1）選取適宜大小的花蕾（2） 消毒以獲得無菌的花蕾（3） 分離子房或胚珠（4） 接種培養(yǎng)（5） 試管苗移栽（6） 植株倍性鑒定4、 影響子房或胚珠培養(yǎng)的因素有哪些？答：（1）胚囊的發(fā)育時期（2）基因型（3）激素影響、蔗糖濃度（4）接種方式（5）胚因子6、怎樣進(jìn)行離體授粉？（簡述離體受精的一般程序。）答：未授粉的子房 花蕾或花藥 消毒 消毒 分離胚珠 分離花粉 胚珠培養(yǎng)、授粉 合子 種子7、影響單細(xì)胞培養(yǎng)的因

27、素答：（1）條件培養(yǎng)基的作用（2） 細(xì)胞密度（3） 生長激素（4） 二氧化碳濃度（5） 適當(dāng)調(diào)節(jié)pH值和提高培養(yǎng)基中鐵的含量有時能提高置板率 8、 生物反應(yīng)器的類型及其特點(diǎn)答：（1）攪拌式生物反應(yīng)器，混合程度高、適應(yīng)性廣、反應(yīng)器內(nèi)溫度、PH、溶氧及營養(yǎng)液濃度較易控制；易對植物細(xì)胞造成傷害。培養(yǎng)周期長，易污染。（2） 氣動式生物反應(yīng)器，剪切力小、結(jié)構(gòu)簡單、避免污染（3） 固定化細(xì)胞生物反應(yīng)器，較易控制培養(yǎng)系統(tǒng)理化環(huán)境、有利于次生代謝產(chǎn)物的合成，可以連續(xù)生產(chǎn)（4） 光照生物反應(yīng)器，（5） 轉(zhuǎn)鼓式生物反應(yīng)器懸浮系統(tǒng)均一、低剪切環(huán)境、供養(yǎng)效率高、防止細(xì)胞粘壁的優(yōu)點(diǎn)。2、 怎樣進(jìn)行種細(xì)胞的選擇、增殖和擴(kuò)

28、大培養(yǎng)種細(xì)胞的篩選：外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)單細(xì)胞分離和培養(yǎng)細(xì)胞系的篩選單細(xì)胞克隆結(jié)合誘變和壓力篩選是種細(xì)胞篩選的常用方法種細(xì)胞的培養(yǎng)目的:獲得大量活躍生長的細(xì)胞群體方法:采用懸浮培養(yǎng)注意事項:防止細(xì)胞株的退化和變異3、簡述利用細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物程序及其關(guān)鍵工程技術(shù)。工程技術(shù)：成批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)4、怎樣提高細(xì)胞次生代謝物的產(chǎn)量?答：（1）選擇適宜的起始材料（2） 培養(yǎng)基成分（3） 在培養(yǎng)基中補(bǔ)加適當(dāng)?shù)那绑w物質(zhì)、中間代謝物或旁路抑制劑，可以有效的提高目的次生代謝物的產(chǎn)量。5、次生代謝物分離的方法有哪些？答：沉淀分離、層析分離、萃取分離6、簡述次生代謝物生產(chǎn)意義和現(xiàn)狀答：各

29、種生物體在一定條件下合成各種各樣的物質(zhì)，支撐著人類生存和發(fā)展7、 如何生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的具體流程。答：（1）選擇自然狀態(tài)下產(chǎn)生天然產(chǎn)物的器官、組織作為外植體（2） 確定實驗方案，配制相應(yīng)培養(yǎng)基（3） 處理外植體得到相應(yīng)的單細(xì)胞（4） 運(yùn)用懸浮培養(yǎng)，誘導(dǎo)單個細(xì)胞形成愈傷組織（5） 將單個細(xì)胞形成的愈傷組織取一半進(jìn)行成分含量分析，另一半保留培養(yǎng)（6） 選出高產(chǎn)的細(xì)胞系后，及對對應(yīng)的愈傷組織進(jìn)行增殖培養(yǎng)，再進(jìn)入懸浮培養(yǎng)過程，為進(jìn)一步規(guī)?；囵B(yǎng)提供種子細(xì)胞（7） 運(yùn)用氣動式生物反應(yīng)器進(jìn)行培養(yǎng)（8） 分離次生代謝產(chǎn)物8、 原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義？答：（1）是體細(xì)胞雜交育種的材料（2）是轉(zhuǎn)基因的良好受體（3）

30、是開展基礎(chǔ)理論研究的良好材料（4）是分離細(xì)胞器的良好材料9、 分離原生質(zhì)體的方法哪些？答：（1）機(jī)械分離法優(yōu)點(diǎn)：可避免酶制劑對原生質(zhì)體的破壞作用。缺點(diǎn)：獲得完整的原生質(zhì)體數(shù)量較少。（2） 酶解分離法優(yōu)點(diǎn)：可獲得大量原生質(zhì)體，幾乎所有植物均適用。缺點(diǎn)：酶制劑會影響所獲原生質(zhì)體的活力。10、 影響原生質(zhì)體數(shù)量和活力的因素有哪些？答：（1）細(xì)胞降解酶的種類和組合（2） 滲透壓穩(wěn)定劑（3） 質(zhì)膜穩(wěn)定劑（4） pH值的影響（5） 溫度（6） 植物材料的生理狀態(tài)11、 原生質(zhì)體的純化方法有哪些？答：（1）沉降法：利用比重原理，在具有一定滲透壓的溶液中先進(jìn)行過濾后低速離心，使純凈完整的原生質(zhì)體沉積于試管底部

31、。 優(yōu)點(diǎn)：純化收集方便，操作簡單，原生質(zhì)體丟失少。 缺點(diǎn)：易造成原生質(zhì)體相互擠壓而引起破碎，且純度不高。（2）漂浮法：采用比原生體比重大的高滲溶液，使原生質(zhì)體漂浮在溶液表面。 優(yōu)點(diǎn)：可收集到較純凈的原生質(zhì)體?？杀苊怆x心引起的原生質(zhì)體破裂或損傷，所用試劑簡單，成本低廉。 缺點(diǎn)：原生質(zhì)體獲得率較低。（3）界面法：采用兩種比重不同的溶液，使原生質(zhì)體牌兩液相的界面之中。 優(yōu)點(diǎn)：可收集到數(shù)量較大的純凈原生質(zhì)體，同時可避免收集過程中原生質(zhì)體因相互擠壓而破碎。12、 原生質(zhì)體活力測定方法答：（1）熒光素雙醋酸酯染色法（2） 酚藏花紅染色法（3） 熒光增白劑染色法（4） 伊凡藍(lán)染色法13、 原生質(zhì)體的培養(yǎng)有哪

32、些方法？答：1、飼養(yǎng)層培養(yǎng)法2、微室培養(yǎng)法3、懸滴培養(yǎng)法14、 原生質(zhì)體的培養(yǎng)程序答：（1）原生質(zhì)體分離（2） 原生質(zhì)體純化（3） 原生質(zhì)體培養(yǎng)（4） 細(xì)胞壁再生（5） 細(xì)胞分裂形成細(xì)胞團(tuán)（6） 器官形成植株再生15、 影響原生質(zhì)體培養(yǎng)的因素？答：（1）原生質(zhì)體的活力（2） 原生質(zhì)體密度（3） 細(xì)胞壁再生速度（4） 原生質(zhì)體培養(yǎng)的營養(yǎng)和環(huán)境（5） 基因型（6） 分離的材料（7） 培養(yǎng)方法（8） 原生質(zhì)體粘連16、植物細(xì)胞融合的意義?答：（1）克服種、屬間有性雜交不親和性障礙，擴(kuò)大遺傳物質(zhì)的重組范圍。（2）為攜帶外源遺傳物質(zhì)（信息）的大分子滲入細(xì)胞創(chuàng)造條件。（3）創(chuàng)造新的遺傳變異、新的育種材料甚

33、至新物種。17、 細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方法及融合劑?答：（1）NaNO3融合法（2） 多聚化合物法（3） 高PH高Ca2+法（4） 聚乙二醇法（PEG）（5） 電融合法18、植物細(xì)胞融合的程序?答：（1）原生質(zhì)體分離（7） 原生質(zhì)體純化（8） 原生質(zhì)體融合（9） 細(xì)胞雜種的選擇（10） 傷組織形成器官分化植株再生（11） 雜種植株鑒定19、融合體的類型?答：自體融合發(fā)生在親本原生質(zhì)體自身，結(jié)果是獲得“同核體”。異體融合由不同種的雙親原生質(zhì)體融合而得到“異核體”。20、 細(xì)胞雜種的選擇和鑒定?答：（一）互補(bǔ)選擇法（） 激素自養(yǎng)型互補(bǔ)選擇（） 葉綠體缺失互補(bǔ)選擇（） 營養(yǎng)缺陷型互補(bǔ)選擇（） 抗性互補(bǔ)選擇

34、（） 抗光性互補(bǔ)選擇（2） 機(jī)械選擇法（） 利用天然顏色標(biāo)記分離雜種細(xì)胞（） 利用熒光素標(biāo)記分離雜種細(xì)胞（） 應(yīng)用熒光激活細(xì)胞分選儀自動分離雜種細(xì)胞（） 應(yīng)用流式細(xì)胞儀分離雜種細(xì)胞（3） 組織培養(yǎng)篩選法雜種植株的鑒定方法：（） 雜種植物形態(tài)特征、特性鑒定（） 雜種植物的核型分析（染色體顯帶技術(shù)）（） 生化分析（同工酶）（） 分子標(biāo)記鑒定21、細(xì)胞質(zhì)雜種產(chǎn)生的途徑答：（1）一個正常的原生質(zhì)體與一個去核的原生質(zhì)體融合；（2） 一個正常的原生質(zhì)體與一個核失活的原生質(zhì)體融合；（3） 用原生質(zhì)體與亞原生質(zhì)體或微原生質(zhì)體融合；（4） 在雜種細(xì)胞的增殖過程中一個親本的染色體丟失；（5） 用抑制劑處理得到胞質(zhì)

35、雜種等。22、 無性系變異產(chǎn)生的原因、類型和影響因素答：原因：（1） 外植體本身產(chǎn)生的變異（2） 生長環(huán)境改變造成的（3） 自然變異和誘變（4） 可轉(zhuǎn)位基因的激活類型：（1） 染色體數(shù)目變異（2） 染色體結(jié)構(gòu)變異（3） 基因結(jié)構(gòu)變異（4） 基因表達(dá)的改變影響因素：（1） 供體植株（2） 培養(yǎng)基和培養(yǎng)方式（3） 繼代次數(shù)23、 突變體篩選的程序和方法？答：1、誘變材料的準(zhǔn)備（預(yù)處理）2、材料培養(yǎng)：（1）植株再生-選擇變異（2體突變細(xì)胞系的篩選植株再生 3、突變體鑒定方法：（1）細(xì)胞水平篩選A直接篩選法：是指在設(shè)計的選擇條件下，使培養(yǎng)細(xì)胞和再生植株獲得直接感觀上的差異，將突變個體和非突變個體分離開來。B間接篩選法：是一種借助于與突變表現(xiàn)型有關(guān)的性狀作為選擇指標(biāo)的篩選方法。（2）組織水平篩選“綠島法”是指在個體水平上誘導(dǎo)，細(xì)胞或組織水平上篩選的